TW200524619A - Pharmaceutical compositions and methods comprising combinations of 2-alkylidene-19-nor-vitamin D derivatives and aromatase inhibitors - Google Patents

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200524619 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於醫藥組合物及包含對需要其之患者投與2 _ 亞烷基19_降'維生素〇衍生物及芳香酶抑制劑或其醫藥學 上可接受之鹽或前藥之組合的治療方法。特定言之，本發 明係關於醫藥組合物及包含對需要其之患者投與2_亞甲基_ 19-降-2G(S)-la，25-m維生素〜及芳香酶抑制劑或其醫 藥學上可接受之鹽或前藥的治療方法。 、 【先前技術】 維生素D為一組類固醇分子之通稱。藉由在人體中將 脫氫膽固醇轉變為維生素h(膽鈣化醇）來生物合成出稱為 1，25-二羥基維生素Ds(1，25_二羥基膽鈣化醇）的活性形式之 維生素D。該轉變發生在皮膚中且需要通常源自陽光之紫外 輻射。維生素D3隨後在肝臟中代謝為25_羥基維生素仏(25_ 經基膽約化醇），其接著在腎臟中進一步代謝為活性形式之 維生素D，即^^二羥基維生素a。二羥基維生素仏 隨後分佈至全身，在身體中其與細胞内維生素D受體結合。 該活性形式之維生素D為一種已知涉及無機代謝作用及 骨骼生長且促進腸内鈣吸收之激素。 維生素D類似物揭示於1998年12月}日頒予之美國專利案 第5,843,928號中揭示。所揭示之化合物為2•亞絲_19_降_ 維生素D衍生物且其特徵為與二羥基維生素a相比具 有低腸内鈣傳輸活性及高骨骼鈣遷移活性。 本發明提供使用2-亞烷基_19-降_維生素D衍生物、且尤其 95021.doc 200524619 為化合物2 _亞甲基_〗Q夂 卢也 -降_20(S)-la，25-二羥基維生素D3(亦 稱為2MD)與芳香酿永4丨 一 ％抑制劑或其醫藥學上可接$之鹽或前 樂之組合的治療方法。 【發明内容】 本發明提供包合#人^ 〜其μ m 亞甲基·19·降·2()⑻·1α,25-二 經土，准生素D3及芳香酶抑制劑或其醫 前藥之醫藥組合物。本發 又之一戈 特疋貫施例為包含化合物2- 土 -20(S)_la，25_二羥基維生素 劑或其醫藥學上可接為+碰* 乂 m ΡΨί 别藥之醫藥組合物，其中該 方㈣抑制劑係選自胺魯米特（amin〇g】咖him (f〇rmeStane)、阿挞盖 / J 果坦 丨了塔美坦（atamestane)、阿納司唑 (軸traz〇le)、法屈唾（fadr〇z〇le)、芬羅哇（行⑽z〇⑷萊曲 伏㈣一°le)、4卿漠叫叫氛 土女土 J-4H-1，2,4-二唑或6_亞甲基雄·M-二烯 嗣（亦稱為依西美坦（exemestene))或其醫藥學上可接受之睡 或前藥。更特定言之’本發明提供包含化合物2_亞甲基_二 降20(S)-la，25_二羥基維生素仏及依西美坦之醫藥組合 物。本發明亦提供治療老年性骨質疏鬆症、絕經期後 疏鬆症、骨折、移植骨、乳癌、前列腺癌、肥胖症、骨質 減少、男性骨質疏鬆症、虛弱、肌肉損傷或肌肉貧乏症之 方法’該方法包含對需要其之患者投與治療有效劑量之2_ 旦^19-降_2〇(S)_la’25_:經基維生素D3及治療有效劑 里之方香酶抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽或前藥。該户 療方法之特定實施例為如下方法：其中2_亞甲基_19_降； 95021.doc 200524619 ·1α，25-二經基維生素d3及芳香酶抑制劑為經口投 i。本發明之額外實施例為上述治療方法，其中2_亞甲基 …降以⑻也〜二經基維生枚為非經腸投藥或經皮土投 藥。本發明之進-步實施例為其中該芳香酶抑制劑選自本 文上述本發明之醫藥組合物的治療方法。一種特殊治療方 法為治療乳癌之方法，該方法包含對需要其之患者投與治 療有效劑量之2-亞曱基尊降，(SMa，25_二羥基維生素 〇3及治療有效劑量之依西美坦。 ” 【實施方式】 本發明係、關於使用2_残基-19_降·維生素〇衍生物_ 香酶抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽或前藥之組合治療下 列疾病且用來增加青春期高峰骨質量及治療及預防第二次 競關節骨折之醫藥組合物及方法：新陳代謝性骨病、老年 性骨質疏鬆症、絕經期後骨質疏鬆症、類固醇誘發之骨質 疏鬆症、低骨轉換骨質疏鬆症、骨軟化症、腎性骨質營養 不良、牛皮癖、多發性硬化症、糖尿病、宿主抗移植物排 斥反應、移植排斥（transplant rejecti〇n)、類風濕性關節炎、 哮喘、骨折、移植骨、痤瘡、脫髮症、乾皮病、皮膚緊實 性不足一不足、敏紋、高…血病、=貫 礼癌、前列腺癌、肥胖症、骨質減少、男性骨質疏鬆症、 性腺機能減退、男性更年期(andr〇pause)、虛弱、肌肉損傷、 肌肉負乏症、骨肉瘤、低血轉性手足抽搐、甲狀旁腺機能 減退、軟骨病、維生扣缺乏、厭食症、過度運動行為導致 之低骨質量。 95021.doc 200524619 在車又佳實知例中，本發明係關於使用亞烧基_19_降 維生素D街生物與芳香酶抑制劑或其醫藥學上可接受之睡 或前藥之組合治療下列疾病且用來增加青春期高峰骨質: 及治療及㈣第二次„„折的方法：新陳代謝性骨 病、老年性骨質疏鬆症、絕經期後骨質疏鬆症、類固醇誘 發之骨質疏鬆症、低骨轉換骨質疏鬆症、骨軟化症、腎性 骨質營養不良、牛皮癖、多發性硬化症、糖尿病、宿主抗 移植物排斥反應、移植排斥、類風濕性關節炎、哮喘、骨 折移植月、痤瘡、脫髮症、乾皮病、皮膚緊實性不足、 皮脂分泌不足、級紋、高血壓、白血病、結Μ、乳癌、 前列腺癌、肥胖症、骨質減少、男性骨質疏鬆症、性腺機 能減退、男性更年期、虛弱、肌肉損傷、肌肉貧乏症、骨 肉瘤低血㉖性手足抽搐、甲狀旁腺機能減退、軟骨病、 、隹生素D缺乏、厭食症、過度運動行為導致之低骨質量。 在-較佳實施例中，使用該組合之治療方法為治療老年 性骨質疏鬆症、絕經期後骨質疏鬆症、骨折、移植骨、乳 癌、月|J列腺癌、肥胖症、骨質減少、男性骨質疏鬆症、虛 弱、肌肉損傷及肌肉貧乏症。 骨質減少為骨骼變細薄，但程度小於骨質疏鬆症中所觀 察到的且其為真正之骨質疏鬆症前之階段。世界衛生組織 (World Health 〇rganization)已基於骨質量密度（BMD)研究 出診斷種類以顯示一個人是否具有正常骨骼、骨質減少或 為正⑦骨选度在青年成人平均骨密度之1標準偏差 以内（+1或-1)。骨質減少（低骨質量）定義為低於青年成人平 95021.doc 200524619 均骨密度1至2.5標準差㈠至_2·5)之骨密度，且骨質疏鬆定 義為低於青年成人平均骨密度值2·5標準差及更多之骨密 度（>-2·5)。 性腺機能減退一般定義為性腺功能不足，其表現為配子 發生及/或性腺激素分泌不足，其可導致青春期延遲及/或生 殖力不足。有三種主要類型之性腺機能減退：丨）原發性腺 機能減退；2)繼發性腺機能減退及3)抗藥性性腺機能減退。 在原發性腺機能減退中，對萊迪希氏細胞（Leydig ceU)之損 傷會削弱雄性激素生成。在繼發性腺機能減退中，下丘腦 或垂體病症會削弱促性腺激素分泌，且在抗藥性性腺機能 減退中，對雄性激素之身體反應不足。 軟骨病為涉及骨骼軟化及弱化之兒童期病症，其最初由 缺乏維生素D、鈣及/或磷酸鹽引起。 厭食症為具有下列特徵之疾病··拒絕使體重保持在適於 年齡及身高之最低正常重量或其上（例如重量減輕導致使 體重保持在低於預期重量之85%，·或不能在生長期間獲得 預期之增重，導致體重低於預期體重之85%);即使重量不 足也強烈恐懼增重或變胖；及所經歷某人之體重或體形之 紊亂’自我評價對體重或體形之不當影響，或拒絕承認目 刖體重低之嚴重性。本發明之化合物及組合可用於治療厭 食症且可用於治療與厭食症相關之骨質損失。 另一可使用本發明之化合物及組合來治療之病症為特別 疋對於女性與過度運動行為相關之骨質損失。過度參與鍛 鍊、運動或體育可導致骨骼損失，其在女性中通常伴隨閉 95021.doc 200524619 經。亦顯不過度運動行為之男性亦體現出骨質損失。 男性更年期（亦稱為男性絕經期（male menopause)或男性 絕精期（viropause))為男性中之自然事件，通常發生於4〇至 55歲年齡之間。男性更年期為激素睾酮 teSt〇Ster〇ne)含量下降。當睾調水平下降，且男性進入男性 更年期’可觀測到各種變化或病症，包括精力及體力減退、 身體月旨肪增加、骨質疏鬆症、抑營症、精神靈敏度下降、 不能保持肌肉、心血管病、動脈粥樣硬化、性慾減退、性 高潮強度減退、勃起功能障礙、應激性增加、及尤其為手 及腳上之關節疼痛與關節強硬直。另外，正遭受或已遭受 男性更年期之男性可患有男性乳房發育、血脂病，其包括 高膽固醇血症、脈管反應性降低、性腺機能減退及良性前 列腺肥大。虛弱之特徵為骨骼肌質量之進行性及持續性損 失，其導致高風險的摔傷、難以自疾病康復、住院期延長 及曰常生活長期不能自理需要幫助。肌肉質量、體力及體 能降低通常導致生活質量了降、方蜀立性喪失及死亡。虛弱 一般與老化相關，但當由於其它因子造成肌肉損失及強度 降低時亦可導致虛弱，該等因子例如疾病誘發之惡病質、 不能動彈或藥物誘發之肌肉貧乏症。另_用來表示虛弱之 術語為肌肉貧乏症，其為用於骨骼肌質量或品質損失之通 稱。有助於骨骼肌總體品質之骨骼肌特性的實例包括：收 縮性、纖維尺寸及類型、易疲勞性、激素反應性、葡萄糖 攝入/代謝作用及毛細管密度。肌肉品質損失甚至在無肌肉 質量損失下可導致體力損失及削弱體能。 95021.doc -10- 200524619 本文所使用之術語”肌肉損傷”為對任何肌肉組織的損 傷。肌肉損傷起因於由事故、運動傷害、内分泌失調、疾 病、創傷或手術過程所引起的對肌肉組織之物理外傷。本 發明之方法適用於藉由促進肌肉損傷修復來治療肌肉損 傷。 一老齡女性之骨質疏鬆症係藉由青春期通向成年期中所獲 而峰骨質量之量、絕經期前該高峰量之保持及絕經期 後骨質量損失速率來確定。高峰骨質量之決定性因子包 括：遺傳、營養、負重（鍛鍊）及環境因子。因此希望增加青 春期高峰骨質量以便最大化㈣質量以預防生命後期中發 展骨質疏鬆。同樣，亦希望增加男性之青春期高峰骨質量。 旦/髖關節骨折對醫療資源及患者發病率及死亡率具有重大 影^很少考慮對受㈣關節f折之患者進行針對減少此 後二折風險之預防性措施。目前，1〇_13%之患者會隨後經 =二次_節骨折。遭受第二讀關料折之患者在第 人月折後與第_次相比更少有患者保持其獨立行走之能 2〇〇3 別為 53 及 91% ’ P<0._5)。E 〇 等人，“jury， ’ 34(7)，518_521。隨第二次骸關節骨折之後，患者移 良平决足其未來社會獨立性。老年患者及具有多次 ::歷史之患者骨折間具有更短之間隔時間。第二次髖關 T患者移動能力及社會獨立性具錢著之進—步影 S私因此希望用於預防二次髖部骨折之新方法。 骨肉瘤為-種相對普通、高惡性之原發性骨瘤，其具有 95021.doc 200524619 轉移至肺部之趨向。儘管骨肉瘤可發生在任何年齡，但其 在10^ 20歲的人中最常見。大約所有骨肉瘤中之半數位於 膝蓋區域但可在任何骨中發現。疼痛及腫塊（_s)為骨肉瘤 <見症狀通*月肉瘤之療法為與手術組合的化學療法。 可使用以<•式知(例如甲胺喋呤、阿黴素、順氯胺鉑或卡波鉑 進行之手術前或手術後任一者之化學療法來治療骨肉瘤。 甲狀旁腺機能減退有低血妈症之傾向’其通常與激素缺 乏導，之慢性手足抽搐有關，其特徵為低血清職高血清 磷含量。甲狀旁腺機能減退通常接在甲狀腺切除術期間音 外移除或損壞某些甲狀旁腺之後發生。暫時性甲狀旁腺機 $減退通常隨亞全甲狀腺切除術之後且在小於3%的熟練 兀成之甲狀腺切除術中永久性發生。 低血約性手足抽㈣產生自低血詞症之手足 低血鈣症之特徵為：總血漿鈣濃度在正常血漿蛋白曰質^在 下降低至8.8 mg/dL(毫克/分升）以下。手足抽插可以自發症 狀外顯或可為潛在的。當抽搐外顯時特徵為：感覺症狀， 例如嘴唇、舌頭、手指及足部感覺異常；手足癌擎，其可 長期持續且有疼痛性；全身性肌肉痛；及面部肌肉組織痙 =。潛在性抽搐需要激發測試來顯示且一般出現在血聚約 展度降低不太嚴重（例如7至8 1^/此）時。低血鈣性手足抽搐 亦在動物之獸醫實踐中觀察到。例如，馬之低血㈣手^ 抽搐為與血清離子妈之急性損耗相關且有時與鎮及鱗酸越 之血清濃度變化相關之罕見病症。該病症發生在長期身^ 透支或運輸（運輸性抽搐）後且發生在哺乳母馬（泌乳性抽播 95021.doc -12- 200524619 (lactation tetany))中。病徵多變且與神經肌肉應激性亢進相 關。 本發明亦係關於用於治療以下疾病且用於提高青春期顛 峰骨質量及預防二次髖部骨折之醫藥組合物：老年性骨質 疏鬆症、絕經期後骨質疏鬆症、類固醇誘發之骨質疏鬆症、 低月轉換骨質疏鬆症、骨軟化症、腎性骨質營養不良、牛 皮癖、多發性硬化症、糖尿病、宿主抗移植物排斥反應、 移植排斥、類風濕性關節炎、哮喘、骨折、移植骨、痤瘡、 脫髮症、乾皮病、皮膚緊實性不足、皮脂分泌不足、皺紋、 高血壓、白血病、結腸癌、乳癌、前列腺癌、肥胖症、骨 質減少、男性骨質疏鬆症、性腺機能減退、男性更年期、 虛弱、肌肉損傷、肌肉貧乏症、骨肉瘤、低血弼性手足抽 搐、甲狀旁腺機能減退、軟骨病、維生素D缺乏、厭食症、 過度運動行為導致之低骨質量，該醫藥組合物包含2_亞烷 基-19-降-維生素〇衍生物（例如式I之化合物）及芳香酶抑制 劑或其醫藥學上可接受之鹽或前藥及載劑、溶劑、稀釋劑 及其類似物。 在一實施例中，本發明之組合包含治療有效劑量之第一 化合物’該第一化合物為2-亞烷基-19-降-維生素D衍生物， 例如式I之化合物；及治療有效劑量之第二化合物，該第二 化合物為芳香酶抑制劑或其醫藥學上可接受之鹽或前藥。 一種特定較佳之組合為2-亞甲基-19•降-20(S)-la，25-二 經基維生素D3與依西美坦之組合。 可用於本發明之2-亞烷基-19-降-維生素D衍生物揭示於 95021.doc -13- 200524619 美國專利第5,843,928號中，該等衍生物特徵為如下所示之 通式I :

其中丫!及1可相同或不同，其各選自氫及羥基保護基所 組成之群；R0及R8可相同或不同，其各選自由氫、烷基、 羥烷基及氟烷基組成之群，或尺6及1連在一起時代表基團 -(CH2)x-(其中X為2至5之整數）；且其中基團R代表維生素d 型化合物所已知之任何典型側鏈。 更特定言之，R可代表i至35個碳原子的飽和或不飽和烴 土 /、了為直鏈、支鏈或$辰狀且其可含有一或多個額外取 代基，例如羥基-或經保護之羥基、氟基、羰基、酯基、環 氧基、胺基或其它雜原子基。該類型之較佳側鏈由如下結 構所代表： γ 其中該立體化學中心（在類固醇編號中對應於C-20)可具 有R或S構型（意即關於碳20之自然構型或20-表構型）且其 95021.doc -14- 200524619 中 z係選自 Υ、_〇γ、_CH2〇Y、_c 三 及 _Ch=chy，其中 該雙鍵可具有順式或反式幾何結構，且其中γ錢自氮、、甲 基、-COR5及下述結構之基團：

Rl R2 _ \ / /Ri (CH2)~ C (€Η2)λ- C - |j5

其中m及n獨立代表〇至5之整數，其中尺丨係選自氫、氘、 經基、經保護之經基、敦基、三氣甲基及Ci”烧基，該CM 烧基可為直鏈或线，且視情況帶有㈣或經保護經基取 代基，且其中R2、R3及作—者係獨立選自氖、氖代烧基、 氫、氟基、三氟甲基及Cl·5烷基，該CM烷基可為直鏈或支 鏈且視情況帶有羥基或經保護羥基取代基，且其中尺〗及r2 連在-起代表氧基或亞炫基、=cr2r3或_(CH2)p·(其中p為2 至5之整數），i其中^r4連繫在一起代表氧基或基團 -(CH2)q-(其中q為2至5之整數），且其中R5代表氫、羥基、經 保護之羥基或Cw烷基且其中側鏈中2〇、22或23位置之任何 CH基可由氮原子置換，或其中分別在2〇、^及以位置之基 團_CH(CH3)…ch(r3)_或颂办中* —者可*氧或硫^ 子置換。 位於C-20之甲基取代基的波狀線表明碳2〇可具有尺或8構 型之任一者。 具有自然20R構型之側鏈的特別重要實例為由下式0)、 (b)、（c)、（d)及（e)代表之結構，意即存在於下列物質中之 側鏈：25-羥基維生素DKa);維生素D3(b) ; 25_羥基維生素 95021.doc -15- 200524619 D2(c);維生素D2(d);及25-羥基維生素D2之C-24差向異構 體⑷； (a)

OH (b)

(c)

id)

(e) 本文所用術語n羥基保護基”表示任何通常用於臨時保護 經基官能性之基團，例如烧氧羰基、醯基、烧基曱石夕烧基 或烷芳基甲矽烷基（下文簡稱為"甲矽烷基”）及烷氧基烷 基。烷氧羰基保護基為烷基-ο-co-群組，例如甲氧羰基、 乙氧羰基、丙氧羰基、異丙氧羰基、丁氧羰基、異丁氧羰 基、第三丁氧羰基、苄氧羰基或烯丙氧羰基。術語”醯基” 95021.doc -16- 200524619 表示所有異構形式之1至6個碳原子之烷醯基，或丨至6個碳 原子之羧烷醯基，例如乙二醯基、丙二醯基、丁二醯基或 戊二醯基，或芳醯基，例如苯甲醯基或經齒基、硝基或烷 基取代之苯甲醯基。用於本說明書或申請專利範圍之術語 ”烷基”表示所有異構形式之丨至1〇個碳原子的直鏈或支鏈 烷基。烷氧基烷基保護基為例如下列基團之群組：甲氧基 甲基、乙氧基甲基、甲氧基乙氧基甲基或四氫呋喃基及四 氫哌喃基。較佳之甲矽烷基保護基為三甲基甲矽烷基、三 乙基甲矽烷基、第三丁基二甲基甲矽烷基、二丁基甲基甲 矽烷基、二苯基甲基曱矽烷基、苯基二甲基甲矽烷基、二 苯基第三丁基甲矽烷基及類似之烷基化曱矽烷基。術語，，芳 基”除非本文另有規定，否則規定為苯基或任何經烷基、硝 基或鹵基取代之苯基。 ’’經保護羥基”係由任何上述通常用於臨時性或永久性保 護羥基官能性之基團（例如前文定義之曱矽烷基、烷氧基烷 基、醯基或烷氧羰基）所衍生或保護之羥基。術語"羥烷基，，、 氘代烷基π及”氟烷基”係指任何分別經一或多個羥基、氘或 氟基取代之烷基。 應注意在本說明書中術語”24_高”係指在側鏈中碳24位置 處加成一個亞曱基且術語”24_二高”係指在該位置加成兩個 亞甲基。同樣，術語”三高，，係指加成三個亞曱基。亦及術 語”26,27-二甲基”係指在碳26及27位置加成甲基以使得（例 如）R及R4為乙基。同樣，術語"26,27_二乙基”係指在碳26 及27位置加成乙基以使得R3&R4為丙基。 95021.doc -17- 200524619 在下列化口物列表中，連接至碳2位置之特定亞烷基取代 基應田冰加入叩名+。例如，若亞^基為該亞嫁基取代基， 術叩2 S f基應、位於各命名化合物之前。若乙基為該亞貌 基取代基，術語”2-伸乙基”應位於各化合物之前，等等。另 外，若連接至碳20位i之甲基為其表構型或非自然構型， 術語，，20(S)”或”20-表”應包括在下列命名化合物之每一者 中。必要時該等命名化合物亦可為維生素型。 當側鏈不飽和_，結構I之2_线基化合物之特定及較佳 實例為： 19-降_24_高-1，25-二經基-22-脫氫維生素〇3 ; 19-降-24-二高-1，25-二羥基_22·脫氫維生素D3 ; 19-降-24·三高-1，25-二經基_22•脫氫維生素D3 ; 19-降-26,27-二甲基-24·高十乂二經基_22_脫氫維生素 脫氫維生

脫氫維生 19-降-26,27-二甲基-24-二高二羥基 _22_ 素d3 ; 19-降-26,27_二甲基-24-三高_l 525_二羥基_2孓 素D3 ; 二羥基-22_脫氫維生素 19 -降 _26,27-二乙基 _24-高 _ι，25· D,； 19-降-26,27-二乙基-24- 素D3 ; 高-1，25-二經基_22_脫氫維生 脫氫維生 19-降-26,27-二乙基-24-三高二羥基 _22 素〇3 ; 95021.doc -18- 200524619 19-降-26,27 一 一 • 丙基-24-尚―1，25-二羥基-22-脫氫維生素 19-降-26 27 - 素…及，、^基-24·二高-1，25-二經基·22_脫氫維生 19-降-26,27 - ^ 素D3。 一丙基-24_三高-1，25·二羥基-22-脫氫維生 當側鏈飽和_ ^ ^ 施例為：、’-構1之2-亞烷基化合物之特定及較佳實 19-降-24-黑 τ、 二羥基維生素〇3 ; 19-降-24-二古, 阅-1，25·二羥基維生素d3 ; 1 9-降-24-三古 —巧-1，25-二羥基維生素; 19务26 26 — 19-降_26,27' 19_ 降-26,27' 19-降，26,27' 19_降_26,27' 19_降_26,27' 19-降-26,27' 5 一甲基-24-高-1，25-二羥基維生素D3 ; 甲基-24-二高-；!，25_二羥基維生素A ; 甲基·24-三高二羥基維生素d3 ; 乙基·2‘高_1，25-二羥基維生素D3 ; 乙基-24-二高4,25-二羥基維生素d3 ; 乙基_24-二高4,25-二羥基維生素d3 ; 19_降·26,27 一丙基·24·高十仏工經基維生素; 及 19-降-26 27 一丙基_24•二高_1，25_二羥基維生素D: 用 於本發明二丙基_24三高-1，25·二經基維生素d3。 劑。芳香酶抑制的第二化合物為芳香酶抑制 Μ係精由抑制或滅活芳香酶（細胞 p-彻超科之酶且為CYP19基因之產物）來起作用。芳香= 貝由雄丨生基貝合成雌激素，例如由較佳之基質雄烯二_合 95021.doc -19- 200524619 成雌留酮及由睪酮合成雌二酵。芳香酶抑制劑已根據時門 順序或其臨床發展分為第一代、第二代、第三代^制

根據其作用機制分為1型或2型抑制劑。smith，M ’ ·υ·，Ι·Ε·及

Dowsett，Ph.D·，M，N Engl J Med 2003, 348, 2431-2442 型芳香酶抑制劑一般為不可逆結合於芳香酶藉以使酶滅活 的雄烯二酮之類固醇類似物。2型芳香酶抑制劑一般為非類 固醇且藉由驗性氮可逆地結合於酶之血紅素基團。

用於本發明之組合及方法的較佳芳香酶抑制劑包括描述 於美國專利第4,808,616號及第4,904,650號中之化合物。彼 等化合物具有本文所述之式（Α)且如下所示：

及R2各獨立為氫或Ci_c0烧基且Ri為氫、鹵素或燒 基。緊接上文所述之式（A)之較佳化合物為彼等化合物，其 =為氫或Cl-C：4烷基；Ri為氫、氟、氯或Ci_c4烷基且心為 氫或C!-C4烷基。該基團之更佳化合物為式之化合物， '、中R為氫、甲基或乙基；R1為氫、氟或氣且R2為氫。 特殊芳香酶抑制劑之實例包括：6_亞甲基雄-M-二烯-3，17-二_ ; 甲基_6_亞甲基雄」〆·二烯二酮；卜乙基_ 亞曱基雄二烯_3，17_二酮；4_甲基_6_亞甲基雄 95021.doc -20- 200524619 二烯-3，17-二酮；4-乙基_6_亞曱基雄屮肛二烯_3，17_二酉同； 扣氣冬亞甲基雄十心二烯七^二酉同：‘氯-卜亞曱基雄· M-二烯-3，17-二酮；6·亞乙基雄 二烯 _3，17_二_ ; ^ 亞丙基雄-1，4-二烯_3，17_二酮；扣氟」·曱基_6_亞甲基雄_ i，4·二烯-3，17-二酮；‘氣_1_曱基-6-亞甲基雄_Μ·二烯_ 3，17-二酮；1_曱基_6_亞乙基雄_Μ_二烯_3，17_二酮；及肛 氟-6_亞乙基雄_1，4_二烯_3，17_二酮。 上述芳香酶抑制劑之基團内的最佳化合物為6-亞甲基雄-1，4_二烯-3，17·二酮，亦稱為依西美坦，且銷售商標為 h〇maSi，。可根據美國專利第4,808,616號及第4,9〇4,65〇 號中之實例1的程序來製備6_亞甲基雄H稀_3，17_二嗣 且該等程序再現於下文中： “將0.50 g6-亞甲基雄·4_婦_3，17_二綱及〇57 g二氯二氰基 苯醌(DDQ)在20 ml無水二噁烷中回流約15小時。為移除 々DQ將》亥懸/于液經氧化鋁過濾。在蒸發溶劑後將殘餘物 溶於乙酸乙醋中，以水洗務有機層，經硫酸納乾燥且真空 移除溶劑。將粗產物使用己炫/乙酸乙㈣％進行石夕膠層: 以得到0.25秦亞甲基雄从二締_3，17_二酮，熔點靴 _191 C，λ _247 m_3.750)。實驗值·· C 81.01，η 8,〇5。 C2〇H24〇2規定值·· c 81.04, Η 8.16。 其它用於本發明之組合及方法的示範性芳香酶抑制劑包 括· 3-(4-胺苯基）_3_乙基_2 6_氣 # , 乳比啶一酮，其通常稱為胺 ::、寺且鎖售商標為加-’；4·羥基雄烯二鲷，亦稱作 福美坦；1-曱基雄-14•二烯_3 I、一 那，—酮，亦稱作阿塔美坦； 95021.doc -21 - 200524619 α，α，α，αΐ-四甲基三唑_卜基甲基）4,3-苯二乙 腈，亦稱作阿納司唑，描述於us· re36617中且銷售商標 為Annndex® ; 4-(5,6,7,8-四氫咪唑[丨，^]吡啶_5_基）_苯甲 腈、單氫氯化物，亦稱作法屈唑；4-(3_(4_敦苯基）_2•經基_ 1-(1H-1，2,4-三唑+基）_丙基）_苯甲腈，亦稱作芬羅唑； 4,4’_(1H-1，2,4-三唑+基亞甲基）雙_苯甲腈，亦稱作萊曲 唑，描述於美國專利第4,978,672號中且銷售商標為 Femara⑧；6_[(4_氯苯基）_1H]，2,4-三唑小基甲基]小甲基 -1H-苯幷三唑，亦稱作伏羅唑，·及4_[N_(4_溴苄基(心氰 苯基）胺基]_4Η-1，2,4·三唑，亦稱作ΥΜ_511，其正由 Yamanouchi研製 〇 本發明亦係關於用於治療以下疾病且用於增加青春期高 峰骨負篁及預防第二次髖關節骨折之醫藥組合物：新陳代 謝性骨病、老年性骨質疏鬆症、絕經期後骨質疏鬆症、類 固醇引起的骨質疏鬆症、低骨轉換骨質疏鬆症、骨軟化症、 腎性骨質營養不良、牛皮癖、多發性硬化、糖尿病、宿主 抗移植物排斥反應、移植排斥、類風濕性關節炎、哮喘、 骨折、移植骨、痤瘡、脫髮症、乾皮病、皮膚緊實性不足、 皮脂分泌不足、皺紋、高血壓、白血病、Μ腸癌、乳癌、 前列腺癌、肥胖症、骨質減少、男性骨質疏鬆症、性腺機 月b減退、男性更年期、虛弱、肌肉損傷、肌肉貧乏症、骨 肉瘤、低血鈣性手足抽搐、甲狀旁腺機能減退、軟骨病、 、准生素D缺乏、厭食症、過度運動行為導致之低骨質量，該 提面或預防方法包含對需要其之患者投與2_亞烷基_19_降_ 95021.doc 200524619 酶抑制劑或其醫 稀釋劑及其類似 維生素D衍生物（例如式I之化合物）與芳香 藥學上可接受之鹽或前藥及載劑、溶劑、 物之組合。 ^主^本文中討論化合物時，其涵蓋可對患者投與作 為“子上可接受之鹽、前藥或前藥之鹽的化合物。所有 5亥專變體意欲包括在本發明中。 術語"需要其之患者"意謂患有下列疾病或具有患病風險 且需要增加青春期高峰骨f量及肋第二次髖關節骨折之 人類及其它動物：新陳代謝性骨病、老年性骨質疏鬆症、 絕經期後骨質疏鬆症、類固醇引起的骨f疏鬆症、低骨轉 換骨質疏鬆症、骨軟化症、腎性骨質營養不良、牛皮癬、 多發性硬化症、糖尿病、宿主抗移植物排斥反應、移植排 斥、類風濕性關節炎、哮喘、骨折、移植骨、痤瘡、脫髮 症、乾皮病、皮膚緊實性不；i、皮脂分泌不^、皺紋、高 血壓、白血病、結腸癌、乳癌、前列腺癌、肥胖症、骨質 減少、男性骨質疏鬆症、性腺機能減退、男性更年期、虛 弱、肌肉損傷、肌肉貧乏症、骨肉瘤、低血鈣性手足抽搐、 甲狀旁腺機能減退、軟骨病、維生素D缺乏、厭食症、過度 運動行為導致之低骨質量。 本文所用術語Π治療Π包括預防性（preventative)(例如，防 止性（prophylactic))、緩和性及治療性治療。 ’醫藥學上可接受的’’意謂載劑、稀釋劑、賦形劑，及/或 鹽或前藥須與調配物之其它成分相容且對患者無害。 術语如藥π意謂在活體内經轉化產生本發明之化合物的 95021.doc -23- 200524619 化合物。該轉化作用可藉由各種機制來發生，例如經血液 中水解。前藥用途之討論由τ. mguchi及w· stella，AC.S·

Symposium Series 之第 14 卷 ”pro_drugs as Novel Delivery Systems 及在 Bioreversible Carriers in Drug Design 中， Edward Β· Roche編輯，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press，1987 ° 例如，當本發明之化合物含有羧酸官能基時，前藥可包 含藉由以例如下列基團置換酸基之氫原子來形成的酯： (Ci-Cs)烧基、（CVCu)烧醢氧基甲基、具有4至9個碳原子之 1-(烷醯氧基）乙基、具有5至1〇個碳原子之1-甲基烷醯氧 基）-乙基、具有3至6個碳原子之烧氧基戴氧基甲基、具有4 至7個奴原子之1-(烧氧基幾氧基）乙基、具有5至8個碳原子 之1·甲基-1-(烷氧基羰氧基）乙基、具有3至9個碳原子之 N-(烧氧基幾基）胺甲基、具有4至1〇個碳原子之1 _(n_ (烧氧 基幾基）胺基）乙基、3-S太基、4-巴豆酸内酯基、γ_丁内g旨-4_ 基、一 -N，N-(C 1-C2)烧基胺基（C2-C3)烧基（例如β-二甲基胺 乙基）、胺甲醯基-(Ci-C2)烷基、N，N_:(CVC2)烷基胺甲醯 基- (Ci-C2)烧基及六氫π比σ定基、ϋ比洛ϋ定基或嗎福琳基（C2_c3) 烷基。 相似地，當本發明之化合物包含酵官能基時，可藉由以 例如下列基團置換醇基之氫原子來形成前藥：（Ci_c6)烧醯 乳基曱基、l-((Ci_C6)烧酿氧基）乙基、1-甲基_1_((^_^6)院 醯氧基）乙基、（CVC6)烷氧基羰氧基曱基、氧基 幾基胺甲基、丁二醯基、（Ci-C6)烧醢基、a-胺基（clec4)炫 95021.doc -24- 200524619 醢基、芳醯基及α-胺醯基或α-胺酿基-α-胺醯基，其中各… 胺醯基係獨立選自自然存在之L-胺基酸、ρ(〇)(〇η：)2、 -PCOXOCCi-C6)烷基）2或糖基（移除半縮醛形式之碳水化合 物之羥基所產生之基團）。 當本發明之化合物包含胺官能基時，前藥可藉由用例如 下列基團置換胺基中之氫原子來形成：Rx_羰基、Rx〇_罗炭 基、NRXRX1-羰基，其中Rx與RX1各自獨立為（Cie_Ci〇)烷基、 (C^C：7)環烷基、苄基，或rx_羰基為自然α_胺醯基或自然 胺醯基-自然α-胺醯基、-C(0H)C(0)0Yx，其中γχ為Η、 (CVCO烷基或节基；_C-(OYx〇)Yxi，其中γΧ0為（CVC4)烷基 且Υχ丨為（CVC6)烷基、羧基（CVC6)烷基、胺基（Ci_c4)烷基或 單-Ν-(〇ν〇6)烷胺基烷基或雙_N，N_(Ci_C6)烷胺基烷美. -C(Y，Yn，其中^為H或甲基且γΧ3為單_n_(Ci_C6^胺 基或二-N，N-(Cl_C6)烷胺基、嗎福啉基、六氫吡啶-丨_基或吡 咯啶-1-基。 / 表達方式"醫藥學上可接受之鹽"係指含有陰離子之無毒 性陰離子鹽，例如（但不限於）氯化物、漠化物、硬化物、硫 酸鹽、硫酸氫s、磷酸鹽、乙酸鹽、順丁烯二酸趟、反； 鹽、草酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、#樣酸鹽、葡萄 毒性二ΓΓ二及4_甲苯侧。該表達方式亦係指無 ’例如（但不限於）：納鹽、鉀鹽、約鹽、鎮踐、 二 =質子化节星__二节基乙二胺)、膽驗、乙醇：、 :基二胺、甲葡胺(N_甲基-葡糖胺)、节苯乙胺(N-女、哌嗪或緩血酸胺（2-胺基_2-羥甲基q 3丙一 95021.doc •25· 200524619 醇）之鹽。 應認識到本發明之化合物可存在經放射性標記之形式， 意即該等化合物可含有一或多個原子，該等原子含有與通 常天然發現之原子質量或質量數不同的原子質量或質量 數。氫、碳、磷、氟及氯之放射性同位素分別包括3H、l4c、 p、 s、14及36(：1。含有彼等放射性同位素及/或其它原 子之其它放射性同位素的本發明化合物在本發明之範缚 内。氣化（意即3H)及碳-14(意即14c)放射性同位素因為其易 於製備及可偵測性尤其較佳。一般可藉由熟習此項技術者 所热知之方法來製備本發明經放射性標記之化合物。可採 用本文所揭示程序來方便地製備該等經放射性標記之化合 物除了以报谷易獲得之經放射性標記之試劑取代非經放 射性標記之試劑外。 一般熟習此項技術者應瞭解本發明之某些化合物具有至 ^個不對稱碳原子且因此為對映異構體或非對映異構 體。可藉由本身已知方法(例如層析法及/或分步結晶)將非 對映異構體混合物基於其物理化學區別分離為其獨立之非 對=異構體。可藉由下述方法來分離對映異構體：藉由與 2田光學活性化合物（例如醇類）反應來轉化為非對映異構 物刀離非對映異構體且將單獨之非對映異構體轉化 i例如水解，同時包括化學水解方法及例如經酶催化水解之 微生物脂酶水解方法）為相應之純對映異構體。將包括非對 :太：體對映異構體及其混合物之所有該等異構體認為 疋t明之部分。亦及本發明之某些化合物為滯轉異構體 95021.doc -26- 200524619 (意即經取代之聯芳基）且認為是本發明之部分。 另外，當本發明之化合物（包括式〗之化合物或芳香酶抑 制劑）形成水合物或溶合物時，其亦在本發明之範疇内。 可、左由任何全身性及/或局部性投遞本發明之化合物的 方法來投與本發明之化合物。該等方法包括經口、非經腸 及十一扣腸内之途徑等等。一般而言，本發明之化合物係 經口投與，但例如在當經口投藥不合適該目標或當患者不 月b攝取某物時，可利用非經腸（例如靜脈内、肌肉内、經皮、 皮下、直腸或髓内）投藥。 本發明之化合物亦可在適當載劑或稀釋劑中局部施加於 患者體内或患者體外之部位。 可對人類患者投與約0·01微克/天至約10微克/天範圍内 之劑量的本發明之2MD及其它2-亞烷基_19_降_維生素]〇衍 生物。較佳劑量範圍為約0·05微克/天至約工微克/天且更佳 劑量範圍為約〇·1微克/天至約〇·4微克/天。 正常情況下，本發明之組合及方法所使用之芳香酶抑制 劑可以約0.01 mg/kg至約50 mg/kg之劑量範圍投藥給一位 人類患者。例如胺魯米特最初可以8小時間隔給予25〇 之劑量投藥且該劑量可增至日劑量為2克。胺魯米特（銷售 商標為Cytadren®)可以250 mg 口服錠劑市售。其它芳香酶抑 制劑之市售劑型包括以2·5 mg口服錠劑市售之萊曲唑（銷售 商標為Femar，），及以} mg 口服錠劑市售之阿納司唑（銷售 商標為Arimidex⑧）。 投藥量及時間安排當然應取決於待治療對象、病痛之賞 95021如 答 200524619 重性、投藥方式以及主治醫生之診斷。因此，由於患者與 患者之可變性，本文所給定之劑量為準則且醫生可滴定藥 物劑量以達成該醫生認為對患者適當之治療。考慮到所需 治療程度’醫生須平衡各種因子，例如患者年齡、既有疾 病之=在以及其它疾病之存在。劑量可為_日提供一次或 :日提供多次，且可以持續釋放或受控釋放調配物形式給 :。亦有可能使用立即釋出與受控釋放及/或持續釋放調配 物之組合來投與該等化合物。 根據任何連續性或間歇性投藥進度來投與2助或其 2·亞燒基_19-降·維生素D衍生物。-日-次、一日多次、 週一次、

週多次、每兩週一次、每兩週多次 月多次、每兩月一次、每 月一次 月 次、每六月一次及 ^給藥為鳩或其它2_亞絲_19♦維生素D街生: 方—·或其組合之給藥進度的非限制性實例。 同Γ=?Τ般以包含至少-種本發明之化合物 藥固予彳接又之媒劑或稀釋劑的醫藥組合物形式來. 直腸^广'明之化合物可以任何習知經口、非經腸 腸或經皮劑型來投藥。 對於經口投藥，醫華 丸劑、歸 · I，、口物可採用溶液、懸浮液、錠劑 劑:“二末及其類似物之形式。採用含有各㈣ (例如殿粉且較佳為馬於ΛΓ)之鍵劑與各種崩解$ 一起，、έ η ”、、〜、々薯或木薯澱粉，及某種錯合矽酸鹽 拉伯膠=合劑(例如聚―定酮、產糖、明㈣ / 如、月桂基硫酸納及;;

9502l.d〇( -28- 200524619 石）通常對成錠之目的非常有用。在軟填充（s〇f卜fiUed)及硬 填充（hard-filled)明膠膠囊中亦採用相似類型之固體組合物 作為填充劑；就此而論較佳物質亦包括乳糖或奶糖以及高 -分子量聚乙二醇。當經口投藥需要水懸浮液及/或酒劑時， • 本發明之化合物可與各種甜味劑、芳香劑、著色劑、乳化 劑及/或懸浮劑，以及與諸如水、乙醇、丙二醇、丙三醇及 其各種類似組合之稀釋劑組合。一種2MD與其它2_亞烷基_ 19-降-維生素D衍生物之可接受之調配物實例為含有耐奥 比油（neobe oil)之軟明膠膠囊，其中2MD或其它2_亞烷基_ 19-降-維生素〇衍生物已溶於該油中。其它適用之調配物對 熟習此項技術者而言將顯而易見。 對於非經腸投藥之目的，可採用在芝麻油或花生油中或 在έ水丙一醇中之溶液，以及相應水溶性鹽之無菌水溶 液必要時，可將該等水溶液適當緩衝，且首先以足量生 理食鹽水或葡萄糖使該液體稀釋劑等張。該等水溶液尤其 適用於靜脈内、肌肉内、皮下及腹膜内注射之目的。就此 而卿，藉由熟習此項技術者熟知之標準技術很容易獲得所 採用之無菌水介質。 對於經皮（例如經局部）投藥之目的，製備稀釋之無菌、 水洛液或部分含水溶液（通常為約〇.1%至5%之濃度）、否則 類似於上述非經腸溶液之溶液。 製備具有特定置之活性成分的各種醫藥組合物之方法為 已知的’或根據本揭示内容對於熟習此項技術者而言將顯 而易見。對於製備醫藥組合物之方法的實例，參見 95021.doc 200524619

Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company，Easton，Pa.，第 19版（1995)。 本發明之另一態樣為包含下列物質的套組： a.第一單位劑型中的一定量2-亞烷基-19_降-維生素〇衍 生物（例如式I之化合物），及醫藥學上可接受之載劑或稀釋 劑； b·第二單位劑型中的一定量芳香酶抑制劑，及醫藥學上 可接受之載劑或稀釋劑；及 c·一容器。 該套組包含兩種分離之醫藥組合物：例如式j之化合物的 2-亞烷基-19-降_維生素D衍生物及上述第二化合物。該套組 包含用來容納該等分離組合物之容器裝置，例如分隔瓶或 为隔箔包裝，然而該等分離組合物亦可包含在單一未分隔 谷态中。通常，該套組包含分離組分之投藥說明。當分離 組分較佳以不同劑型（例如經口及非經腸）投藥，以不同劑量 時間間隔投藥，或當主治醫生希望滴定組合物之 時’該套組形式尤其有利。 刀 /套、、且之貫例係所謂發泡包裝（blister 發泡包裝在 =扃工業中為人所熟知且廣泛用於包裝醫藥單位劑型（錠 :丨卜膠囊及其類似物)。發泡包裝一般由一相對較硬材料之 ^片覆蓋以較佳透明塑膠材料之箔片來組成。在包裝過程 期間’在塑膠W上形成凹洞。該等凹洞具有待 或膠壸今 ^ 二尺寸與形狀。接著，將錠劑或膠囊放入凹洞中且 相對4塑膠片在片表面密封該相對較硬材料之薄片， 95021.doc 200524619 。亥泊片與形成凹洞之方向相反。結果，錠劑及膠囊密封在 塑膠鑛片與薄片之間的凹洞中。較佳該薄片強度為藉由在 該:凹洞處手工施壓以便在薄片中凹洞位置處形成開口以 自發泡包裝移除錠劑或膠囊。隨後可經該開口移除錠劑或 膠囊。 、可此希望在套組上提供記憶輔助物，例如為緊接於錠劑 或膝囊之數字形式，藉以使數字對應於其巾應當攝取所規 定之錠劑或膠囊的療程天數。另—種該記憶輔助物之實例 為p刷在卡片上之日曆，例如，如下所示”第一週，星期一、 ' 專專......第二週，星期一、星期二......"等等。 其它記憶辅助物之變更將很容易變得顯而易見。”曰劑量，， 可為既定日内待服用之單獨錠劑或膠囊或若干錠劑或膠 =與亦即式I之化合物、其前藥，或該化合物或該前藥之醫 藥學上可接受之鹽之日劑量可由一錠劑或膠囊組成，而第 ^化合物之日劑量可由若干錠劑或膠囊組成且反之亦然。 該記憶輔助物應當對此加以反映。 者在本發明之另一特定實施例中，提供一種設計來按照計 劃用：之順序一次分配一份日劑量之分配器。較佳地，該 刀-器凌配一纪憶辅助物以便進一步促進與該療程之順應 性。：記憶輔助物之實例為顯示已分配之日劑量數的機： 十數器另一該記憶輔助物之實例為耦合於一液晶讀出器 或σ欷提示讯號之電池驅動微型晶片記憶體，該讀出器戋 訊號（例如）讀出上一次已服用日劑量之日期及/或提示何= 服用下一劑量之曰期。 95021.doc -31 - 200524619 可同時或不同時以相同劑型或不同劑型來投與2_亞烷基_ 19降·維生素d衍生物及芳香酶抑制劑。預期所有投藥方法 之麦化 種較佳之投藥方法為同時以相同劑型投與該組 a另車乂佳之投藥方法為在一劑型中投與2-亞烧基-19_ 降-維生素D衍生物且在另一劑型中投與芳香酶抑制劑，二 者同時服用。 可藉由常見一般方法來達成具有基本結構—羥基_ 2-烧基-19-降-維生素d化合物，尤其為1α_經基_2_甲基_19_ 降-維生素D化合物之製備，意即將二環溫道斯-格倫德曼 (Windaus-Grundmann)型酮Π與烯丙基氧化膦m縮合為相應 之2-亞甲基-19-降-維生素D類似物IV，隨後在後者化合物中 在C-1及C-3處去保護。

丫 § Ο

95021.doc -32- 200524619

R

在結構II、III及IV中，基團¥1與¥2及R代表上文所定義之 基圑；¥1與¥2較佳為羥基保護基，亦應暸解R中任何可能敏 感或干擾縮合反應之官能基應如此項技術中所熟知地適當 加以保護。如上顯示之方法代表彙集性合成概念之應用， 其已有效應用於製備維生素D化合物[例如Lythgoe等人，J· Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 590(1978) ； Lythgoe, Chem. Soc. Rev. 9, 449(1983) ; Toh等人，J. Org. Chem. 48, 1414(1983); Baggiolini等人，J. Org. Chem. 5 1，3098(1986) ; Sardina等 人，J. Org· Chem. 51，1264(1986) ; J. Org. Chem. 51， 1269(1986); DeLuca等人，美國專利第 5,086,191 號；DeLuca 等人，美國專利第5,536,713號]。 通式結構II之氫化茚I同（hydrindanone)為已知的或可藉由 已知方法製備。該等已知二環酮之特別重要的實例為上述 具有側鏈（a)、（b)、（c)及（d)之結構，意即25-羥基格倫德曼 酮（f)[Baggiolini 等人，J. Org. Chem. 51，3098(1986)];格 倫德曼酮（g)[Inhoffen等人，Chem. Ber· 90, 664(1957)] ; 25- 95021.doc -33- 200524619 經基溫道斯嗣（h)[Baggiolini 等人，J· Org. Chem· 51， 3098(1986)]及溫道斯 _ (i)[Windaus 等人，Ann·，524, 297(1936)]：

為製備所需通式結構III之氧化膦，已發展出一種由奎尼 酸T S旨（methyl quinicate)衍生物1開始之新合成途徑’該衍 95021.doc -34- 200524619 生物很容易自市售（1 R，3R，4S，5R)-㈠-奎尼酸如Perlman等 人，Tetrahedron Lett. 32，7663(1991)及 DeLuca等人，美國 專利第5,086,191號中所述來獲得。起始甲酯1轉化成所需A 環合成纖維之整個方法歸納在流程圖I中。因此，以Ru04 氧化（以RuC13及NaI04作為共氧化劑之催化方法）1中之二級 4-羥基。對於僅為此受阻羥基之有效氧化方法而言有必要 使用該強氧化劑。然而，亦可應用其它更常用氧化劑（例如 重鉻酸吼錠鏽），儘管該等反應通常需要長得多的時間來完 成。該合成之第二步包含空間受阻之4-酮基化合物2與自甲 基三苯基溴化鱗及正丁基鋰製備之内鑌鹽進行維蒂希 (Wittig)反應。其它鹼亦可用於生成反應性亞甲基磷烷 (methylenephosphorane)，如第三丁氧基钾、NaNH2、NaH、 K/HMPT、NaN(TMS)2等等。為了製備4-亞甲基化合物3， 可使用某些所描述維蒂希方法之修正，例如使2與活化亞甲 基三苯基鱗烧反應[Corey等人，Tetrahedron Lett· 26, 5 5 5(1985)]。或者，可應用其它廣泛用於亞甲基化惰性酮之 方法，例如與自甲基二苯基氧化膦經正丁基鋰去質子化所 獲得之PO-内鑌鹽進行維蒂希-霍納（Wittig-Horner)反應 [Schosse等人，Chimia 30，197(1976)]，或使酮與曱基亞磺 酸鈉[Corey等人，J· Org· Chem. 28, 1128(1963)]及甲基亞磺 酸钾[Greene等人，Tetrahedron Lett· 3755(1976)]反應。以 氫化鋁鋰或其它適用還原劑（例如DIBALH)還原醋3提供了 二醇4，其隨後經高磁酸鈉氧化為環己酮衍生物$ ° 5亥方法 之下一步包含使酮5與（三甲基甲矽烷基）乙酸甲酿進行彼特 95021.doc -35- 200524619 森反應（Peterson reaction)。將所得烯丙酯6以氫化二異丁基 銘處理且將所形成之烯丙醇7又轉化為所需A環氧化膦8。7 至8之轉變涉及3個步驟，即就地以正丁基鋰及對甲苯石黃醯 氯進行甲苯磺醯化，隨後以二苯基膦鋰鹽反應且以過氧化 氫進行氧化。 可使用A環合成纖維8及具有所需侧鏈結構之合適的溫道 斯-格倫德曼酮II來合成若干通式結構1¥之2_亞甲基_19_降_ 維生素D化合物。因此，例如生成自8及正丁基鋰之膦氧基 石反化鋰與根據公開之程序[Sicinski等人，L Med. Chem. 37, 3730(1994)]製備之經保護25-羥基的格倫德曼酮9進行維蒂 希-霍納偶合產生了預期之維生素化合物1〇。此化合物在以 AG 50W-X4陽離子交換樹脂去保護後，此提供了 1α，25_二 羥基-2-亞曱基-19-降-維生素〇3(11)。 藉由氧化膦8與經保護之（20S)-25_羥基格倫德曼酮13(流 程圖II)進行類似偶合來達成C_2〇差向異構化作用且提供了 19-降-維生素14，其在該等羥基-保護基水解後產生 (208)-1〇6,25-二羥基-2-亞甲基-19-降-維生素£)3(15)。如上所 述，可藉由本文所揭示方法來合成其它孓亞曱基_丨、降-維 生素D類似物。例如，可藉由提供格倫德曼酮（§)來獲得1… 經基-2-亞曱基-19-降-維生素D3。 本申請案中所引用所有文件（包括專利及專利申請案）以 引用之方式併入本文中。以下呈現之實例意欲說明本發明 之特殊實施例而並非意圖以任何方式限制本發明（包括申 請專利範圍）。 95021.doc -36- 200524619 實例 下列縮寫用於本申請案中。 NMR mp 核磁共振 溶點 Η 氫 h min t-Bu THF n-BuLi MS HPLC SEM Ph 小時 分鐘 第三丁基 四氫呋喃 正丁基鋰 質譜 高壓液相層析法 標準誤差量測 笨基

Me 甲基

Et 乙基

DIBALH LDA 二異丁基氫化鋁 一異丙基醯胺基經 式1之化合物的製備方法在美國專利第5,843,928號中陳 述如下： 在°亥等實例中，由阿拉伯數字（例如1、2、3等等）標識之 特定產物係指在前述及流程圖I及流程圖II中如此標識之特 定產物。 ' 實例1 95021.doc -37- 200524619 製備1α，25-二羥基-2-亞甲基-19-降-維生素D3(ll) 首先參看流程圖I，如前文所述[Perlman等人，Tetrahedron Lett· 32，7663(1991)及 DeLuca等人，美國專利第 5,086，191 號]自市售（-)-奎尼酸獲得起始奎尼甲酯衍生物1。1:^^· 82。〇82.5。(：（來自己烷），NMR(CDC13)S 0.098, 0.110, 0.142及 0.159(各3H，各s，4xSiCH3)，0.896及0·911(9Η及9H，各s，2xSi+Bu)， 1.820(1H，dd，J=13.1，10.3 Hz)，2·02(1Η，ddd，J=14.3, 4.3, 2.4 Ηζ)，2·09(1Η， dd，J=14,3, 2.8 Hz)，2·19(1Η，ddd，J= 13.1，4.4, 2·4 Hz)，2·31(1Η，d，J=2.8 Hz，OH)，3·42(1Η，m ; D20 dd後，J=8.6, 2.6 Hz)，3.77(3H，s)，4.12(lH，m)， 4·37(1Η，m)，4-53(lH，br s，OH)。 (a)氧化奎尼酸甲酯衍生物1之4-羥基 (3R，5R)_3,5-雙[(第三丁基二甲基甲矽烷基）氧]-1-羥基-4-氧基環己烷羧酸甲酯（2)。向經攪拌的水（42 mL)中之水合 氯化釕（111)(434 mg，2.1 mmol)與高碘酸鈉（10.8 g，50.6 mmol)之混合物添加奎尼酸甲酯1(6.09 g，14 mmol)之 CC14/CH3CN(1:1，64 mL)中的溶液。持續劇烈授拌8小時。 添加幾滴2-丙醇，將該混合物傾注至水中且以氯仿萃取。 將有機萃取物組合、以水洗滌、乾燥（MgS04)及蒸發以得到 深色油狀殘餘物（大約5 g)，其經急驟層析法純化。以己烷 /乙酸乙酯（8 : 2)溶離產生純淨油狀4-酮2(3.4 g，56%) : 4 NMR(CDC13)S 0.054, 0.091，0.127及0.132(各3H，各s，4xSiCH3)，0.908 及0.913(9H及9H，各s，2xSi-t-Bu)，2·22(1Η，dd，J=13.2, 11.7 Ηζ)，2·28(1Η， 〜dt J=14.9, 3.6 Hz)，2_37(1H，dd，J=14.9, 3.2 Hz)，2·55(1Η，ddd，J=13.2, 6.4, 3·4 Hz)，3.79(3H，s)，4·41(1Η，t，J〜3·5 Hz)，4.64(1H，s，OH)，5.04(1H，dd， 95021.doc -38 - 200524619 J=11.7，6.4 Hz) ; MS m/z(相對強度）無 m+，375(M+-t_Bu，32)， 357(M+-t-Bu-H20, 47)，243(31)，225(57)，73(100)。 (b)4-酮2之維蒂希反應 (3R，5R)-3,5·雙[(第三丁基二甲基曱矽烷基）氧-羥基_ 4-亞甲基環己烷羧酸甲酯（3)。在〇。〇下於氬氣下向無水 THF(32 mL)中之甲基三苯基漠化鱗（2.S13 g，us mm〇1^ 逐滴添加正丁基鐘（在己烧中2.5 Μ，6.0 mL，1 5 mmol)同時 進行攪拌。隨後添加另一份]^?113?+：81^2.813@，7.88 111111()1；) 且在0°C下將溶液攪拌10分鐘並在室溫下攪拌40分鐘。將撥 紅色混合物再次冷卻至0。〇下且將4-酮2(1.558 g，3.6 mmol) 之無水THF( 16+2 mL)溶液在20分鐘内虹吸至反應燒瓶中。 將該反應混合物在0 °C下擾拌1小時且在室溫下擾拌3小 時。隨後將該混合物小心傾注至含1 〇/〇 HC1之鹽水中且用乙 酸乙酯與苯萃取。將經組合之有機萃取物以稀釋NaHC03 及鹽水洗務、乾無（MgSO4)及蒸發產生撥色油狀殘餘物（大 約2.6 g)，其經急驟層析法進行純化。以己烷/乙酸乙酯（9:u 溶離產生呈無色油之純4-亞曱基化合物3(368 mg，24%): NMR(CDC13)6 0.078，0.083， 0.092 及 0.115(各3H，各s，4x SiCH3)，0.889及 0·920(9Η及9H，各s，2xSi-t-Bu)，1·811(1Η，dd， J=12.6, 11·2 Hz)，2·10(2Η，m)，2.31(lH，dd，J=12.6, 5·1 Hz)， 3.76(3H，s)，4.69(1H，t，J=3.1 Hz)，4.78(1H，m)，4.96(2H，m; D20 1H後，br s)，5.17(1H，t，J=1.9 Hz) ; MS m/z(相對強度） 無 M+，373(M+-t-Bu，57)，355(M+-t-Bu -H20，13)，341(19)， 313(25)，241(33)，223(37)，209(56)，73(100)。 95021.doc -39- 200524619 (C)還原4-亞甲基化合物3中之酯基 [(311，511)-3,5_雙[(第三丁基二甲基甲矽烷基）氧]-1_經基· 4-亞甲基環己基]甲醇（4)。⑴在〇。〇下於氬氣下向經攪拌的 酯3(90 mg，0.21 mmol)之無水THF(8 mL)溶液添加氫化鋁 鋰（60 mg，1.6 mmol)。在1小時後將冷浴移除且在6〇c下繼 續攪拌12小時及在室溫下攪拌6小時。以飽和水溶液 分解過置试劑，且將該混合物以乙酸乙酯及醚萃取、乾燥 (MgSCU)及蒸發。將該殘餘物以己烷/乙酸乙酯（9 :丨）經急驟 層析法處理提供未反應基質（丨2 mg)及純的結晶二醇4(35 mg，基於所回收酯 3 48%): !h NMR(CDCl3+D2〇)s 〇()79, 0.091，0·1〇〇及 〇·ΐ21(各3H，，各s，4xSiCH3)，0.895及0·927(9Η及 9Η ’ 各s，2xSi-t-BU)，1.339(1¾ t，J〜12 Ηζ)，1·510(1Η，dd，J=14.3, 2.7 Ηζ)， 2·10(2Η，m) ’ 3·29及3·40(1Η及 1H，各d，J=ll.〇 Hz)，4·66(1Η，t，J-2.8 Hz)， 4.78(1H，m)，4·92(1Η，t，J=1.7 出)，5·13(1Η，t，J=2.0 Hz) ; MS m/z(相對強 345(M+-t-Bu5 8)3 327(M+-t-Bu-H205 22)? 213(28), 195(11), 73(100) 〇 (11)將二異丁基氫化鋁（在甲苯中1.5M，2.0mL，3 mmol) 在-78 C下於氬氣下添加至酯3(215 mg，0.5 mmol)之無水乙 驗（3 mL)溶液中。將混合物在_7fC下攪拌3小時且在_24它 下授拌1.5小時，以乙醚（1〇 mL)稀釋且藉由緩慢添加2 N酒 石酸納鉀來中止。將溶液溫至室溫且攪拌丨5分鐘，傾注至 鹽水中且以乙酸乙酯及乙醚萃取。將該等有機萃取物組 合、以稀HC1(大約1%)及鹽水洗滌、乾燥（Mgs〇4)及蒸發。 藉由急驟層析法純化結晶殘餘物。以己烧/乙酸乙酯（9:1)溶 95021.doc -40- 200524619 離產生結晶二醇4(43 mg，24%)。 (d) 裂解鄰二醇4 (3R，5R)-3,5-雙[(第三丁基二曱基甲矽烷基）氧]-4-亞曱基 環己酮（5)。將高碘酸鈉飽和水（2.2 mL)在0°C下添加入二醇 4(146 mg，0.3 6 mmol)之甲醇（9 mL)溶液中。將該溶液在0°C 下攪拌1小時，傾注入鹽水中且以乙醚及苯萃取。將有機萃 取物組合、以鹽水洗滌、乾燥（MgS04)及蒸發。將油狀殘餘 物溶於己烷（1 mL)中且應用於二氧化矽Sep-Pak濾芯 (cartridge)上。以己烧/乙酸乙S旨（95:5)溶離呈無色油之純4-亞曱基環己酮衍生物 5(110 mg，82%) : WNMRCCDCIW 0.050 及0·069(6Η及6H，各s，4xSiCH3)，0·881(18Η，s，2xSi-t-Bu)，2·45(2Η，ddd， J=14.2, 6.9, 1·4 Ηζ)，2·64(2Η，ddd，J=14.2, 4.6, 1.4 Ηζ)，4·69(2Η，dd，J=6.9, 4.6 Ηζ)，5·16(2Η，s) ; MS Μ/ζ(相對強度）無Μ+，355(M+-Me，3)， 313(M+-t-Bu，100)，73(76)。 (e) 製備烯丙酯6 [(3’11，5’1〇-3’，5’-雙[(第三丁基二甲基甲矽烷基）氧]-4，-亞 甲基亞環己基]乙酸甲酯（6)。向二異丙胺（37 μί，0.28 mmol) 之無水THF(200 μΙ〇溶液在氬氣下於_78艺下添加正丁基鋰 (在己烷中2.5 Μ，113 pL，0.28 mmol)同時進行攪拌，且隨 後添加（三曱基甲矽烷基）乙酸甲酯（46 pL，0.28 mmol)。15 分鐘後，逐滴添加無水THF(200 + 80 μ!〇中之酮基化合物 5(49 mg，0.132 mmol)。將該溶液在-78°C下攪拌2小時且以 飽和NH4C1中止反應混合物，將其傾注至鹽水中且以乙醚及 苯萃取。將該等經組合之有機萃取物以鹽水洗滌、乾燥 95021.doc -41 - 200524619 (MgS04)及蒸發。將該殘餘物溶於己烷中（1 mL)且施用於二 氧化矽Sep-Pak濾芯上。用己烷/乙酸乙酯（98 : 2)溶離得到 呈無色油之純烯丙酯6(50 mg，89%):它NMR(CDC13> 0.039, . 0.064及0_076(6H，3H及3H，各s，4xSiCH3)，0_864及0·884(9Η及9H，各s， 2xSi-t-Bu)，2.26(1H，dd, J=12.8, 7.4 Hz)，2.47(1H，dd，J=12.8, 4·2 Ηζ)， 2·98(1Η，dd，J=13.3, 4.0 Hz)，3·06(1Η，dd，J=13.3, 6·6 Hz)，3·69(3Η，s)， 4.48(2H，m)，4.99(2H，s)，5.74(1H，s) ; MS m/z(相對強度)426(M+, 2)， 411(M+-Me，4)，369(M+-t-Bu，100)，263(69)。 (f)還原烯丙酯6 2-[(3V，5’R)_3*，5^雙[(第三丁基二甲基甲矽烷基）氧 基]-4’-亞甲基亞環己基]乙醇（7)。將二異丁基氫化鋁（1.5 Μ 在甲苯中，1.6 mL，2.4 mmol)在氬氣下於-78°C下缓慢添加 至經攪拌的烯丙酯6(143 mg，0.33 mmol)之甲苯/二氣甲烷 (2 ·· 1，5·7 mL)溶液中。在-78°C下繼續攪拌1小時且在 -46°C(環己酮/乾冰浴）下攪拌25分鐘。藉由緩慢添加酒石酸 納鉀（2 N，3 mL)、HC1水溶液（2 N，3 mL)及 H20( 12 mL)來 中止該混合物，且接著以二氯甲烷（12 mL)稀釋且用醚及苯 萃取。將該等有機萃取物組合、以稀釋（大約1%)之HC1及鹽 水洗滌、乾燥（MgS04)及蒸發。藉由急驟層析法純化該殘餘 物。以己烷/乙酸乙酯（9 : 1)溶離產生結晶烯丙醇7(130 mg， 97%) : 4 NMR(CDC13)5 0.038, 0.050及0·075(3Η，3H及6H，各s，4x SiCH3)，0.876及0·904(9Η及9H，各s，2xSi-t-Bu)，2·12(1Η，dd，J=12.3, 8.8 Hz)，2·23(1Η，dd，J=13.3, 2.7 Hz)，2·45(1Η，dd，J=12.3, 4.8 Hz)，2·51(1Η，dd， J=13_3, 5.4 Hz)，4.04(1¾ m ; D20 dd後，J=12.0, 7·0 Hz)，4.17(1H，m; D20 95021.doc -42- 200524619 dd後，J=12.0, 7.4 Ηζ)5 4·38(1Η，m)，4·49(1Η，m)，4·95(1Η，br s)，5.05(1H，t， J=1.7 Hz)，5·69(1Η，〜t，J=7.2 Hz) ; MS m/z(相對強度)398(M+，2)， 383(M+-Me，2)，365(M+-Me_H20, 4)，341(M+-t-Bu，78)，323(M+-t-Bu-H20, 10),73(100)。 (g)將烯丙醇7轉變為氧化膦8 [2-[(3’R，5’R)-3’，5’_雙[(第三丁基二甲基甲矽烷基）氧 基]-4’-亞甲基亞環己基]乙基]二苯基氧化膦（8)。向在無水 THF(2.4 mL)中之烯丙醇7(105 mg，0.263 mmol)在氬氣下於 0°C下添加正丁基鋰（在己烷中2.5 Μ，105 μι，0.263 mmol)。 將新鮮再結晶之甲苯績醯氣（50·4 mg，0.264 mmol)溶於無 水THF(480 μΙ〇中且添加至稀丙醇-丁基鋰溶液中。將該混 合物於0°C下攪拌5分鐘且擱置於0°C下。在由氬氣置換空氣 之另一乾燥燒瓶中，將正丁基鋰（在己烷中2.5 Μ，210 μί， 0.525 mmol)在(TC 下添加至無水 THF(750 μ!〇 中之 Ph2PH(93 pL，0.5 34 mmol)同時進行攪拌。在氬氣壓下將該紅色溶液 虹吸至甲苯磺酸鹽溶液中直至橙色持續存在（大約添加1/2 溶液）。將所得混合物在〇°C下額外攪拌30分鐘且藉由添加 Η2Ο(30 μΙ〇來中止。減壓蒸發溶劑且在二氣甲烷（2.4 mL) 中再溶解殘餘物並與10% H202—起在0°C下攪拌1小時。將 該有機層分離、以冷亞硫酸鈉水溶液及H2〇洗滌、乾燥 (MgS04)及蒸發。使該殘餘物經受急驟層析法。以苯/乙酸 乙酯（6:4)溶離產生半結晶氧化膦8(134 mg，87%) : 4 NMR (CDC13)3 0.002，0.011 及 〇·〇19(3Η，3H及6H，各s，4xSiCH3)，0.855及 0·860(9Η及9H，各s，2xSi-t-Bu)，2·0-2·1(3Η，br m)，2.34(1 H，m)，3·08(1Η， 95021.doc -43- 200524619 m)，3·19(1Η，m)，4·34(2Η，m)，4.90及4·94(1Η 及 1H，各s)，5·35(1Η，〜q， J=7.4 Hz)，7·46(4Η，m)，7·52(2Η，m)，7·72(4Η，m) ; MS m/z(相對強度)無 M+，581(Μ+·1，1)，567(M+-Me，3)，525(M+-t-Bu，100)，450(10)，393(48)。 (h)經保護之25-羥基格倫德曼酮9與氧化膦8之維蒂希-霍納 偶合 1α，25-二羥基-2-亞甲基-19·降-維生素D3(ll)。向氧化膦 8(33.1 mg，56.8 μιηοΐ)之無水THF(450 μ!〇溶液在氬氣下於 〇°C下緩慢添加正丁基裡（在己烧中2·5Μ，23 μί，57·5 μηιοί) 同時進行攪拌。溶液變成深橙色。將該混合物冷卻至-78°C 且緩慢添加根據公開程序[Sicinski等人，J. Med. Chem· 37, 373 0( 1994)]製備的經保護之羥基酮9(9.0 mg，22.8 μηιοί)之 無水THF(200+100 μΙ〇預冷溶液（-78°C)。將該混合物在氬氣 下於-78°C下攪拌1小時且在〇°C下攪拌18小時。添加乙酸乙 酯，且將該有機相以鹽水洗滌、乾燥（MgS04)及蒸發。將該 殘餘物溶於己烷中且施用於二氧化矽Sep-Pak濾芯上，且以 己烷/乙酸乙酯（99 : 1，20 mL)洗滌以產生19-降-維生素衍 生物10(13.5 mg，78%)。隨後以己烧/乙酸乙酯（96: 4, 10 mL) 洗滌Sep-Pak以回收一些未變化之C，D-環酮9(2 mg)，且以乙 酸乙酯（10 mL)以回收二苯基氧化膦（20 mg)。出於分析之目 的，藉由 HPLC(6.2 mmx25 cm Zorbax-Sil 管柱，4 mL/min) 使用己烷/乙酸乙酯（99.9:0.1)溶劑系統來純化經保護維生 素1 0之樣品。在Rv26 mL下溶離純化合物1 0得無色油： UV(在己烷中）Xmax224、253, 263 nm;NMR(CDC13)3 0.025, 0.049，0.066及 0.080(各 3H，各 s，4xSiCH3)，0·546(3Η，s， 95021.doc -44- 200524619 Ι8-Η3)，0·565(6Η，q，J=7.9 Hz，3xSiCH2)，0.864及 0·896(9Η 及 9H，各 s，2xSi-t-Bu)，0·931(3Η，d，J=6.0 Hz，21-H3)， 0·947(9Η，t，J=7.9 Hz，3xSiCH2CH3)，1.188(6H，s，26-及 27-H3)5 2·00(2Η，m)，2·18(1Η，dd，J=12.5，8.5 Hz，4β·Η)， 2·33(1Η，dd，J=13.1，2·9 Hz，10β-Η)，2.46(1H，dd J=12.5, 4.5 Hz，4α-Η)，2·52(1Η，dd，J=13.1，5·8 Hz，lOot-H)，2.82(1H，br d，J=12 Hz，9β-Η)，4.43(2H，m，1β-及 3a-H)，4.92及 4.97(1H 及 1H’ 各s’ =CH2)，5.84 及 6·22(1Η 及 1H，各d，J=11.0Hz， 7-及 6-H); MS m/z(相對強度）758(M+，17)，729(M+-Et，6)， 701(M+-t-Bu，4)，626(100)，494(23)，366(50)，73(92)。 將經保護之維生素10(4.3 mg)溶於苯（150 μΙ〇中 且添加曱 醇（800 μΙ〇中之樹脂（AG 5 0W-X4，60 mg ;以甲醇預洗滌）。 將該混合物於室溫下在氬氣下攪拌17小時，以乙酸乙酯/乙 醚（1:1，4 mL)稀釋且進行傾析。以乙醚（8 mL)洗滌樹脂且 以鹽水及飽和NaHC03洗滌經組合之有機相，將其乾燥 (MgS04)及蒸發。藉由HPLC(62 mmx25 cm Zorbax-Sil 管 柱，4 mL/min)使用己烷/2-丙醇（9 : 1)溶劑系統來純化該殘 餘物。在Rv29 mL下（相同系統中，ΐα，25-二羥基維生素D3 在Rv52 mL下溶離）收集分析上純的2-亞甲基-19-降-維生素 11(2.3 mg，97%)白色固體·· UV(EtOH中)λ· 243_5,252,262.5nm; lU NMR(CDC13)5 0.552(3H? s? 18-H3)5 0.941(3H? d5 J=6.4 Hz5 21-H3)5 1·222(6Η，s，26-及 27·Η3)，2.01(2H，m)，2·27·2·36(2Η，m)，2·58(1Η，m)5 2·80·2·88(2Η，m)，4·49(2Η，m，1β_及3<x_H)，5.10及5·11(1Η及 1H，各s， =CH2)，5.89 及6·37(1Η及 1H，各d，J=11.3 Hz，7-及6-H) ; MS m/z(相對 95021.doc -45- 200524619 強度)416(M+，83)，398(25)，384(31)，380(14)，351(20)，313(100)。 實例2 製備（20S)-la，25-二羥基-2-亞曱基-19-降-維生素D3(15) 流程圖II說明經保護之（20S)-25-羥基格倫德曼酮13之製 備，及其與氧化膦8(如實例1中所述獲得）之偶合。 (a) 甲矽烷基化羥基酮12 (20S)-25·[(三乙基甲矽烷基）氧]-消-A，B-膽甾烷-8-酮 (13)。將酮 12(Tetrionics，Inc. Madison，WI·; 56 mg，0.2 mmol) 及口米峻（65 mg，0.95 mmol)之無水DMF(1 ·2 mL)溶液以三乙 基甲矽烷基氯（95 pL，0.56 mmol)處理，且將混合物在室溫 下於氬氣下攪拌4小時。添加乙酸乙酯及水，且分離有機 層。將乙酸乙酯層以水及鹽水洗滌、乾燥（MgSCU)及蒸發。 使該殘餘物在己烷/乙酸乙酯中（9: 1)經過二氧化矽Sep-Pak 濾芯且在蒸發後藉由HPLC使用己烷/乙酸乙酯（9:1)溶劑系 統（9.4 mmx25 cm Zorbax-Sil 管柱，4 mL/min)進行純化。 rv35 mL下溶離出呈無色油之純的經保護經基酮13(55 mg ^ 70%) ： NMR(CDC13)6 0.566(6H? q5 J=7.9 Hz? 3xSiCH2)? 〇_638(3H，s，18·Η3)，0.859(3H，d，J=6.0 Hz，2bH3)， 〇.947(9H，t，J=7.9Hz，3xSiCH2CH3)，1.196(6H，s，26j27-H3)，2.45(lH， dd，J=11.4,7.5Hz，14a-H)。 (b) 經保護之（2〇S)-25-羥基格倫德曼酮13與氧化膦8之維蒂 希-霍納偶合 (2〇S)-la，25-二羥基-2-亞甲基-19-降-維生素D3(15)。向氧 化膦 8( 1 5 ·8 mg，27· 1 μπιοί)之無水 THF(200 μΙ〇溶液在 〇 C 下 95021.doc -46- 200524619 於氩氣下緩慢添加正丁基鋰（在己烷中2.5 μ，11 μ[，27.5 μηιοί)同時進行攪拌。溶液轉變成深橙色。將混合物冷卻至 -78°C且緩慢添加經保護羥基酮13(8·〇 mg，2〇.3 μηι〇1)之無 水THF(100 pL)預冷（-78。〇溶液。將該混合物在氬氣下於 -78 C下授拌1小時且在〇°c下攪拌18小時。添加乙酸乙酯， 且將有機相以鹽水洗滌、乾燥（MgS〇4)及蒸發。將殘餘物溶 於己烷中且施用於二氧化矽Sep-pak濾芯上，且以己烷/乙酸 乙酯（99.5:0.5 ’ 20 mL)洗務以產生呈無色油之19-降-維生素 衍生物14(7 mg，45%)。隨後以己烷/乙酸乙酯（96: 4, 10 mL) 洗滌Sep-Pak以回收部分未變化C，D-環酮13(4 mg)，且以乙 酸乙酉旨（10 mL)回收二苯基氧化膦（9 mg)。出於分析目的， 將經保護之維生素14之樣品進一步藉由HPLC(6.2 mmx25 cm Zorbax-Sil管柱，4 mL/min)使用己烧/乙酸乙酯（99.9 ·· 〇·1)溶劑系統進行純化。 14: UV(己烷中）Xmax 244, 253.5, 263 nm; 4 NMR(CDC13) δ 0.026，0.049，0.066 及 0.080(各 3H，各 s，4xSiCH3)， 0·541(3Η，s，18-H3)，0.564(6H，q，J=7.9 Hz，3xSiCH2)， 0.848(3H，d，J=6.5 Hz，21-H3)，0.864及 0·896(9Η及 9H，各 s， 2xSi-t-Bu), 0·945(9Η，t，J=7.9 Hz，3xSiCH2CH3)，1·188(6Η， s，26-及 27-H3)，2·15-2.35(4Η，br m)，2·43-2·53(3Η，br m)， 2.82(1H，br d，J=12.9 Hz，9β_Η)，4.42(2H，m，1β·及 3a-H)， 4.92及4.97(111及11^，各3，=(：112)，5.84及6.22(11"1及1«^各 d，J=ll_l Hz，7-及6-H) ; MS m/z(相對強度）758(M+，33)， 729(M+-Et，7)，701(M+-t-Bu，5)，626(100)，494(25)，366(52)， 95021.doc -47- 200524619 75(82)，73(69)。 將經保護之維生素14(5.0 mg)溶於苯（160 pL)中且添加曱 醇（900 μΙ〇中之樹脂（AG 50W-X4，70 mg;以甲醇預先洗 條）。將混合物在室溫下於氬氣下揽摔19小時，以乙酸乙西旨 /乙醚（1 : 1，4 mL)稀釋且進行傾析。以乙醚洗滌樹脂（8 mL) 且以鹽水及飽和NaHC〇3洗滌經組合之有機相，將其乾燥 (MgS〇4)及蒸發。將殘餘物藉由HPLC(6.2 mmx25 cm Zorbax-Sil管柱，4 mL/min)使用己烷/2-丙醇（9 : 1)溶劑系統 進行純化。在Rv28 mL下（相同系統中，在Rv29 mL下溶離 (2011)_類似物且在1^521111^下溶離1〇1，25-二經基維生素〇3) 收集呈白色固體之分析上純的2-亞甲基-1 9-降-維生素 15(2.6 mg，95%)白色固體：UV(EtOH中）λ_ 243.5, 252.5, 262.5 nm ; 3HNMR(CDC13)S 0·551(3Η，s，18-Η3)5 0·858(3Η， d，J=6.6 Ηζ，21-Η3)，1·215(6Η，s，26-及 27·Η3)，1·95·2·04(2Η， m)，2·27-2·35(2Η，m)，2.58(1Η，dd，J=13.3，3.0 Ηζ)， 2·80-2.87(2Η，m)，（2H，m，1β_ 及 3α_Η)，5·09 及 5·11(1Η及 1Η，各 s，=CH2)，5·89及 6·36(1Η及 1Η，各 d，J=11.3 Hz， 7-及 6-H) ; MS m/z(相對強度）416(M+，100)，398(26)， 380(13)，366(21)，313(31)。 經2-亞甲基取代之19-降- l，25_(OH)2D3化合物及其20S- 異構體之生物活性 式I之化合物的生物活性在美國專利第5,843,928號中陳 述如下。向19-降-l，25-(OH)2D3或其20S-異構體之2-位引入 亞甲基對結合於豬腸維生素D受體效果極小或沒有效果。所 95021.doc -48- 200524619 有化合物同等良好地結合於豬受體，包括標準 1，25-(ΟΗ)2〇3。由該等結果吾人可預期所有化合物可能具有 相等之生物活性。然而驚人的是，2-亞曱基取代產生主要 作用於骨上之高選擇性類似物。當在慢性模式中給定7天 時，受測之最有效化合物為2_亞甲基_19_降 ⑴耶叫表丨）。當給定13〇皮莫耳/天時，其骨上鈣遷移(血 清鈣）活性比天然激素之活性高大約至少1〇倍且可能高 10(M，0GG倍。在相同條件下，之兩倍劑量在 13〇pmol劑量下得到血清約值13.8mg/i〇〇mi血清詞。當給· 定260皮莫耳/天時，其在骨消耗上產生令人驚言牙的血清躬 值14 mg/100 ml血清鈣。為顯示其選擇性，該化合物在 或者260 pmol劑量下對腸内鈣傳輸未產生任何重大變化， 而在唯一劑量（意即260皮莫耳/天）測試下丨，25_(〇η)2〇3使腸 内鈣傳輸產生預期之上升。2_亞甲基_19•降 在兩個劑量水平下亦具有極強的骨約遷移作用，但亦未顯 不出腸内鈣傳輸活性。該化合物之骨鈣遷移作用活性可能 泰 為1，25-(〇Η)2〇3活性之1(M00倍。該等結果說明19_降_ l，25_(〇H)2D3之2-亞甲基及20S-2-亞甲基衍生物對來自骨 之鈣遷移具有選擇性。表2說明腸内及血清鈣對單獨大劑量 之各種化合物的反應；再次支持源於表丨的結論。 該等結果說明2-亞甲基-19-降對誘發 HL 6 0細胞为化為單核細胞極為有效。2 _亞甲基_ 19 _降化合 物具有同l，25-(〇H)2D3相似之活性。該等結果說明2_亞f基_ 19降-20S-1，25-(〇H)2D3與2·亞甲基]9-降“，仏⑴印办化 95021.doc - 49· 200524619 口物作為抗癌劑（尤其對抗白血病、結腸癌、乳癌及前列腺 癌）或作為治療牛皮癖之藥劑之潛力。 藉由 Dame 等人（Bi〇ChemistlT 25,4523-45 34，1986)描述之 方法來進仃類似物與豬腸内受體之競爭性結合。 由0价⑽等人（J. Biol.Chem. 262， 14164-14171， 1987)所 述測定HL’前髓細胞向單核細胞之分化。 表1 對慢性劑量之 19-降-l，25-(OH)2D3 及 之2-亞甲基衍生物的反應 血清弼 (mg/100 ml) 劑量 腸内鈣傳輸 維生素D缺乏 經 l，25_(〇H)2D3 治療 2-亞曱基-19-降-1，25-(OH)2D3 2-亞曱基-19-降-20S-l，25-(〇H)2D3 (皮莫耳/天/7天） （S/M) 媒劑 260 130 260 130 260 5.5 士 0.2 6·2 士 0.4 5.3 士 0.4 4.9 土 0.6 5.7±0.8 4·6±0·7 5.1±〇.16 7.2 士 0.5 9.9±0.2 9·6 土 0.3 13·8±0·5 14.4±0.6 雄性斷奶大氣係獲自 Sprague Dawley Co.(Indianapolis， Ind.)且餵養〇·47%鈣、0.3%磷維生素D缺乏之飲食1週且接 著餿養含有0.02%鈣、0.3°/。磷之相同飲食額外2週。在最後 一週期間，藉由腹膜内注射對其投與每天0.1 ml 95%丙二醇 及5%乙醇中之指定劑量之化合物7天中。對照動物僅接受 〇·1 ml之95%丙二醇、5%乙醇。最後一劑24小時後，犧牲大 鼠且藉由前述外翻囊（everted sac)技術測定腸内鈣傳輸且 藉由原子吸收光譜法在3110型 Perkin Elmer設備 (Norwalk，Conn.)上測定血清鈣。每組有5只大鼠且該等值 表示為平均值（±)SEM。 95021.doc -50- 200524619 表2 腸内鈣傳輸及血清鈣(骨鈣遷移)活性對慢性劑量之19-降_1，25-(011)203及 其20S異構體之2-亞甲基衍生物的反應 腸内鈣傳輸 血清鈣 (S/M) (mg/100 ml) -D對照組 l，25-(OH)2D3 2_ 亞甲基-19-降-l，25-(OH)2D3 2-亞甲基-19-降-20S-1，25- (〇h)2d3 4.2 ± 0.3 5.8 ±0.3 5.3 ±0.5 5.5 ±0.6 4.7 ±0.1 5.7 ±0.2 6.4 土 0.1 8.0 ±0.1

雄性霍爾茲曼（Holtzman)種斷奶大鼠係獲自Sprague Dawley 公司（Indianapolis，Ind.)且假養 Suda 等人（J. Nutr. 100, 1049-1052,1970)所述0.47%鈣、0.3%磷之飲食1週且接 著餵養含有0.02%鈣及0.3%磷之相同飲食額外2週。就此而 論，其接受溶於〇_1 ml 95%丙二醇/5%乙醇之指示劑量的單 一頸靜脈注射。24小時後，犧牲該等大鼠且如表1所述測定 了腸内妈傳輸及血清#5。該等化合物劑量為650 pmol且每 組5只動物。該等數據表示為平均值（士）SEM。

因此，本發明亦涵蓋下列式la之化合物連同彼等式I之化 合物： 95021.doc -51 - 200524619

在上式la中，丫丨、γ2、r6、r8&Z之定義如前文所述。關 於 Χι、X2、X3、X4、χ5、χ6、X7、X8及 χ9，該等取代基可 為相同或不同且選自氫或低碳數烷基，意即CN5烷基，例如 甲基、乙基或正丙基。另外，成對取代基1及心、或χ5、 X2或X3及X6或X?、X4或Xs及Xs或X9當連同該化合物中心部 分之三個相鄰碳原子（分別對應於位置8、14、13或Μ、I)、 17或13、17、20)-料可相同或不同且形成飽和或不飽 和、經取代或未經取代之3、4、5、6或7員碳環。 本發明之較佳化合物可由下列式中任一式來代表： 95021.doc -52- 200524619

95021.doc -53- 200524619

95021.doc -54- 200524619

95021.doc -55- 200524619

R

在上述式 lb、Ic、Id、Ie、If、lg及比中，Υ!、Y2、r6、 R8、R、Z、X!、X2、X3、X4、χ5、χ6、乂7及 χ8如前文所述。 取代基Q代表飽和或不飽和、經取代或未經取代、包含〇、i、 2、3或4個碳原子之烴鏈，但較佳為_(cH2)k-基團，其中k為 等於2或3之整數。 製造式Ia-Ih化合物之方法為人所知。具體而言，參考丨994 年7月7日申請及1995年1月19日在國際公開案號w〇 95/01960下公開之國際申請案號PCT/EP94/02294。 95021.doc 56- 200524619 流程圖i HOOC^oh MeOOC^^〇|.

MeOOC^^Oh 2個步驟 HO、'OH OH (+奎尼酸 OH 1

RuCIa ， Nal04 八、、 tBuMe2SiO "OSitBuMe2 r〇SitBuMe2 〇 tBuMe2Si< OΑΛ <Nal04 vOSitBuMe2

tBuMe2SiO X)SitBuMe

MePh3P+Br- n-BuLi

MeOOCy^^〇H

LiAIH4

MegSiCHsCOOMe LDA

COOMe

CH2OH

1. n-BuLi, TsCI 2. n-BuLi. Ph〇PH

tBuMe2Si〇NN

OSitBuMe2 CH2POPh2

_PlBALH 3. H2〇2 '、、、、、、、 tBuMe2SiO>

〇SitBuMe2 、\、、、、、 tBuMe2Sj〇NN>

OSitBuMe2

tBuMe2SiONVNS

OSitBuMe2

n-BuLi 95021.doc -57· 200524619 流程ι(續）

95021.doc -58- 200524619

流程圖II

95021.doc -59-

Claims (1)

1. 200524619 十、申請專利範圍： 1. 一種醫藥組合物，包含化合物2-亞甲基·19_降_2〇(s)· 1α，25-二羥基維生素h及芳香酶抑制劑或其醫藥學上可 接受之鹽或前藥。 ' 2. 如請求^之組合物，其中該芳香酶抑制劑係選自胺魯米 特（aminoglutethimide)、福美坦（f〇rmestane)、阿塔美坦 (atamestane)、阿納司唑（anastraz〇le)、法屈唑（fadr〇〇z〇i、e): 芬羅唑（finrozole)、萊曲唑（letroz〇le)、伏羅唑（v〇r〇z〇le)、 4-[N_(4_漠节基）·Ν_(4·氛苯基）胺基-三唾或依 西美坦（exemestene)，或其醫藥學上可接受之鹽。 3. 如請求項2之組合物，其中該芳香酶抑制劑為:西美坦。 4. 一種包含治療有效劑量之2_亞甲基_19_降_2〇(8)_^25_二 羥基維生素A及治療有效劑量之芳香酶抑制劑或其醫藥 學上可接受之鹽或前藥的組合用途，係用以製備用於治 療下列疾病之藥物：老年性疏鬆症、絕經期後骨質 疏鬆症、骨折、移植骨、乳癌、前列腺癌、肥胖症、骨 質減少、男性骨質疏鬆症、虛弱、肌肉損傷或肌肉貧乏 症。 5. 如請求項4之用途，其中經口投與2_亞甲基_19•降_2〇⑻-1α，25-二羥基維生素A及芳香酶抑制劑。 6. 如請求項4之用途，其中非經腸投與2_亞甲基尊降_ 2〇(S)-la，25-二羥基維生素A及芳香酶抑制劑。 7·如請求項4之用途，其中經皮投與2_亞甲基·19_降_2〇(外 1 α,25 -一經基維生素ds及芳香酶抑制劑。 95021.doc 200524619 8. 9· 10. 11. 12. 13. 如請求項4之用途，其中實質上同 零㈣·⑽㈣D甲基答降- 如睛求項4之用途，係用以治療乳癌。 如請求項4之用途，其中該芳香 ^ %抑制劑係選自胺魯半 特、褐美坦、阿塔美坦、阿納司唑、 八 ^ . , /ί:屈σ坐、芬羅唑、 來曲唾、伏羅嗤、4-[Ν·(4_漠节基）*(4_羅 ^惠丨从三钱依西美坦，或其醫藥學上可接土受: 如請求項A之用途，其中該芳香酶抑制劑為依西美妇 如請求項11之用途，係用以治療乳癌。 、一 一種包含治療有效劑量之2_亞甲基_19秦2G⑻] 羥基維生素D3及治療有效劑量之依 ’ _一 夕 w秀坦的組合用诠， 係用以製備用於治療乳癌之藥物。 & 95021.doc 200524619 七、指定代表圖： (一) 本案指定代表圖為：（無） (二) 本代表圖之元件符號簡單說明: 八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式：

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