TW200524617A - Pharmaceutical compositions and methods comprising combinations of 2-alkylidene-19-nor-vitamin D derivatives and a bisphosphonate - Google Patents

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200524617 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於醫藥組合物及包含對需要其之患者投與2 亞烷基-1 9-降-維生素D衍生物與雙膦酸鹽之組合的治療方 法。詳言之，本發明係關於醫藥組合物及包含對需要其之 患者投與治療有效劑量之2-亞甲基-19-降-20(S)-1 α，25-二 羥基維生素D3及雙膦酸鹽的治療方法。 【先前技術】 維生素D為一組類固醇分子之通稱。藉由在人體中將 脫氫膽固醇轉變為維生素(膽鈣化醇）來生物合成出稱為 1，25-一羥基維生素D3(l，25-二羥基膽鈣化醇）的活性形式之 維生素D。該轉變發生在皮膚中且需要通常源自陽光之紫 外賴射。維生素Da隨後在肝臟中代謝為25_羥基維生素 D3(25-羥基膽鈣化醇），其接著在腎臟中進一步代謝為活性 形式之維生素D，即1，25-二羥基維生素r>3。丨’25-二羥基維 生素D3隨後分佈至全身，在身體中其與細胞内維生素d受 體結合。 5亥活性形式之維生素D為一種已知涉及無機代謝作用及 骨絡生長且促進腸内鈣吸收之激素。 維生素D類似物揭示於1998年12月i曰頒予之美國專利第 5,843,928號中。所揭示之化合物為2_亞烧基_19降-維生素 -D何生物且其特徵為與丨，25_二羥基維生素相比具有低腸 ^ 内4弓傳輸活性及高骨骼鈣遷移活性。 本發明提供使用2-亞烷基_19_降_維生素D衍生物、且尤 95020.doc 200524617 其為化合物2-亞甲基-19 -降-20(S)-la，25-二經基維生素 〇3(亦稱為2MD)與雙膦酸鹽之組合的治療方法。本發明亦 提供包含2-亞烷基-19-降-維生素D衍生物、且尤其為化合 物2-亞甲基-19-降-20(S)-1 α，25-二羥基維生素D3(亦稱為 2MD)及雙膦酸鹽之醫藥組合物。 【發明内容】 本發明提供包含化合物2-亞甲基·19-降-20(S)-1 α，25_二 經基維生素D3及雙膦酸鹽之醫藥組合物。本發明之特定實 施例為包含化合物2-亞甲基-19-降-20(S)-1 α，25-二經基維 生素D3及雙膦酸鹽之醫藥組合物，其中該雙膦酸鹽係選自 替魯膦酸鹽（tiludronate)、阿侖膦酸鹽（alendr〇nate)、唑來 膦酸鹽（zoledronate)、伊班膦酸鹽（ibandr〇nate)、利塞膦酸 鹽（dsedronate)、依替膦酸鹽（etidronate)、氯屈膦酸鹽 (clodronate)或帕米膦酸鹽（pamidr〇nate)。更特定言之，本 發明提供包含化合物2-亞甲基-19-降_20(S)-1 α ,25-二羥基 維生素D3及阿侖膦酸鹽或利塞膦酸鹽之醫藥組合物。本發

素Da及雙膦酸鹽為經口投藥。 (S)-la，25-二羥基維生素D3及治療有效 該治療方法之特定實施例為緊接上文所 亞曱基-19-降_20(S)_i a，25_二羥基維生 經口投藥。本發明之另一實施例為上述 95020.doc 200524617 治療方法，其中2-亞曱基-19-降-20(S)-la，25-二羥基維生 素為非經腸投藥或經皮投藥。本發明之其它實施例為該 等治療方法，其中該雙膦酸鹽係選自替魯膦酸鹽、阿侖膦 酸鹽、唑來膦酸鹽、伊班膦酸鹽、利塞膦酸鹽、依替膦酸 鹽、氣屈膦酸鹽或帕米膦酸鹽。本發明之特殊實施例為該 等治療方法，其中雙膦酸鹽為阿侖膦酸鹽或利塞膦酸鹽。 【實施方式】 本發明係關於使用2 -亞烧基-19 -降-維生素d衍生物鱼雙 膦酸鹽之組合治療下列疾病且用於增加青春期高峰骨質量 及治療及預防第二次髖關節骨折之醫藥組合物及方法··新 陳代謝性骨病、老年性骨質疏鬆症、絕經期後骨質疏鬆 症、類固醇誘發之骨質疏鬆、低骨轉換骨質疏鬆症、骨軟 化症、腎性骨質營養不良、牛皮癖、多發性硬化、糖尿 病、宿主抗移植物排斥反應、移植排斥、類風濕性關節 炎、哮喘、骨折、移植骨、痤瘡、脫髮症、乾皮病、皮膚 緊實性不足、皮脂分泌不足、皺紋、高血壓、白血病、結 腸癌、乳癌、前列腺癌、肥胖症、骨質減少、男性骨質疏 鬆症、性腺機能減退、男性更年期（andr〇pause)、虛弱、 肌肉損傷、肌肉貧乏症、骨肉瘤、低血鈣性手足抽搐、甲 狀旁腺機能減退、軟骨病、維生素D缺乏、厭食症、過度 運動行為（aggressive athletic behavior)導致之低骨質量。 在一較佳實施例中，本發明係關於使用亞烷基_19_降_ 維生素D衍生物與雙膦酸鹽之組合治療下列疾病且用於增 加青春期高峰骨質量及治療及預防第二次髖關節骨折的方 95020.doc 200524617 症、糖尿病、宿主抗移植物排斥反應、移植排斥、類風渴 性關節炎、哮喘、骨折、移植骨、痤瘡、脫髮症、'乾2 病、皮膚緊實性不足、皮脂分泌不足、皺紋、高血壓、白 法：新陳代謝性骨病、老年性骨質疏鬆症、絕經期後骨質 疏鬆症、類固醇誘發之骨質疏鬆症、低骨骼轉換骨質：二 症、骨軟化、腎性骨質營養不良、牛皮癬、多發性：： 血病、結腸癌、乳癌、前列腺癌、肥胖症、骨質減少、男 ，骨質疏鬆症、性腺機能減退、男性更年期、虛弱、肌肉 損傷、肌肉貧乏症、骨肉瘤、低血鈣性手足抽搐、甲狀旁 腺機能減退、軟骨病、維生素D缺乏、厭食症、過度運^ 行為導致之低骨質量。 在一較佳實施财’使用賴合之治療方法為治療老年 性骨質疏鬆症、絕經期後骨質疏鬆症、骨折、移植骨、乳 癌、月'J列腺癌、肥胖症、骨質減少、男性骨質疏鬆症、虛 弱、肌肉損傷及肌肉貧乏症。 骨質減少為骨骼變細薄，但程度小於骨質疏鬆症中所觀 察到的且其為真正之骨質疏鬆症前之階段。世界衛生組織 (Wyld Health Organization)已基於量密度（BMD)研究 出珍斷種類以顯示一個人是否具有正常骨骼、t質減少或 骨質疏鬆。正常骨密度在青年成人平均骨密度之丨標準偏 差以内（+1或-1)。骨質減少（低骨質量）定義為低於青年成 /平、句月始度1至2.5標準差（-1至_2·5)之骨密度，且骨質疏 氣疋義為低於青年成人平均骨密度值25標準差及更多之 骨密度（>-2.5)。 95020.doc 200524617 性腺機能減退一般定義為性腺功能不足，其表現為配子 發生及/或性腺激素分泌不足，其可導致青春期延遲及/或 生殖力不足。有三種主要類型之性腺機能減退·· 1}原發性 腺機能減退；2)繼發性腺機能減退及3)抗藥性性腺機能減 退。在原發性腺機能減退中，對萊迪希氏細胞（Leydig cell)之損傷會削弱雄性激素生成。在繼發性腺機能減退 中，下丘腦或垂體病症會削弱促性腺激素分泌，且在抗藥 性性腺機能減退中，對雄性激素之身體反應不足。 軟骨病為涉及骨骼軟化及弱化之兒童期病症，其最初由 缺乏維生素D、鈣及/或磷酸鹽引起。 厭食症為具有下列特徵之疾病：拒絕使體重保持在適於 年齡及身高之最低正常重量或其上（例如重量減輕導致使 體重保持在低於預期重量之85% •，或不能在生長期間獲得 預期之增重，導致體重低於預期體重之85%);即使重量不 足也強烈恐懼增重或變胖；及所經歷某人之體重或體形之 紊亂，自我評價對體重或體形之不當影響，或拒絕承認目 刖體重低之嚴重性。本發明之化合物及組合可用於治療厭 食症且可用於治療與厭食症相關之骨質損失。 另可使用本發明之化合物及組合來治療之病症為特別 是對於女性與過度運動行為相關之骨骼損失。過度參與鍛 煉、運動或體育可導致骨質損失，其在女性中通常伴隨閉 經。亦顯示過度運動行為之男性亦體現出骨質損失。 男丨生更年期（亦稱為男性絕經期（male men〇pause)或男性 絕精期（viropause))為男性中之自然事件，通常發生於仙與 95020.doc 200524617 55歲年齡之間。男性更年期為激素睾酮（h〇rm〇ne 罝下降。當睾酮水平下降，且男性進入男 性更年期，可觀測到各種變化或病症，包括精力及體力減 退、身體脂肪增加、骨質疏鬆症、抑鬱症、精神靈敏度下 降、不能保持肌肉、心血管病、動脈粥樣硬化、性慾減 退、性鬲潮強度減退、勃起功能障礙、應激性增加、及尤 其為手及腳上之關節疼痛與關節強硬直。另外，正遭受或 已遭受男性更年期之男性可患有男性乳房發育、血脂病， 其包括高膽11醇血症、脈管反應性降低、性腺機能減退及 良性前列腺肥大。 虛弱之特徵為骨骼肌質量之進行性及持續性損失，其導 致高風險的摔傷、難以自疾病康復、住院期延長及日常生 活長期不能自理需要幫助。肌肉質量、體力及體能降低通 常導致生活質量下降、獨立性喪失及死亡。虛弱一般與老 化相關，但當由於其它因子造成肌肉損失及強度降低時亦 可導致虛弱，該等因子例如疾病誘發之惡病質、不能動彈 或藥物誘發之肌肉貧乏症。另一用來表示虛弱之術語為肌 肉貧乏症，其為用於骨骼肌質量或品質損失之通稱。有助 於骨骼肌總體品質之骨骼肌特性的實例包括：收縮性、纖 維尺寸及類型、易疲勞性、激素反應性、葡萄糖攝入/代 謝作用、及毛細管密度。肌肉品質損失甚至在無肌肉質量 損失下可導致體力損失及削弱體能。 本文所用術語’’肌肉損傷’’為對任何肌肉組織之損傷。肌 肉損傷起因於由事故、運動傷害、内分泌失調、疾病、創 95020.doc -10- 200524617 傷或手術過程所引起的對肌肉組織之物理外傷。本發明之 方法適用於藉由促進肌肉損傷修復來治療肌肉損傷。 老齡女性之骨質疏鬆症係藉由青春期通向成年期中所獲 高峰骨質量之量、絕經前該高峰骨質量之保持及絕經後骨 質篁損失速率來確定。高峰骨質量之決定性因子包括··遺 傳、營養、負重（鍛煉）及環境因子。因此希望增加青春期 高峰骨質量以便最大化骨骼質量以預防生命後期中發展骨 貝疏鬆症。同樣，亦希望增加男性之青春期高峰骨質量。 髖關節骨折對醫療資源及患者發病率及死亡率具有重大 衫響。很少考慮對受過髖關節骨折之患者進行針對減少此 後骨折風險之預防性措施。目前，1〇_13%之患者會隨後經 党第二次體關節骨折。遭受第二次髖關節骨折之患者在第 二次骨折後與第一次相比更少有患者保持其獨立行走之能 力（分別為53及91%，Ρ<0·_5)。E 〇等人，叫㈣ 2〇〇3, 34(7)，518_521。隨第二次體關節骨折之後，患者移 動，力水平決定其未來社會獨立性。老年患者及具有多次 f落歷史之患者骨折間具有更短之間隔時間。第二次競關 即骨折對患者移動能力及社會獨立性具有顯著之進一步影 響。因此希望用於預防二次競部骨折之新方法。 月肉瘤為-種相對晋通、高惡性之原發性骨瘤，其具有 轉和至肺部之趨向。儘管骨肉瘤可發生在任何年齡，但其 ㈣至20歲人群中最常見。大約所有骨肉瘤中之半數位ς 2區域但可在任何骨中發現。疼痛及腫塊（mass)為骨肉 瘤常見症狀。通常骨肉瘤之療法為與手術組合之化學療 95020.doc 200524617 t二:吏用-以試劑(例如甲胺嗓吟、阿黴素、順氯胺始或 兵 $仃之手術耵或手術後任-者之化學療法來治療 骨肉瘤。 :狀旁腺機能減退有低血難之傾向，其通常與激素缺 * =之慢性手足抽搐有關，其特徵為低血_及高血清 & 3里°、f狀旁腺機能減退通常接在甲狀腺切除術期間意 外移除或損壞某些"犬旁腺之後發生。暫時性甲狀旁腺機 :減退通常隨亞全甲狀腺切除術之後且在小於3%的熟練 完成之甲狀腺切除術中永久性發生。 低血鈣性手足抽搐為產生自低血鈣症之手足抽搐形式。 低血鈣症之特徵為：總血漿鈣濃度在正常企漿蛋白質存在 下降低至8·8 mg/dL(毫克/分升）以下。手足抽搐可以自發 症狀外顯或可為潛在的。當抽搐外顯時特徵為：感覺症 狀’例如嘴唇、舌頭、手指及足部感覺異常；手足痙攣， 其可長期持續且有疼痛性；全身性肌肉痛；及面部肌肉組 、我痙f： I在抽搐需要激發測試來顯現且一般出現在血裝 鈣濃度降低不太嚴重（例如7至8 mg/dL)時。低血鈣性手足 抽搐亦在動物之獸醫實踐中觀察到。例如，馬之低血鈣性 手足抽搐為與血清離子鈣之急性損耗相關且有時與鎂及磷 酸鹽之血清濃度變化相關之罕見病症。該病症發生在長期 身體透支或運輸（運輸性抽搐）後且發生在哺乳母馬（泌乳性 抽搐（lactation tetany))中。病徵多變且與神經肌肉應激性 亢進相關。 本發明亦係關於用於治療以下疾病且用於提高青春期顛 95020.doc -12- 200524617 峰骨質量及預防二次髖部骨折之醫藥組合物：老年性骨質 疏鬆症、絕經期後骨質疏鬆症、類固醇誘發之骨質疏鬆 症、低骨轉換骨質疏鬆症、骨軟化症、腎性骨質營養不 良、牛皮癖、多發性硬化症、糖尿病、宿主抗移植物排斥 反應、移植排斥、類風濕性關節炎、哮喘、骨折、移植 骨、痤瘡、脫髮症、乾皮病、皮膚緊實性不足、皮脂分泌 不足、皺紋、高血壓、白血病、結腸癌、乳癌、前列腺 癌、肥胖症、骨質減少、男性骨質疏鬆症、性腺機能減 退、男性更年期、虛弱、肌肉損傷、肌肉貧乏症、骨肉 瘤低血約丨生手足抽搐、甲狀旁腺機能減退、軟骨病、維 生素D缺乏、厭食症、過度運動行為導致之低骨質量，該 等醫樂組合物包含2-亞烷基-19-降-維生素D衍生物（例如式 I之化合物）與雙膦酸鹽及載劑、溶劑、稀釋劑及其類似 物。 在一實施例中，本發明之組合包含治療有效劑量之第一 化δ物’該第一化合物為2_亞烧基_ 19-降-維生素d衍生 物’例如式I之化合物；及治療有效劑量之第二化合物， 該第二化合物為雙膦酸鹽。 一種特定較佳之組合為2-亞甲基-19-降-20(S)-1 α，25_二 Μ基維生素〇3與雙膦酸鹽之組合。 可用於本發明之2-亞烷基-19-降-維生素D衍生物在美國 專利第5,843,928號中揭示，該等衍生物特徵為如下之通式 95020.doc -13- 200524617

其中\及丫2可相同或不同，其各選自氫及羥基保護基所 組成之群；R0及Rs可相同或不同，其各選自由氫、烷基、鲁 經烧基及氟烧基所組成之群，或缺心連在一起時代表基 團（CH2)x-，其中X為2至5之整數；且其中基團尺代表維生 素D型化合物所已知之任何典型側鏈。 寺疋ϋ之R可代表1至3 5個碳原子的飽和或不飽和烴 基，其可為直鏈、支鏈或環狀且其可含有一或多個額外取 代基，例如羥基或經保護之羥基、氟基、羰基、酯基、環 氧基、胺基或其它雜原子基。該類型之較佳側鏈由如下結 構所代表： 其中邊立體化學中心（在類固醇編號中對應於C-20)可具 有R或S構型（意即關於碳2〇之自然構型或2〇_表構型）且其 中 2係 4 自 Y、-〇Y、-CH2〇Y、-Ce CY及-CH=CHY，其中 4雙鍵可具有順式或反式幾何結構，且其中γ係選自氮、 甲基、-COR5及下述結構之基團： 95020.doc •14· 200524617 R; R2

R3 (CH2)^ C' (CH2)rt- C R5

其中m及n獨立代表〇至5之整數，其中…係選自氫、氘、 羥基、經保護之羥基、氟基、三氟甲基及Cii烷基，該Cm 烷基可為直鏈或支鏈且視情況帶有羥基或經保護羥基取代 基，且其中R2、R3及R4每一者係獨立選自氘、氘代烷基、 氫、氟基、二氟甲基及Cw烷基，該c1-5烷基可為直鏈或支 鏈且視情況帶有羥基或經保護羥基取代基，且其中…及R2 連在一起代表氧基或亞烷基、=CR2R34_(CH2)p_(其中0為2 至5之整數），且其中R3&R4連在一起代表氧基、或基團_ (CH2)q-(其中q為2至5之整數），且其中r5代表氫、羥基、 經保濩之經基或CNS烧基且其中側鍵中2〇、22或23位置之 任何CH基可由氮原子置換，或其中分別在2〇、^及^位 置之基團-CH(CH3)-、-卿的-或/玛的-中任一者可由氧 或硫原子置換。 位於C-20之甲基取代基的波狀線表明碳2〇可具有尺或^構 籲 型之任一者。 具有自然20R構型之侧鏈的特別重要實例為由下式0)、 (b)、（c)、（d)及（e)代表之結構，意即存在於下列物質中之 側鏈·· 25-經基維生素D3⑷；維生素D3(b) ; 25_經基維生素 DKc);維生素D2(d);及25-羥基維生素％之c_24差向里 體（e); " (a) 95020.doc -15- 200524617

\〇H ⑻

(C)

\〇H (d)

(e)

\〇H 本文所用術語’’羥基保護基’’表示任何通常用於臨時保護 羥基官能性之基團，例如烷氧羰基、醯基、烷基甲矽烷基 或烷芳基甲矽烷基（下文簡稱為’’甲矽烷基’’）及烷氧基烷 95020.doc -16- 200524617 基。烷氧羰基保護基為烷基-〇-CO_群組，例如甲氧幾基、 乙氧羰基、丙氧羰基、異丙氧羰基、丁氧羰基、異丁氧羰 基、第三丁氧羰基、苄氧羰基或烯丙氧羰基。術語，，醯基，， 表示所有異構形式之1至6個碳原子之烷醯基，或1至6個碳 原子之羧烷醯基，例如乙二醯基、丙二醯基、丁二醯基或 戊二酸基，或芳醯基，例如苯甲醯基或經鹵基、硝基或烷 基取代之苯甲醯基。術語”烷基”，除非本文另有規定，否 則表明所有異構形式之1至丨〇個碳原子的直鏈或支鏈烷 基。烧氧基燒基保護基為例如下列基團之群組··甲氧基甲 基、乙氧基甲基、甲氧基乙氧基甲基或四氫呋喃基及四氫 派喃基。較佳之甲矽烷基保護基為三甲基甲矽烷基、三乙 基甲矽烷基、第三丁基二甲基甲矽烷基、二丁基甲基甲矽 燒基、二苯基甲基甲矽烷基、苯基二甲基甲矽烷基、二苯 基第二丁基甲石夕烧基及類似之烧基化甲石夕院基。術語，，芳 基”，除非本文另有規定，否則規定為苯基或任何經烷 基、硝基或ii基取代之苯基。 經保護—基”係由任何上述通常用於臨時性或永久性保 遵每基官能性之基團（例如前文定義之曱石夕烧基、统氧基 烧基、酿基或烷氧羰基）所衍生或保護之羥基。術語”羥烷 基' 氣代烧基"及’’氟烧基"係指任何分別經一或多個經 基、氘或氟基取代之烷基。 應注意在本說明書中術語”24-高”係指在側鏈中碳24位置 處加成一個亞甲基且術語”24-二高”係指在該位置加成兩個 亞曱基。同樣，術語，，三高”係指加成三個亞曱基。亦及術 95020.doc -17- 200524617

及27位置加成乙基以使得R3&R4為丙基。 語，，26,27- 如）R3及R4 在下列化合物列表中’連接至碳2位置之特定亞烧基取 代基應當添加入命名中。例如’若亞甲基為該亞院基取代 基，術語"2-亞甲基，，應位於各命名化合物之前。若乙基為 :亞烷基取代基，術語"2_伸乙基"應位於各化合物之前， 等等。另外，若連接至碳20位置之甲基為其表構型或非自 然構型，術語"2〇⑻"或"2〇_表"應包括在下列命名化合物· 之每者中。必要時該等命名化合物亦可為維生素仏型。 當側鏈不飽和時，結構〗之2-亞烷基化合物之特定及較 佳實例為： I、降高-1,25-二羥基-22-脫氫維生素D3 ; I、降_24_二高_1，25_二羥基-22•脫氫維生素D3 ; I、降_2‘三高-1，25-二羥基-22-脫氫維生素D3 ; 牛26,27_二甲基-24-高-1，25-二羥基J2-脫氫維生素 血

19-降-26,27-二 乙基-24-二高-1，25_二羥基-22-脫氫維生 95020.doc -18- 200524617 素d3 ; 19-降-26,27-二乙基-24-三高-1，25-二羥基_22_脫氫維生 素d3 ; 19-降-26,27-二丙基-24-高-1，25-二羥基-22-脫氫維生素 D3 ; 19-降_26,27_二丙基-24-二高-1，25_二經基·22_脫氫維生 素D3 ;及 19-降-26,27-二丙基-24-二南-1，25_二羥基_22_脫氫維生 素D3 〇 當側鏈飽和時，結構I之2·亞烧基化合物之特定及_ <土 實施例為： 19-降-24-高-1，25-二羥基維生素D3 ; 19-降-24-二高·1，25-二羥基維生素D3 ; 19-降-24-三高-1，25-二羥基維生素d3 ; 19 -降- 26,26-二甲基-24-南-1，25-二經基維生素d3 · 19-降-26,27-一甲基-24-二高- l，25-二經基維生素; 19-降-26,27-二甲基-24_三高_1，25_二羥基維生素D3 ; 19-降-26,27-二乙基-24-高·1，25_二羥基維生素j)3 ; 19-降-26,27-一乙基-24-二高- i，25-二羥基維生素〇3 ; 19-降-26,27-二乙基_24_三高二羥基維生素A ; 19-降-26,27-二丙基_24_高二羥基維生素a ; 19-降-26,27-二丙基·24-二高-二羥基維生素;及 19-降-26,27-二丙基_24·三高_丨，25_二羥基維生素a。 多膦酸鹽（包括雙膦酸鹽）在本發明之組合及方法中用作 95020.doc -19- 200524617 第二化合示範性多膦酸鹽包括美國專利第Μα 〇咐 中所揭示類型之多膦酸鹽。較佳之多膦酸鹽為成對雙㈣ 鹽（本文稱作雙膦酸鹽）。較佳之雙膦酸鹽為通式Α之雙鱗 〇

其中 R4為Η、OH或C1 ;且 R5為 (a) 具有1至6個碳原子之烷基，其視情況經胺基、烷胺 基、二烷基胺基或雜環基取代； (b) 鹵素； (c) 方硫基，其較佳經氣取代； (d) 具有5至7個碳原子之環烧基胺基；或 (e) 飽和五員或六員含氮雜環基’其具有—或兩個雜原 子； 或其醫藥學上可接受之鹽或前藥。 在式A中R5之定義内的”烷胺基，，及，，二烷基胺基，，中”燒基 可具有1至5個碳原子且可獨立地在二烷基胺基中選擇。 式A中R5中之術語，’雜環基”意謂具有一或兩個環及i至3個 雜原子之飽和或不飽和5至7員雜環基，其獨立選自N、〇 及S。R5定義中之術語”芳硫基”中術語，，芳基，，意謂經取代或 95020.doc -20· 200524617 未^^取代之笨基、吱喃基、°塞吩基或σ比唆基，或任何該等 基團之稠合環系統，例如萘基。當經取代時，R5中之芳基 經一或多個烷基、烷氧基、鹵素、胺基、硫醇、硝基、羥 基、醯基、芳基或氰基所取代。 式Α之化合物包括·· 4-胺基-1-羥基亞丁基·丨上雙膦酸鹽（阿侖膦酸鹽、（3-胺基-1-羥基亞丙基）-雙膦酸鹽（帕米膦酸鹽）、[2-(2-吡啶 基）亞乙基]-雙膦酸鹽（匹利膦酸鹽）、（二氯亞甲基）雙膦酸 (氣膦酸）及其二鈉鹽（氣屈膦酸鹽）、N，N_二甲基_3_胺基 經基亞丙基- i，i -雙膦酸鹽（米爾膦酸鹽（mii(ironate)、奥帕 膦酸鹽（olpadronate))、1-羥基-3-(N-甲基-N-戊胺基）亞丙 基-1，1-雙膦酸鹽（伊班膦酸鹽）、1-羥基-2-(3-吡啶基）伸乙 基-1，1-雙膦酸鹽（利塞膦酸鹽）、1-羥基亞乙基_1，；μ雙膦酸 鹽（依替膦酸鹽）、1-經基-3- (1-。比嘻。定基）亞丙基- ΐ，ι_雙膦 酸鹽（ΕΒ-1053)、1-經基- 2-(1-味σ坐基）亞乙基_ι，ι_雙膦酸鹽 (唾來鱗酸鹽）、1-經基-2-(味唾幷[1，2*^]11比咬-3-基）乙基-1，1_雙膦酸鹽（米諾膦酸鹽（minodronate))、1-(4•氣苯硫基） 次甲基-1，1-雙膦酸鹽（替魯膦酸鹽）、(環庚基胺基）次甲 基-1，卜雙膦酸鹽（司馬膦酸鹽（cimadronate)、因卡膦酸趟 (incadronate))、6_胺基-1_羥基亞己基-雙膦酸鹽（内利 膦酸鹽（neridronate))。 術語雙膦酸鹽意謂雙膦酸形式之化合物及其醫藥學上可 接受之鹽。例如，本文所用術語阿侖膦酸鹽涵蓋阿命鱗酸 (游離酸形式）連同其醫藥學上可接受之鹽，例如阿侖鱗酸 95020.doc •21- 200524617 鈉。同樣，術語利塞膦酸鹽意謂利塞膦酸及其醫藥學上可 接受之鹽，例如利塞膦酸納。該等化合物之可水解酷形式 亦包括在如本文所用雙膦酸定義中。 替魯膦酸一鈉為尤其較佳之雙膦酸鹽。伊班膦酸鹽為尤 其較佳之雙膦酸鹽。阿侖膦酸鹽為尤其較佳之雙膦酸鹽。 吐來私酸鹽為尤其較佳之雙麟酸鹽。其它較佳之雙膦酸鹽 為6-胺基-1-經基-亞己基-雙膦酸鹽及經基_3(甲基戊基胺 基）_亞丙基-雙膦酸鹽。包括雙膦酸鹽之多膦酸鹽可以酸或 可溶性鹼金屬鹽或驗土金屬鹽形式投與。同樣包括多膦酸 鹽之水解性酯。特殊實施例包括··乙烷-；μ羥基丨，^雙膦 酸、甲烷雙膦酸、戊烷-1-羥基-lj-雙膦酸、甲烷二氣雙 膦酸、甲烷羥基雙膦酸、乙烷胺基-丨，^雙膦酸、乙烷· 2-胺基-1，1-雙膦酸、丙烧-3-胺基-1-經基-ΐ，ι_雙膦酸、丙 烧-N，N-二甲基-3-胺基-1-羥基-1，1-雙膦酸、丙烧·3,3-二甲 基-3-胺基-1-羥基-ΐ，ΐ-雙膦酸、笨基胺基甲烷雙膦酸、 Ν，Ν-二甲基胺基甲烷雙膦酸、ν(2-羥乙基）胺基甲烷雙膦 酸、丁烧-4-胺基-1-經基- ΐ，ΐ-雙膦酸、戊烧胺基-1-經 基-1，1-雙膦酸、己烷-6-胺基-1-羥基-ΐ，ΐ-雙膦酸及其醫藥 學上可接受之酯及鹽。 用於本發明之組合物及方法之尤其較佳雙膦酸鹽包括： 替魯膦酸、唑來膦酸、伊班膦酸、利塞膦酸、依替膦酸、 氣屈膦酸、及帕米膦酸及其醫藥學上可接受之鹽或前藥或 前藥之鹽。 本發明之組合物及方法中所採用的雙膦酸鹽在此項技術 95020.doc -22- 200524617 中已知且描述於文獻中。替魯膦酸、相關化合物及其鹽已 在美國專利第4，134,969號、第4,578,376號、第4,621，〇77 號、第 4,876,248號、第 4,980，171號、第 5,405,994號及第 5,656,288號中進行描述。美國專利第5,405,994號揭示替魯 膦酸二鈉半水合物及替魯膦酸二鈉單水合物。美國專利第 5,656,288號揭示替魯膦酸二鈉四水合物。阿侖膦酸鹽（其 單鈉鹽三水合物形式銷售商標為Fosamax®)描述於美國專 利第 4,621，077 號、第 4,922,007 號、第 5,019,651 號、第 5,510,517號及第5,648,491號中。例如，阿侖膦酸鹽（為雙 膦酸形式）可根據美國專利第4,621，077號中所述來製備， 其程序複製如下。將1莫耳4-胺基丁酸、1_5莫耳亞磷酸及 500 cc無水氯苯之混合物加熱至l〇〇°c。在猛烈攪拌下於該 溫度下添加1.5莫耳量之三氣化磷。在loot：下攪拌該混合 物3個半小時直至完全形成緻密相（dense phase)且接著使其 冷卻。將固體過濾、以小量氯苯洗滌且溶於水中。將溶液 加熱至沸點歷時1小時，隨後將其冷卻且以活性炭脫色。 將該物質過濾且以過量熱曱醇沉澱產物。將如此獲得之原 料在20%鹽酸中回流加熱八小時。藉由蒸镏移除鹽酸且將 殘餘物自水中再結晶。產物為白色結晶粉末形式之4-胺基-1-羥基丁烷-1，1-雙膦酸。 唾來膦酸鹽（其游離酸單水合物形式銷售商標為 Zometa,已描述於美國專利第4,939，130號中。伊班膦酸鹽 描述於美國專利第4,927,814號中。匹利膦酸鹽描述於美國 專利第4,761，406號中。氣屈膦酸鹽描述於比利時專利第 95020.doc •23- 200524617 672,205號（1966)及 J· Org· Chem· 1967, 32, 4111 中。因卡膦 酸鹽揭示於美國專利第4,970,335號中。利塞膦酸鹽（其單 鈉鹽半五水合物（2.5 HW)形式銷售商標為Actonel®)描述於 美國專利第 5,583，122 號、第 5,994,329 號、第 6,015,801 號、第6,096,342號及第6，165,513號中。例如可根據下列程 序製備利塞膦酸鹽，該程序闡述於美國專利第5,583，122號 中之實例3。合成2-(2-吡啶基）-1-羥基-乙烷-ij-雙膦酸。 向配備有回流冷凝器及磁性攪拌棒之3頸圓底燒瓶注入 6.94克（0.04莫耳）2-吡啶乙酸、9.84克（0.14莫耳）磷酸及15〇 nil氣本。將该反應混合物在彿水浴上加熱，且逐滴添加 16.5克（0· 12莫耳）三氣化磷同時進行授拌。將反應混合物 加熱2個半小日守’其間形成黏性黃色油。隨後在冰浴中冷 卻反應混合物且自凝固產物傾析出氣苯溶液。向含有該固 化產物之反應燒瓶饋入150 ml水且在沸水浴中加熱若干小 時。隨後將熱溶液經Celite 545®過濾（石夕藻土，

Mallinckrodt Baker，Inc·，Phillipsburg，NJ)。將 300 ml 甲醇 添加至溫濾出溶液中，且顯現出沉澱物。在冰中冷卻丄小 時後，濾出沉澱物且揍著將其以曱醇/水（1/1體積/體積）、 曱醇及乙醚洗滌，且進行空氣乾燥。該產物可自熱水再結 晶。產量大約為5.9克（52%)。該樣品由p_31&c_i3 nmr進 行表徵。 本發明亦係關於用於治療以 峰骨質量及預防第二次髖關節 謝性骨病、老年性骨質疏鬆症 下疾病且用於增加青春期高 骨折之醫藥组合物··新陳代 、絕經期後骨質疏鬆症、類 95020.doc -24- 200524617 固醇誘發之骨質疏鬆症、低骨轉換骨質疏鬆症、骨軟化 症、腎性骨質營養不良、牛皮癬、多發性硬化症、糖尿 病、宿主抗移植物排斥反應、移植排斥、類風濕性關節 炎、哮喘、骨折、移植骨、痤瘡、脫髮症、乾皮病、皮膚 緊實性不足、皮脂分泌不足、皺紋、高血壓、白血病、結 腸癌、乳癌、前列腺癌、肥胖症、骨質減少、男性骨質疏 鬆症、性腺機能減退、男性更年期:、虛弱、肌肉損傷、肌 肉貝乏症、骨肉瘤、低血鈣性手足抽搐、甲狀旁腺機能減 退、軟骨病、維生素D缺乏、厭食症、過度運動行為導致 之低骨質量，該提南或預防方法包含對需要其之患者投與 2-亞烷基-19-降-維生素D衍生物（例如式〗之化合物）與雙膦 酸鹽及載劑、溶劑、稀釋劑及其類似物之組合。 應注意當本文中討論化合物時，其涵蓋可對患者投與作 為醫藥學上可接受之鹽、前藥或前藥之鹽的化合物。所有 該等變體意欲包括在本發明中。 術語”需要其之患者”意謂患有下列疾病或具有患病風險 且需要增加青春期高峰骨質量及預防第二次髖關節骨折之 人類及其它動物：新陳代謝性骨病、老年性骨質疏鬆症、 絕經期後骨質疏鬆症、類固醇誘發之骨質疏鬆症、低骨轉 換骨質疏鬆症、骨軟化症、腎性骨質營養不良、牛皮癖、 多發性硬化症、糖尿病、宿主抗移植物排斥反應、移植排 斥、類風濕性關節炎、哮喘、骨折、移植骨、痤瘡、脫髮 症、乾皮病、皮膚緊實性不足、皮脂分泌不足、皺紋、高 血壓、白血病、結腸癌、乳癌、前列腺癌、肥胖症、骨質 95020.doc •25- 200524617 減少、男性骨質疏鬆症、性腺機能減退、男性更年期、虛 弱、肌肉損傷、肌肉貧乏症、骨肉瘤、低血4弓性抽搐、甲 狀旁腺機能減退、軟骨病、維生素D缺乏、厭食症、過度 運動行為導致之低骨質量。 本文所用術語”治療’f包括預防性（preventative)(例如防止 性（prophylactic))、緩和性及治療性治療。 ”醫藥學上可接受的”意謂載劑、稀釋劑、賦形劑，及/或 鹽或前藥須同該調配物之其它成分相容且對患者無害。 術語”前藥π意謂在活體内經轉化得到本發明之化合物的 化合物。轉化可藉由各種機制來發生，例如經血液中水 解。前藥用途之討論由Τ· Higuchi及W· Stella，A.C.S· Symposium Series 之第 14 卷’fPro-drugs as Novel Delivery Systems，” ，及在 Bioreversible Carriers in Drug Design 中，Edward B. Roche 編輯，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987提供 o 例如，當本發明之化合物含有羧酸官能基時，前藥可包 含藉由以例如下列基團置換酸基之氫原子來形成的酯： (C^Cs)烷基、（C2-C12)烷醯氧基甲基、具有4至9個碳原子 之1-(烷醯氧基）乙基、具有5至10個碳原子之1-曱基-1-(烷 醯氧基）-乙基、具有3至6個碳原子之烷氧基羰氧基甲基、 具有4至7個碳原子之1-(烷氧基羰氧基）乙基、具有5至8個 碳原子之1-曱基·1-(烷氧基羰氧基）乙基、具有3至9個碳原 子之Ν-(烷氧基羰基）胺甲基、具有4至10個碳原子之1-(Ν-(烷氧基羰基）胺基）乙基、3-酞基、4-巴豆酸内酯基、τ -丁 95020.doc -26- 200524617 内酯-4-基、二烷基胺基（C2-C3)烷基（例如万. 二甲基胺乙基）、胺甲醯基-(CVC2)烷基、Ν，Ν-二（CVCd^ 基胺甲驢基- (Ci-C2)烧基及六氫σ比淀基、°比嘻唆基或嗎福 啉基（c2-c3)烷基。 相似地，當本發明之化合物包含醇官能基時，可藉由以 例如下列基團置換醇基之氫原子來形成前藥：（Cl_C6)烷酸 氧基甲基、1-(((ν〇：6)烷醯氧基）乙基、1·甲基-l-GCVCd^ 醯氧基）乙基、（Ci-C6)烷氧基羰氧基甲基、烷氧 基羰基胺甲基、丁二醯基、（Ci-Cd烷醯基、α _胺基（Cr C4)烧酿基、芳醯基及α -胺醯基、或α-胺醒基-α-胺酸 基，其中各α -胺醯基係獨立選自自然存在之L-胺基酸、 Ρ(0)(0Η)2、-Ρ(0)(0(〇νί：6)烷基）2或糖基（移除半縮醛形式 之碳水化合物之羥基所產生之基團）。 當本發明之化合物包含胺官能基時，前藥可藉由用例如 下列基團置換胺基中之氫原子來形成·· Rx -藏基、Rx〇-幾 基、NRXRX1-羰基，其中Rx與RX1各自獨立為（Ci-C^o)烷 基、（G-C7)環烷基、苄基，或Rx-羰基為自然α _胺醯基或 自然α -胺醯基-自然α -胺醯基、-C(0H)C(0)0Yx，其中γχ 為 Η、（Ci-C6)烷基或苄基；-C-(0YX())YX1，其中 γχο為（cv C4)烷基且YX1為（CVC6)烷基、羧基（CVC6)烷基、胺基（q-c4)烷基或單NKC^C6)烷基胺基烷基或雙-n，n-(cvc6)烷基 胺基烷基；-C(YX2)YX3，其中YX2為Η或甲基且YX3為單—N-(Ci-C6)炫基胺基或二烧基胺基、嗎福琳基、 六氫°比σ定-1 -基或叹洛。定-1 -基。 95020.doc -27- 200524617 表達方式”醫藥學上可接受之鹽,,係指含有陰離子之p 性陰離子鹽’例如（但不限於）氯化物、漠化物、蛾化物母 硫酸鹽、硫酸氫鹽、碟酸鹽、乙酸鹽、順丁烯二酸鹽、反 :烯二酸鹽、草酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸：一 萄糖^鹽、甲續酸鹽及4•甲苯賴鹽。該表達方式亦係於 無毒性陽離子鹽，例如（但不限於）：納鹽、卸鹽、詞趟、日 :鹽、銨鹽或質子化节星(N，m乙二胺)、膽鹼：乙 醇胺、二乙醇胺、乙二胺、甲葡胺（N·甲基·葡糖胺）、节笨 乙胺（N-卞基笨乙胺）、哌嗪或緩血酸胺（2_胺基羥甲基_ 1，3-丙二醇）之鹽。 土 應認識到本發明之化合物可存在經放射性標記之形式， 意即該等化合物可含有—或多個原子，該等原子含有與通 常天然發現之原子質量或質量數不同的原子質量或質量 數。氫、碳、磷、氟及氣之放射性同位素分別包括A、 C、32P、、18ρ及36C1。含有彼等放射性同位素及/或其 匕原子之其它放射性同位素的本發明化合物在本發明之範 疇内。氣化（意即3H)及碳-14(意即BC)放射性同位素因為其 易於製備及可偵測性尤其較佳。一般可藉由熟習此項技術 者所熟知之方法來製備本發明經放射性標記之化合物。可 採用本文所揭示程序來方便地製備該等經放射性標記之化 合物，除以很容易獲得之經放射性標記之試劑取代非經放 射性標記之試劑外。 一般熟習此項技術者應瞭解本發明之某些化合物具有至 少一個不對稱碳原子且因此為對映異構體或非對映異構 95020.doc -28- 200524617 肢。可藉由本身已知方法（例如層析法及/或分步結晶）將非 對映異構體混合物基於其物理化學區別分離為其獨立之非 對映異構體。可藉由下述方法來分離對映異構體：藉由與 適當光學活性化合物（例如醇類）反應來轉化為非對映異構 混合物，分離非對映異構體且將單獨之非對映異構體轉化 (w如水解同日守包括化學水解方法及例如經酶催化水解 之微生物脂酶水解方法）為相應之鈍對映異構體。將包括 非對映異構體、對映異構體及其混合物之所有該等異構體 認為是本發明之部分。亦及本發明之某些化合物為滯轉異 構體（意即經取代之聯芳基）且認為是本發明之部分。 另外，當本發明之化合物（包括式I之化合物或雙膦酸鹽） 形成水合物或溶合物時，其亦在本發明之範疇内。 可經由任何全身性及/或局部性投遞本發明之化合物的 方法來投與本發明之化合物。該等方法包括經口、非經腸 及十二指腸内之途徑等等。一般而言，本發明之化合物係 經口投與，但例如在當經口投藥不合適該目標或當患者不 能攝取藥物時，可利用非經腸（例如靜脈内、肌肉内、經 皮、皮下、直腸或髓内）投藥。 本發明之化合物亦可在適當載劑或稀釋劑中局部施加於 患者體内政患者體外之部位。 可對人類患者投與約0.01微克/天至約10微克/天範圍内 之劑量的本發明之2MD及其它2-亞烷基-19-降-維生素D衍 生物。較佳劑量範圍為約〇·〇5微克/天至約1微克/天且更佳 劑量範圍為約0.1微克/天至約〇.4微克/天。 95020.doc -29- 200524617 正常情況下，雙膦酸鹽之劑量為對需要其之患者投與自 0.002 mg/kg至 20.0 mg/kg、尤其自 0 01 mg/kg至 10.0 mg/kg 之單劑量雙膦酸鹽活性成分。術語”mg/kg，，意謂患者每公 斤體重雙膦酸鹽毫克數。市售雙膦酸鹽劑型之實例包括5

mg、30 mg及35 mg作為其鈉鹽之利塞膦 口服錠劑，其銷售商標為Act〇nel⑧，及5mg、1〇mg、35mg、 40 mg及70 mg亦作為其鈉鹽之阿命膦酸鹽（阿命膦酸鈉）口 服錠劑，其銷售商標為F〇samax®。雙膦酸鹽劑量可為（例 如）母日給樂、一週兩次或一週一次給藥。 投藥量及時間安排當然應取決於待治療對象、病痛之嚴 重性、投藥方式以及主治醫生之診斷。因此，由於患者與 患f之可變性，本文所給定劑量為準則且醫生可滴定藥物 ^里以達成4醫生認為對患者適當之治療。考慮到所需治 療程度，醫生須平衡各種因+，例如患者年齡、既有疾病 子在X及其匕疾病之存在。該劑量可為一曰提供一次或

^提仏夕人且可以持續釋放或受控釋放之調配物形式 捻供。亦有可能使用立即釋放與受控釋放及/或持續釋放 調配物之組合來投與該等化合物。 w根據任何連績性或間歇性投藥進度來投與篇D或其它 2-亞烷基]9|維生素D衍生物。—日—次、—週一次、 一週多次、每兩週一次 — 人母兩週多次、一月一次、一月多 -人、母兩月一次、每三月—次、每六 其它2_亞貌一維生素D衍生二 孤或八，'且合之給藥進度的非限制性實例。 95020.doc -30- 200524617 本發明之化合物-般以包含至少—種本發 :醫藥學上可接受之媒劑或稀釋劑的醫藥組合物形式來二 此，本發明之化合物可以任何習知經口、非經腸、 直％或經皮劑型來投藥。 對於經口投藥，醫藥組合物可採用溶液、懸浮液、錠 劑、丸劑、膠囊、散劑及其類似物之形式。採用含有各種 賦形劑（例如檸檬酸納、碳酸約及鱗_)之錠劑與各種崩 解劑（例如殿粉且較佳為馬鈴著或木著殿粉，及特定錯合 石夕酸鹽）一起’連同黏合劑（例如聚乙婦対㈣、岸糖'

明臊及阿拉伯膠)。另外’潤滑劑(例如硬脂酸鎂、月桂夷 硫酸納及滑石）通常對歧之目的料有用。在軟填充 (soft-fUled)及硬填充（hard_f出⑷明膠膠囊中亦採用相似類 型之固體組合物作為填充劑；就此而論較佳物質亦包括乳 糖或奶糖以及高分子量聚乙二醇。當經口投藥需要水懸浮 液及/或酒劑時，本發明之化合物可與各種甜味劑、芳香 劑、著色劑、乳化劑及/或懸浮劑，以及與諸如水、乙 醇丙—醇、丙二酵及其各種類似組合之稀釋齊| ,组合。一 種2MD與其它2-亞烧基_19务維生素d衍生物之可接受之 〇周配物貝例為含有财奥比油〇⑴之軟明膠膠囊，並 中謂或其它2_亞烧基，-降-維生素D衍生物已溶於該Z 中。其它適用之調配物對熟習此項技術者而言將顯而易 見。 對於非經腸投藥之目的，可採用在芝麻油或花生油中或 在含水丙二醇中之溶液，以及相應水溶性鹽之無菌水溶 95020.doc -31 - 200524617 液。必要時，可將該等水溶液適當緩衝，且首先以足量生 理食鹽水或葡萄糖使該液體稀釋劑等張。該等水溶液尤其 適用於靜脈内、肌肉内、皮下及腹膜内注射之目的。就此 而論，藉由熟習此項技術者熟知之標準技術报容易獲得所 採用之無菌水介質。 對於經皮（例如經局部）投藥之目的，製備稀釋之無菌、 水溶液或部分含水溶液（通常為約0.1%至5%之濃度）、否則 類似於上述非經腸溶液之溶液。 製備具有特定量之活性成分的各種醫藥組合物之方法為 已知的，或根據本揭示内容對於熟習此項技術者而言將顯 而易見。對於製備醫藥組合物之方法的實例，參見 Remington^ Pharmaceutical Sciences > Mack Publishing Company，Easton，Pa.，第 19版（1995)。 本發明之另一態樣為包含下列各物之套組： a·第一單位劑型中的一定量2_亞烷基_19_降-維生素〇衍 生物（例如式I之化合物），及醫藥學上可接受之載劑或稀釋 劑； b. 第二單位劑型中的一定量雙膦酸鹽、及醫藥學上可接 受之載劑或稀釋劑；及 c. 一容器。 該套組包含兩種分離之醫藥組合物〔例如式〗之化人物 的2-亞烷基-19-降-維生素D衍生物及上述第二化合物。爷 套組包含用來容納該等分離組合物之容器裝置， 一 , ^ ^ 例如分隔 瓶或分隔箔包裝，然而該等分離組合物亦可包含在單一未 95020.doc -32- 200524617 分隔容器中。通常，該套組包含分離組分之投藥說明。當 刀離組刀較佳以不同劑型（例如經口及非經腸）投藥，以不 同劑量時間間隔投藥，《當主治醫生希望滴定組合物之單 獨組分時，該套組形式尤其有利。 ’藉此在該等凹洞之薄片處形成一 该套組之實例為所謂發泡包裝。發泡包裝在包裝工業中 為人所熟知且廣泛用於包裝醫藥單位劑型（錠劑、膠囊及 /、顯似物）發泡包裝一般由一相對較硬材料之薄片覆苗 以較佳透明塑膠材料之箔片來組成。在包裝過程期間 塑膠箱片上形成凹洞。該等凹洞具有待包裝鍵劑或勝囊之 =與形狀。接著’賴劑或膠囊放人凹洞中且相對該塑 膠箔片在箔片表面密封該相對較硬材料之薄片，該箔片與 形成凹洞之方向相反。結果，錠劑及膠囊密封在塑膠箔片 =薄片之間的凹洞中。該薄片強度較佳為可手卫施壓在該 一開口以便將該 。隨後可經由該開口移出該 等錠劑或膠囊移出該發泡包裝。隨後可經由

一，，二隹該套組上提供記憶辅助物， 添ιί 士 咖 由 .. . 例如為緊接於錠

95020.doc 200524617 合物或該前藥之醫藥學上可接受之鹽之日劑量可由一錠劑 或膠囊組成，而第二化合物之日劑量可由若干錠劑或膝囊 、’且成且反之亦然。该圯憶辅助物應當對此加以反映。 在本發明之另一特定實施例中，提供一種設計來按照計 劃用途之順序—次分配—份日劑量之分配器。較佳地，該 刀配w衣配一記憶輔助物以便進一步促進與該療程之順應 ί*生忒5己憶辅助物之實例為顯示已分配之曰劑量數的機械 计數器另一該記憶輔助物之實例為耦合於一液晶讀出器 或可聽提示訊號之電池驅動微型晶片記憶體，該讀出器或 afl唬（例如）躓出上一次已服用曰劑量之曰期及/或提示 何日守服用下一劑量之日期。 可同時或不同時以相同劑型或不同劑型來投與2•亞烷 基1 9降_維生素D衍生物及芳香酶抑制劑。預期所有投藥 方法之又化。一種車父佳投藥方法為在相同時間以相同劑型 投與組合物。另一較佳投藥方法為投與一種劑型中之2_亞 烷基19降·維生素d衍生物及另一劑型中之雙膦酸鹽投 與，該兩種藥劑同時服用。 可藉由〶見一般方法來達成具有基本結構式〗之1 α _羥 基-2-烷基-19_降_維生素D化合物、尤其為丨^-羥基甲 基49-降-維生素D化合物之製備，意即將二環溫道斯·格倫 德曼（Windaus-Gnmdmann)型酮Π與烯丙基氧化膦m縮合為 相應之2-亞甲基-19-降-維生素D類似物IV，隨後在後者化 合物中在C-1及C-3處去保護。 95020.doc -34· 200524617

在結構II、III及IV中，基團丫1與Y2及R代表上文定義之基 團；Yi&Y2較佳為羥基保護基，亦應瞭解R中任何可能敏 感或干擾縮合反應之官能性應如此項技術中所熟知地適當 加以保護。上文所示方法代表彙集性合成概念之應用，其 95020.doc -35- 200524617 已有效應用於製備維生素D化合物[例如Lythgoe等人，J· Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 590 (1978] ； Lythgoe, Chem. Soc· Rev· 9，449 (1983) ; Toh等人，J· Org· Chem· 48, 1414 (1983) ; Baggiolini等人，J· Org· Chem· 51，3098 (1986) ; Sardina等人，J· Org. Chem· 51，1264 (1986) ; J· Org· Chem· 51，1269( 1986) ; DeLuca 等人，美國專利第 5,086，191 號；DeLuca等人，美國專利第 5,536,713號]。

通式結構II之氫化茚酮（hydrindanone)為已知的或可藉由 已知方法製備。該等已知二環酮之特別重要的實例為上述 具有側鏈（a)、（b)、（c)及（d)之結構，意即25-羥基格倫德曼 酮（f)[Baggiolini等人，J· Org· Chem· 51，3098 (1986)];格倫 德曼酮（g) [Inhoffen等人，Chem· Ber· 90，664 (1957)] ; 25-經基溫道斯 _(h)[Baggiolini等人，J· Org· Chem· 51，3098 (1986)]及溫道斯嗣（i) [Windaus 等人，Ann·，524，297 (1936)]:

95020.doc -36- 200524617

(g)

為製備所需通式結構III之氧化膦，已發展出一種由奎尼 酸甲醋（methyl quinicate)衍生物1開始之新合成途徑，該衍 生物很容易自市售（lR，3R，4S，5RH_)-奎尼酸如Perlman等 人，Tetrahedron Lett· 32，7663 (1991)及 DeLuca等人，美 國專利第5,086,191號中所述來獲得。起始曱酯1轉化成所 需A環合成纖維之整個方法歸納在流程圖I中。因此，以 95020.doc -37- 200524617

Ru〇4氧化（以RuC13及NaI04作為共氧化劑之催化方法）1中 之二級4-羥基。對於僅為此受阻羥基之有效氧化方法而言 有必要使用該強氧化劑。然而，亦可應用其它更常用氧化 劑（例如重鉻酸吡錠鑌鹽），儘管該等反應通常需要相當長 的時間來完成。該合成之第二步包含空間受阻之4-酮基化 合物2與自甲基三苯基溴化鱗及正丁基鋰製備之内鑌鹽進 行維蒂希（Wittig)反應。其它鹼亦可用於生成反應性亞甲 基構烧（methylenephosphorane)，如第三丁氧基卸、 NaNH2、NaH、K/HMPT、NaN(TMS)2等等。為 了製備4-亞 甲基化合物3，可使用某些所描述維蒂希方法之修正，例 如使2與活化亞曱基三苯基磷烷反應[Corey等人， Tetrahedron Lett· 26，555 (1985)]。或者，可應用其它廣 泛用於亞甲基化惰性酮之方法，例如與自甲基二苯基氧化 膦經正丁基鋰去質子化所獲得之PO-内鏽鹽進行維蒂希-霍 納（Wittig-Horner)反應[Schosse 等人，Chimia 30，197 (1976)]，或使酮與甲基亞磺酸鈉[Corey等人，J· Org· Chem· 28，1128 (1963)]及甲基亞績酸卸[Greene等人， Tetrahedron Lett. 3755 (1976)]反應。以氫化鋁锂或其它 適用還原劑（例如DIBALH)還原酯3提供了二醇4，其隨後 經高碘酸鈉氧化為環己酮衍生物5。該方法之下一步包含 使酮5與（三甲基曱矽烷基）乙酸曱酯進行彼特森反應 (Peterson reaction)。將所得稀丙酯6以二異丁基氫化I呂處 理且將所形成之烯丙醇7又轉化為所需A環氧化膦8。7至8 之轉變涉及3個步驟，即就地以正丁基鋰及對甲苯磺醯氯 95020.doc -38- 200524617 進行甲苯磺醯化，隨後與二苯基膦鋰鹽反應且以過氧化气 進行氧化。 可使用A環合成8及具有所需側鏈結構之合適的溫道斯一 格倫德曼酮II來合成若干通式結構IV之2-亞甲基-19-降·維 生素D化合物。因此，例如生成自8及正丁基鋰之膦氧基碳 化經與根據公開之程序[Sicinski等人，J. Med· Chem 37 3730 (1994)]製備之經保護25-經基的格偷德曼嗣9進行維 蒂希-霍納偶合產生了預期之維生素化合物1〇。此化合物 在以AG 50W-X4陽離子交換樹脂去保護後提供了 1 ^，25_二 羥基-2-亞甲基-19-降-維生素d3(11)。 C-20差向異構化藉由氧化膦8與經保護之（2〇s)-25-羥基 格倫德叉酮13(流程圖Π)進行類似偶合來達成c_2〇差向異 構化作用且提供了 19-降-維生素14 ,其在該等羥基_保護基 水解後產生（20S)-1 α，25-二經基-2-亞甲基_19_降_維生素 〇3(15)。如上所述，可藉由本文所揭示方法來合成其它 亞曱基-19-降-維生素D類似物。例如，可藉由提供格倫德 曼_(g)來獲得1 α -羥基_2_亞甲基_19-降_維生素D3。 本申請案中所引用所有文件（包括專利及專利申請案）以 引用之方式併入本文中。以下呈現之實例意欲說明本發明 之特殊貫施例而並非意圖以任何方式限制本發明（包括申 睛專利範圍）。 實例 下列縮寫用於本申請案中。 NMR 核磁共振 95020.doc -39- 200524617

mp Η h min t-Bu THF n-BuLi MS HPLC SEM Ph Me Et 熔點 氫 小時 分鐘 第三丁基 四氫吱喃 正丁基鋰 質譜 面壓液相層析法 標準誤差量測 苯基 甲基 乙基 DIBALH 二異丁基氫化鋁 LDA 二異丙基醯胺基鋰 式I之化合物的製備方法在美國專利第5,843,928號中陳 述如下： 在該等實例中，由阿拉伯數字（例如1、2、3等等）標識 之特定產物係指在前述及流程圖I及流程圖II中如此標識之 特定產物。 實例1 製備1 α，25-二羥基-2-亞甲基-19·降-維生素D3(ll) 首先參看流程圖I，如前文所述[Perlman等人， Tetrahedron Lett· 32，7663 (1991)及 DeLuca等人，美國專 95020.doc -40- 200524617 利第5,086,191號]自市售（-)-奎尼酸獲得起始奎尼甲酯衍生 物 1。l:mp. 82°C-82.5°C。（來自己烷）4 NMR(CDC13) δ 0.098，0.110，0.142，及 0.159(各 3Η，各 s，4xSiCH3)， 0.896及 0·911(9Η及 9H，各 s，2xSi-t-Bu)，1.820 (1H，dd， J=13.1，10.3 Hz)，2·02 (1H，ddd，J=14.3, 4.3, 2.4 Hz)，2·09 (1H，dd，J=14.3，2.8 Hz)，2·19 (1H，ddd，J= 13.1，4.4，2·4 Hz)，2·31 (1H，d，J=2.8 Hz，OH)，3·42 (1H，m ; D20 dd後， J=8.6, 2.6 Hz)，3.77 (3H，s)，4.12 (lH，m)，4.37 (1H，m)，4.53 (lH，br s，OH)。 (a) 奎尼曱酯衍生物1之4-羥基之氧化 (3R，5R)-3,5-雙[(第三丁基二甲基甲矽烷基）氧]-1-羥基_ 4-氧基環己烷羧酸甲酯（2)。於經攪拌的水（42 mL)中之水 合氣化釕（111)(434 mg，2.1 mmol)與高硤酸鈉（ΐ〇·8 g，50.6 mmol)之混合物添加奎尼酸甲酯1(6.09 g，14 mmol)之 CC14/CH3CN(1 : 1，64 mL)中的溶液。持續劇烈攪拌8小 時。添加幾滴2-丙醇，將該混合物傾注至水中且以氣仿萃 取。將有機萃取物組合、以水洗滌、乾燥（MgS04)及蒸發 以得到深色油狀殘餘物（大約5 g)，其經急驟層析法純化。 以己烷/乙酸乙酯（8 : 2)溶離產生純淨油狀4-酮2(3.4 g， 56%) : 4 NMR (CDC13) δ 0.054, 0.091，0.127，及 0.132(各 3H，各 s，4xSiCH3)，0.908及 0·913(9Η及 9H，各 s，2xSi-t_ Bu)，2·22 (1H，dd，J=13.2, 11.7 Hz)，2.28 (1H，〜dt J=14.9, 3·6 Hz)，2·37 (1H，dd，J=14.9，3.2 Hz)，2·55 (1H，ddd， J=13.2, 6.4, 3.4 Hz)，3·79 (3H，s)，4·41 (1H，t，J-3.5 Hz)， 95020.doc -41 - 200524617 4.64 (1H，s，ΟΗ)，5·04 (1H，dd，J=11.7，6.4 Hz) ; MS m/z(相對強度）#M+，375 (M+-t-Bu，32)，357 (M+-t-Bu-H20, 47)，243 (31)，225 (57)，73 (100)。 (b) 4-酮2之維蒂希反應 (3R，5R)-3,5-雙[(第三丁基二甲基甲矽烷基）氧]羥基― 4-亞甲基環己烷羧酸甲酯（3)。在〇°C下於氬氣下向無水 丁册（32 1111^)中之甲基三苯基溴化鱗（2.813§，7.88 111111〇1) 中逐滴添加正丁基經（在己烧中2.5 Μ，6.0 mL，15 mmol) 同時進行授拌。隨後添加另一份MePh3P+Br-(2.8 13 g，7.88 mmol)且在0°C下將溶液攪拌10分鐘並在室溫下擾拌4〇分 鐘。將燈紅色混合物再次冷卻至0°C下且將4-酮2(1.558 g， 3.6 mmol)之無水THF(16+2 mL)溶液在20分鐘内虹吸至反 應燒瓶中。將該反應混合物在0°C下攪拌1小時且在室溫下 挽拌3小時。隨後將該混合物小心傾注至含1 % HC1之鹽水 中且以乙酸乙酯及苯萃取。將經組合之有機萃取物以稀釋 NaHC〇3及鹽水洗滌、乾燥（MgSCU)及蒸發產生橙色油狀殘 餘物（大約2 _ 6 g) ’其經急驟層析法進行純化。以己烧/乙酸 乙酯（9 : 1)溶離產生呈無色油之純4-亞甲基化合物3(368 mg，24%) : 1η NMR(CDC13) δ 0.078，〇.〇83，0.092，及 0.115(各 3Η，各 s ’ 4xSiCH3)，0.889及 0·920(9Η及 9Η，各 s， 2xSi-t-Bu)，1.811 (1H，dd，J=12.6，11·2 Hz)，2.10 (2H，m)， 2.31 (1H，dd，J=12.6，5.1 Hz)，3.76 (3H，s)，4·69 (1H, t， J=3.1 Hz)，4.78 (1H, m)，4.96(2H，m; D2〇 1H後，br s)， 5.17 (1H，t，J=1.9 Hz) ; MS m/z(相對強度）無 m+，373 (M+- 95020.doc -42- 200524617 t-Bu，57)，355 (M+-t-Bu -H20, 13)，341 (19)，313 (25)，241 (33)，223 (37)，209 (56)，73 (100) 〇 (c) 還原4-亞曱基化合物3中之酯基 [(3R，5R)-3,5-雙[(第三丁基二甲基甲矽烷基）氧]-1-羥基-4-亞曱基環己基]甲醇（4)。⑴在〇°C下於氬氣下向經攪拌的 酯3(90 mg，0.21 mmol)之無水THF(8 mL)溶液添加氫化鋁 鋰（60 mg，1.6 mmol)。在1小時後將冷浴移除且在6°C下繼 續攪拌12小時及在室溫下攪拌6小時。以飽和Na2S04水溶 液分解過量試劑，且將該混合物以乙酸乙酯及乙醚萃取、 乾燥（MgS04)及蒸發。將該殘餘物以己烷/乙酸乙酯（9 : 1) 經急驟層析法處理提供未反應基質（12 mg)及純的結晶二 醇4(3 5mg，基於所回收酯 3 48%):1HNMR(CDCl3+D20) δ 0.079，0.091，0.100，及 〇.121(各 3H，，各 s，4xSiCH3)， 0.895 及 0·927(9Η 及 9H，各s，2xSi-t-Bu)，1·339 (1H，t， J〜12 Hz)，1.510 (1H，dd，J=14.3，2·7 Ηζ)，2·10 (2H，m)， 3.29及 3·40(1Η及 1H，各d，J=11.0 Hz)，4·66 (1H，t，J-2.8 Hz)，4.78 (1H，m)，4·92 (1H，t，J=1.7 Hz)，5.13 (1H，t， J=2.0 Hz) ; MS m/z(相對強度）無 M+，345 (M+_t-Bn，8)，327 (M+-t-Bu-H20, 22)，213 (28)，195 (11)，73 (100)。 (ii)將二異丁基氫化銘（在曱苯中L5 Μ，2.0 mL，3 mmol)在-78°C下於氬氣下添加至酯3(215 mg，0.5 mmol)之 無水乙醚（3 mL)溶液中。將混合物在_78°C下攪拌3小時且 在-24 C下授拌1.5小時，以乙醚（1〇 mL)稀釋且藉由緩慢添 加2 N酒石酸鈉鉀來中止。將溶液溫至室溫且攪拌丨5分 95020.doc -43- 200524617 鐘’傾/主至鹽水中且以乙酸乙醋及乙醚萃取。將該等有機 萃取物組合、以稀HC1(大約1%)及鹽水洗滌、乾燥 (MgSCU)及蒸發。藉由急驟層析法純化結晶殘餘物。以己 烧/乙酸乙酯（9 : 1)溶離產生結晶二醇4(43 mg，24%)。 (d) 裂解鄰二醇4

(3R，5R)-3,5-雙[(第三丁基二甲基曱矽烷基）氧亞甲基 環己酮（5)。將高破酸鈉飽和水（2.2 mL)在0°C下添加入二 醇4(146 mg，〇·36 mmol)之甲醇（9 mL)溶液中。將該溶液 在〇°C下攪拌1小時，傾注入鹽水中且以乙醚及苯萃取。將 有機萃取物組合、以鹽水洗滌、乾燥（MgS〇4)及蒸發。將 油狀殘餘物溶於己烷（1 mL)中且應用於二氧化矽sep-pak濾 芯（cartridge)上。以己烷/乙酸乙酯（95 : 5)溶離呈無色油之 純4-亞甲基環己酮衍生物5(110 mg，82%) : ^ NMR (CDC13) δ 0.050 及 〇·〇69(6Η 及 6H各 s，4xSiCH3)，〇·881 (18H，s，2xSi-t-Bu)，2·45 (2H，ddd，卜14.2，6·9，1·4 Hz)， 2.64 (2Η，ddd，J=14.2，4·6，1.4 Ηζ)，4.69 (2Η，dd，J=6.9, 4·6 Hz)，5·16 (2H，s) ; MS M/z(相對強度）無]^1+，355 (1^+-Me，3)，313 (M+-t-Bu，100)，73 (76) 〇 (e) 製備稀丙酉旨6 [(31，51)-3’，5，-雙[(第三丁基二甲基曱矽烷基）氧]_4，_亞 曱基亞環己基]乙酸曱酉旨（6)。向二異丙胺（37 μΧ，〇 28 mmol)之無水THF(200 /xL)溶液在氬氣下於-78°C下添加正 丁基鋰（在己烷中2·5 Μ，113 μί，0.28 mmol)同時進行授 拌，且隨後添加（三曱基曱矽烷基）乙酸甲酯（46 μί，〇.28 95020.doc -44- 200524617

mmol)。15分鐘後，逐滴添加無水THF(2〇〇+8〇叫）中之酮 基化合物5(49 mg，〇·132 mmol)。將該溶液在_78。〇下攪拌 2小時且以飽和NH4C1中止反應混合物，將其傾注至鹽水中 且以乙醚及笨萃取。將該等經組合之有機萃取物以鹽水洗 滌、乾燥（MgS〇4)及蒸發。將該殘餘物溶於己烷中（1 mL) 且轭用於二氧化矽Sep-pak濾芯上。以己烷/乙酸乙酯（98 : 2)溶離得到呈無色油之純烯丙酯6(50 mg，89%) Jh NMR (CDC13) δ 0·039, 0·064，及 0·076(6Η，3H，及 3H，各 s，4χ

SiCH3)，〇·864 及 0·884(9η&9η，各 s，2xSi + Bu)，2 26 (1H, dd，J-12.8，7·4 Hz)，2·47 (1H，dd，J=12.8，4.2 Hz)， 2·98 (1H，dd，J=13.3，4.0 Hz)，3·06 (1H，dd，J=13.3，6.6 Hz)，3.69 (3H，s)，4·48 (2H，m)，4·99 (2H，s)，5.74 (1H， s); MS m/z(相對強度）426 (M+，2)，411 (M+ Me，4)，娜 (M+_t_Bu，100)，263 (69) 〇 (f) 還原稀丙g旨6 2-[(3%5’11)-3’，5’-雙[(第三丁基二甲基甲矽烷基）氧]_4，_ 亞甲基亞環己基]乙醇（7)。將二異丁基氫化鋁（1·5 M在甲 笨中，1·6 mL，2·4 mmol)在氬氣下於_78。〇下緩慢添加至 經攪拌的烯丙酯6(143 mg，〇·33 mm〇1)之甲苯/二氣甲烷 (2 : 1，5·7 mL)溶液中。在-78X：下繼續攪拌丨小時且在_ 46°C(環己酮/乾冰浴）下攪拌25分鐘。藉由緩慢添加酒石酸 鈉鉀（2 N，3 mL)、HC1 水溶液（2 N，3 mL)及 H2〇(12 mL) 來中止該混合物，且接著以二氯甲烷（12 mL)稀釋並以乙 醚及笨萃取。將該等有機萃取物組合、以稀釋（大約1%)之 95020.doc •45· 200524617 HC1及鹽水洗滌、乾燥（MgS〇4)及蒸發。藉由急驟層析法 純化該殘餘物。以己烷/乙酸乙酯（9 : 1)溶離產生結晶烯丙 醇 7(130 mg，97%) ·· 4 NMR (CDC13) δ 0·038, 0.050，及 0·075(3Η，3Η，及 6Η，各 s，4xSiCH3)，0.876及 0·904(9Η 及 9Η，各 s，2xSi-t-Bu)，2.12 (1Η，dd J=12.3, 8.8 Ηζ)，2.23 (1H，dd，J=13.3，2·7 Hz)，2·45 (1H，dd，J=12.3，4.8 Hz)， 2.51 (1H，dd，J=13.3，5.4 Hz)，4.04 (1H，m; D20 dd後， J=12.0, 7·〇 Hz)，4.17 (1H，m; D20 dd後，J=12.0, 7.4 Hz), 4.38 (1H，m)，4·49 (1H，m)，4·95 (1H，br s)，5.05 (1H，t， J=1.7 Hz)，5·69 (1H，〜t，J=7.2 Hz); MS m/z (相對強度） 398 (M+，2)，383 (M+-Me，2)，365 (M+-Me-H20，4)，341 (M+-t_Bu，78)，323 (M+-t-Bu-H20, 10)，73 (100) 〇 (g) 將烯丙醇7轉變為氧化膦8 [2-[(3’11，5’1〇-3’，5，-雙[(第三丁基二甲基甲矽烷基）氧]-4，-亞甲基亞環己基]乙基]二苯基氧化膦（8)。向無水THF(2.4 mL)中之烯丙醇7(105 mg，0.263 mmol)在氬氣下於〇°C下添 加正丁基鋰（在己烷中2.5 Μ，105 ，0.263 mmol)。將新 鮮再結晶之甲苯續醢氯（50.4 mg，0.264 mmol)溶於無水 THF(480 #L)中且添加至烯丙醇-丁基經溶液中。將該混合 物於0°C下攪拌5分鐘且擱置於〇°C下。在由氬氣置換空氣 之另一乾燥燒瓶中，將正丁基裡（在己烧中2.5 Μ，210 ML，0.525 mmol)在0°C下添加至無水THF(750 gL)中之 Ph2PH(93 μί，0.534 mmol)同時進行攪拌。在氬氣壓下將 該紅色溶液虹吸至甲苯石黃酸鹽溶液中直至燈色持續存在 95020.doc -46- 200524617 (大約添加1/2溶液）。將所得混合物在下額外攪拌川分 鐘且藉由添加H2〇(30 gL)來中止。減壓蒸發溶劑且在二氣 甲烷（2·4 mL)中再溶解殘餘物並與1〇% H2〇2一起在〇亡下攪 拌1小時。將該有機層分離、以冷亞硫酸鈉水溶液及h2〇洗 滌、乾燥（MgSCU)及蒸發。使該殘餘物經受急驟層析法。 以苯/乙酸乙酯（6 ·· 4)溶離產生半結晶氧化膦8(134 mg， 87〇/〇):咕 NMR (CDC13) δ 0·002，O.OlU 0·019(3Η， 3H，及 6H，各 s，4xSiCH3)，0.855 及 0·860(9Η及 9H ,各 s，2xSi小Bu)，，2.0-2.1 (3H，br m)，2.34(1 H，m)，3.08 (1H，m)，3·19 (1H，m)，4.34 (2H5 m)，4·90及 4·94(1Η 及 1Η，各 s)，5·35 (1Η，〜q，J=7.4 Ηζ)，7·46 (4Η，m)，7·52 (2Η， m), 7·72 (4Η，m) ; MS m/z(相對強度）無 μ+，581 (Μ+-1，1)， 567 (M+_Me，3) 525 (M+-t-Bu，100)，450(10)，393(48)。 (h)經保護之25-羥基格倫德曼酮9與氧化膦8之維蒂希-霍 納偶合 1 α，25-二羥基-2-亞甲基-19-降-維生素d3(1 1)。向氧化 膦8(33.1 mg，56.8 μιηοΐ)之無水THF(450 gL)溶液在氬氣下 於〇°C下緩慢添加正丁基鋰（在己烷中2.5 Μ，23 jitL，57.5 μιηοΐ)同時進行擾拌。溶液變成深撥色。將混合物冷卻至· 78°C且緩慢添加根據公開之程序[sicinski等人，J. Med. Chem· 37，3730 (1994)]製備的經保護之羥基酮9(9.0 mg，22·8 /xmol)之無水 THF(200+l〇〇 #L)預冷溶液（-78。〇。 將混合物在氬氣下於-78°C下攪拌1小時且在〇。(：下攪拌1 8小 時。添加乙酸乙酯，且將該有機相以鹽水洗務有機相、乾 95020.doc -47- 200524617 燥（MgS〇4)及蒸發。將殘餘物溶於己烧中且施用於二氧化 矽Sep-Pak濾芯上，且以己烷/乙酸乙酯（99 : 1，20 mL)洗 滌以產生19-降-維生素衍生物ι〇(ΐ3·5 mg，78%)。隨後以 己烧/乙酸乙S旨（96· 4’ 1〇 mL)洗務Sep_Pak以回收一些未 變化之C,D-環酮9(2 mg)，且以乙酸乙酯（1〇 mL)以回收二 苯基氧化膦（20 mg)。出於分析之目的，藉由hplC(6.2 mm x25 cm Zorbax-Sil管柱，4 mL/min)使用己烷/乙酸乙酯 (99·9 : 0·1)溶劑系統來純化經保護維生素1〇之樣品。在rv 26 mL下溶離出呈無色油之純化合物1〇 : uv(在己烷 中）Xmax 224，253，263 nm; 4 NMR (CDC13) δ 0.025，0.049, 0.066，及 0.080(各 3Η，各8，4父31(：113)，0.546 (311，8，18-H3)，0.565 (6H，q，J=7.9 Hz，3xSiCH2)，0.864及 0·896(9Η及 9H，各 s，2xSi-t-Bu)，0.931 (3H，d，J=6.0 Hz，21-H3)，0.947 (9H，t，J=7.9 Hz，3xSiCH2CH3)，1.188(6H，s，26-及 27-H3), 2.00 (2H，m)，2.18 (1H，dd，J=12.5，8.5 Hz，4/3-H)，2.33 (1H，dd，J=13.1，2.9 Hz，10沒-H)，2·46 (1H，dd J=12.5，4.5 Hz，4a-H)，2.52 (1H，dd，J=13」，5.8 Hz，10〇:-H)，2·82 (1H， br d，J=12 Hz，9/3-H)，4·43(2Η，m，ljS_及 3a-H)，4.92及 4.97(111及111，各8，=。112)，5.84及6.22(111及111，各（1， J=11.0 Hz，7-及 6-H) ; MS m/z(相對強度）758 (M+，17)， 729 (M+-Et，6)，701 (M+-t-Bu，4)，626 (100)，494 (23)，366 (50)，73 (92)。 將經保護之維生素10(4.3 mg)溶於苯（150 /iL)中且添加甲 醇（800 ^L)中之樹脂（AG 50W-X4，60 mg ;以曱醇預洗 95020.doc -48 - 200524617 滌）。將該混合物於室溫下在氬氣下攪拌17小時，以乙酸 乙酉旨/乙醚（1· 1’4 mL)稀釋且進行傾析。以乙醚（8 mL)洗 滌樹脂且以鹽水及飽和NaHC〇3洗滌經組合之有機相，將 其乾無（MgS〇4)及条發。精由 HPLC(62 mmx25 cm Zorbax_ Sil管柱，4 mL/min)使用己烷/2-丙醇（9 : l)溶劑系統來純 化該殘餘物。在Rv 29 mL下（相同系統中，ια，25-二經基維 生素D3在Rv 52 mL下溶離）收集呈白色固體之分析上純的2- 亞甲基-19-降·維生素 11(2.3 mg，97%) : UV(EtOH 中）Xmax 243.5, 252, 262.5 nm; lU NMR (CDC13) 8 0.552 (3H, s? 18- H3)，0.941 (3H，d，J=6.4 Hz，21-H3)，1·222(6Η，s，26-及 27-H3)，2.01 (2H，m)，2·27-2·36 (2H，m)，2·58 (1H，m)， 2.80-2.88 (2H，m)，4·49(2Η，m，1/3-及 3ax-H)，5.10及 5·11(1Η及 1H，各 s，=CH2)，5·89 及 6·3 7(1Η及 1H，各 d， J=11.3 Hz，7-及 6-H) ; MS m/z(相對強度）416 (M+，83)， 398 (25)，384 (31)，380 (14)，351 (20)，313 (100) 〇 實例2 製備（20S)-la，25_二經基-2-亞曱基-19 -降-維生素D3(15) 流程圖II說明經保護之（20S)-25-羥基格倫德曼酮13之製 備，及其與氧化膦8(如實例1中所述獲得）之偶合。 (a) 曱矽烷基化羥基酮12 (20S)-25-[(三乙基曱矽烷基）氧]-消_A，B_膽甾烷-8-酮 (13)。將酮 12(Tetrionics，Inc· Madison，WI·; 56 mg，0.2 mmol)及咪唑（65 mg，0.95 mmol)之無水 DMF(1.2 mL)溶液 以三乙基曱石夕烧基氣（95 μί，0.56 mmol)處理，且將混合 95020.doc -49- 200524617 物在室溫下於氬氣下攪拌4小時。添加乙酸乙酯及水，且 分離有機層。將乙酸乙酯層以水及鹽水洗滌、乾燥 (MgS04)及蒸發。使該殘餘物在己烷/乙酸乙酯中（9 : 1)經 過二氧化矽Sep-Pak濾芯且在蒸發後藉由HPLC使用己烷/乙 酸乙酉旨（9 ·· 1)溶劑系統（9.4 mmx25 cm Zorbax-Sil管柱，4 mL/min)進行純化。Rv 35 mL下溶離出呈無色油之純的經 保護羥基酮 13(55 mg，70%)·· 4 NMR (CDC13) δ 0.566 (6Η，q，J=7.9 Ηζ，3xSiCH2)，0.638 (3Η，s，18-Η3)，0·859 (3H，d，J=6.0 Hz，21-H3)，0.947 (9H，t，J=7.9 Hz，3χ SiCH2CH3)，1·196(6Η，s，26-及 27-H3)，2.45 (1H，dd， J=11.4，7·5 Hz，14ce_H) o (b) 經保護之（20S)-25-羥基格倫德曼酮13與氧化膦8之維 蒂希-霍納偶合 (20S)-la，25-二羥基-2-亞甲基-19-降-維生素D3(15)。向 氧化膦 8(15.8 mg，27.1 /xmol)之無水 THF(200 μΙ〇 溶液在 〇 °C下於氬氣下緩慢添加正丁基鋰（在己烷中2 5 μ，11 ， 27.5 μπιοί)同時進行攪拌。溶液轉變成深橙色。將混合物 冷卻至-78 °C且緩慢添加經保護羥基酮13(8.0 mg，20.3 μιηοΐ)之無水THF(l〇〇此）預冷（_78。〇溶液。將該混合物在 氬氣下於-78°C下攪拌1小時且在〇°c下攪拌18小時。添加 乙酸乙酯，且將有機相以鹽水洗滌、乾燥（MgS〇4)及蒸 發。將殘餘物溶於己烷中且施用於二氧化矽Sep-Pak濾芯 上’且以己烷/乙酸乙酯（99.5 ·· 0·5，20 mL)洗滌以產生呈 無色油之19-降-維生素衍生物14(7 mg，45%)。隨後以己 95020.doc -50- 200524617 烷/乙酸乙酯（96 : 4，10 mL)洗滌Sep-Pak回收部分未變化 之C，D-環顚J 13(4 mg)，且以乙酸乙酯（10 mL)回收二苯基氧 化膦（9 mg)。出於分析目的，將經保護之維生素14之樣品 進一步藉由 HPLC(6.2 mmx25 cm Zorbax-Sil 管柱，4 mL/min)使用己烷/乙酸乙酯（99.9 : 0.1)溶劑系統進行純 化。 14: UV(己烷中）Xmax 244，253.5, 263 nm ； lR NMR (CDC13) δ 0.026，0.049，0.066及 0.080(各 3H，各 s，4χ SiCH3)，0.541 (3Η，s，18-Η3)，0.564 (6Η，q，J=7.9 Ηζ，3χ SiCH2)，0.848 (3H，d，J=6.5 Hz, 21-H3)，0.864及 0·896(9Η 及 9H，各 s，2xSi-t-Bu)，0.945 (9H，t，J=7.9 Hz，3 x SiCH2CH3)，1.188 (6H，s，26-及 27_H3)，2.15-2.35 (4H，br m)，2·43-2·53 (3H，br m)，2·82 (1H，br d，J=12.9 Hz，9/5-H)， 4·42(2Η，m，1/3-及 3α-Η)，4.92 及 4·97(1Η 及 1H，各 s， =CH2)，5.84 及 6·22(1Η及 1H，各 d，J=ll.l Hz , 7-及 6-H); MS m/z(相對強度）758 (M+，33)，729 (M+-Et，7)，701 (M+-t-Bu，5)，626 (100)，494 (25)，366 (52)，75 (82)，73 (69) 〇 將經保護之維生素14(5.0 mg)溶於苯（160 gL)中且添加甲 醇（900 /xL)中之樹脂（AG 50W-X4，70 mg;以曱醇預先洗 滌）。將混合物在室溫下於氬氣下攪拌19小時，以乙酸乙 酯/乙醚（1 : 1，4 mL)稀釋且進行傾析。以乙鱗洗務樹脂（8 mL)且以鹽水及飽和NaHC〇3洗務經組合之有機相，將其乾 燥（MgS〇4)及蒸發。將殘餘物藉由HPLC(6.2 mmx25 cm 95020.doc -51 - 200524617

Zorbax-Sil管柱，4 mL/min)使用己烧/2-丙醇（9 : 1)溶劑系 統進行純化。在Rv 2 8 mL下（相同系統中，在Rv 29 mL下溶 離（20R)-類似物且在Rv 52 mL下溶離1α，25-二羥基維生素 DO收集呈白色固體之分析上純的2-亞甲基-19-降-維生素 15(2.6 mg，95%)白色固體：UV(EtOH 中）Xmax 243.5, 252·5, 262.5 nm ; 3H NMR (CDC13) δ 0.551 (3H，s，18-H3)， 0.858 (3H，d，J=6.6 Hz，21-H3)，1·215(6Η，s，26-及 27-H3)， 1.95-2.04 (2H，m)，2.27-2.35 (2H，m)，2·58 (1H，dd，J=13.3, 3·0 Hz)，2·80-2·87 (2H，m)，（2H，m，1/3-及 3a-H)，5.09及 5.11(111及111，各5，=(：112)，5.89及6.36(111及111，各(1， J=11.3 Hz ’ 7-及 6-H) ; MS m/z (相對強度）416 (M+，100)， 398 (26)，380 (13)，366 (21)，313 (31) 〇 經2_亞甲基-取代之19_降_1，25-(〇11)2〇3化合物及其208_異 構想之生物活性 式I之化合物的生物活性在美國專利第5,843,928號中陳 述如下。向19-降-l，25-(OH)2D3或其20S-異構體之2-位引入 亞甲基對結合於豬腸維生素D受體效果極小或沒有效果。 所有化合物同等良好地結合於豬受體，包括標準1，25_ (OH);3(圖1)。由該等結果吾人可預期所有化合物可能具 有相等之生物活性。然而驚人的是，亞曱基取代產生主 要作用於骨上之高選擇性類似物。當在慢性模式中給定7 天柃，受測之最有效化合物為2-亞甲基 (OHhD3(表1)。當給定130皮莫耳/天時，其骨鈣遷移（血清 弼）/舌1*生比天然激素之活性咼大約至少丨〇倍且可能高1 _ 95020.doc -52- 200524617 1，〇〇〇倍。在相同條件τ，之兩倍劑量在㈣ pm〇I劑量下得到血料值13 8邮胸心 細皮莫耳/天時，其在骨消耗上產生令人驚料^龍 出腸㈣傳輸活性。該化合物之骨转遷移作用活性可能為 l，25-(OH)2D3活性之10_1〇〇倍。該等結果說明19降-丨力-(OH)2D3之2-亞甲基及20S-2-亞甲基衍生物對來自骨之鈣遷 14mg/_ml血清H顯示其選擇性，該化合物在130或 者260 pm。!劑量下對腸㈣傳輸未產生任何重大變化，而 在唯-劑量（意即皮莫耳/天）測試下！，25•陶Λ使腸内 約傳輸屋生預期之上升。2-亞甲基-19-降十乂卿办在 兩個劑量水平下亦具有極強的骨約遷移作用，但亦未顯示 移具有遥擇性。表2說明腸内及血清舞對單獨大劑量之各 種化合物的反應；再次支持源於表丨之結論。 圖2中之結果說明2-亞甲基_19-降對誘 發HL-60細胞分化為單核細胞極為有效。2_亞甲基降化 合物具有同l，25-(OH)2D3相似之活性。該等結果說明2_亞 甲基-19-降 _2〇S_1，25-(OH)2D3 與 2-亞甲基 _19_ 降 (〇H)2D3化合物作為抗癌劑（尤其對抗白血病、結腸癌、乳 癌及前列腺癌）或作為治療牛皮癣之藥劑之潛力。 藉由 Dame 等人（Biochemistry 25，4523-4534，1986)描述 之方法來進行該等類似物與豬腸内受體之競爭性結合。 由 Ostrem等人（J· Biol· Chem· 262，14164-14171，1987) 所述測定HL-60前髓細胞向單核細胞之分化。 95020.doc -53- 200524617 表1 腸内鈣傳輸及血清鈣（骨鈣遷移）活性對慢性劑量之19 -降-l，25-(OH)2D3及其20S異構體之2-亞甲基衍生物的反應 劑量 腸内約傳輸 血清鈣 組 (皮莫耳/天/7天） (S/M) (mg/100 ml) 維生素D缺乏 媒劑 5.5 土0·2 5.1 ±0.16 經 l，25-(OH)2D3 治療 260 6.2 ± 0.4 7.2 ±0.5 2-亞甲基-19-降-1，25- 130 5. 3 ±0.4 9·9 士0·2 (〇h)2d3 2-亞甲基-19-降-20S- 260 4.9 ±0.6 9.6 ±0.3 130 5.7 土 0.8 13.8 土0.5 l，25-(OH)2D3 260 4.6 土 0.7 14.4 土 0.6 雄性斷奶大鼠係獲自 Sprague Dawley Co.(Indianapolis, Ind·)且餵養0.47%鈣、0.3%磷維生素D缺乏之飲食1週且接 著餵養含有0.02%鈣、0.3%磷之相同飲食額外2週。在最後 一週期間，藉由腹膜内注射對其投與每天0.1 ml 95%丙二 醇及5%乙醇中之指定劑量之化合物7天。對照動物僅接受 0.1 ml之95%丙二醇、5%乙醇。最後一劑24小時後，犧牲 大鼠且藉由前述外翻囊（everted sac)技術測定腸内約傳輸 且藉由原子吸收光譜法在3 110型 Perkin Elmer設備 (Norwalk，Conn.)上測定血清#5。每組5只大鼠且該等值表 示為平均值（±)SEM。 95020.doc »54- 200524617 表2 腸内妈傳輸及血清骨妈遷移)活性對慢性劑量之19-降-1，25-(OH)2D3及其20S異構體之2-亞甲基衍生物的反應 組 腸内鈣傳輸 血清鈣 (S/M) (mg/100 ml) -D對照組 4.2 土 0.3 4·7 土 0·1 l，25-(OH)2D3 5.8 ±0.3 5.7 ±0.2 2-亞甲基-19-降-l，25-(OH)2D3 5·3 土0.5 6.4 ±0.1 2-亞甲基-19-降-20S-1，25- (〇h)2d3 5.5 ±0.6 8.0 土 0.1 雄性霍爾茲曼（Holtzman)種斷奶大鼠係獲自Sprague Dawley 公司（Indianapolis, Ind.)且银養 Suda 等人（J· Nutr. 100，1049-1052，1970)所述 0.47% 鈣、0.3% 磷之飲食 1 週且 接著餵養含有0.02%鈣及0.3%磷之相同飲食額外2週。就此 而論，其接受溶於0.1 ml 95%丙二醇/5%乙醇之指示劑量 的單一頸靜脈注射。24小時後，犧牲該等大鼠且如表1所 述測定了腸内妈傳輸及血清辦。該等化合物劑量為650 pmol且每組5只動物。該等數據表示為平均值（±)SEM。 _ 因此，本發明亦涵蓋下列式la之化合物連同彼等式I之化 合物： 95020.doc -55- 200524617 Χδ

在上式中la中’ Yi、Υ2、r6、r8及ζ之定義如前文所述。 關於 X!、Χ2、Χ3、Χ4、Xs、Χό、χ7、&及 x9 ,該等取代 基可相同或不同且選自氫或低碳數烷基，意即Cl-5烷基， 例如甲基、乙基或正丙基。另外，成對取代基&及\4、或 X5、X2或X3及&或X7、乂4或\及Xs或x9當連同該化合物 中心部分之三個相鄰碳原子（分別對應於位置8、14、13或 14、13、17或13、17、20)—起時可相同或不同且形成飽 和或不飽和、經取代或未經取代之3、4、5、6或7員碳 環。 本發明之較佳化合物可由下列式中任一式來代表·· 95020.doc -56- 200524617

95020.doc -57- 200524617

95020.doc -58- 200524617

95020.doc -59- 200524617

R

在上述式 lb、Ic、Id、Ie、If、l τ g 及 Ih 中，Yi、γ2、R6、

Rg、R、Z、Xi、X2、X3、X4、x、 6、X7及X8如前文所 述。取代基Q代表飽和或不飽和、 !取代或未經取代、包 含0、1、2、3或4個碳原子之烴絲 y 二轉’但較佳為_(CH2)k-基 團，其中k為等於2或3之整數。 製造式la-Ih化合物之方法為人所知。具體而言，參考 1994年7月7日申睛且1995年1月η日在國際公開案號 \¥0 95/01960下公開之國際申請案號1>(：：17即94/〇2294。 95020.doc 60- 200524617 流程圖1

6

95020.doc -61 - 200524617 流程圓ι(續)

95020.doc -62- 200524617 流程圖2

95020.doc -63-

Claims (1)

1. 200524617 十、申請專利範圍： 1· 一種醫藥組合物，包含化合物2-亞甲基-19-降-2〇(S)_ 1α，25-二羥基維生素D3及雙膦酸鹽。 2·如請求項1之組合物，其中該雙膦酸鹽係選自替魯膦酸 鹽（tiludronate)、阿侖膦酸鹽（alendronate)、唑來膦酸鹽 (zoledronate)、伊班膦酸鹽（ibandronate)、利塞膦酸 (etidronate)、氣屈膦酸鹽（clodronate)或帕米膦酸鹽 (pamidronate) ° 3·如請求項2之化合物，其中該雙膦酸鹽為阿侖膦酸鹽。 4·如請求項2之化合物，其中該雙膦酸鹽為利塞膦酸鹽。 5· 一種包含治療有效劑量之2-亞甲基-19-降_20(S)-l〇i，25-二 經基維生素D3及治療有效劑量之雙膦酸鹽之組合用途， 係用以製備用於治療下列病症之藥物：老年性骨質疏鬆 症、絕經期後骨質疏鬆症、骨折、移植骨、乳癌、前列 腺癌、肥胖症、骨質減少、男性骨質疏鬆症、虛弱、肌 肉損傷或肌肉貧乏症。 6·如請求項5之用途，其中經口投與2-亞曱基-19-降-20(S)-1α，25-二羥基維生素h及雙膦酸鹽。 7.如請求項5之用途，其中非經腸投與2-亞甲基-19-降-2〇(S)-la，25-二羥基維生素D3。 8·如請求項5之用途，其中經皮投與入亞甲基_19-降_2〇(8)_ 1〇：，25_二羥基維生素D3。 9·如請求項5之用途，其中實質上同時投與2-亞甲基-19-降-20(S)-ia，25-二羥基維生素d3及雙膦酸鹽。 95020.doc 200524617 1〇·如明求項5之用途，其中治療絕經期後骨質疏鬆症。 11·種包合治療有效劑量之2-亞甲基49-降-20(s)-lce，25-二 I基維生素D3及治療有效劑量之雙膦酸鹽之組合用途， 係用以製備用於治療下列病症之藥物：老年性骨質疏鬆 症、絕經期後骨質疏鬆症、骨折、移植骨、乳癌、前列 腺癌' 肥胖症、骨質減少、男性骨質疏鬆症、虛弱、肌 肉損傷或肌肉貧乏症，其中該雙膦酸鹽係選自替魯膦酸 鹽、阿侖膦酸鹽、唑來膦酸鹽、伊班膦酸鹽、利塞膦酸 鹽、依替膦酸鹽、氣屈膦酸鹽或帕米膦酸鹽。 12·如清求項π之用途，其中該雙膦酸鹽為阿侖膦酸鹽。 13·如請求項12之用途，其中治療絕經期後骨質疏鬆症。 14·如請求項1丨之用途，其中該雙膦酸鹽為利塞膦酸鹽。 15.如請求項14之用途，其中治療絕經期後骨質疏鬆症。 95020.doc 200524617 七、指定代表圖·· (一) 本案指定代表圖為：（無）。 (二) 本代表圖之元件符號簡單說明： 八、本案若有化學式時，請揭示最能顯示發明特徵的化學式 R Η

   及 R5b

   OH 95020.doc -4-