TR2022004759A2 - Bacillus subtilis bakteri̇ ai̇lesi̇ i̇çeri̇kli̇ bi̇yoteknoloji̇k ürün - Google Patents

Bacillus subtilis bakteri̇ ai̇lesi̇ i̇çeri̇kli̇ bi̇yoteknoloji̇k ürün

Info

Publication number
TR2022004759A2
TR2022004759A2 TR2022/004759A TR2022004759A TR2022004759A2 TR 2022004759 A2 TR2022004759 A2 TR 2022004759A2 TR 2022/004759 A TR2022/004759 A TR 2022/004759A TR 2022004759 A TR2022004759 A TR 2022004759A TR 2022004759 A2 TR2022004759 A2 TR 2022004759A2
Authority
TR
Turkey
Prior art keywords
bacillus subtilis
product
probiotic
subtilis
bacterial
Prior art date
Application number
TR2022/004759A
Other languages
English (en)
Inventor
Sayar Ümi̇t
Original Assignee
Sayar Organik Biyolojik Ueruenler Imalat Sanayi Ve Ticaret Ltd Sirketi
Sayar Organi̇k Bi̇yoloji̇k Ürünler İmalat Sanayi̇ Ve Ti̇caret Li̇mi̇ted Şi̇rketi̇
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Sayar Organik Biyolojik Ueruenler Imalat Sanayi Ve Ticaret Ltd Sirketi, Sayar Organi̇k Bi̇yoloji̇k Ürünler İmalat Sanayi̇ Ve Ti̇caret Li̇mi̇ted Şi̇rketi̇ filed Critical Sayar Organik Biyolojik Ueruenler Imalat Sanayi Ve Ticaret Ltd Sirketi
Priority to TR2022/004759A priority Critical patent/TR2022004759A2/tr
Publication of TR2022004759A2 publication Critical patent/TR2022004759A2/tr
Priority to PCT/TR2022/050466 priority patent/WO2023191736A1/en

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23LFOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L33/00Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/135Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74Bacteria
    • A61K35/741Probiotics
    • A61K35/742Spore-forming bacteria, e.g. Bacillus coagulans, Bacillus subtilis, clostridium or Lactobacillus sporogenes

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

Buluş, sağlık alanında probiyotik gıda takviyesi olarak geliştirilmiştir. Probiyotik gıda takviyeleri kişilerin mide bağırsak florasını düzenlemede, mikrobiyatayı dengelemede ve IBS gibi gastrointestinal hastalıkları önlemede kanıtlanmış etkilere sahiptir. Buluş özellikle, probiyotik ve gıda takviyesi olan Bacillus Subtilis bakteri ailesi içerikli biyoteknolojik ürün ile ilgilidir.

Description

TARIFNAME BACILLUS SUBTILIS BAKTERI AILESI IÇERIKLI BIYOTEKNOLOJIK ÜRÜN TEKNIK ALAN Bulus, saglik alaninda probiyotik gida takviyesi olarak gelistirilmistir. Probiyotik gida takviyeleri kisilerin mide bagirsak florasini düzenlemede, mikrobiyatayi dengelemede ve IBS gibi gastrointestinal hastaliklari önlemede kanitlanmis etkilere sahiptir. Bulus özellikle, probiyotik ve gida takviyesi olan Bacillus Subtilis bakteri ailesi içerikli biyoteknolojik ürün ile ilgilidir. TEKNIGIN BILINEN DURUMU Bacillus subtilis toprakta bulunan, hayvan ve insan bagirsaklarinda da bulunan spor olusturan gram(+) bir bakteridir. B. Subtilis sert çevre kosullarinda bile hayatta kalabilir. B.subtilis antibiyotiklerin yayginlastigi 1950'li yillardan önce gastrointestinal sistem ve üriner sistem enfeksiyonlarinda bagisiklik sistemini güçlendirici etkisi ile kullanilmaktaydi. Diger yandan B. Subtilis hayvancilik ve tavukçuluk sektörlerinde antibiyotik alternatifi olarak halen kullanilmaktadir. Özellikle son yillarda yapilan arastirmalarda mide bagirsak sagliginin insan sagligi için sanilandan çok daha büyük öneme sahip oldugu; bagisiklik sistemini yükselttigi; diabet, obezite, kardiyovasküler hastaliklar vs gibi kronik hastaliklari, ayrica otoimmün hastaliklari engelledigi ortaya çikmistir. Bacillus subtilis mide-bagirsak sistemi için faydalidir. B. subtilis bagirsak florasini düzenler. Probiyotik olarak kullanilan B.subtilis bakterisinin hastaliklardan veya antibiyotik kullanimindan sonra bozulan bagirsak mikroortamini düzelttigi düsünülmektedir. B. subtilis Bifidobacterilerin artmasini saglarken bazi Clostridium türlerinin azalmasini saglar ve laboratuar deneylerinde Lactobacillus acidophilus ve Lactobacillus reuteri'nin artisina yol açmistir. B. subtilis kabizligi rahatlatir. B. subtilis ve laktülöz rejimi fonksiyonel kabizligi bulunan yasli hastalari için güvenilir bir seçimdir. B. subtilis ishali iyilestirir. B. subtilis hastalarda antibiyotik ile iliskili diyare sikligini önemli ölçüde azaltip buna bagli bulanti, kusma, karin agrisi, siskinlik gibi semptomlari önlemektedir. Asya"da yapilan klinik çalismalarinda birinde, B. subtilis ve E.faeceum karisimlari akut ishalde kullanilmis ve bu karsim akut ishal tedavisinde ates. kusma, karin agrisi ve siskinligi hafifletmede faydali bulunmustur. Ayni çalismada kronik ishalli hastalarda ishalin geriledigi ve tedavi sonrasinda bagirsak Bifidobacteri yogunlugunda belirgin artis oldugu gösterilmistir. B. subtilis huzursuz bagirsak sendromunda faydali olabilir. B. subtilis , E. Faeceum ile birlikte bir asya çalismasinda kullanilmis ve huzursuz bagirsak sendromlu hastalarida karin agrisini azaltigi sonucuna ulasilmistir. Ancak bu konuda daha fazla çalisma yapilmasina ihtiyaç duyulmaktadir. B. subtilis inflamatuar bagirsak hastaliklarinda faydali olabilir. Ülseratif kolitli hastalari içeren asya çalismasinda tedaviye B. subtilis eklenmesi kanli ishal görülen gün sayisini oldukça azalttigi, relapssiz tam remisyona yol açtigi ve meselazin ve sülfosalazin tedavisinin etkinligini önemli ölçüde arttirdigi gösterilmistir. Yüksek dozda B. subtilis verilen bagirsak iltihabi bulunan farelerde bagirsak iltihabinin geriledigi ve bagirsakta zararli bakterilerin yerini faydali bakterilerin alarak bir denge olustugu gözlenmistir. TBD'da farkli bakteri içeriklerinden, degisik formlarda (kapsül, sase, sivi formlar) gida takviyeleri mevcuttur. Bu mevcut gida takviyeleri genelde belli basli bakteri gruplarindan olusmaktadir (Lactobacillus, Streptococcus ve Bifidobacterium grubu) ve çogunlukla tek suslu probiyotikler seklindedir. Bunlarin çalisma mekanizmalari standart olarak bagirsagi flore etmek seklindedir ancak bu bakteri içerikleri bagisikligi yükseltmede yetersiz kalmaktadir. Mevcut ürünlerin ezici çogunlugu spor formda olmamasi nedeniyle mide asitlerini asarak bagirsaklara ulasamamaktadir, dolayisiyla etki güçleri düsük olmaktadir. Piyasadaki mevcut ürünler, depolama süresi içerisinde canliligini ve gücünü yitirmektedir. Teknigin bilinen durumunda geçen probiyotiklere asagidaki linklerden ulasabilirsiniz: - ms:Ilwww.edermo.comlmiraderm-rawflor-probivotik-10-sase (Ürün adi: Kapsül Probiyotik Mikroorganizma Içeren Takviye Edici Gida) - mps:llwww.dermoecz_anem.com_lnatrol-acid_ophiIus-probiotjc-takvive- edici-gida-SO-kagsul (Ürün adi: Acidophilus 100 mg Probiotic Probiyotik Mikroorganizma Içeren Takviye Edici Gida) . https:Ilwww.enteroqermina.com.tri' (Ürün adi: Probiyotik Mikroorganizma Içeren Takviye Edici Gida (4 Milyar) Teknigin bilinen durumunda geçen TR2019/17034 numarali, "Bacillus Clausii sporlarinin pastil formunda probiyotik olarak üretilmesi" baslikli bulus, "probiyotik olarak degerlendirilen Bacillus bakteri türünün Bacillus Clausii sporlari çesidinin bogaz pastili olarak üretilmesini saglamak üzere gelistirilmis olan Bacillus Clausii sporlari pastil formunda probiyotik olarak üretilmesi olup; yüzde olarak %82,43 sorbitol, %4 karamürver extrati, %0,02 çinko sülfat, %1,2 kaydirici (Mg Stearat), gam arabik'ten meydana gelir." seklinde özetlenmistir. Içerikleri ve oranlari farklidir. Sonuç olarak yukarida anlatilan olumsuzluklardan dolayi ve mevcut kullanimin yetersizligi nedeniyle ilgili teknik alanda bir gelistirme yapilmasi gerekli kilinmistir. Dolayisiyla bu sorunlarin üstesinden gelecek bir bulusa ihtiyaç duyulmaktadir. BULUSUN TANIMI Mevcut bulus yukarida bahsedilen dezavantajlari ortadan kaldirmak ve ilgili teknik alana yeni avantajlar getirmek üzere probiyotik ve gida takviyesi olan Bacillus Subtilis bakteri ailesi içerikli biyoteknolojik ürün ile ilgilidir. Bulusun amaci amaci, insanlarin bagisikligini yükseltmek, koruyucu saglik baglaminda kronik hastaliklari önlemeyi saglamak ve ayni zamanda insanlarin yasam kalitelerini ve sürelerini artirmak, dolayisiyla insanliga hizmet etmektir. Bulus konusu ürün, içerigi olan Bacillus ailesinden bakterilerin çalisma ve etki gücü hem de spor formda olmasi nedeniyle mide asitlerini asarak bagirsaklara ulasabilme imkani bulmasi ve bagirsakta tutunma gücü ve tutunma süresinin uzunlugu nedeniyle diger bakteri gruplarindan çok daha etkilidir. Bagirsak duvarina tutunmada, duvari tamir ederek protein kaçaklarini önlemede, mikrobiyatayi dengelemede ve dolayisiyla bagisikligi yükseltmede, bunu takiben de tip 2 diyabet, obezite, kardiyovasküler hastaliklari ve otoimmün hastaliklar gibi kronik hastaliklarin önlenmesinde kiyas kabul etmeyecek bir üstünlüge sahiptir. Bunun yani sira diger bir önemli husus bulusun, nihai kullaniciya ulasincaya dek geçen depolama süresi ve kosullarinda (raf ömrü boyunca) stabilitesini saglayabilmesidir. Bulus, son kullanim tarihine kadar depolama süreçlerinde canliligini ve stabilitesini korumakta ve ilk günkü etkinligini gösterebilmektedir. Patente konu ürün, spor formda olmasi nedeniyle diger ürünlerin yasadigi etkinlik sorunlarini yasamamaktadir. Bulus, diger ürünlerin ulasamadigi ya da gücünün çok azalarak ulasabildigi bagirsaklara spor formu sayesinde gücünü koruyarak canli ulasabilmekte ve bagirsaklara uzun sure tutunabilmektedir. Bacillus Subtilis bakteri ailesi üzerine yapilmis çalismalara ve Iiterature girmis arastirmalara bakildiginda, bu bakterinin kisa zincir yag asitleriyle olan etkilesimi, antioksidan özellikleri, antimikrobiyal aktivite gücü, zararli bakterileri azaltip faydali bakterileri artirma yetenegi, Helicobacter pyloriye karsi etkili olmasi, vücudumuzda bulunan T-hücreleri ve dendiritik hücreler gibi immün sistem hücrelerini indüklemesi, infeksiyonlarla savasmada vücudu desteklemesi, organizmanin yasam süresini uzatmadaki etkileri gibi üstün özellikleri tespit edilmistir. Bacillus Subtilis bakteri ailesine ait bakteri suslarinin farkli kombinasyonlari karakterize edilerek stabil ürün formülasyonu olusturulmustur, (çoklu suslardan olusan probiyotik), ürünün kaplanmis olmasi nedeniyle bakteri korumaya alinarak mide asidi ve safraya karsi direnç göstermesi saglanmis, hedef ortama ulastiginda spor formundan uyanarak çogalan, bagirsak hücre epiteline tutunan, gastrointestinal sistemde kolonize olabilen, antimikrobiyal içerikli salgi yapabilen ve konak canliyi patojenlere karsi domine ederek, mikrobiyatayi dengelemeyi basaran, beyaz kan hücrelerini artiran, antikor üretimini artiran, bagisikligi yükselten katma degeri yüksek ve probiyotik etkisi arttirilmis patente konu ürünümüz elde edilmistir. Diger önemli husus olan ürünün stabilitesini ve etkinligini korumasi anlaminda; patente konu ürünümüz piyasadaki mevcut ürünlerin aksine, gelistirilmis formülasyonu sayesinde nihai kullaniciya ulasincaya dek geçen depolama süresi ve kosullarinda canliligini ve stabilitesini uzun sure koruyabilmektedir. Spor formunda bakteri içerikli ürünümüz depolama asamasinda kendi ambalajinda saklandigi müddetçe kendisini korumaya almakta, ancak kullanici tarafindan ürün kullanim talimatlarina göre hazirlanip bünyeye alindiktan sonra hedef organizmaya ulastiginda tekrar aktif olmakta ve bu sekilde raf ömrü boyunca ilk günkü etkinligini gösterebilmektedir, ambalaji üzerine beyan edilen bakteri miktarini korumaktadir. Bulus, uygulanmadan önce ve uygulandiktan sonra asagidaki degerler elde edilmistir ve kullanimdan sonra ilgili bakteriler artmistir. Teknigin bilinen durumunda da ilgili bakterilerin degisiminin çesitli kaynaklarda olumlu etkilerinden bahsedilmistir. Bu bilgiler asagida detayli olarak verilmistir; Alfa çesitlilik analizine bakildiginda uygulama sonrasinda Shannon çesitlilikte bir farklilik görülmezken chao(p<0,006) analizinin bollugunda azalma görülmüstür. Bu da uygulama sonrasi grubunu birbirine benzestigini gösterir. Beta çesitlilik analizi olan PCAgrafiginde ise yine uygulama sonrasinda bir daralma oldugu ve sonrasi grup içerisinde yer alan numunelerin birbirine benzer özellik gösterdigi görülmektedir. UYGULAMA ÖNCESI Bacteroides caccae p<0,029; Gidalardan alinan Iiflerin yikilmasina yardimci oldugu gösterilmistir (Stefania Magnüsdöttir ve ark. 2016). Ayrica T2D ve lBD hastalarinda kontrollere göre miktari artmaktadir (Huanzi Zhong ve ark. 2019, Vicente Pérez-Brocal ve ark. 2015, Katja Lucke ve ark. 2006). Prevotella stercorea p<0,019 Prevotella copri' ile birlikte artisi HlV enfeksiyonlu kisilerde miyeloid dendritik hücrelerin yüksek CD40 ekspresyonu ile iliskili oldugunu bildirmistir. (Dillon SM ve Ruminococcus flavefaciens p<0,035 Bitki hücre duvari materyalini parçalayabilen az sayida selülolitik bakteri türünden biridir. R. flavefaciens, ksilanazlar, selülazlar, pektinazlar ve esterazlar dahil olmak üzere çok çesitli bitki hücre duvarini yikan enzimlere sahiptir.( Shi Y ve ark. 1997) Dorea formicigenerans p<0,033 Pediyatrik ve yetiskin IBS hasta bagirsaginda gaz üretimi ile iliskili olarak bollugu önemli ölçüde arttigi bildirilmistir. Dorea türleri, müsinlerin terminal uçlarinda yaygin olarak bulunan sialik asitleri metabolize etme kabiliyeti sayesinde müsin yikimiyla iliskili mukoza ile iliskili bir bakteridir. Bu asitlerin salimi potansiyel olarak bagirsak geçirgenligini arttirir. Dorea cinsinin üyeleri ayrica ülseratif kolitli hastalarda daha fazla miktarda bulunmustur(Rajilic-Stojanovic, M. Ve ark. 2011; Nomura, T. Ve ark. 2005). UYGULAMA SONRASI Ile ksilanaz / ksilosidaz arasinda bir korelasyon oldugu görülmüstür (Jing Li, ve ark. 2017). Hemiselülazlar, arabinoksilanaz veya lif parçalayici enzim olarak da bilinirler (Smith, J. 2011) . Ayni zamanda bütirat, Iaktat ve asetat üreticileridir (Anne Willems and Matthew D. Collins 2009). Ruminococcus callidus p<0,014 Nisasta ve ksilan da dahil olmak üzere diger karmasik polisakkaritleri yikarak olusturdugu ürünler ile bagirsak mikrobiyal toplulugu ve insan sagligi üzerinde bir etkilidir (Hiroko Nagao-Kitamoto et. al. 2017). Inulin takviyesine bagli diyet sonucunda R. callidus bagirsak sendromlari ve yasam kalitesi açisindan negatif korelasyon gösterdigi bildirilmistir (Sophie Hiel et. al. 2019). Bifidobacterium bifidum p<0,021 Bollugunun artmasi ökaryotik hücrelerde anti-inflamatuar sitokinlerin ve siki baglanti proteinlerinin ekspresyonunu da destekledigi gösterilmistir (Chichlowski ve digerleri, 2012). Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium dentium ve bir B. Iongum susu, sistemik ve bagirsak seviyelerinde TH1 ve TH2 sitokinlerini indüklemistir (Odile Ménard ve ark 2008). Çocukluk döneminde bol bulunan B. bifidum yas ilerledikçe azalma egilimde oldugu belirtilmistir Chaplin ve ark. (2015). Antibiyotik uygulamasi sonrasinda B. bifidum ile tedavi edilen grupta mikrobiyal çesitliligi geri getirmese de konakçi sagligin iyilesmesine katkida bulunabilir (Ojima Miriam ve Bulusun detayli açiklama bölümünde yukaridaki çalismanin detaylari aktarilacaktir. Bulus konusu BACILLUS SUBTILIS BAKTERI AILESI IÇERIKLI BIYOTEKNOLOJIK ÜRÜN daha büyük ve küçük, farkli ölçülerde, gramajlarda ve farkli boyutlarda üretilebilir. BULUSUN DETAYLI AÇIKLANMASI Bu detayli açiklamada bulus konusu BACILLUS SUBTlLlS BAKTERI AILESI IÇERIKLI BIYOTEKNOLOJIK ÜRÜN yapilanmasinin tercih edilen alternatifleri, sadece konunun daha iyi anlasilmasina yönelik olarak ve hiçbir sinirlayici etki olusturmayacak sekilde açiklanmaktadir. Bulus; deiyonize su ve Bacillus Subtilis bakteri sus kombinasyonu içermektedir. Bulus; agirlikça %95-98,5 oraninda deiyonize su ve agirlikça %1,5-5 oraninda Bacillus Subtilis sus kombinasyonu içermektedir. Bulusta kullanilan Bacillus Subtilis sus kombinasyonunun yogunlugu 1-10x109 CFU/ml'dir. Bulusta kullanilan Toplam bakteri sayiminin birimi CFU/mL'dir. CFU (Coloni-Forming Units) Koloni Olusturan Birimler(KOB) anlamini ifade etmektedir. Bulus için bir çalisma grubu olusturulmustur ve bu çalisma grubunun sonuçlari asagida verilmistir. olmak üzere) hasta dahil edilmistir. Hastalarin bulusu kullanmadan önce IBS-SSS aralarindaki fark istatistiksel olarak anlamli bulunmustur (p<0.001). Hemogram parametreleri ve CRP, ESR açisindan bulus kullanim öncesi ve sonrasi yapilan karsilastirmada; sadece lökosit degerlerinde ise kullanim sonrasi istatistiksel olarak anlamli düsüs tespit edildi (p=0.007). Bulusun kullanimi sonrasi HB, CRP ve MPV'de düsüs gözlenirken aralarindaki fark anlamli degildi (p0.05). NLR ve PLR oraninda ise bulusun kullanimi sonrasinda istatistiksel olarak anlamli olmayan bir artis gözlenmistir (p0.05). Bulusun kullanimi sonrasi TAS, TOS, OSl, IL-10,IFN- gama, düzeylerinde artis, lL-6 ve TNF-oi düzeylerinde düsüs gözlenirken, aralarinda fark istatistiksel olarak anlamli degildi (p0.05). Çalisma grubunda degerlendirilen tüm parametlerin analiz sonuçlari tablo 1 'de özetlenmistir. Tablo 1. Çalisma grubunda tedavi sonrasinda laboratuar parametrelerindeki de i imin de erlendirilmesi ürün kullanim öncesi ve sonrasi Before treatment After treatment P Bulusta önce Bacillus Subtilis Bakteri suslarinin izole edilerek lab ortaminda formülüze edilmistir. Bu islem adimi tamamen laboratuvar ortaminda yapilan çalismalari ve Bacillus Subtilis bakteri suslarinin farkli kombinasyonlariyla gelistirilerek nihai ürünün yapilandirilmasini kapsar. Islem adim lab asamasidir. Daha sonra, Formülüze edilen bakteri suslarinin biyokütle üretimi yapilmistir. Ikinci islem adimi, nihai ürünün gelistirilmesini takip eden biyokütle üretimidir ve yine lab ortamini kapsamaktadir. Üretime hazir haldeki bakteri suslarinin üretim tesisinde bulusta geçen formüle uygun oranlarda ve sartlarda nihai üretim ve dolumunun yapilmasi saglanmistir. Bacillus bakteri ailesine ait Bacillus Subtilis ailesinden bakteri suslari sivi besi ortaminda çözüldükten sonra 37 C° sicaklik ve 140 rpm çalkalama hizinda 24 saat inkübe edilmektedir. Sonrasinda sivi ortamda çogalan hücreler seyreltilmekte ve tekli koloniler elde edilmektedir. Izolatlarin moleküler analizi yapilmaktadir. Izolasyon ve moleküler tanimlama sonrasinda seçilen suslar ile optimize edilmis besi ortaminda biyokütle üretimi yapilmaktadir. Formülüzasyonu takiben, seçilen suslarin asit toleransi ve safra direnci saptanmaktadir. Canli hücre sayimi yapilarak, bakterinin canli kalma yüzdesel verimliligi hesaplanmaktadir. Akabinde simüle edilmis gastrointestinal kosul altinda hayatta kalma becerisi ölçülerek, Klinik ve Laboratuvar Standartlari Enstitüsü'ne (NCCSI) göre dayanikli olarak tanimlanmistir. Konsantre edilen bakteri suslari belirli hacimlerde ( örnegin;200 ml, 20ml gibi) mikro santrifüj tüpleri içerisinde birlestirildikten sonra, korunmanin maksimum düzeyde saglanmasi amaciyla üzerlerine ürüne özgü koruyucu madde eklenmektedir. Ürün, +5 ile +2500' lerde saklanarak belirli zaman araliklarinda hücre sayimi ile stabilite tayini yapilmaktadir. Tüm bu süreçlerin tamamlanmasiyla probiyotik biyokütle üretimi asamasi tamamlanmaktadir. 316 paslanmaz çelik kazanda, 21 C° ye sabitlenmis deiyonize su içerisine, bakteri suslarindan formülüze edilmis etken madde ilave edilir, 2 saat boyunca mikserle havali karistirilarak doluma hazir hale getirilir. Ambalajlanan ürün oda sicakliginda depolama sartlarinda depolanir. Bulusta tercihen agirlikça %985 oraninda yer alan deiyonize su tasiyici madde olarak kullanilmaktadir. Yine tercihen %1,5 oraninda kullanilan Bacillus Subtilis sus kombinasyonumuz etken madde olup nihai ürünümüzün fonksiyonunu yerine getiren temel maddedir. Bulusta ana tasiyici madde deiyonize sudur. Formülasyona uygun oranda deiyonize suya eklenen bakteri suslarindan formüle edilmis ürün sivi formdadir. Bulus konusu ürünümüzde, sivi formda probiyotik üretim metodlarinda kullanilan tasiyici madde olan deiyonize su %95 oraninda kullanim mümkün olsa da optimum oran olan %985 oraninda tercih edilerek kullanilmaktadir. Su tasiyici madde olmasi nedeniyle, ürünün fonksiyonalitesini gerçeklestirmese de üründen çikartilmasi mümkün degildir. Bulusun üretim asamasi iki ayri bölüm altinda açiklanabilir. Birinci bölüm; bacillus subtilis bakteri ailesinden sus kombinasyonlariyla olusturulan formülün laboratuvar ortaminda elde edilmesidir. Bacillus Sp. Bakteri suslarindan olusan kombinasyonun farkli koloni sayilariyla çalismalari yapilmis, 1-10 x 109 CFU/ml (mililitredeki koloni olusturan birim) koloni yogunlugunda optimum sonuçlari göstermis ve formül bu koloni araliginda en ideal fonksiyonel oran olarak tespit edilmistir. Bu aralikta olusturulan formülden ilk probiyotik ruhsatlandirmasi ise 5x109 CFU olarak yapilmis olup, bu aralik içerisinde kalmak kosuluyla farkli yogunlukta koloniye sahip formüllerle Ar-ge çalismalari devam etmektedir. Ikinci bölüm ise; olusturulan bacillus subtilis formülünün endüstriyel üretim asamasidir. Ürün formülünün sivi formda olmasi sebebiyle probiyotik üretimi için tasiyici maddeye ihtiyaç duyulmaktadir. Tasiyici madde olarak saf su yani deiyonize su kullanilmaktadir. Probiyotik ürünün hedef etkinligi saglayan asil unsuru bakteri formulüdür. Fiziksel karisimda ise agirlikça deiyonize su %95-98,5 araliginda, bakteri formulü ise %1,5-5 oraninda kullanilmasi yeterli olmaktadir. Formülün deiyonize suya ilave edilmesi, 2 saat süreyle deiyonize suda mayalanmaya yani sporlanmaya birakilmasini takiben probiyotik ürün ambalajlanarak sevkiyata hazir hale gelmektedir. Bulusun birinci asamasi bacillus bakteri suslarinin belirli bir kombinasyonla formulize edilmesi olup, bunun alternatif ya da benzer bir kompozisyonu simdilik söz konusu degildir. Ancak ulasilmak istenen nihai hedefe göre, ikinci bölümde farkli bir kompozisyon, farkli / seyreltilmis / arttirilmis koloni sayilari ya da enzim, ekstrakt, vitamin vs gibi ilave bilesenler eklenerek ürünün farklilastirilmasi mümkün olup hali hazirda bununla ilgili AR-GE çalismalari da devam etmektedir. Probiyotik ürünlerin insan üzerinde ilk ve en etkili oldugu alan mide - bagirsak sistemi olup, insan vücuduna ve bagisiklik sistemine etkileri buradan baslar. Buradan hareketle ürünümüzün mide - bagirsak sistemi üzerindeki etkinligini tetkik etmek üzere Gazi Üniversitesihde GASTROENTEROLOJI biriminde 11 kadin hasta + 11 erkek hasta üzerinde klinik testler gerçeklestirilmistir. Yukarida sonuçlari gösterildigi üzere; Gastroentroloji birimi tarafindan takip edilen, IBS hastasi olan, ishal, kabizlik, siskinlik gibi sikintilar yasayan 22 hastanin ürün kullanim öncesi ve sonrasi alinan kan ve gaitalari tetkik edilmis ve ekli dosyada sunulan sonuçlar elde edilmistir. Bu 22 kisinin test sonuçlarinda vücuda faydali bakterilerin arttigi, patojenlerin azaldigi tespit edilmistir. Hastalarin genel durumu iyi olarak gözlenmis, hastalardaki ishal, kabizlik, siskinlik, mide yanmasi vs gibi sikayetler ortadan kalkmistir. TR TR TR TR TR TR

Claims (5)

ISTEMLER
1- Bulus bacillus subtilis bakteri ailesi içerikli biyoteknolojik ürün olup, özelligi; - Deiyonize su ve bacillus subtilis bakteri sus kombinasyonu içermesiyle karakterize edilmesidir.
2- Bulus istem 1'deki gibi bacillus subtilis bakteri ailesi içerikli biyoteknolojik ürün olup, özelligi; içeriginde agirlikça %95-98,5 oraninda deiyonize su ve agirlikça
3- Bulus istem 1 veya 2'deki gibi bacillus subtilis bakteri sus kombinasyonu olup, özelligi; yogunlugunun 1-1Ox109 CFU/ml olmasidir.
4- Bulus istem 1 veya 3'teki gibi bacillus subtilis bakteri sus kombinasyonu olup, özelligi; yogunlugunun tercihen 5 X109 CFU/ml olmasidir.
5- Bulus istem 1 veya 2'deki gibi bacillus subtilis bakteri ailesi içerikli biyoteknolojik ürün olupi özelligi; içeriginde agirlikça tercihen %985 oraninda deiyonize su ve agirlikça tercihen %1,5 oraninda bacillus subtilis sus kombinasyonu içermesidir.
TR2022/004759A 2022-03-28 2022-03-28 Bacillus subtilis bakteri̇ ai̇lesi̇ i̇çeri̇kli̇ bi̇yoteknoloji̇k ürün TR2022004759A2 (tr)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
TR2022/004759A TR2022004759A2 (tr) 2022-03-28 2022-03-28 Bacillus subtilis bakteri̇ ai̇lesi̇ i̇çeri̇kli̇ bi̇yoteknoloji̇k ürün
PCT/TR2022/050466 WO2023191736A1 (en) 2022-03-28 2022-05-23 Bacillus subtilis bacteria family-containing biotechnological product

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
TR2022/004759A TR2022004759A2 (tr) 2022-03-28 2022-03-28 Bacillus subtilis bakteri̇ ai̇lesi̇ i̇çeri̇kli̇ bi̇yoteknoloji̇k ürün

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TR2022004759A2 true TR2022004759A2 (tr) 2022-04-21

Family

ID=85128057

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TR2022/004759A TR2022004759A2 (tr) 2022-03-28 2022-03-28 Bacillus subtilis bakteri̇ ai̇lesi̇ i̇çeri̇kli̇ bi̇yoteknoloji̇k ürün

Country Status (2)

Country Link
TR (1) TR2022004759A2 (tr)
WO (1) WO2023191736A1 (tr)

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DK0986314T3 (da) * 1997-06-03 2009-01-19 Ganeden Biotech Inc Probiotisk mælkesyrebakterie til behandling af bakterielle infektioner associeret med SIDS
CA2559183A1 (en) * 2003-03-11 2004-09-23 Inatech International Inc. Probiotic micro-organisms and uses thereof
US7759105B2 (en) * 2003-08-29 2010-07-20 Cobb & Company, Llp Probiotic composition useful for dietary augmentation and/or combating disease states and adverse physiological conditions
MX348937B (es) * 2010-08-25 2017-07-03 Tate & Lyle Ingredients Americas Llc Producto simbiotico.

Also Published As

Publication number Publication date
WO2023191736A1 (en) 2023-10-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Le et al. Efficacy of Lactobacillus plantarum in prevention of inflammatory bowel disease
Torres-Maravilla et al. Identification of novel anti-inflammatory probiotic strains isolated from pulque
Del Piano et al. Probiotics: from research to consumer
Grześkowiak et al. Microbiota and probiotics in canine and feline welfare
EP3052111B1 (en) Compositions comprising a defined microbiome and methods of use thereof
US20180207165A1 (en) Methods and compositions for stimulating beneficial bacteria in the gastrointestinal tract
Panigrahi et al. The viability of probiotic bacteria as a factor influencing the immune response in rainbow trout Oncorhynchus mykiss
Panigrahi et al. Immune responses in rainbow trout Oncorhynchus mykiss induced by a potential probiotic bacteria Lactobacillus rhamnosus JCM 1136
Lee Effects of diet on gut microbiota profile and the implications for health and disease
CA3215700A1 (en) Lactobacillus reuteri, and use, composition, drug and food thereof
Klayraung et al. Antibacterial and antioxidant activities of acid and bile resistant strains of Lactobacillus fermentum isolated from miang
Poppi et al. Effect of Lactobacillus sp. isolates supernatant on Escherichia coli O157: H7 enhances the role of organic acids production as a factor for pathogen control
CN102481322A (zh) 预防和治疗退化性疾病的细菌组合物
Liu et al. Lactobacillus plantarum BSGP201683 isolated from giant panda feces attenuated inflammation and improved gut microflora in mice challenged with enterotoxigenic Escherichia coli
Moens et al. Lactobacillus rhamnosus GG and Saccharomyces cerevisiae boulardii exert synergistic antipathogenic activity in vitro against enterotoxigenic Escherichia coli
Kanjan et al. Antibacterial metabolites secreted under glucose-limited environment of the mimicked proximal colon model by lactobacilli abundant in infant feces
EP3536330A1 (en) Infant &amp; toddler formula containing a virus preparation
KR102036374B1 (ko) 마이코박테리움 파라투버클로시스에 대한 항균효과를 갖는 신규한 락토바실러스 파라카제이 균주 및 이를 함유하는 염증성 장 질환의 예방 또는 치료용 조성물
TR2022004759A2 (tr) Bacillus subtilis bakteri̇ ai̇lesi̇ i̇çeri̇kli̇ bi̇yoteknoloji̇k ürün
Chauhan et al. Probiotic, prebiotic and synbiotics in the prevention of lifestyle disorders
Calo-Mata et al. Intestinal microbiota: first barrier against gut-affecting pathogens
Fliss et al. Biological control of human digestive microbiota using antimicrobial cultures and bacteriocins
Asahara et al. Antibacterial effect of fermented milk containing Bifidobacterium breve, Bifidobacterium bifidum and Lactobacillus acidophilus against indigenous Escherichia coli infection in mice
Hmar et al. An Insight into the Combination of Probiotics and their Implications for Human Health
O Khidhr et al. Isolation and Identification of Saccharomyces cerevisiae var boulardii and its Uses as a Probiotic (in vitro)