TH97352B - เมล็ดพืชถ่ายโอนยีนที่มีไลซีนเพิ่มขึ้น - Google Patents

Abstract

DC60 (28/12/49) สิ่งที่ได้รับการเปิดเผยไว้ในคำขอรับสิทธิบัตรนี้ คือพืชถ่ายโอนยีนที่มี DNA คอนสตรัคท์ใหม่จากภายนอกที่แสดงออกเป็นไดไฮโดรไดพิโคลินิคแอซิดซินเธส และ โมเลกุลของการกดยีน สำหรับไลซีนกลูตาเรทรีดัคเทส ซึ่งการออกฤทธิ์ของคอนสตรัคท์นั้นให้ผล เป็นไลซีนที่เพิ่มขึ้นในเมล็ดของพืช สิ่งที่ได้รับการเปิดเผยไว้ในคำขอรับสิทธิบัตรนี้ คือพืชถ่ายโอนยีนที่มี DNA คอนสตรัคท์ใหม่จากภายนอกที่แสดงออกเป็นไดไฮโดรไดพิโคลินิคแอซิดซินเธส และ โมเลกุลของการกดยีน สำหรับไลซีนกลูตาเรทรีดัคเทส ซึ่งการออกฤทธิ์ของคอนสตรัคท์นั้นให้ผล เป็นไลซีนที่เพิ่มขึ้นในเมล็ดของพืช

Claims (37)

แก้ไขใหม่ 15 ก.ย. 2560 1. โครงสร้าง DNA ซึ่งประกอบรวมด้วยคาสเซตต์ของการแสดงออกในพืชตามที่พบใน พลาสมิด pMON93093 ตามที่ฝากไว้ด้วย ATCC เป็น PTA - 6734 ------------------------------------------------- (เดิม)

1. DNA คอนสตรัคท์ที่ประกอบด้วย คาสเซตต์ของการแสดงออกในพืชชนิด เฮทเทอโรโลกัสที่กำหนดรหัสไดไฮโดรพิโคลินิคแอซิดซินเธสที่จัดว่าต้านทานต่อการยับยั้ง แบบป้อนกลับโดย L-ไลซีนอิสระ และมีส่วนเพิ่มเติมที่ประกอบด้วยโมเลกุลของ DNA ที่ได้รับการ ลอกรหัส เพื่อผลิตโมเลกุลของ RNA ที่กดไลซีนคีโตกลูตาเรทรีดัคเทส/แซคคาโรปีนดีไฮโดร เจนเนส ซึ่งแต่ละโมเลกุลของ DNA เชื่อมต่ออย่างดำเนินการได้อยู่กับโปรโมเตอร์ที่ออกฤทธิ์เพิ่มขึ้น ในเมล็ด

2. DNA คอนสตรัคท์ของข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งโปรโมเตอร์ส่งเสริมการลอกรหัส ของโมเลกุลของ DNA ที่ส่วนใหญ่อยู่ในเอนโดสเปิร์ม หรือเอมบริโอของเมล็ด

3. DNA คอนสตรัคท์ของข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ประกอบด้วยคาสเซตต์ของการ แสดงออกเพิ่มเติมที่ประกอบด้วยโมเลกุลของ DNA ที่กำหนดรหัสแอสปาร์เตทไคเนสที่จัดว่า ต้านทานต่อการยับยั้งแบบป้อนกลับโดย L-ไลซีนอิสระ

4. DNA คอนสตรัคท์ของข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งโมเลกุลของ DNA ที่กำหนดรหัส เพปไทด์สัญญาณของการส่งผ่านเข้าสู่พลาสติก เชื่อมต่ออย่างดำเนินการได้อยู่กับโมเลกุลของ DNA ที่กำหนดรหัสไดโฮโดรไดพิโคลินิคแอซิดซินเธส

5. DNA คอนสตรัคท์ของข้อถือสิทธิที่ 3 ซึ่งโมเลกุลของ DNA ที่กำหนดรหัส เพปไทด์สัญญาณของการส่งผ่านเข้าสู่พลาสติก เชื่อมต่ออย่างดำเนินการได้อยู่กับโมเลกุลของ DNA ที่กำหนดรหัสแอสปาร์เตสไคเนส

6. DNA คอนสตรัคท์ของข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งโมเลกุลของ DNA ที่กำหนดรหัส ไดไฮโดรไดพิโคลินิคแอซิดซินเธสคือ SEQ ID NO: 1

7. DNA คอนสตรัคท์ของข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งโมเลกุลของ DNA ที่ได้รับการลอก รหัสเพื่อผลิตโมเลกุลของ RNA ที่ไลซีนคีโตกลูตาเรทรีดัคเทส/แซคคาโรปีนดีไฮโดรเจนเนสนั้น โฮโมโลกัส หรือเข้าคู่ได้กับ SEQ ID NO: 2 หรือส่วนหนึ่งของลำดับนี้ที่เพียงพอในการกด ดีไฮโดรเจนเนสดังกล่าว

8. DNA คอนสตรัคท์ของข้อถือสิทธิที่ 3 ซึ่งโมเลกุลของ DNA ที่กำหนดรหัส แอสปาร์เตทไคเนสคือ SEQ ID NO: 3

9. วิธีการเพิ่มไลซีนในเมล็ดพันธุ์พืชที่ประกอบด้วยคาสเซตต์ของการแสดงออก ในพืชจากภายนอกหนึ่งคาสเซตต์หรือมากกว่าที่ประกอบด้วย โมเลกุล DNA ที่กำหนดรหัส ไดไฮโดรไดพิโคลินิคแอซิดซินเธสที่จัดว่าต้านทานต่อการยับยั้งแบบป้อนกลับโดย L-ไลซีนอิสระ, โมเลกุลของ DNA ที่ได้รับการลอกรหัสเพื่อผลิตโมเลกุลของ RNA ที่กดไลซีนคีโตกลูตาเรท รีดัคเทส/แซคคาโรปีนดีไฮโดรเจนเนส และโมเลกุลของ DNA ที่กำหนดรหัสแอสปาร์เตทไคเนส ที่ต้านทานต่อการป้อนกลับของไลซิน โมเลกุลของ DNA ทั้งหลายเชื่อมต่ออย่างดำเนินการได้ กับโมเลกุลของโปรโมเตอร์หนึ่งโมเลกุลหรือมากกว่าที่ทำให้เกิดการลอกรหัสของโมเลกุลของ RNA หนึ่งโมเลกุลหรือมากกว่าในเนื้อเยื่อของเมล็ดข้าวโพด

10. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 9, ซึ่งคอนสตรัคท์มีส่วนเพิ่มเติมที่ประกอบด้วย โมเลกุลของ DNA ที่กำหนดรหัส 5-อีนอลไพรูวิลชิคิเมท

11. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 9, ซึ่งโมเลกุลของ DNA ที่กำหนดรหัสไดไฮโดร ไดพิโคลินิคแอซิดซินเธสที่เป็นลำดับ DNA โครงสร้างนั้นคือ SEQ ID NO: 1

12. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 9, ซึ่งโมเลกุลของ DNA ที่กำหนดรหัสแอสปาร์เตท ไคเนสคือ SEQ ID NO: 3

13. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 9, ซึ่งโมเลกุลของ DNA ที่ได้รับการลอกรหัสเพื่อ ผลิตโมเลกุลของ RNA ที่กดไลซีนคีโตกลูตาเรทรีดัคเทส/แซคคาโรปีนดีไฮโดรเจนเนสนั้นคือ SEQ ID NO: 9

14. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 9, ซึ่ง 5-อีนอลไพรูวิลชิคิเมท 3-ฟอสเฟตซินเธส ดังกล่าวคือ aroA: CP4: EPSPS

15. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 9, ซึ่งโมเลกุลของ DNA มีส่วนเพิ่มเติมที่ ประกอบด้วยลำดับ DNA ที่กำหนดรหัสเพปไทด์สัญญาณของการส่งผ่านเข้าสู่คลอโรพลาสต์ที่ เชื่อมต่อ อย่างดำเนินการได้กับลำดับ DNA ที่กำหนดรหัสไดไฮโดรไดพิโคลินิคแอซิค ซินเธสหรือแอสปาร์เตทไคเนส

16. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 9, ซึ่งโปรโทเตอร์เลือกได้จากกลุ่มที่ประกอบด้วย โปรโมเตอร์ B32 ของ Zea mays, โปรโมเตอร์แกมมาโคอิกซินของ Zea mays และโปรโมเตอร์ L3 ของ Zea mays

17. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 9, โดยที่พืชคือต้นข้าวโพด

18. DNA คอนสตรัคท์ที่ประกอบด้วยพลาสมิค pMON 93092 ที่ประกอบด้วย คาสเซตต์ของการแสดงออกในพืชดังที่ส่งเก็บไว้กับ ATCC1 ด้วยหมายเลข PTA-6733 หรือ พลาสมิค pMON 93093 ที่ประกอบด้วยคาสเซตต์ของการแสดงออกในพืชดังที่ส่งเก็บไว้กับ ATCC ด้วยหมายเลข PTA-6734

19. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 9, โดยที่เมล็ดที่ภายในยีโนมของมันประกอบด้วย คาส เซตต์ของการแสดงออกในพืชอย่างน้อยหนึ่งคาสเซตต์ที่เป็นพลาสมิด pMON 93092 หรือ pMON 93093

20. ผลผลิตที่ได้รับการดำเนินกระบวนการแล้วของเมล็ดของข้อถือสิทธิที่ 19 ซึ่ง ผลผลิตดังกล่าวคือ อาหารสัตว์, แป้ง, วัสดุบด หรือสารผสมของโปรตีนที่ได้รับการทำให้บริสุทธิ์แล้ว เป็นบางส่วน

21. ผลผลิตที่ได้รับการดำเนินกระบวนการแล้วของเมล็ดของข้อถือสิทธิที่ 19 ที่ประกอบด้วยชิ้นส่วนของ DNA ธรรมชาติ และชิ้นส่วนของคาสเซตต์ของการแสดงออกในพืช ที่มีจากภายนอก

22. เซลล์ข้าวโพดที่ในหลอดทดลองที่ประกอบด้วย คาสเซตต์ของการแสดงออกใน พืชที่มาจากภายนอกที่ประกอบด้วย โมเลกุลของ DNA ที่กำหนดรหัสไดไฮโดพิโคลินิคแอซิดซิน เธสที่จัดว่าต้านทานต่อการยับยั้งแบบป้อนกลับโดย L-ไลซีน, โมเลกุลของ DNA ที่ได้รับการลอก รหัสเพื่อผลิตโมเลกุลของ RNA ที่กดไลซีนคีโตกลูตาเรทรีดัคเทส/แซคคาโรปีนดีไฮโดรเจนเนส และโมเลกุลของ DNA ที่กำหนดรหัสแอสปาร์เตทไคเนสที่ต้านทานการป้อนกลับของไลซีนโมเลกุล ของ DNA ทั้งหลายเชื่อมต่ออย่างดำเนินการได้กับโมเลกุลของโปรโมเตอร์หนึ่งโมเลกุล หรือ มากกว่าที่ทำให้เกิดการลอกรหัสของโมเลกุลของ RNA หนึ่งโมเลกุลหรือมากกว่าในเนื้อเยื่อของ เมล็ดข้าวโพด

23. เซลล์ในหลอดทดลองของข้อถือสิทธิที่ 22 ซึ่งคอนสตรัคท์มีส่วนเพิ่มเติมที่ ประกอบด้วยโมเลกุลของ DNA ที่กำหนดรหัส 5-อีนอลโพรูวิลชิคิเมท 3-ฟอสเฟตซินเธส

24. เซลล์ในหลอดทดลองของข้อถือสิทธิที่ 22 ซึ่งโมเลกุลของ DNA ที่กำหนดรหัส ไดไฮโดรไดพิโคลินิคแอซิดซินเธสที่เป็นลำดับ DNA โครงสร้างคือ SEQ ID NO : 1

25. เซลล์ในหลอดทดลองของข้อถือสิทธิที่ 22 ซึ่งโมเลกุลของ DNA ที่กำหนด รหัสแอสปาร์เตทไคเนส คือ SEQ ID NO: 3

26. เซลล์ในหลอดทดลองของข้อถือสิทธิที่ 22 ซึ่งโมลเลกุลของ DNA ที่ได้รับการ ลอกรหัสเพื่อผลิตโมเลกุลของ RNA ที่กดไลซีนคีโตกลูตาเรทรีดัคเทส/แซคคาโรปีนดีไฮโดรเจนเน สคือ SEQ ID NO : 9 (ลำดับ bfx)

27. เซลล์ในหลอดทดลองของข้อถือสิทธิที่ 23 ซึ่ง 5-อีนอลไพรูวิลชีคิเมท 3- ฟอสเฟตซินเธส ดังกล่าวคือ aroA: CP4 FPSPS

28. เซลล์ในหลอดทดลองของข้อถือสิทธิที่ 22 ซึ่งโมเลกุลของ DNA มีส่วน เพิ่มเติมที่ประกอบด้วยลำดับ DNA ที่กำหนดรหัสเพปไทด์สัญญาณของการส่งผ่านเข้าสู่คลอโรพ ลาสต์ที่เชื่อมต่อ อย่างดำเนินการได้อยู่กับลำดับ DNA ที่กำหนดรหัสไดไฮโดรไดพิโคลินิคแอซิดซิน เธสหรือแอสปาร์เตทไคเนส

29. เซลล์ในหลอดทดลองของข้อถือสิทธิที่ 22 ซึ่งโปรโมเตอร์คือโปรโมเตอร์ B32 ของ Zea mays, โปรโมเตอร์แกมมาโคอิกซินของ Zea mays หรือ โปรโมเตอร์ L3 ของ Zea mays

30. เซลล์ในหลอดทดลองของข้อถือสิทธิที่ 22 ที่มีปริมาณไลซีนสูงกว่า เมล็ด ข้าวโพดที่ไม่มีคาสเซตต์ของการแสดงออกในพืชที่มาจากภายนอก

31. เซลล์ในหลอดทดลองที่ภายในยีโนมของมันประกอบด้วยคาสเซตต์ของการ แสดงออกในพืชที่เป็น pMON 93092 หรือพลาสมิด pMON 93093

32. ผลผลิตที่ได้รับการทำกรรมวิธีแล้วที่ประกอบด้วย เซลล์ที่ยังคงสภาพหรือ เซลล์ที่แตกแล้วตามที่กำหนดไว้ในข้อถือสิทธิที่ 22 ซึ่งผลผลิตนั้นคือ อาหารสัตว์, วัสดุบด หรือแป้ง

33. วิธีการสำหรับทำเมล็ดธัญพืชที่ประกอบด้วยขั้นตอนของ a) การเปลี่ยนแปลงพันธุกรรมของเซลล์ของสายพันธุ์พืชด้วยคาสเซตต์ ของการแสดงออกในพืชที่เป็นพลาสมิด pMON 93092 หรือ pMON 93093 b) การทำให้เซลล์ดังกล่าวเกิดเป็นต้นพืชขึ้นใหม่ให้เป็นต้นพืชที่สืบพันธุ์ ต่อได้ที่มีคาสเซตต์ของการแสดงออกนั้นอยู่ในยีโนมของมัน และ c) การเก็บเกี่ยวเมล็ดจากต้นพืชดังกล่าว โดยวิธีการนี้เมล็ดมีปริมาณไลซีนสูงกว่าเมล็ดของพืชสายพันธุ์เดียวกันที่ไม่ถูก เปลี่ยนแปลงพันธุกรรมด้วยคอนสตรัคท์

34. วิธีการสำหรับทำให้ได้เมล็ดที่ประกอบด้วยขั้นตอนของ : a) การเลือกต้นพืชพ่อแม่ที่หนึ่ง และที่สองที่แต่ละพ่อแม่ประกอบด้วย คาสเซตต์ของการแสดงออกในพืชชนิดเฮทเทอโรโลกัสหนึ่งคาสเซตต์หรือ มากกว่าที่เลือกได้จากกลุ่มที่ประกอบด้วย (i) คาสเซตต์ที่ประกอบด้วย โมเลกุลของ DNA ที่กำหนดรหัสไดไฮโดรไดพิโคลินิคแอซิดซินเธส ที่จัดว่าต้านทานต่อการยับยั้งแบบป้อนกลับโดย L-ไลซีนอิสระ; (ii) โมเลกุลของ RNA ที่กดไลซีนคีโตกลูตาเรทรีดัคเทส/แซคคาโรปีน ดีไฮโโรเจนเนส และ (iii) คาสเซตต์ที่ประกอบด้วยโมเลกุลของ DNA ที่กำหนดรหัสแอสปาร์เตทไคเนสที่ต้านทานต่อการยับยั้งแบบป้อนกลับ ของไลซีน; โมเลกุลของ DNA ทั้งหลายในแต่ละคาสเซตเชื่อมต่อ อย่างดำเนินการได้กับโปรโมเตอร์โมเลกุลของโปรโมเตอร์ที่ทำให้เกิดการ ลอกรหัสของโมเลกุลของ RNA ในเนื้อเยื่อของเมล็ดข้าวโพด ในลักษณะ ที่แต่ละพ่อแม่มีคาสเซตต์ของการแสดงออกอย่างน้อยหนึ่งคาสเซตต์, ไม่มีพ่อแม่ใดมีคาสเซตต์ของการแสดงออกทั้งสามชนิด และพ่อแม่แตกต่าง จากกันและกันในแง่ของคาสเซตต์ของการแสดงออก b) การผสมข้ามระหว่างต้นพ่อ และต้นแม่ที่เลือกสรรไว้, และ c) การเก็บเกี่ยวเมล็ดรุ่นลูกหลานจากการผสมข้ามดังกล่าว

35. วิธีการให้โภชนาการแก่คนหรือสัตว์ชั้นต่ำที่ประกอบด้วยการเลี้ยงคนหรือ สัตว์ชั้นต่ำด้วยอาหารที่ประกอบด้วย เมล็ดข้าวโพดที่มีไลซีนสูง หรือผลผลิตที่ได้รับการดำเนิน กระบวนการจากเมล็ดข้าวโพดนั้นที่ประกอบด้วย คาสเซตต์ของการแสดงออกในพืชที่เป็น pMON 93092 หรือ pMON 93093

36. วิธีการให้โภชนาการแก่คนหรือสัตว์ชั้นต่ำที่ประกอบด้วย การเลี้ยงคนหรือสัตว์ ชั้นต่ำด้วยอาหารที่ประกอบด้วย เมล็ดข้าวโพดที่มีไลซีน หรือผลผลิตที่ได้รับการดำเนินกระบวนการ จากเมล็ดข้าวโพดนั้นที่ประกอบด้วย ชิ้นส่วนของ DNA ธรรมชาติจากเมล็ด และชิ้นส่วนของ คาสเซตต์ของการแสดงออกในพืชที่เป็น pMON 93092 หรือ pMON 93093

37. ผลผลิตที่ได้รับการดำเนินกระบวนการแล้วของเมล็ดที่ประกอบด้วยขั้นตอน ของ : a) การเปลี่ยนแปลงพันธุกรรมของเซลล์ของสายพันธุ์พืชด้วยคาสเซตต์ของ การแสดงออกในพืชที่เป็นพลาสมิด pMON 93092 หรือ PMON 93093; b) การทำให้เซลล์ดังกล่าวเกิดเป็นต้นพืชขึ้นใหม่ให้เป็นต้นพืชที่สืบพันธุ์ต่อ ได้ที่มีคาสเซตต์ของการแสดงออกนั้นอยู่ในยีโนมของมัน c) การเก็บเกี่ยวเมล็ดจากต้นพืชดังกล่าว และ d) การดำเนินกระบวนการให้แก่เมล็ดดังกล่าวให้เป็นอาหารสัตว์ หรือวัสดุ บดหรือแป้ง หรือน้ำมัน ซึ่งโดยวิธีนี้เมล็ดมีปริมาณไลซีนสูงกว่าเมล็ดของพืชสายพันธุ์เดียวกันที่ไม่ได้รับ การเปลี่ยนแปลงพันธุกรรมด้วยคอนสตรัคท์ดังกล่าว