Claims (30)
1. วิธีการของการแพร่ขยายโปรเจนิเตอร์ของตับในหลอดทดลองซึ่งประกอบรวมด้วย: (a) การจัดหาโปรเจนิเตอร์ของตับที่ถูกแยกและ (b) การเพาะเลี้ยงโปรเจนิเตอร์ของตับที่ถูกแยกบนส่วนประกอบเมทริกซ์นอกเซลล์หนึ่งหรือ มากกว่าที่ถูกพบในส่วนของสเต็มเซลล์ของตับ1. The method of in vitro propagation of liver progenitors comprises: (a) the provision of isolated liver progenitors and (b) the culture of isolated liver progenitors on one or more extracellular matrix components found in liver stem cell fractions.
2. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 1 ในที่ซึ่งส่วนประกอบเมทริกซ์นอกเซลล์ที่ถูกพบในส่วนของ สเต็มเซลล์ของตับถูกเลือกจากกลุ่มซึ่งประกอบด้วยคอลลาเจนไทป์ III, คอลลาเจนไทป์ IV, ลามินิน, ไฮยาลูโรแนนหรือการรวมกันของสิ่งนั้น2. Method of Claim 1 in which the extracellular matrix components found in liver stem cells are selected from a group consisting of collagen type III, collagen type IV, laminin, hyaluronan, or a combination thereof.
3. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 2 ในที่ซึ่งส่วนประกอบเมทริกซ์นอกเซลล์ที่ถูกพบในส่วนของ สเต็มเซลล์ของตับคือคอลลาเจนไทป์ III หรือไทป์ IV หรือการรวมกันของสิ่งนั้น3. Method of claim 2 in which the extracellular matrix component found in liver stem cells is collagen type III or type IV, or a combination of both.
4. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 2 ในที่ซึ่งโปรเจนิเตอร์ของตับถูกเพาะเลี้ยงต่อไปบนส่วนประกอบ เมทริกซ์นอกเซลล์ที่ถูกเลือกจากกลุ่มซึ่งประกอบด้วยคอลลาเจนไทป์ III, โมเลกุลการติดพื้นฐาน, โปรตีโอไกลแคน (PG), ไกลโคซามิโนไกลแคนเฮพาแรนซัลเฟต, อิลาสติน การรวมกันของสิ่งนั้น4. Method of the second claim in which liver progenitors are further cultured on an extracellular matrix component selected from a group consisting of type III collagen, basic binding molecules, proteoglycans (PG), glycosaminoglycan heparan sulfate, elastin, and a combination thereof.
5. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 4 ในที่ซึ่งโมเลกุลการติดพื้นฐานคือไฟโบรเนคติน5. Method of claim number 4 in which the basic binding molecule is fibronectin.
6. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 4 ในที่ซึ่ง PG คือเฮพาแรนซัลเฟต-PG, คอนดรอยตินซัลเฟต PGs หรือการรวมกันของสิ่งนั้น6. Method of claim 4 in which PG is heparan sulfate-PG, chondroitin sulfate PGs or a combination thereof.
7. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 4 ในที่ซึ่งไกลโคซามิโนไกลแคนคือเฮพาแรนซัลเฟต, เฮพาริน, คอนครอยตินซัลเฟต, เดอมาแทนซัลเฟต, ไฮยาลูโรแนนหรือการรวมกันของสิ่งนั้น7. Method of claim 4 in which glycosaminoglycans are heparan sulfate, heparin, chondroitin sulfate, dermatan sulfate, hyaluronan or a combination thereof.
8. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 2 ในที่ซึ่งส่วนประกอบเมทริกซ์นอกเซลล์คือคอลลาเจนไทป์ III และลามินิน8. Method of claim 2 in which the extracellular matrix components are collagen type III and laminin.
9. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 1 ในที่ซึ่งโปรเจนิเตอร์ของตับที่ถูกแยกคือสเต็มเซลล์ของตับที่ถูก แยก, เฮพาโตบลาสท์ที่ถูกแยก, โปรเจนิเตอร์ของตับที่ถูกกำหนด, หรือการรวมกันของสิ่งนั้น9. Method of Claim 1 where the isolated liver projector is isolated liver stem cells, isolated hepatoblasts, designated liver projector, or a combination thereof.
10. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 9 ในที่ซึ่งโปรเจนิเตอร์ของตับที่ถูกแยกคือสเต็มเซลล์ของตับ ที่ถูกแยก10. The method of claim 9 in which the isolated liver projector is an isolated liver stem cell.
11. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 1 ในที่ซึ่งโปรเจนิเตอร์ของตับต่อไปถูกเพาะเลี้ยงในการมีของ ฟีดเดอร์เซลล์11. Method of Claim 1 in which liver projector cells are subsequently cultured in the presence of feeder cells.
12. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 11 ในที่ซึ่งฟีดเดอร์เซลล์เป็นเอ็มบริโอหรือทารกในครรภ์12. Method of claim 11 in which feeder cells are embryos or fetuses.
13. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 12 ในที่ซึ่งฟีดเดอร์เซลล์คือแองจิโอบลาสท์หรือเซลล์ตั้งต้น รูปดาวจากตับ13. The method of claim 12 in which the feeder cells are angioblasts or liver progenitor cells.
14. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 11 ในที่ซึ่งฟีดเดอร์เซลล์มาจากเนื้อเยื่อสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมใดๆ14. The method of claim 11 in which feeder cells are derived from any mammalian tissue.
15. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 11 ในที่ซึ่งฟีดเดอร์เซลล์มาจากสปีชีส์ที่เหมือนกันเป็น โปรเจนิเตอร์ของตับ15. The method of claim 11, in which feeder cells originate from the same species, is a hepatocellular carcinogen.
16. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 1 ในที่ซึ่งฟีดเดอร์เซลล์คือมิวรีน16. Method of claim 1 in which the feeder cell is murine.
17. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 16 ในที่ซึ่งฟีดเดอร์เซลล์คือ STO ฟีดเดอร์เซลล์17. Method of claim 16 in which the feeder cell is an STO feeder cell.
18. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 1 ต่อไปซึ่งประกอบรวมด้วยอาหารเลี้ยงเชื้อที่ไม่มีซีรัม18. The method of claim 1 continues, incorporating serum-free culture medium.
19. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 1 ในที่ซึ่งโปรเจนิเตอร์ของตับถูกได้รับจากตับผู้ใหญ่19. Method of claim 1 in which hepatic projector is obtained from an adult liver.
20. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 19 ในที่ซึ่งตับผู้ใหญ่คือตับมนุษย์ผู้ใหญ่20. The method of claim 19 in which an adult liver is an adult human liver.
21. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 2 ในที่ซึ่งลามินินคือที่ความเข้มข้นระหว่างประมาณ 0.1 ถึง ประมาณ 10 มิวg/cm221. Method of claim 2 in which laminin is present at concentrations between approximately 0.1 and approximately 10 μg/cm2.
22. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 21 ในที่ซึ่งลามินินคือที่ความเข้มข้นระหว่างประมาณ 0.5 ถึง ประมาณ 5 มิวg/cm222. The method of claim 21 states that laminin is present at concentrations between approximately 0.5 and approximately 5 μg/cm2.
23. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 22 ในที่ซึ่งลามินินคือที่ความเข้มข้นของประมาณ 0.5 มิวg/cm223. The method of claim 22 in which laminin is present at a concentration of approximately 0.5 μg/cm2.
24. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 22 ในที่ซึ่งลามินินคือที่ความเข้มข้นของประมาณ 1 มิวg/cm224. Method of claim 22 in which laminin is present at a concentration of approximately 1 μg/cm2.
25. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 2 ในที่ซึ่งคอลลาเจนไทป์ III หรือ IV แต่ละไทป์คือที่ ความเข้มข้นระหว่างประมาณ 0.1 ถึงประมาณ 15 มิวg/cm225. Method of Claim 2 in which each type III or IV collagen is at a concentration between approximately 0.1 and approximately 15 µg/cm2.
26. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 25 ในที่ซึ่งคอลลาเจนไทป์ III หรือ IV แต่ละไทป์คือที่ ความเข้มข้นระหว่างประมาณ 0.5 ถึงประมาณ 8 มิวg/cm226. Method of claim 25 in which each type III or IV collagen is at a concentration between approximately 0.5 and approximately 8 µg/cm2.
27. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 25 ในที่ซึ่งคอลลาเจนไทป์ III หรือ IV คือที่ความเข้มข้นระหว่าง ประมาณ 1 ถึงประมาณ 7 มิวg/cm227. Method of claim 25 in which collagen type III or IV is present at concentrations between approximately 1 and approximately 7 µg/cm2.
28. วิธีการของการแพร่ขยายโปรเจนิเตอร์ของตับซึ่งประกอบรวมด้วย: (a) การจัดหาชั้นที่หนึ่งของซึ่งประกอบรวมด้วยส่วนประกอบเมทริกซ์นอกเซลล์ที่หนึ่งที่ถูก พบในส่วนสเต็มเซลล์ของตับ; (b) การจัดหาชั้นที่สองซึ่งประกอบรวมด้วยส่วนประกอบเมทริกซ์นอกเซลล์ที่สองที่ถูกพบใน ส่วนของสเต็มเซลล์ของตับ; และ (c) การเพาะเลี้ยงโปรเจนิเตอร์ของตับที่ถูกแยกระหว่างชั้นที่หนึ่งและที่สอง28. Methods of liver progenitor propagation include: (a) supplying the first layer, which comprises the first extracellular matrix component found in the liver stem cell fraction; (b) supplying the second layer, which comprises the second extracellular matrix component found in the liver stem cell fraction; and (c) culturing the liver progenitor separated between the first and second layers.
29. ภาชนะสำหรับการแพร่ขยายของโปรเจนิเตอร์ของตับซึ่งประกอบรวมด้วย: (a) ภาชนะ, และ (b) วัสดุไม่ละลายซึ่งประกอบรวมด้วยอย่างน้อยที่สุดหนึ่งส่วนประกอบเมทริกซ์นอกเซลล์ที่ ถูกพบในส่วนของสเต็มเซลล์ของตับ; ในที่ซึ่งวัสดุไม่ละลายเคลือบอย่างแท้จริงอย่างน้อยที่สุดหนึ่งพื้นผิวของภาชนะ29. The vessel for hepatic progenitor diffusion comprises: (a) the vessel, and (b) insoluble material comprising at least one extracellular matrix component found in the hepatic stem cell fraction; in which the insoluble material literally coats at least one surface of the vessel.
30. ภาชนะของข้อถือสิทธิที่ 24 ในที่ซึ่งภาชนะคือเพลทเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อ,ไบโอรีแอกเตอร์, แล็บเซลล์หรือแล็บชิพ30. Container of claim 24 where the container is a tissue culture plate, bioreactor, lab cell or lab chip.