Claims (7)
1. แองคาไลน์โปรตีนเนส K-16 ที่ประกอบไปด้วยลักษณะเฉพาะเชิงเอนไซม์ ดังต่อไปนี้: (1) การออกฤทธิ์ ออกฤทธิ์ต่อโปรตีนต่าง ๆ ภายใต้สภาวะแอลคาไลน์อย่างสูง ; (2) ความจำเพาะต่อสับสเทรท แสดงการออกฤทธิ์ที่ดีต่อโปรตีนละลายน้ำและโปรตีนไม่ละลายน้ำ ; (3) ช่วงพีเอชเหมาะสม ช่วงพีเอชเหมาะสมคือ 11.0-12.3 เมื่อทำปฏิกิริยาที่ 40 ํ ซ. โดยใช้เคซีน เป็นสับสเทรท ; (4) ความมีเสถียรภาพต่อพีเอช เสถียรมากช่วงพีเอช 5.0-12.0 ในสภาพที่มี Ca 2+ เมื่อเก็บอยู่ใน สารละลายบัฟเฟอร์ต่าง ๆ ที่ 25 ํ ซ. นาน 2 วัน ; (5) อุณหภูมิเหมาะสม อุณหภูมิเหมาะสม 55 ํซ. เมื่อทำปฏิกิริยาที่พีเอช 10.0 โดยการใช้เคซีนเป็น สับสเทรท ; (6) ความมีเสถียรภาพต่อความร้อน รักษากิจกรรมคงเหลือ 90% หรือสูงกว่า เมื่อดำเนินกรรมวิธีที่ 50 ํ ซ. และที่ พีเอช 9.5 นาน 10 นาที (7) มวลโมเลกุล 28,000 (สูตร) 1,000 ที่วัดโดย (SDS)-พอลิแอคริลเอไมด์เจลอิเล็คโตรโฟรีซีส ; (8) จุดไอโซอิเล็คทริค 10.5 หรือสูงกว่า (9) ผลของโลหะไอออน กิจกรรมจะถูกยับยั้งด้วย Hg 2+ และ Cu2+ และความมีเสถียรภาพต่อความร้อน จะถูกส่งเสริมด้วย Ca2+ (10) ผลของตัวยับยั้ง กิจกรรมไม่ถูกยับยั้งด้วยกรดเอทิลีนไดเอทิลีนไดเอมีนเตตราแอซิติค 4-คลอโรเมอร์คิวริเบนโซเอตและแอนติเพน ,และจะถูกยับยั้งด้วยไตไอโซพรอพิลฟลูโอโรฟอสเฟต ฟีนีลมีเทนซัลโฟนิลฟลูโอไรด์ ,และไคโมสตาติน ; และ (11) ผลของสารออกฤทธิ์ต่อพื้นผิว เสถียรมากในสภาพที่มีโซเดียมลิเนียร์แอลคิลเบนซีนซัลโฟเนต,โซเดียมพอลิออกซีเอ- ทิลีนแอลคิลซัลเฟต โซเดียมโคเดคิลซัลเฟตโซเดียม (สูตร) -โอลีฟินซัลโฟเนต โซเดียมแอลคิล- ซัลโฟเนต และ(สูตร) -ซัลโฟ-แฟตตีแอซิดเอสเทอร์ความเข้มสูง1. The K-16 alkaline proteinase contains the following enzymatic characteristics: (1) their action on various proteins under high alkaline conditions; (2) specificity. Connect straight Good activity against soluble and insoluble proteins; (3) optimal pH range. The optimum pH range was 11.0-12.3 when reacted at 40 ํ using casein as a substrate; (4) stability to pH. Very stable pH range 5.0-12.0 in condition with Ca 2+ when stored in Various buffers at 25 ํ for 2 days; (5) optimum temperature. The optimum temperature is 55 ํ C when reacting at pH 10.0 by using casein as a substrate; (6) Thermal stability. Maintain residual activity of 90% or higher when process at 50 ํ and at pH 9.5 for 10 min. (7) Molar mass 28,000 (formula) 1,000 as measured by (SDS) - Polyacrylamide. Electrophoresis gel; (8) isoelectric point 10.5 or higher; (9) metal ion effect. Activity was inhibited by Hg 2+ and Cu2 +, and thermal stability. Will be promoted by Ca2 + (10) inhibitor effect Activity was not inhibited by ethylenediaminetetraacetic acid. 4- chloromers, curibenzoates and antipens , And will be inhibited by kidney isopropyl fluorophosphate Phenyl Methane Sulfonyl Fluoride , And chimostatin; And (11) effect of the active substance on the surface. Very stable in the presence of sodium linear alkylbenzene sulfonate, sodium polyoxamine-tylene alkyl sulfate. Sodium Codekyl Sulfate, Sodium (Formula) - Olefin Sulfonate High-intensity sodium alkyl-sulfonate and (formula) -sulfo-fat acid ester.
2. แอลคาไลน์โปรตีนเนส K-16 ตามข้อถือสิทธิ 1 โดยที่โปรตีนละลายน้ำ ที่กล่าวถึงที่แสดงกิจกรรมที่ดีคือเคซีน ฮีโมกลอเคซีน ฮีโมกลอนบิน และ FCS แอลบูมิน และโปรตีนที่ไม่ ละลายน้ำที่ดังกล่าวถึงที่แสดงกิจกรรมที่ดีคือเคราตินและอีลาสติน2. Alkaline Protein Nase K-16 according to claim 1 where the protein is soluble. The well-documented activities are casein, hemoglobin, hemoglobin, and FCS. The water softener mentioned above shows good activity is keratin and elastin.
3. กระบวนการสำหรับการสร้างแอลคาไลน์โปรตีนเนส K-16 ที่ประกอบไปด้วย : (i) การเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ที่เป็นสมาชิกของจีนัส Bacillus ที่สามารถ สร้างแอลคาไลน์โปรตีนเนส K-16 และ (ii) รวบรวมเอนไซม์จากอาหารเลี้ยงเชื้อเหลว3. The process for the formation of K-16 alkaline proteinase consists of: (i) culturing microorganisms that belong to the genus Bacillus capable of producing alkaline protein K-16 and (ii) ) Collect enzymes from liquid culture medium.
4. กระบวนการตามข้อถือสิทธิ 3 โดยที่จุลินทรีย์ที่กล่าวถึงเป็นสมาชิกของจีนัส คือ Bacillus คือ Bacillus s p. KSM-K 164.Process according to claim 3, whereby microorganisms mentioned are members of the genus, Bacillus, i.e. Bacillus s p.KSM-K 16.
5. จุลินทรีย์ที่เป็นสมาชิกของจีนัส Bacillus ซึ่งสามารถสร้างแอลคาไลน์- โปรตีนเนส K-16 ที่ประกอบไปด้วยลักษณะเฉพาะเชิงวิทยาเอนไซม์ดังต่อไปนี้ (1) การออกฤทธิ์ ออกฤทธิ์ต่อโปรตีนต่าง ๆ ภายใต้สภาวะแอลคาไลน์อย่างสูง (2) ความจำเพาะต่อสับสเทรท แสดงการออกฤทธิ์ที่ดีต่อโปรตีนละลายน้ำและโปรตีนไม่ละลายน้ำ (3) ช่วงพีเอชเหมาะสม ช่วงพีเอชเหมาะสมคือ 11.0-12.3 เมื่อทำปฏิกิริยาที่ 40 ํซ. โดยใช้เคซีนเป็น สับสเทรท : (4) ความมีเสถียรภาพต่อพีเอช เสถียรมากช่วงพีเอช 5.0-12.0 ในสภาพที่มี Ca2+ เมื่อเก็บอยู่ใน สารละลายบัฟเฟอร์ต่าง ๆที่ 25 ํซ. นาน 2 วัน ; (5) อุณหภูมิเหมาะสม อุณหภูมิเหมาะสม 55 ํซ. เมื่อทำปฏิกิริยาที่พีเอช 10.0 โดยการใช้เคซีนเป็นสับสเทรท ; (6) ความมีเสถียรภาพต่อความร้อน รักษากิจกรรมคงเหลือ 90% หรือสูงกว่า เมื่อดำเนินกรรมวิธีที่ 50 ํซ. พีเอช 9.5 นาน 10 นาที (7) มวลโมเลกุล 28,000 (สูตร)1,000 วัดด้วยโซเดียมโคเตคิลซํลเฟต (SDS) พอลิแอคริลเอไมด์- เจลอิเล็คโตรโฟรีซีส ; (8) จุดไอโซอิเล็คทริค 10.5 หรือสูงกว่า ; (9) ผลของไอออนโลหะ กิจกรรมจะถูกยับยั้งด้วย Hg 2+ และ Cu2+ และความมีเสถียรภาพต่อความร้อน จะถูกส่งเสริมด้วย Ca2+ (10) ผลของตัวยับยั้ง กิจกรรมไม่ถูกยับยั้งด้วยกรดเอทิลีนไดเอทิลีนไดเอมีนเตตราแอซิติก 4-คลอโรเมอร์คิวริเบนโซเอต และแอนติเพน , และจะถูกยับยั้งด้วยไตไอโซพรอพิลฟลูโอโรฟอสเฟต , ฟีนีลมีเทนซัลโฟนิลฟลูโอไรด์ , และไคโมสตาติน และ (11) ผลของสารออกฤทธิ์ต่อพื้นผิว เสถียรมากในสภาพที่มีโซเดียมลิเนียร์แอลคิลเบนซีนซัลโฟเนต , โซเดียมพอลิออกซี- เอทิลีนแอลคิลซัลเฟต โซเดียมโคเดคิลซัลเฟต โซเดียม (สูตร) โอลีฟินซัลโฟเนต โซเดียมแอลคิล- ซัลโฟเนต และ(สูตร)-ซัลโฟแฟตตีแอซิดเอสเทอร์5. Microorganisms belonging to the genus Bacillus which can produce alkaline-proteinase K-16 with the following enzymological characteristics: (1) their action on various proteins under aqueous conditions. Highly alkaline (2) Specificity per substrate Good activity against soluble and insoluble proteins (3) suitable pH range. The optimum pH range was 11.0-12.3 when reacted at 40 ํ using casein as a substrate: (4) Stability to pH. Very stable pH range 5.0-12.0 in the Ca2 + state when stored in Various buffers at 25 ํ for 2 days; (5) optimum temperature. The optimum temperature was 55 ํ C when reacted at pH 10.0 by using casein as a substrate; (6) Thermal stability. Maintain residual activity of 90% or higher when process at 50 ํ pH 9.5 for 10 min. (7) Molar mass 28,000 (formula) 1,000 measured with sodium cotekyl sulfate (SDS) polyamide. Cryl amide-gel electrophoresis; (8) isoelectric point 10.5 or higher; (9) metal ion effect. Activity was inhibited by Hg 2+ and Cu2 +, and thermal stability. Will be promoted by Ca2 + (10) inhibitor effect Activity was not inhibited by ethylenediaminetetraacetic acid. 4- chloromer curibenzoate and antipen, and is inhibited by isopropyl fluorophosphate, phenyl methane sulfonyl fluoride, and Chimostatin and (11) effects of active substances on substrates. Very stable in the presence of sodium linear alkylbenzene sulfonate, sodium polyoxi-ethylene alkyl sulfate. Sodium Codekyl Sulfate, Sodium (Formula) Olefin Sulfonate Sodium alkyl-sulfonate and (formulation) -sulfofatty acid ester.
6. จุลินทรีย์ตามข้อถือสิทธิ 5 โดยทีโปรตีนละลายน้ำที่กล่าวถึงที่แสดงกิจกรรมที่ดีคือเคซีน ฮิโมกลอบิน และ FCS แอลบูมินและโปรตีนไม่ละลายน้ำที่กล่าวถึงที่แสดงกิจกรรมที่ดีคือเคราติน และอีลาสติน6. Microorganisms according to claim 5, whereby soluble proteins mentioned that exhibit good activity are casein, hemoglobin, and FCS. The mentioned albumin and insoluble proteins that exhibit good activity are: Keratin and elastin
7. จุลินทรีย์ Bacillus s p. KSM-D 16 (FERM BP - 3376)7. Microorganisms Bacillus s p. KSM-D 16 (FERM BP - 3376)