TH82139A - การแสดงออกที่ถูกทำให้เหมาะสมของ hpv 45l1 ในยีสต์ - Google Patents

Abstract

DC60 (27/09/47) โมเลกุล DNA สังเคราะห์ ซึ่งให้การแปลรหัส HPV45 L1 โปรตีนจะถูกจัดหา อย่างจำเพาะเจาะจง, การประดิษฐ์ครั้งนี้จะจัดหาโพลีนิวคลีโอไทด์ซึ่งให้การแปลรหัส HPV45 L1 โปรตีน, โดยที่โพลีนิวคลีโอไทด์ดังกล่าวได้ถูกทำให้เหมาะสมเชิงโคดอน เพื่อให้การแสดงออกที่ ระดับสูงในเซลล์ยีสต์ โมเลกุลสังเคราะห์อาจจะถูกใช้เพื่อผลิตอนุภาคที่คล้ายไวรัส HPV45 (VLPs) , และเพื่อผลิตวัคซีนและสารผสมเชิงเภสัชกรรมซึ่งประกอบรวมด้วย HPV45 VLPs วัคซีนตามการประดิษฐ์ครั้งนี้จะให้การป้องกันเชิงภูมิคุ้มกันวิทยา ต่อต้านการติดเชื้อพาพิลโลมา ไวรัส โดยผ่านแอนติบอดี้ซึ่งทำให้การลบล้างฤทธิ์ และภูมิคุ้มกันที่สื่อโดยเซลล์

Claims (25)

แก้ไข 05/03/2562 หน้า 1 ของจำนวน 1 หน้า ข้อถือสิทธิ 1. โมเลกุลกรดนิวคลีอิกซึ่งประกอบรวมด้วยลำดับของนิวคลีโอไทด์ซึ่งแปลรหัส HPV 45 L1 โปรตีนที่ถูกกำหนดไว้ก่อนใน SEQ ID NO:2 ลำดับกรดนิวคลีที่ถูกกำหนดไว้ก่อนใน SEQ ID NO: 1 ---------------------------------------------------------------------------------------------------- ------21/03/2561------(OCR) หน้า 1 ของจำนวน 2 หน้า ข้อถือสิทธิ 1. โมเลกุลกรดนิวคลีอิกที่แปลรหัส HPV 45 L1 โปรตีนซึ่งประกอบด้วย SEQ ID NO:2 ที่ซึ่ง โมเลกุลกรดนิวคลีอิกประกอบด้วยลำดับกรดนิวคลีอิกที่แปลรหัส SEQ ID N0:2 ซึ่งถูกทำให้ เหมาะสมเชิงโคดอนสำหรับการแสดงออกในระดับที่สูงในเชลล์ยีสต์ 2. เวคเตอร์ซึ่งประกอบด้วยโมเลกุลกรดนิวคลีอิกของข้อถือสิทธิที่ 1 3. เซลล์เจ้าบ้านที่เปีนยีสต์ซํ่งประกอบด้วยเวคเตอร์ของข้อถือสิทธิที่ 2 4. เชลล์เจ้าบ้านของข้อถือสิทธิที่ 3 ที่ซึ่งเซลล์เจ้าบ้านถูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย แซคคาโรไมซิส เซอรวิซิอ (Saccharomyces cerevisiae), ฮานซินูลา โพลีมอร์ฟา (Hansenula polymorpha), พิเชย พาสตอริส (Pichia pastoris), คลายเวอโรไมชิส ฟรากิลิส (Kluyveromyces fragilis), คลายเวอโรไมซิส แลคติส (Kluyveromyces lactis) และชโซแซคคาโรไมซิส ปอมเป (Schizosaccharomyces pombe) 5. เซลล์เจ้าบ้านของข้อถือสิทธิที่ 4 ที่ซํ่งเซลล์เจ้าบ้าน คือ แซคคาโรไมซิส เซอริวิซิอี (Saccharomyces cerevisiae) 6. โมเลกุลกรดนิวคลีอิกของข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่งลำดับของนิวคลีโอไทต์ประกอบด้วยลำดับ ของนิวคลีโอไทต์ที่ถูกกำหนดไว้ก่อนใน SEQIDNO: 1 7. เวคเตอร์ซึ่งประกอบด้วยโมเลกุลกรดนิวคลีอิกของข้อถือสิทธิที่ 6 8. เซลล์เจ้าบ้านที่เป็นยีสต์ซึ่งประกอบด้วยเวคเตอร์ของข้อถือสิทธิที่ 7 9. อนุภาคที่เหมือนพาพิลโลมาไวรัสของมนุษย์(HPV) 45 (VLPs) ซึ่งประกอบด้วยรีคอม- บิแนนท์ L1 โปรตีน หรือ รีคอมบิแนนท์ L1+L2 โปรตีน ของ HPV45 ที่ซึ่งรีคอมบิแนนท์ L1 โปรตีน หรือ หรือ รีคอมบิแนนท์ L1+L2 โปรตีนถูกผลิตยีสต์ และที่ซํ่งรีคอมบิแนนท์ L1 โปรตีน ประกอบด้วยลำดับของกรดอะมิโนดังที่กำหนดไว้ก่อนใน SEQ ID NO:2 10. อนุภาคที่เหมือนพาพิลโลมาไวรัสของมนุษย์ (HPV) 45 (VLPs) ซึ่งประกอบด้วยรีคอม- บิแนนท์ L1 โปรตีน หรือ รีคอมบิแนนท์ L1+L2 โปรตีน ของ HPV45 ที่ซึ่งรีคอมบิแนนท์ L1 โปรตีนประกอบด้วยลำดับของกรดอะมิโนดังที่กำหนดไว้ก่อนใน SEQ ID NO:2 11.วัคซีนซึ่งประกอบด้วย HPV VLPs ของข้อถือสิทธิที่ 10 12. องค์ประกอบทางเภสัชกรรมซึ่งประกอบด้วย HPV VLPs ของข้อถือสิทธิที่ 10 13. วัคซีนซึ่งประกอบด้วย VLPs ของข้อถือสิทธิที่ 9 14. องค์ประกอบทางเภสัชกรรมซึ่งประกอบด้วย VLPs ของข้อถือสิทธิที่ 9 15. วิธีการของการผลิต อนุภาคที่เหมือน HPV 45 ไวรัส (VLP) ซึ่งประกอบด้วย (a) การเปลี่ยนรูปเซลล์ยีสต์ด้วยโมเลกุลกรดนิวคลีอิกที่แปลรหัส HPV 45 L1 โปรตีน หรือ HPV45 L1+L2 โปรตีน, ที่ซึ่ง HPV45 L1 โปรตีนประกอบด้วยลำดับของกรดอะมิโนดังที่กำหนดไว้ หน้า 2 ของจำนวน 2 หน้า ก่อนใน SEQ ID N0:2 และที่ซื่งโมเลกุลกรดนิวคลีอิกถูกทำให้เหมาะสมเชิงโคดอนสำหรับการ แสดงออกในระดับที่สูงในเซลล์ยีสต์ (b) การเพาะเลี้ยงเซลล์ยีสต์ที่ถูกเปลี่ยนรูปภายใต้สภาวะที่ยอมให้มีการแสดงออกของโมเลกุล กรดนิวคลีอิกที่ถูกทำให้เหมาะสมเชิงโคดอนเพื่อผลิตรคอมบิแนนท์พาพิลโลมาไวรัสโปรตีน และ (c) การแยกรคอมบิแนนท์พาพิลโลมาไวรัสโปรตีนเพื่อผลิต HPV 45 VLP 16. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 15 ที่ซํ่งเซลล์ยีสต์ถูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วยแซคคาโรไม- ซส เซอรวซอ (Saccharomyces cerevisiae), ฮานซนูลา โพลมอรฟ่า (Hansenulapolymorpha), พเชย พาสตอรส (Pichiapastoris), คลายเวอโรไมซิส ฟรากิลิส (Kluyveromyces fragilis), คลายเวอโรไมซิส แลคติส (Kluyveromyces lactis) และชิโซแซคคาโรไมซิส ปอมเป (Schizosaccharomyces pombe) 17. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 16 ที่ซื่งเซลล์ยีสต์คือ แชคคาโรไมซิส เซอรวิซิอี (1Saccharomyces cerevisiae) 18. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 15 ที่ซํ่งโมเลกุลกรดนิวคลีอิกประกอบด้วยลำดับของนิวคลีโอ- ไทต์ที่ถูกกำหนดไว้ก่อนใน SEQ ID NO: 1 19. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 18 ที่ชํ่งโมเลกุลกรดนิวคลีอิกประกอบด้วยส่วนสำคัญของลำดับ ของนิวคลีโอไทต์ที่ถูกกำหนดไว้ก่อนใน SEQIDNO: 1 ------------

1. โมเลกุลกรดนิวคลีอิกซึ่งประกอบรวมด้วยสายลำดับของนิวคลีโอไทด์ที่แปลงรหัส HPV45 L1 โปรตีน ดังที่อธิบายไว้ใน SEQ ID NO: 2, ซึ่งลำดับกรดนิวคลีอิกได้ถูกทำให้เหมาะสมเชิง โคดอนสำหรับการแสดงออกในระดับที่สูง ในเซลล์ยีสต์

2. เวคเตอร์ซึ่งประกอบรวมด้วยโมเลกุลกรดนิวคลีอิกตามข้อถือสิทธิ 1

3. เซลล์เจ้าบ้านซึ่งประกอบรวมด้วยเวคเตอร์ตามข้อถือสิทธิ 3

4. เซลล์เจ้าบ้านตามข้อถือสิทธิ 3, โดยที่เซลล์เจ้าบ้านจะถูกเลือกสรรจากกลุ่มซึ่งประกอบ ด้วย : แซคคาโรไมซิส เซอรีวิซิอี (Seccharomyces cerevisiae), ฮานซินูลา โพลีมอร์ฟา (Handenula polymorpha), พิเซีย พาสตอริส (Pichia pastoris), คลายเวอโรไมซิส ฟรากิลิส (Kluyveromyces fragilis), คลายเวอโรไมซิส แลคติส (Kluyveromyces lectis), และชิโซแซค- คาโรไมซิส ปอมเป (Schizosaccharomyces pombe)

5. เซลล์เจ้าบ้านตามข้อถือสิทธิ 4, โดยที่เซลล์เจ้าบ้านคือ แซคคาโรไมซิส เซอรีวิซิอี (Seccharomyces cerevisiae)

6. โมเลกุลกรดนิวคลีอิกตามข้อถือสิทธิ 1, โดยที่สายลำดับนิวคลีโอไทด์จะประกอบรวมด้วย สายลำดับของนิวคลีโอไทด์ดังที่อธิบายไว้ใน SEQ ID NO:1

7. เวคเตอร์ซึ่งประกอบรวมด้วยโมเลกุลกรดนิวคลีอิกตามข้อถือสิทธิ 6

8. เซลล์เจ้าบ้านซึ่งประกอบรวมด้วยเวคเตอร์ตามข้อถือสิทธิ 7

9. อนุภาคที่คล้ายไวรัส (VLPs) ที่ประกอบรวมด้วย รีคอมบิแนนท์ L1 โปรตีน หรือ รีคอมบิแนนท์ L1+L2 โปรตีนของ HPV45,โดยที่รีคอมบิแนนท์ L1 โปรตีน หรือ รีคอมบิแนนท์ L1+L2 โปรตีนจะถูกผลิตในยีสต์

10. VLPs ตามข้อถือสิทธิ 9, โดยที่ รีคอมบิแนท์ L1 โปรตีน และ รีคอมบิแนนท์ L1+L2 โปรตีน จะถูกแปลงรหัสจากโมเลกุลกรดนิวคลีอิก HPV45 L1 ที่ถูกทำให้เหมาะสมเชิงโคดอน

11. VLPs ตามข้อถือสิทธิ 10, โดยที่โมเลกุลกรดนิวคลีอิกที่ถูกทำให้เหมาะสมเชิงโคดอนจะ ประกอบอย่างเป็นส่วนสำคัญด้วยสายลำดับของนิวคลีโอไทด์ดังที่อธิบายไว้ใน SEQ ID NO:1

12. วิธีการสำหรับการผลิต VLPs ตามข้อถือสิทธิ 10, ซึ่งประกอบรวมด้วย : (a) การปลูกถ่ายยีสต์ด้วยโมเลกุล DNA ที่ถูกทำให้เหมาะสมเชิงโคดอน ซึ่งให้การ แปลรหัส HPV45 L1โปรตีน หรือ HPV45 L1+L2 โปรตีน: (b) การเพาะเลี้ยงยีสต์ที่ถูกปลูกถ่าย ภายใต้สภาวะที่ยอมให้มีการแสดงออกของ โมเลกุล DNA ที่ถูกทำให้เหมาะสมเชิงโคดอน เพื่อผลิตรีคอมบิแนนท์พาพิลโลมาไวรัสโปรตีน ; และ (c) การแยกรีคอมบิแนนท์ พาพิลโลมาไวรัส โปรตีนเพื่อผลิต VLPs ตามข้อถือสิทธิ 10

13. วัคซีน ซึ่งประกอบรวมด้วย VLPs ตามข้อถือสิทธิ 10

14. สารผสมเชิงเภสัชกรรม ซึ่งประกอบรวมด้วย VLPs ตามข้อถือสิทธิ 10

15. วิธีการของการป้องกันการติดเชื้อ HPV ซึ่งประกอบรวมด้วยการให้วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 13 แก่สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม

16. วิธีการสำหรับการชักนำการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันในสัตว์ ซึ่งประกอบรวมด้วยการให้ VLPs ตามข้อถือสิทธิ 10 แก่สัตว์

17. อนุภาคที่คล้ายไวรัสตามข้อถือสิทธิ 10 โดยที่ ยีสต์จะถูกเลือกสรรจากกลุ่มซึ่งประกอบ ด้วย แซคคาโรไมซิส เซอรีวิซิอี (Seccharomyces cerevisiae), ฮานซินูลา โพลีมอร์ฟา (Handenula polymorpha), พิเซีย พาสตอริส (Pichia pastoris), คลายเวอโรไมซิส ฟรากิลิส (Kluyveromyces fragilis), คลายเวอโรไมซิส แลคติส (Kluyveromyces lectis),ชิโซแซค- คาโรไมซิส ปอมเป (Schizosaccharomyces pombe)

18. อนุภาคที่คล้ายไวรัสตามข้อถือสิทธิ 17, โดยที่ยีสต์ คือ แซคคาโรไมซิส เซอรีวิซิอี (Seccharomyces cerevisiae)

19. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 13, ซึ่งประกอบรวมต่อไปด้วย VLPs ของอย่างน้อยหนึ่งชนิดของ HPV เพิ่มเติม

20. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 19, โดยที่อย่างน้อยหนึ่งชนิดของ HPV เพิ่มเติม จะถูกเลือกสรร จากกลุ่มซึ่งประกอบด้วย :HPV6, HPV11, HPV16, HPV18, HPV31, HPV33, HPV35, HPV39, HPV51, HPV52, HPV55, HPV56, HPV58, HPV59, และ HPV68

21. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 20, โดยที่อย่างน้อยหนึ่งชนิดของ HPV เพิ่มเติม ประกอบด้วย HPV16

22. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 21, ซึ่งประกอบรวมต่อไปด้วย HPV18 VLPs

23. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 22, ซึ่งประกอบรวมต่อไปด้วย HPV6 VLPs และ HPV11 VLPs

24. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 23, ซึ่งประกอบรวมต่อไปด้วย HPV31 VLPs

25. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 22, ซึ่งประกอบรวมต่อไปด้วย HPV31 VLPs