TH64808B - การแสดงออกที่ถูกทำให้เหมาะสมของ hpv31 l1 ในยีสต์ - Google Patents

Abstract

DC60 (20/10/47) โมเลกุล DNA สังเคราะห์ ซึ่งให้การแปลรหัส HPV31 L1 โปรตีนจะถูกจัดหา อย่างจำเพาะเจาะจง, การประดิษฐ์ครั้งนี้จะจัดหาโพลีนิวคลีโอไทด์ซึ่งให้การแปลรหัส HPV31 L1 โปรตีน, โดยที่โพลีนิวคลีโอไทด์ดังกล่าวจะปราศจากสัญญานการสิ้นสุดทรานสคริปชั่นภายในที่ ถูกจดจำได้โดยยีสต์ ที่ถูกจัดหาไว้ด้วยคือโพลีนิวคลีโอไทด์สังเคราะห์ซึ่งให้การแปลรหัส HPV31 L1 โดยที่โพลีนิวคลีโอไทด์ได้ถูกทำให้เหมาะสมเชิงโคดอน เพื่อให้การแสดงออกที่ระดับ สูงในเซลล์ยีสต์ โมเลกุลสังเคราะห์อาจจะถูกใช้เพื่อผลิตอนุภาคที่คล้ายไวรัส HPV31 (VLPs) , และเพื่อผลิตวัคซีนและสารผสมเชิงเภสัชกรรมซึ่งประกอบรวมด้วย HPV31 VLPs วัคซีนตาม การประดิษฐ์ครั้งนี้จะให้การป้องกันโรคเชิงภูมิคุ้มกันวิทยาที่มีประสิทธิภาพ ต่อต้านการติดเชื้อ พาพิลโลมาไวรัส โดยผ่านแอนติบอดี้ซึ่งให้การลบล้างฤทธิ์ และภูมิคุ้มกันที่สื่อโดยเซลล์ โมเลกุล DNA สังเคราะห์ ซึ่งให้การแปลรหัส HPV31 L1 โปรตีนจะถูกจัดหา อย่างจำเพาะเจาะจง, การประดิษฐ์ครั้งนี้จะจัดหาโพลีนิวคลีโอไทด์ซึ่งให้การแปลรหัส HPV31 L1 โปรตีน, โดยที่โพลีนิวคลีโอไทด์ดังกล่าวจะปราศจากสัญญานการสิ้นสุดทรานสคริปชั่นภายในที่ ถูกจดจำได้โดยยีสต์ ที่ถุกจัดหาไว้ด้วยคือโพลีนิวคลีโอไทด์สังเคราะห์ซึ่งให้การแปลรหัส HPV31 L1 โดยที่โพลีนิวคลีโอไทด์ได้ถูกทำให้เหมาะสมเชิงโคดอน เพื่อให้การแสดงออกที่ระดับ สูงในเซลล์ยีสต์ โมเลกุลสังเคราะห์อาจจะถูกใช้เพื่อผลิตอนุภาคที่คล้ายไวรัส HPV31 (VLPs) , และเพื่อผลิตวัคซีนและสารผสมเชิงเภสัชกรรมซึ่งประกอบรวมด้วย HPV31 VLPs วัคซีนตาม การประดิษฐ์ครั้งนี้จะให้การป้องกันโรงเชิงภูมิคุ้มกันวิทยาที่มีประสิทธิภาพ ต่อต้านการติดเชื้อ พาพิลโลมาไวรัส โดยผ่านแอนติบอดี้ซึ่งให้การลบล้างฤทธิ์ และภูมิคุ้มกันที่สื่อโดยเซลล์ สิทธิบัตรยา

Claims (3)

ข้อถือสิทธฺ์ (ทั้งหมด) ซึ่งจะไม่ปรากฏบนหน้าประกาศโฆษณา :20 กรกฎาคม 2560 1. โมเลกุลกรดนิวคลีอิคซึ่งประกอบด้วยลำดับของนิวคลีโอไทด์ที่แปลรหัส HPV31 L1 โปรตีน ดังที่กำหนดไว้ก่อนหน้าใน SEQ ID NO:4 ลำดับกรดนิวคลีอิคถูกทำให้เหมาะสมเชิงโคดอนเพื่อการ แสดงออกที่ระดับสูงในเซลล์ยีสต์ --------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------- แก้ไข 23/01/2560 1. โมเลกุลกรดนิวคลีอิคซึ่งประกอบด้วยลำดับของนิวคลีโอไทด์ที่แปลรหัส HPV31 L1 โปรตีน ดังที่กำหนดไว้ก่อนหน้าใน SEQ ID N0:4 ลำดับกรดนิวคลีอิคถูกทำให้เหมาะสมเชิงโคดอนเพื่อการ แสดงออกที่ระดับสูงในเซลล์ยีสต์ 2. เวคเตอร์ซึ่งประกอบด้วยโมเลกุลกรดนิวคลีอิคของข้อถือสิทธิที่ 1 3. เซลล์เจ้าบ้านยีสต์ซึ่งประกอบด้วยเวคเตอร์ของข้อถือสิทธิที่ 2 4. เซลล์เจ้าบ้านของข้อถือสิทธิที่ 3 ที่ซึ่งเซลล์เจ้าบ้านถูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วยแซคคาโร- ไมซิส เซอรีวิซิอี (Saccharomyces cerevisiae), ฮานเซนูลา โพลีมอร์ฟา (Hansenula Polymorpha), พิเชีย พาสตอริส (Pichia pastoris), คลายทอร์ไมซิส ฟรากิลิส (Kluyvermycesfragilis), คลายเวอโรไมซิส แลคติส (Kluyveromyces lactis) และชิโซแซคคาโรไมชิส ปอมเป (Schizosaccharomyces pombe) 5. เซลล์เจ้าบ้านของข้อถือสิทธิที่ 4 ที่ซึ่งเซลล์เจ้าบ้าน คือ แซคคาโรไมซิส เซอรีวิซิอี (Saccharomyces cerevisiae) 6. โมเลกุลกรดนิวคลีอิคของข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่งลำดับของนิวคลีโอไทด์ประกอบด้วยลำดับของ นิวคลีโอไทด์ดังที่กำหนดไว้ก่อนหน้าใน SEQ ID NO:2 หรือ SEQ ID NO:3 7. เวคเตอร์ซึ่งประกอบด้วยโมเลกุลกรดนิวคลีอิคของข้อถือสิทธิที่ 6 8. เซลล์เจ้าบ้านยีสต์ซื่งประกอบด้วยเวคเตอร์ของข้อถือสิทธิที่ 7 9. อนุภาคที่คล้ายไวรัส (VLP) ซึ่งประกอบด้วยรีคอมบิแนนท์ L1 โปรตีน หรือริคอมบิแนนท์ L1+L2 โปรตีนของ HPV31 ที่ซึ่งริคอมบิแนนท์ L1 โปรตีน หรือริคอมบิแนนท์ L1+L2 โปรตีนถูกผลิตใน ยีสต์ และที่ซึ่ง L1 โปรตีนถูกแปลรหัสโดยโมเลกุลกรดนิวคลีอิค HPV31 L1 ที่ถูกทำให้เหมาะสมเชิงโคดอน ซึ่งประกอบด้วยส่วนลำคัญของลำดับของนิวคลีโอไทด์ดังที่กำหนดไว้ก่อนหน้าใน SEQ ID NO:2 หรือ SEQ ID NO:3 1 0. วิธีการของการผลิตอนุภาคที่คล้ายไวรัส (VLP) HPV31 ซึ่งประกอบด้วย (a) การเปลี่ยนรูปเซลล์ยีสต์ด้วยโมเลกุลกรดนิวคลีอิคที่แปลรหัส HPV31 L1 โปรตีน ซึ่ง HPV31 L1 โปรตีนประกอบด้วยลำดับของกรดอะมิโนดังที่กำหนดไว้ก่อนหน้าใน SEQ ID NO:4 ที่ซื่งโมเลกุลกรดนิว- คลิอิคประกอบด้วยลำดับของนิวคลีโอไทด์ที่ถูกทำให้เหมาะสมเชิงโคดอนเพื่อการแสดงออกที่ระดับสูงใน เซลล์ยีสต์ (b) การเพาะเลี้ยงเซลล์ยีสต์ที่ถูกเปลี่ยนรูปภายใต้สภาวะที่ยอมให้มีการแสดงออกของโมเลกุลกรด นิวคลีอิคเพื่อผลิตรีคอมบิแนนท์ พาพิลโลมาไวรัสโปรตีน และ (c) การแยกรีคอมบิแนนท์ พาพิลโลมาไวรัสโปรตีนเพื่อผลิต HPV31 VLP 1 1. วัคซีนซึ่งประกอบด้วย VLP ของข้อถือสิทธิที่ 9 1 2. องค์ประกอบทางเภสัชกรรมซึ่งประกอบด้วย VLP ของข้อถือสิทธิที่ 9 1 3. วิธีการของการป้องกันการติดเชื้อ HPV ซึ่งประกอบด้วยการให้วัคซีนของข้อถือสิทธิที่ 11 แก่ สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม 1 4. วิธีการสำหรับการชักนำการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันในสัตว์ซึ่งประกอบด้วยการให้ VLP ของ ข้อถือสิทธิที่ 9 แก่สัตว์ 1 5. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 10 ที่ซึ่งยีสต์ถูกเลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วยแซคคาโรไมซิส เซอรีวิซิอี (Saccharomyces cerevisiae), ฮานเซนูลา โพลีมอร์ฟา (Hansenula Polymorpha), พิเชีย พาสตอริส (Pichia pastoris), คลายเวอร์ไมซิส ฟรากิลิส (Kluyvermycesfragilis), คลายเวอโรไมซิส แลคติส (Kluyveromyces lactis) และชิโซแซคคาโรไมซิส ปอมเป (Schizosaccharomyces pombe) 1 6. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 15 ที่ซึ่งยีสต์ คือ แซคคาโรไมซิส เซอริวิซิอี (Saccharomyces cerevisiae) 1 7. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 10 ที่ซึ่งโมเลกุลกรดนิวคลีอิคประกอบด้วยลำดับของนิวคลีโอไทด์ดังที่ กำหนดไว้ก่อนหน้าใน SEQ ID NO:2 หรือ SEQ ID NO:3 1 8. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 17 ที่ซึ่งโมเลกุลกรดนิวคลีอิคประกอบด้วยส่วนสำคัญของลำดับของ นิวคลีโอไทด์ดังที่กำหนดไว้ก่อนหน้าใน SEQ ID NO:2 หรือ SEQ ID NO:3 1 9. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 10 ที่ซึ่งขั้นตอน (a) ประกอบต่อไปด้วยการเปลี่ยนรูปเซลล์ยีสต์ด้วย โมเลกุลกรดนิวคลีอิคที่แปลรหัส HPV31 L2 โปรตีน 2 0. อนุภาคที่คล้ายไวรัส (VLP) ของพาพิลโลมาไวรัสมนุษย์(HPV) ซึ่งประกอบด้วยรีคอมบิแนนท์ L1 โปรตีนของ HPV31 ที่ซึ่งรีคอมบิแนนท์ L1 โปรตีนประกอบด้วยส่วนสำคัญของลำดับกรดอะมิโนดังที่ กำหนดไว้ก่อนหน้าใน SEQ ID NO:4 2 1. วิธีการสำหรับการชักนำการตอบสนองทางถูมิคุ้มกันในสัตว์ซึ่งประกอบด้วยการให้ HPV31 VLP ของข้อถือสิทธิที่ 20 แก่สัตว์ 2 2. VLP ของข้อถือสิทธิที่ 20 ที่ซึ่ง VLP ถูกผลิตในยีสต์ ------- 1. ซึ่งลำดับกรดนิวคลีอิคได้ถูกทำให้เหมาะสมเชิง โคดอนเพื่อให้การแสดงออกที่ระดับสูง ในเซลล์ยีสต์ 2. เวคเตอร์ ซึ่งประกอบรวมด้วยโมเลกุลกรดนิวคลีอิคตามข้อถือสิทธิ 1 3. เซลล์เจ้าบ้าน ซึ่งประกอบด้วยเวคเตอร์ตามข้อถือสิทธิ 2 4. เซลล์เจ้าบ้านตามข้อถือสิทธิ 3, โดยที่เซลล์เจ้าบ้านจะถูกเลือกสรรจากกลุ่มซึ่งประกอบ รวมด้วย: แซคคาโรไมซิส เซอรีวิซีอี (Saccharomyces cerevisiae), ฮานเซนูลา โพลีมอร์ฟา (Hansenula polymorpha), พิเซีย พาสตอริส (Pichia pastoris), คลายเวอร์ไมซิส ฟรากิลิส (Kluyvermyces fragilis), คลายเวอโรไมซิส แลคติส (Kluyveromyces lactis), และชิโซแซคคา- โรไมซิส ปอมเป (Schizosaccharomyces pombe) 5. เซลล์เจ้าบ้านตามข้อถือสิทธิ 4, โดยที่เซลล์เจ้าบ้านคือ แซคคาโรไมซิส เซอรีวิซิอี (Saccharomyces cerevisiae) 6. โมเลกุลกรดนิวคลีอิคตามข้อถือสิทธิ 1, โดยที่สายลำดับของนิวคลีโอไทด์จะประกอบรวม ด้วยสายลำดับของนิวคลีโอไทด์ดังที่อธิบายไว้ใน SEQ ID NO:2 7. เวคเตอร์ ซึ่งประกอบรวมด้วยโมเลกุลกรดนิวคลีอิคตามข้อถือสิทธิ 6 8. เซลล์เจ้าบ้าน ซึ่งประกอบรวมด้วยเวคเตอร์ ตามข้อถือสิทธิ 7 1.1 0. เวคเตอร์ ซึ่งประกอบรวมด้วยโมเลกุลกรดนิวคลีอิคตามข้อถือสิทธิ 9 1 1. เซลล์เจ้าบ้าน ซึ่งประกอบรวมด้วยเวคเตอร์ตามข้อถือสิทธิ 10 1 2. อนุภาคที่คล้ายไวรัส (VLPs) ที่ประกอบรวมด้วย รีคอมบิแนนท์ L1 โปรตีน หรือ รีคอมบิแนนท์ L1+L2 โปรตีน ของ HPV31 1 3. VLPs ตามข้อถือสิทธิ 12 โดยที่รีคอมบิแนนท์ L1 โปรตีน หรือ รีคอมบิแนนท์ L1+L2 โปรตีน จะถูกผลิตในยีสต์ 1 4. VLPs ตามข้อถือสิทธิ 13, โดยที่รีคอมบิแนนท์ L1 โปรตีน หรือรีคอมบิแนนท์ L1+L2 โปรตีน จะถูกแปลรหัสจากโมเลกุลกรดนิวคลีอิค HPV31 L1 ที่ถูกทำให้เหมาะสมเชิงโคดอน 1 1.1 6. วิธีการของการผลิต VlPs ตามข้อถือสิทธิ 14, ซึ่งประกอบรวมด้วย: (a) การปลูกถ่ายยีสต์ด้วยโมเลกุล DNA ที่ถูกทำให้เหมาะสมเชิงโคดอน ซื่งให้การ แปลรหัส HPV31 L1 โปรตีน หรือ HPV31 L1+L2 โปรตีน; (b) การเพาะเลี้ยงยีสต์ที่ถูกปลูกถ่าย ภายใต้สภาวะที่ยอมให้มีการแสดงออกของ โมเลกุล DNA ที่ถูกทำให้เหมาะสมเชิงโคดอน เพื่อผลิตรีคอมบิแนนท์ พาพิลโลมา ไวรัสโปรตีน; และ (c) การแยกรีคอมแนนท์ พาพิลโลมาไวรัส โปรตีน เพื่อผลิต VLPs ตามข้อถือสิทธิ 14 1 7. วัคซีน ซึ่งประกอบรวมด้วย VLPs ตามข้อถือสิทธิ 14 1 8. สารผสมเชิงเภสัชกรรม ซึ่งประกอบรวมด้วย VLPs ตามข้อถือสิทธิ 14 1 9. วิธีการของการป้องกันการติดเชื้อ HPV ซึ่งประกอบรวมด้วยการให้วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 17 แก่สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม 2 0. วิธีการสำหรับการชักนำการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันในสัตว์ ซึ่งประกอบรวมด้วยการให้ VLPs ตามข้อถือสิทธิ 14 แก่สัตว์ 2 1. อนุภาคที่คล้ายไวรัสตามข้อถือสิทธิ 14 โดยที่ยีสต์จะถูกเลือกสรรจากกลุ่มซึ่งประกอบ รวมด้วย : แซคคาโรไมซิส เซอรีวิซิอี (Saccharomyces cerevisiae), ฮานเซนูลา โพลีมอร์ฟา (Hansenula polymorpha), พิเซีย พาสตอริส (Pichia pastoris), คลายเวอร์ไมซิส ฟรากิลิส (Kluyveromyces fragilis), คลายเวอโรไมซิส แลคติส (Kluyveromyces lactis), และชิโซแซค- คาโรไมซิส ปอมเป (Schizosaccharomyces pombe) 2 2. อนุภาคที่คล้ายไวรัสตามข้อถือสิทธิ 21, โดยที่ ยีสต์ คือ แซคคาโรไมซิส เซอรีวิซิอี (Saccharomyces cerevisiae) 2 3. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 17, ซึ่งประกอบรวมต่อไปด้วย VLPs ของ HPV เพิ่มเติมอย่างน้อย หนึ่งชนิด 2 4. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 23, โดยที่ HPV เพิ่มเติมอย่างน้อยหนึ่งชนิด จะถูกเลือกสรรจาก กลุ่มซึ่งประกอบด้วย : HPV6, HPV11, HPV16, HPV18, HPV33, HPV35, HPV39, HPV45, HPV51, HPV52, HPV55, HPV56, HPV58, HPV59, และ HPV68 2 5. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 24 , โดยที่ HPV เพิ่มเติมอย่างน้อยหนึ่งชนิด จะประกอบด้วย HPV16 2 6. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 25, ซึ่งประกอบรวมต่อไปด้วย HPV18 VLPs 2 7. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 26, ซึ่งประกอบรวมต่อไปด้วย HPV6 VLPs และ HPV11 VLPs 2 8. โมเลกุลกรดนิวคลีอิคซึ่งประกอบรวมด้วยสายลำดับของนิวคลีโอไทด์ที่แปลรหัส HPV31 L1 โปรตีน, โมเลกุลกรดนิวคลีอิคจะปราศจากสัญญาณการสิ้นสุดทรานสคริปชั่นที่ถูกจดจำได้โดย ยีสต์ 2 9. เวคเตอร์ ซึ่งประกอบรวมด้วยโมเลกุลกรดนิวคลีอิคตามข้อถือสิทธิ 28 3 0. เซลล์เจ้าบ้าน ซึ่งประกอบรวมด้วยเวคเตอร์ตามข้อถือสิทธิ 29 3 1. เซลล์เจ้าบ้านตามข้อถือสิทธิ 30, โดยที่เซลล์เจ้าบ้านจะถูกเลือกสรรจากกลุ่มซึ่งประกอบ รวมด้วย: แซคคาโรไมซิส เซอรีวิซิอี (Saccharomyces cerevisiae), ฮานเซนูลา โพลีมอร์ฟา (Hansenula polymorpha), พิเชีย พาสตอริส (Pichia pastoris), คลายเวอร์ไมซิส ฟรากิลิส (Kluyvermyces fragilis), คลายเวอโรไมซิส แลคติส (Kluyveromyces lactis), และชิโซแซคคา- โรไมซิส ปอมเป (Schizosaccharomyces pombe) 3 2. เซลล์เจ้าบ้านตามข้อถือสิทธิ 31, โดยที่เซลล์เจ้าบ้านคือ แซคคาโรไมซิส เซอรีวิซิอี (Saccharomyces cerevisiae) 3 3. VLPs ตามข้อถือสิทธิ 13, โดยที่ รีคอมบิแนนท์ L1 โปรตีน หรือรีคอมบิแนนท์ L1+L2 โปรตีน จะถูกแปลรหัสจากโมเลกุลกรดนิวคลีอิค HPV31 L1 ที่ปราศจากสัญญานการสิ้นสุด ทรานสคริปชั่นที่ถูกจดจำได้โดยยีสต์ 3 4. วิธีการสำหรับการผลิต VLPs ตามข้อถือสิทธิ 33, ซึ่งประกอบรวมด้วย: (a) การปลูกถ่ายยิสต์ด้วยโมเลกุล DNA ซึ่งให้การแปลรหัส HPV31 L1 โปรตีน หรือ HPV31 L1+L2 โปรตีน, ซึ่งโมเลกุล DNA จะปราศจากสัญญานการสิ้นสุด ทรานสคริปชั่นที่ถูกจดจำได้โดยยิสต์; (b) การเพาะเลี้ยงยีสต์ที่ถูกปลูกถ่าย ภายใต้สภาวะที่ยอมให้มีการแสดงออกของ โมเลกุล DNA เพื่อผลิตรีคอมบิแนนท์ พาพิลโลมาไวรัส โปรตีน; และ (c) การแยกรีคอมบิแนนท์ พาพิลโลมาไวรัส โปรตีน เพื่อผลิต VLPs ตามข้อถือสิทธิ 33 3 5. วัคซีน ซึ่งประกอบรวมด้วย VLPs ตามข้อถือสิทธิ 33 3 6. สารผสมเชิงเภสัชกรรม ซึ่งประกอบรวมด้วย VLPs ตามข้อถือสิทธิ 33 3 7. วิธีการของการป้องกันการติดเชื้อ HPV ซึ่งประกอบรวมด้วยการให้วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 35 แก่สัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม 3 8. วิธีการสำหรับการชักนำการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันในสัตว์ ซึ่งประกอบรวมด้วยการให้ VLPs ตามข้อถือสิทธิ 33 แก่สัตว์ 3 9. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 35, ซึ่งประกอบรวมต่อไปด้วย VLPs ของ HPV เพิ่มเติมอย่างน้อย หนึ่งชนิด 4 0. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 39, โดยที่ HPV เพิ่มเติมอย่างน้อยหนึ่งชนิด จะถูกเลือกสรรจาก กลุ่มซึ่งประกอบด้วย : HPV6, HPV11, HPV16, HPV18, HPV33, HPV35, HPV39, HPV45, HPV51, HPV52, HPV55, HPV56, HPV58, HPV59, และ HPV68 4

1. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 40, โดยที่ HPV เพิ่มเติมอย่างน้อยหนึ่งชนิด จะประกอบด้วย HPV16 4

2. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 41, ซึ่งประกอบรวมต่อไปด้วย HPV 18 VLPs 4

3. วัคซีนตามข้อถือสิทธิ 42, ซึ่งประกอบรวมต่อไปด้วย HPV6 VLPs และ HPV11 VLPs