Claims (6)
ข้อถือสิทธฺ์ (ทั้งหมด) ซึ่งจะไม่ปรากฏบนหน้าประกาศโฆษณา :แก้ไข 27 กย. 61 ข้อถือสิทธิ 1. วิธีการสำหรับการผลิตของเมไธโอนีน (methionine), สารตั้งต้น หรือ อนุพันธ์ S-เอซิล เมไธโอนีน (SAM) และ N-เอซิลเมไธโอนีน (NAM) ของสิ่งนั้นในกระบวนการที่เป็นการหมักที่ ประกอบรวมด้วย: การเพาะเลี้ยงจุลชีพที่ถูกดัดแปลง, ที่มีการแสดงออกมากเกินของแอลลีลโฮโมซีรีนซักซี นิลทรานสเฟอเรสที่มีสภาพไวตอบกลับที่ถูกทำให้ลดลงต่อ S-เอซิลเมไธโอนีน (SAM) และเมไธ โอนีน, ในตัวกลางสำหรับการเพาะเลี้ยงที่เหมาะสมที่ประกอบรวมด้วยแหล่งของคาร์บอน, แหล่ง ของซัลเฟอร์ และแหล่งของไนโตรเจน และ การนำกลับมาของเมไธโอนีน และ/หรือ สารตั้งต้น หรือ อนุพันธ์ดังกล่าวของสิ่งนั้น, จาก ตัวกลางสำหรับการเพาะเลื้ยงดังกล่าว, เมื่อจุลชีพดังกล่าวถูกดัดแปลงโดยเปลี่ยนรูปลำดับของยีนซีรีนดีเอมีเนส (sdaA) ของสิ่งนั้น ในตำแหน่ง 158 ด้วย G นิวคลีโอไทด์ เมื่อเทียบกับยีน sdaA ชนิดที่เกิดจากธรรมชาติจาก E. coli SEQ ID No:21), โดยสิ่งนั้น จึงเพิ่มความสามารถจัดหาได้ของซีรีนในจุลชีพ +++++++++++++++++++++++++++++ 1. วิธีการสำหรับการผลิตของเมไธโอนีน (methionine), สารตั้งต้นหรืออนุพันธ์ของ สิ่งนั้นในกระบวนการที่เป็นการหมักที่ประกอบไปด้วยต่อไปนี้ขั้นตอน: - การเพาะเลี้ยงจุลชีพที่ถูกดัดแปลงในตัวกลางสำหรับการเพาะเลี้ยงที่เหมาะสม ที่ประกอบไปด้วยแหล่งของคาร์บอน, แหล่งของซัลเฟอร์ และแหล่งของไนโตรเจน, และ - การนำกลับมาของเมไธโอนีนและ/หรืออนุพันธ์ของสิ่งนั้นจากตัวกลางสำหรับ การเพาะเลี้ยง, เมื่อจุลชีพถูกดัดแปลงในทางที่ลดการเปลี่ยนรูปของธรีโอนีนในสารประกอบอื่นๆ นอกจากเมไธโอนีน 2. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 1 เมื่อการผลิตของไกลซีนจากธรีโอนีนถูกทำให้ลดลง 3. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 2 เมื่อฤทธิ์เอนไซม์ที่เปลี่ยนรูปธรีโอนีนไปเป็นไกลซีนถูกทำ ให้ลดลง 4. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 3 เมื่อการแสดงออกของอย่างน้อยหนึ่งชนิดของยีนต่อไปนี้ ถูกทำให้อ่อนกำลังลง: ItaE, kbl, glyA, tdh 5. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 4 เมื่อเอนไซม์ GlyA ที่เป็นตัวเปลี่ยนรูปถูกแสดงออกว่ามีฤทธิ์ ของธรีโอนีนแอลดอเลสที่ถูกทำให้อ่อนกำลังลง, ในขณะที่ฤทธิ์ของซีรีนไฮดรอกซีเมธิล ทรานสเฟอเรส ของเอนไซม์ GlyA ดังกล่าวถูกรักษาไว้ 6. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 5 เมื่อเอนไซม์ GlyA ดังกล่าวมีอย่างน้อยหนึ่งชนิดของการ เปลี่ยนของกรดอะมิโนต่อไปนี้ในลำดับพอลิเพปไทด์ของสิ่งนั้น: T128S, T224S, T225S, T226S, T227S, T230S, R235K. 7. วิธีการตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 4 ถึง 6 เมื่อยีนที่เกิดขึ้นภายใน glyA ถูกลบ ออกไปจากจุลชีพ 8. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 1 เมื่อจุลชีพถูกดัดแปลงในทางที่การผลิตของไอโซลิวซีน จากธรีโอนีนถูกทำให้ลดลง 9. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 8 เมื่อดีเอมีเนชันและ/หรือดีไฮเดรเตชันของธรีโอนีนไปเป็น แอลฟา-คีโตบิวทีเรตถูกทำให้ลดลง 1 0. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 9 เมื่ออย่างน้อยหนึ่งชนิดของฤทธิ์ของเอนไซม์ต่อไปนี้ถูกทำ ให้อ่อนกำลังลง: ธรีโอนีน ดีเอมีเนส, ธรีโอนีน ดีไฮดราเตส 1Disclaimer (all) which will not appear on the advertisement page: Amendment 27 Sep. 61 Clause 1. Methods for methionine production. (methionine), substrate or derivative S-azylmethionine (SAM) and N-azylmethionine (NAM) of them in a fermentation process that Contains: culture of modified microorganisms, with overexpression of alleles, homoserricans Vinyl Transferase with reduced response sensitivity per S-azyl methionine (SAM) and methionine, in suitable culturing mediums containing carbon, sulfur and nitrogen sources and methion recovery. Onene and / or such precursors or derivatives, from the said medium, when the microorganisms are modified by altering the sequence of the serene damenase (sdaA) gene of That in position 158 with G nucleotides compared to the naturally occurring sdaA gene from E. coli SEQ ID No: 21), thereby increasing the availability of serine in microorganisms. +++++++++++++++++++++++++++++ 1. Methods for the production of methionine. (methionine), precursor or derivative of That in a fermentation process that consists of the following steps: - microorganism culture modified in suitable culture medium. Containing carbon sources, sulfur sources And the source of nitrogen, and - return of methionine and / or its derivatives from the medium for Culture, when microorganisms are modified in a way that reduces the deformation of threonine in other compounds. Other than methionine 2. Method of claim 1 when the production of glycine from threonine is reduced 3. Method of claim 2 when the activity of thre transformative enzyme Onene to glycine was reduced to 4. Method of claim 3 when expression of at least one of the following genes. Softened: ItaE, kbl, glyA, tdh 5. Method of claim 4 When the transformative GlyA enzyme is expressed as potent. Of threonine aldolase, while the serene hydroxymethyltransferase activity of the GlyA enzyme was maintained.6. Method of claim 5 When the GlyA enzyme contains at least one type of Replace the following amino acids in the polypeptide sequence of that: T128S, T224S, T225S, T226S, T227S, T230S, R235K. 7. Method according to any one of claim 4. Up to 6 when the genes formed inside glyA are removed from the microorganism 8. Method of claim 1, when the microorganism is modified in a way that isoleucine production From threonine is reduced. 9. Claim Method 8 When the DEMI and / or dehydration of threonine become Alpha-ketobutyrate was reduced to 1 0. Method of claim 9 when at least one of the following enzyme activity types was performed. To weaken: threonine dehydrate, threonine dehydrate 1.
1. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 10 เมื่อการแสดงออกของอย่างน้อยหนึ่งชนิดของยีนต่อไปนี้ ถูกทำให้อ่อนกำลังลง: ilvA, tdcB, sdaA, sdaB, tdcG 11. Method of claim 10 when the expression of at least one of the following genes Subdued: ilvA, tdcB, sdaA, sdaB, tdcG 1.
2. วิธีการตามข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิที่ 1 ถึง 11 เมื่อความสามารถจัดหาได้ของซีรีน ในจุลชีพถูกทำให้เพิ่มขึ้น 12. Approach to any one of claims 1 through 11 when Serine's availability. In microorganisms is increased by 1
3. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 12 เมื่อการผลิตของซีรีนถูกทำให้เพิ่มขึ้นในจุลชีพ, โดยการ เพิ่มการแสดงออกของอย่างน้อยหนึ่งชนิดของยีน serA, serB, serC 13. Method of claim 12, when the production of serine is increased in microorganisms, by increasing the expression of at least one type of serA, serB, serC 1 genes.
4. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 12 หรือ 13, เมื่อการสลายตัวของซีรีนถูกทำให้ลดลงโดยการ ทำให้อ่อนกำลังลงของฤทธิ์ของอย่างน้อยหนึ่งชนิดของยีน sdaA หรือ sdaB, ที่เข้ารหัสเอนไซม์ ที่มีฤทธิ์ของซีรีนดีเอมีเนส 14. Method of claim 12 or 13, when serine decay is reduced by Weakens the activity of at least one type of sdaA or sdaB gene, encoding the enzyme. That has the effect of Serene D amines 1
5. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 11 หรือ 14 เมื่อยีน sdaA มีการเปลี่ยนแปลงของนิวคลีโอไทด์ T158G ในลำดับของนิวคลีอิกของสิ่งนั้น 15. Method of claim 11 or 14, when the sdaA gene is modified T158G nucleotide in the nucleic sequence of that 1.
6. จุลชีพที่ถูกดัดแปลง ซึ่งประกอบด้วย: - การลบออกของยีน metJ, - การแสดงออกของแอลลีล metA ที่มีที่สภาพไวตอบกลับที่ถูกทำให้ลดลง ไปเป็น เมไธโอนีน, และ - อย่างน้อยหนึ่งชนิดของการดัดแปลง เช่น ที่ถูกอธิบายในข้อใดข้อหนึ่งของ ข้อถือสิทธิที่ 1 ถึง 156. Modified microorganisms These include: - deletion of the metJ gene, - expression of the sensitive metA allele that is reduced to methionine, and - at least one type of alteration such as That is described in one of the Claims 1 to 15