Claims (1)
ข้อถือสิทธฺ์ (ทั้งหมด) ซึ่งจะไม่ปรากฏบนหน้าประกาศโฆษณา :1 แอนติเจนที่ได้จากการคัดเลือกของ เชื่อเลปโตไปราชนิด ชิโรวาร์ ตรวจพบชิโรวาร์ส่วนมากคือ ไซโร , ไพโรจีเนส , บราทิสลาวา และชิโรวาร์อื่นๆ 5 จากการตรวจวิเคราะห์ห้องปฏิบัติการในการรวบรวมข้อมูลการระบาดจะคัดเลือกใช้เป็นแอนติเจนของเชื่อเลปโตสไปราชนิดชิโรวาร์ที่พบบ่อย มาพัฒนาชุดทดลอง 2. น้ำยาที่ใช้แอนติเจนตามข้อถือสิทธิ 1 ซึ่งมีวิธีเตรียม ขั้นตอน 1 การเตรียมเชื้อเลปโตสไปราเพื่อเตรียมเป็นแอนติเจน และการเตรียมเม็ดลาเท็กซ ขั้นตอน 2 การเตรียมชุดน้ำยาทดสอบ รายระเอียดของแต่ละขั้นตอนมีดังนี้ ขั้นตอนที่ 1 การเตรียมเชื่อเลปโตสไปราเพื่อเตรียมเป็นเอนติเจนและการเตรียมเม็ดลาเท็กซ วิธีการเพาะเลี้ยงเชื่อเลปโตสไปราและกาเตรียมน้ำยาต่างๆ 1. การเตรียมอาหารเลี้ยงเชื้อชนิดเหลวเพื่อใช้สำหรับเพาะเลี้ยงเชื่อเลปโตสไปรา ประกอบด้วย นีโอเปปโตน มีเดียม (neopeptone medium ) ชั่ง 0.4 กรัม ผสมกับเกลือโซเดียมครอไรต์ 0.2 กรัมเติมน้ำกลั่น 200 มิลลิลิตร ต้มในน้ำเดือดเพื่อให้ส่วนผสมละลายให้เข้ากันดี ปรับพี เอช ที่ 7.4 นำไปนึ่งฆ่าเชื่อในหม้อนึ่งความดัน 15 ปอนด์ ที่อุณหภูมิ 121 องศาเซลเซียส เป็นเวลานาน 15 นาที เตรียมซีรัมของกระต่ายโดยนำไปอุ่นในน้ำอุ่น (water bath) ที่ อุณหภูมิ 56 องศาเซลเซียส เป็นเวลานาน 30 นาที และกรองผ่านกระดาษกรองขนาด 0.45 ไมครอน เตรียมอาหารเลี้ยงเชื้อที่จะเพาะเลี้ยง เลปโตสไปรา ด้วยการผสม ซีรัมของกระต่ายที่อุ่นแล้ว ผสมกับอาหารเลี้ยงเชื้อชนิดเหลวในอัตราส่วน 1 ต่อ 10 ส่วน โดยเทคนิคปราศจากเชื้อ (aseptic technique) นำอาหารเลี้ยงเชื้อที่ผสมแล้ว นำไปอุ่นที่ 65 องศาเซลเซียส นาน 1 ชั่วโมงทำซ้ำเป็น 2 วัน ติดต่อกัน จะเป็นอาหารเลี้ยงเชื้อชนิดเหลวที่ใช้เพาะเลี้ยงเชื้อ เก็บไว้ที่อุณหภูมิห้องเก็บได้นาน 1-2 อาทิตย์Disclaimer (all) which will not appear on the advertisement page: 1 Antigen obtained from the selection of The Shirovar-type leptopira is believed to detect most of the Shirovars, namely, xiro, pyrogenase, Bratislava and other Shirovars 5 from laboratory analysis to collect data. Outbreaks are selectively used as antigens of the common Shirovar type leptospira. To develop a trial kit 2. Reagent using antigens according to claim 1, which has a method of preparation for step 1, leptospira preparation for preparation of antigen. And preparation of latex tablets. Step 2: Preparation of test reagents The details of each step are as follows: Step 1: Leptospira preparation for entgenology and latex tablet preparation. Leptospira culture methods and various reagents 1. Preparation of liquid culture medium for use for leptospira culture consisting of neopeptone medium weighing 0.4 g. Mix with 0.2 g of crotone sodium salt, add 200 ml of distilled water, boil in boiling water to mix well, adjust pH at 7.4, steam in 15 lb autoclave at 121 ° C. For 15 minutes, the rabbit serum was prepared by warming it in warm water (water bath) at a temperature of 56 ° C for 30 minutes and filtered through 0.45 micron filter paper. Prepare a medium to cultivate leptose. Fungus by mixing the serum of the warm rabbit. Mix with liquid culture medium at a ratio of 1: 10 parts by aseptic technique, bring the mixed culture medium and warm it to 65 ° C for 1 hour and repeat for 2 days in a row. Liquid type for culture Stored at room temperature for 1-2 weeks
1. ใช้ลาเท็กซ 1 ส่วน ผสมกับน้ำยาบอแรทบัฟเฟอร์เซลาย 5ส่วนปั่นในเครื่องปั่นที่มีความเร็วรอบ 5,000 รอบต่อนาที ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส นาน 15 นาที ดูดส่วนใสทิ้งโดยใช้ไปเปตนำส่วนของตะกอนลาเท๊กซมาปั่นและล้าง เหมือนเดิมทำซ้ำ 3 ครั้ง เมื่อครบ 3 ครั้ง แล้ว ให้ละลายส่วนผสมของตะกอนลาเท๊กซ ด้วยน้ำยาบอร์รทบัฟเฟอร์ เซลาย 5 ส่วน เก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียส เก็บได้นาน 6 เดือน การเตรียมชุดทดสอบโดยการเคลือบแอนติเจนของเชื้อเลปโตสไปราบบนเม็ดลาเท็กซมีกรรมวิธีดังนี้ ผสมของส่วนแอนติเจนที่เตรียมไว้ 1 ส่วน รวมกับลาเท๊กซที่เตรียมไว้ 1 ส่วน เขย่าให้เข้ากันดีแล้ว เป็นเวลา 1 ชั่วโมง แล้วนำไปเก็บไว้ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส เพื่อให้แอนติเจนเคลือบติดบนเมล็ด ลาเท็กซ วันรุ่งขึ้นนำมาปั่นด้วยครื่องปั่นความเร็วรอบ 5,000 รอบต่อนาที ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส นาน 15 นาที ส่วนของตะกอนเติม 5 ส่วน ของบล๊อคกิ้งบัฟเฟอร์ เขย่าด้วยเครื่องเขย่าเบาๆ เป็นเวลานาน 2 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส เมื่อครอบกำหนดเวลานำไปปั่นและล่างด้วย บล็อกกิ้งบัฟเฟอร์ ทำซ้ำ 3 ครั้ง ด้วยเครื่องปั่นเหมือนเดิม จะทำให้แอนติเจนเชื่อเลปโตสไปราถูกเคลือบติดแน่นบนเม็ดลาเท็กซ ขั้นตอนสุดท้ายส่วนตะกอนให้ละลายด้วยฟอสเฟทบัฟเฟอร์ ปริมาตร 17 ส่วน น้ำยาทดสอบที่เตรียมไว้ ที่ 4 องศาเซลเซียส เก็บไว้ได้นาน 6 เดือน1. Mix 1 part latex with borat buffer silai solution. 5 parts are blended in a blender at a speed of 5,000 rpm at a temperature of 4 degrees Celsius for 15 minutes, vacuuming the clear part by pipetting the latex sludge to spin and rinse. Repeat 3 times, after 3 times, dissolve the Latex sludge mixture. The 5 parts borate buffer silicate solution was stored at 4 ° C for 6 months. The preparation of the test kit by coating the Leptose Spill antigen on the latex tablet was performed as follows. Mix 1 part of the prepared antigen with 1 part of the prepared lattex, shake well for 1 hour and store it at 4 ° C so that the antigen is coated on the lattex seed. The next day, it was blended with a blender at a speed of 5,000 rpm at 4 degrees Celsius for 15 minutes. 5 parts of the sludge was added to the blocking buffer. Shake it with a shaker for 2 hours at a temperature of 4 ° C. Blocking buffer is repeated 3 times with the same blender. Will cause the antigen to believe the leptospira is firmly coated on the latex beads In the final step, the sediment was dissolved with 17 part phosphate buffer, the test solution prepared at 4 ° C, and stored for 6 months.