Claims (29)
------05/04/2561------(OCR) หน้า 1 ของจำนวน 1 หน้า ข้อถือสิทธิ------05/04/2561------(OCR) Page 1 of 1 page. Claims.
1. โมเลกุลกรดนิวคลิอิกที่มีรหัส HPV58 L1 โปรตีนซํ่งประกอบด้วย SEQ ID NO:2 โดยที่โมเลกุล กรดนิวคลิอิกดังกล่าวประกอบด้วยลำดับกรดนิวคลิอิกที่มีรหัส SEQ ID NO:2 ชํ่งมีโคดอนที่ลูกปรับแต่งให้ เหมาะสมต่อการแสดงออกที่ระดับสูงในเซลล์ยีสต์1. A nucleic acid molecule coded as HPV58 L1 protein containing SEQ ID NO:2, where the nucleic acid sequence with SEQ ID NO:2 has a codon modified to be suitable for high expression levels in yeast cells.
2. เวกเตอร์ที่ประกอบด้วยโมเลกุลกรดนิวคลิอิก ตามข้อถือสิทธิที่ 12. A vector containing nucleic acid molecules, as per claim 1.
3. เซลล์เจ้าบ้านที่ประกอบด้วยเวกเตอร์ ตามข้อถือสิทธิที่ 2 ที่ชํ่ง เซลล์เจ้าบ้านเป็นเซลล์ยีสต์3. Host cell containing the vector, according to claim 2, whereby the host cell is a yeast cell.
4. เซลล์เจ้าบ้านตามข้อถือสิทธิที่ 3 ที่ซึ๋ง เซลล์เจ้าบ้านเป็นเชลล์ยีสต์4. Host cell according to claim 3, where the host cell is a yeast cell.
5. เชลล์เจ้าบ้านตามข้อถือสิทธิที่ 4 ที่ชง เชลล์ยีสต์ คัดเลือกได้จากหมู่ที่ประกอบด้วย Saccharomyces cerevisiae, Hansenula polymorpha, Pichia pastoris, Kluyveromyces fragilis, Kluyveromyces lactis และ Schizosaccharomyces pombe5. The host cell according to claim 4, which states that yeast cells can be selected from groups consisting of Saccharomyces cerevisiae, Hansenula polymorpha, Pichia pastoris, Kluyveromyces fragilis, Kluyveromyces lactis, and Schizosaccharomyces pombe.
6. เซลล์เจ้าบ้านตามข้อถือสิทธิที่ 5 ที่ซึ๋ง เซลล์เจ้าบ้านเป็น Saccharomyces cerevisiae6. The host cell according to claim 5, where the host cell is Saccharomyces cerevisiae.
7. โมเลกุลกรดนิวคลิอิก ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซํ่ง ลำดับกรดนิวคลิโอไทต์ประกอบด้วยลำดับ นิวคลิโอไทต์ดังกำหนดไจ้ใน SEQ ID NO:l7. A nucleic acid molecule, according to claim 1, in which the nucleotide sequence consists of the nucleotide sequence specified in SEQ ID NO:l.
8. เวณตอร์ที่ประกอบด้วย โมเลกุลกรดนิวคลิอิก ตามข้อถือสิทธิที่ 78. A space containing nucleic acid molecules, as per claim 7.
9. เซลล์เจ้าบ้านที่ซํ่ง เซลล์เจ้าบ้านเป็นเชลล์ยีสต์ ที่ประกอบด้วย เวกเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 8 ------------ 1.โมเลกุลกรดนิวคลิอิกที่ประกอบด้วย ลำดับนิวคลิโอไทด์ที่มีรหัสเป็น HPV58 L1 โปรตีน ดังกำหนดไว้ใน SEQ ID NO:2 ลำดับกรดนิวคลิอ ิกที่เป็นโคดอนที่ถูกปรับแต่งให้ เหมาะสมต่อการแสดงออกที่ระดับส ูงในเซลล์ยีสต์ 2.เวกเตอร์ที่ประกอบด้วยโมเลกุลกรดนิวคลิอิก ตามข้อถือสิทธิ ที่ 1 3.เซลล์เจ้าบ้านที่ประกอบด้วยเวกเตอร์ ตามข้อถือสิทธิที่ 2 4.เซลล์เจ้าบ้านตามข้อถือสิทธิที่ 3 ที่ซึ่ง เซลล์เจ้าบ้านเป็น เซลล์ยีสต์ 5.เซลล์เจ้าบ้านตามข้อถือสิทธิที่ 4 ที่ซึ่ง เซลล์ยีสต์ คัดเลือ กได้จากหมู่ที่ประกอบด้วย Saccharomyces cerevisiae, Hansenula polymorpha, Pichia pastoris, Kluyveromyces fragilis, Kluyverom yces lactis และ Schizosaccharomyces pombe 6.เซลล์เจ้าบ้านตามข้อถือสิทธิที่ 5 ที่ซึ่ง เซลล์เจ้าบ้านเป็น Sac charomyces cerevisiae 7.โมเลกุลกรดนิวคลิอิก ตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่ง ลำกัดกรดนิ วคลิอิกโอโทด์ ประกอบด้วย ลำดับนิวคลิโอไทด์กำหนดไว้ใน SEQ ID NO:1 8.เวกเตอร์ที่ประกอบด้วย โมเลกุลกรดนิวคลิอิก ตามข้อถือสิทธิที ่ 7 9.เซลล์เจ้าบ้านที่ประกอบด้วย เวกเตอร์ตามข้อถือสิทธิที่ 89. Host cell, where the host cell is a yeast cell, containing a vector according to claim 8 ------------ 1. A nucleic acid molecule containing the nucleotide sequence coded as HPV58 L1 protein as defined in SEQ ID NO:2. The nucleic acid sequence is a codon optimized for high expression levels in yeast cells. 2. A vector containing a nucleic acid molecule according to claim 1. 3. A host cell containing a vector according to claim 2. 4. A host cell according to claim 3, where the host cell is a yeast cell. 5. A host cell according to claim 4, where the yeast cell is selected from a group consisting of... 6. A host cell according to claim 5, where the host cell is Saccharomyces cerevisiae, Hansenula polymorpha, Pichia pastoris, Kluyveromyces fragilis, Kluyveromyces lactis, and Schizosaccharomyces pombe. 7. A nucleic acid molecule according to claim 1, where the nucleic acid otode sequence consists of the nucleotide sequence specified in SEQ ID NO:1. 8. A vector containing the nucleic acid molecule according to claim 7. 9. A host cell containing the vector according to claim 8.
10.อนุภาคที่คล้ายกับไวรัส (VLPs) ประกอบด้วย รีคอมบิแนนต์ L1 โปร ตีน หรือ รีคอมบิแนนต์ L1 + L2 โปรตีนของ HPV58 ที่ซึ่ง รีคอมบิแ นนต์ L1 โปรตีน หรือรีคอมบิแนนต์ L1+L2 โปรตีน ถูกสร้างขึ้นในย ีสต์10. Viral-like particles (VLPs) consist of recombinant L1 protein or recombinant L1+L2 proteins of HPV58, where the recombinant L1 protein or recombinant L1+L2 proteins are synthesized in the yeast.
11. VLPs ตามข้อถือสิทธิที่ 10 ที่ซึ่ง รีคอมบิแนนต์ L1 โปรตีน ห รือ รีคอมบิแนนต์ L1 + L2 โปรตีน ถูกสร้างรหัสโดยโคดอนที่ถูกปรับ แต่งให้เหมาะสมของโมเลกุลกรดนิวคลิอิก HPV5811. VLPs pursuant to claim 10, where recombinant L1 protein or recombinant L1+L2 protein is encoded by a modified codon of the nucleic acid molecule HPV58.
12. VLPs ตามข้อถือสิทธิที่ 11 ที่ซึ่ง โคดอนที่ถูกปรับแต่งให้เ หมาะสมของโมเลกุล กรดนิวคลิอิก ประกอบด้วยลำดับกรดนิวคลิโอไทด์ ดังกำหนดใน SEQ ID NO:112. VLPs pursuant to claim 11, where the optimized codon of a nucleic acid molecule contains the nucleotide sequence as defined in SEQ ID NO:1.
13.วิธีการที่ใช้สร้าง VLPs ตามข้อถือสิทธิที่ 11 ที่ประกอบด้ว ย (a) การทราส์ฟอร์มยีสต์ด้วยโมเลกุลดีเอ็นเอที่มีโคดอนที่ถูกปรั บแต่งให้เหมะสม ที่มีรหัส HPV58 L1 โปรตีน หรือ HPV58 L1 + L2 โปร ตีน (b) การเพาะเลี้ยงยีสต์ที่ถูกทรานส์ฟอร์มภายใต้สภาพต่าง ๆ ที่อำ นวยให้เกิด การแสดงออกของดีเอ็นเอโมเลกุลที่มีโคดอนที่ถูกปรับแต ่งให้เหมาะสม เพื่อ สร้างรีคอมบิแนนต์ พาพิลโลม่าไวรัสโปรตีน; และ (c) การสกัดแยกรีคอมบิแนนต์ พาพิลโลม่าไวรัสโปรตีน เพื่อสร้ าง VLPs ตาม ข้อถือสิทธิที่ 1113. Methods used to construct VLPs according to claim 11 include: (a) transformation of yeast with DNA molecules containing modified codons encoding HPV58 L1 protein or HPV58 L1 + L2 protein; (b) cultivation of the transformed yeast under various conditions conducive to the expression of DNA molecules containing modified codons to construct recombinant papilloma virus proteins; and (c) isolation of recombinant papilloma virus proteins to construct VLPs according to claim 11.
14.วัคซีนที่ประกอบด้วย VLPs ตามข้อถือสิทธิที่ 1114. Vaccines containing VLPs as per claim 11.
15.ส่วนประกอบยาที่ประกอบด้วย VLPs ตามข้อถือสิทธิที่ 1115. Pharmaceutical components containing VLPs as per claim 11.
16.วิธีการที่ใช้ป้องกันการติดเชื้อ HPV ที่ประกอบด้วยการให้วั คซีนตามข้อถือสิทธิที่ 14 ให้กับสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนม16. Methods used to prevent HPV infection include administering the vaccine under Patent 14 to mammals.
17.วิธีการสร้างการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันในสัตว์ ที่ประกอบด้วย การให้ VLPs ตาม ข้อถือสิทธิที่ 11 ให้กับสัตว์17. A method for inducing an immune response in animals, consisting of administering VLPs as per Claim 11 to the animals.
18.อนุภาคที่คล้ายกับไวรัส ตามข้อถือสิทธิที่ 11 ที่ซึ่ง ยีสต์ค ัดเลือกได้จาก หมู่ที่ประกอบ ด้วย Saccharomyces cerevisiae, Han senula polymorpha, Pichia pastoris, Kluyveromyces fragilis, Klu yveromyces lactis และ Schizosaccharomyces pombe18. Virus-like particles, according to claim 11, which yeast is selected from the group consisting of Saccharomyces cerevisiae, Han senula polymorpha, Pichia pastoris, Kluyveromyces fragilis, Kluyveromyces lactis, and Schizosaccharomyces pombe.
19.อนุภาคที่คล้ายคลึงกับไวรัส ตามข้อถือสิทธิที่ 18 ที่ซึ่ง ย ีสต์ ได้แก่ Saccharomyces cerevisiae19. Virus-like particles, according to claim 18, where yeast includes Saccharomyces cerevisiae.
20. วัคซีนตามข้อถือสิทธิที่ 14 ประกอบขึ้นเพิ่มเติมด้วย VLPs จากอย่างน้อยหนึ่งชนิด HPV เพิ่มเติม20. The vaccine under claim 14 is additionally composed of VLPs from at least one additional HPV species.
21. วัคซีนตามข้อถือสิทธิที่ 20 ที่ซึ่ง อย่างน้อย ชนิด HPV เพิ่มเติมหนึ่งชนิดได้คัดเลือก จากหมู่ที่ประกอบด้วย: HPV6, HPV11, HPV16, HPV18, HPV31, HPV33, HPV35, HPV39, HPV45, HPV51, HPV5 2, HPV55, HPV56, HPV59, และ HPV6821. A vaccine under claim 20 in which at least one additional HPV variant has been selected from a pool comprising: HPV6, HPV11, HPV16, HPV18, HPV31, HPV33, HPV35, HPV39, HPV45, HPV51, HPV52, HPV55, HPV56, HPV59, and HPV68.
22. วัคซีนตามข้อถือสิทธิที่ 21 ที่ซึ่ง อย่างน้อย ชนิด HPV หน ึ่งชนิด ประกอบขึ้นด้วย HPV1622. Vaccines under claim 21 in which at least one HPV species is included, namely HPV16.
23. วัคซีนตามข้อถือสิทธิที่ 22 ประกอบเพิ่มเติมด้วย HPV18 VLP s23. The vaccine under claim 22 includes additional HPV18 VLPs.
24. วัคซีนตามข้อถือสิทธิที่ 23 ประกอบเพิ่มเติมด้วย HPV6 VLP s และ HPV11 VLPs24. The vaccines under claim 23 include additional HPV6 VLPs and HPV11 VLPs.
25. วัคซีนตามข้อถือสิทธิที่ 24 ประกอบเพิ่มเติมด้วย HPV31 VL Ps25. The vaccine under claim 24 includes additional HPV31 VL Ps.
26. วัคซีนตามข้อถือสิทธิที่ 23 ประกอบเพิ่มเติมด้วย HPV31 VL Ps26. The vaccine under claim 23 includes additional HPV31 VL Ps.
27. วัคซีนตามข้อถือสิทธิที่ 25 ประกอบเพิ่มเติมด้วย HPV45 VL Ps27. The vaccine under claim 25 includes additional HPV45 VL Ps.
28. วัคซีนตามข้อถือสิทธิที่ 26 ประกอบเพิ่มเติมด้วย HPV45 VL Ps28. The vaccine under claim 26 includes additional HPV45 VL Ps.
29.โพลิเปปไทด์ HPV58 L1 ที่สกัดได้และที่ถูกทำให้บริสุทธิ์ ป ระกอบด้วย ลำดับกรดอะมิโนต่าง ๆ ดังกำหนดใน SEQ ID ON:229. The extracted and purified HPV58 L1 polypeptide contains the amino acid sequences as specified in SEQ ID ON:2.