TH6639C3

TH6639C3 - Method for testing Fusarium oxysporum f. Sp. Lycopersici, the cause of tomato wilt disease. With PCR technique

Info

Publication number: TH6639C3
Application number: TH903001079U
Authority: TH
Inventors: ศักดิ์ศิริรัตน์ รองศาสตราจารย์วีระศักดิ์; สุริยวนากุล นางมนัสวี
Original assignee: นางจิราภรณ์ เหลืองไพรินทร์
Filing date: 2009-09-10
Publication date: 2011-09-30

Abstract

DC60 (28/09/52) วิธีการตรวจสอบเชื้อรา Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici (Fol) สาเหตุโรคเหี่ยวเหลืองของ มะเขือเทศ โดยใช้ไพรเมอร์จำเพาะ (specific primer) ที่มีลำดับเบสเป็น 5'-CCGCATCTAC-3' ใน ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอเรส (polymerase chain reaction; PCR) และเมื่อตรวจสอบลายพิมพ์ดีเอ็นเอของ ผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ (PCR product) ที่เกิดขึ้น จะพบแถบดีเอ็นเอ (DNA) ที่มีขนาด 520 คู่เบส (base pair) ซึ่งเป็นแถบดีเอ็นเอ (DNA) ที่พบเฉพาะในเชื้อรา Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici (Fol) ที่เป็น สาเหตุของโรคเหี่ยวเหลืองในมะเขือเทศเท่านั้น โดยวิธีตามการประดิษฐ์นี้มีวัตถุประสงค์หลัก เพื่อพัฒนาการตรวจสอบเชื้อรา Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici (Fol) ให้รวดเร็วและแม่นยำยิ่งขึ้น โดยไม่จำเป็นต้องใช้ไพรเมอร์หลายคู่ เพื่อนำไปใช้ในการตรวจรับรอง การปลอดเชื้อรา Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici (Fol) ของเมล็ด พันธุ์มะเขือเทศที่จะส่งออก หรือใช้ในการยืนยันการเกิดโรคเหี่ยวเหลืองที่เกิดจากเชื้อรา Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici (Fol) ในมะเขือเทศ วิธีการตรวจสอบเชื้อรา Fusarium oxysporum f.sp.lycopersici (Fol) สาเหตุโรคเหี่ยวเหลืองของ มะเขือเทศ โดยใช้ไพรเมอร์จำเพาะ (specific primer) ที่มีลำดับเบสเป็น 5'-CCGCATCTAC-3' ใน ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลิเมอเรส (polymerase chain reaction; PCR) และเมื่อตรวจสอบลายพิมพ์ดีเอ็นเอของ ผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ (PCR product) ที่เกิดขึ้น จะพบแถบดีเอ็นเอ (DNA) ที่มีขนาด 520 คู่เบส (base pair) ซึ่งเป็นแถบดีเอ็นเอ (DNA) ที่พบเฉพาะในเชื้อรา Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici (fol) ที่เป็น สาเหตุของโรคที่เหี่ยวเหลืองในมะเขือเทศเท่านั้น โดยมีวิธีตามการประดิษฐ์นี้มีวัตถุประสงค์หลัก เพื่อพัฒนาการตรวจสอบเชื้อรา Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici (Fol) ให้รวดเร็วและแม่นยำยิ่งขึ้น โดยไม่จำเป็นต้องใช้ไพรเมอร์หลายคู่ เพื่อนำไปใช้ในการตรวจรับรอง การปบลอดเชื้อรา Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici(fol) ของเมล็ด พันธุ์มะเขือเทศที่จะส่งออก หรือใช้ในการยืนยันการเกิดโรคเหี่ยวเหลืองที่เกิดจากเชื้อรา Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici (Fol) ในมะเขือเทศ DC60 (28/09/52) Method for determining Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici (Fol) cause of tomato yellowness by using a specific primer with a base sequence. 5'-CCGCATCTAC-3 'in a polymerase chain reaction (PCR) and when examining the DNA of the The resulting PCR product will find a 520 base pair of DNA bands, a base pair of DNA found only in Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici (Fol). That is the only cause of yellow wilt in tomatoes The main objective of this invention was To develop faster and more accurate detection of Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici (Fol). Without the need to use multiple pairs of primers To be used in the verification Fungi-free Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici (Fol) of tomato seeds to be exported. Or used to confirm the occurrence of yellow wilt caused by Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici (Fol) in tomatoes. A specific primer with a base sequence 5'-CCGCATCTAC-3 'in a polymerase chain reaction (PCR) and when examining the DNA of the The resulting PCR product reveals a 520 base pair of DNA bands, a base pair of DNA found only in Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici (fol). That is the cause of the disease with yellowing in tomatoes only. With this method of invention having the main objective To develop faster and more accurate detection of Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici (Fol). Without the need to use multiple pairs of primers To be used in the verification Cloning of Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici (fol) of tomato seeds to be exported. Or for confirmation of yellow wilt caused by Fusarium oxysporum f.sp. lycopersici (Fol) in tomatoes.

Claims

1. Method for detecting Fusarium oxysporum f. S p. Lycopersici causing tomato yellowness by PCR technique using a primer with a base sequence. 5 \ '- CCGCATCTAC-3 \'

2. Method for testing Fusarium oxysporum f. S p. Lycopersici causing yellowness of tomatoes by PCR technique. (PCR) under claim 1, where there is a condition of polymerase chain reaction (PCR) in a thermocycle (thermal cycle) temperature programmed as follows: - step At 1 temperature 94 ° C for 1 minute (only the first cycle) - Stage 2 temperature 94 ° C for 1 minute 40 cycles - Stage 3 temperature 36 ° C for 1 minute 40 cycles - Stage 4 temperature 72 ° C for 1 minute - Step 5 temperature 72 ° C for 2 minutes (only for the final cycle) - At the end, set the temperature to 4 ° C until the PCR product is applied.

3. Methods for investigating Fusarium oxysporum f. S p. Lycopersici causing yellowship of tomatoes by PCR technique. (PCR) according to claim 2, where a PCR product that, when tested for DNA fingerprint with 2% agarose gel, is found DNA band (DNA) size 520 base pairs.