TH64114B - การใช้ไดเมธิลไดซัลไฟด์เพื่อการผลิตเมธิโอนีนในจุลชีพ - Google Patents

Abstract

DC60 (15/06/59) การประดิษฐ์นี้แสดงลักษณะกระบวนการที่ได้รับการปรับปรุง และสิ่งมีชีวิตเพื่อการผลิต เมธิโอนีน การประดิษฐ์ได้แสดงว่าสิ่งมีชีวิต เดลตาmetF หรือสิ่งมีชีวิต เดลตาmetE เดลตาmetH ตัวอย่างเช่น สายพันธ์กลายของ C. glutamicum หรือ E. coli สามารถใช้แหล่งซัลไฟด์ที่ปิดด้วยเมธิล เช่น ไดเมธิล ไดซัลไฟด์ (DMDS) เป็นแหล่งของทั้งหมู่กำมะถัน และเมธิล โดยการเลี่ยงผ่านความต้องการกิจกรรม ของ MetH/MetE และ MetF และความต้องการที่จะรีดิวซ์ซัลเฟต เพื่อการสังเคราะห์เมธิโอนีน ที่ยังได้ บรรยายในสิทธิบัตรคือข้อมูลที่เกี่ยวข้องกับ MetY (ที่ยังเรียกว่า MetZ) เป็นเอนไซม์ที่รวมเข้าแหล่ง เมธิล แคปด์ ซัลไฟด์ เช่น DMDS เข้าในเมธิโอนีน สายพันธ์ เดลตาmetF เดลตาmetB ของ C. glutamicum สามารถใช้แหล่งเมธิล แคปด์ ซัลไฟด์ เช่น DMDS เป็นแหล่งของทั้งหมู่กำมะถัน และเมธิล ยิ่งไปกว่านั้น การผลิตเมธีโอนีน โดยสิ่งมีชีวิตโปรโทโทรปิกที่ได้ถูกทำวิศวกรรมที่ผลิตเกิน O-อะซีทิล-โฮโมซีรีน ได้ถูกปรับปรุงโดยการเติมแหล่งเมธิล แคปด์ ซัลไฟด์ เช่น DMDS แก้ไขบทสรุปการประดิษฐ์ 15/06/59 การประดิษฐ์นี้แสดงลักษณะกระบวนการที่ได้รับการปรับปรุง และสิ่งมีชีวิตเพื่อการผลิต เมธิโอนีน การประดิษฐ์ได้แสดงว่าสิ่งมีชีวิต (สูตร)metF หรือสิ่งมีชีวิต (สูตร)metE (สูตร)metH ตัวอย่างเช่น สายพันธ์กลายของ C. glutamicum หรือ E. coli สามารถใช้แหล่งเมธิล แคปด์ ซัลไฟด์ เช่น ไดเมธิล ไดซัลไฟด์ (DMDS) เป็นแหล่งของทั้งหมู่กำมะถัน และเมธิล โดยการเลี่ยงผ่านความต้องการกิจกรรม ของ MetH/MetE และ MetF และความต้องการที่จะรีดิวซ์ซัลเฟต เพื่อการสังเคราะห์เมธิโอนีน ที่ยังได้ บรรยายในสิทธิบัตรคือข้อมูลที่เกี่ยวข้องกับ MetY (ที่ยังเรียกว่า MetZ) เป็นเอนไซม์ที่รวมเข้าแหล่ง เมธิล แคปด์ ซัลไฟด์ เช่น DMDS เข้าในเมธิโอนีน สายพันธ์ (สูตร)metF (สูตร)metB ของ C. glutamicum สามารถใช้แหล่งเมธิล แคปด์ ซัฟไฟด์ เช่น DMDS เป็นแหล่งของทั้งหมู่กำมะถัน และเมธิล ยิ่งไปกว่านั้น การผลิตเมธีโอนีน โดยสิ่งมีชีวิตโปรโทโทรปิกที่ได้ถูกทำวิศวกรรมที่ผลิตเกิน O-อะซีทิล-โฮโมซีรีน ได้ถูกปรับปรุงโดยการเติมแหล่งเมธิล แคปด์ ซัลไฟด์ เช่น DMDS ---------------------------------------------------------------------- การประดิษฐ์นี้แสดงลักษณะกระบวนการที่ได้รับการปรับปรุง และสิ่งมีชีวิตเพื่อการผลิต เมธิโอนีน การประดิษฐ์ได้แสดงว่าสิ่งมีชีวิต (สูตร)metF หรือสิ่งมีชีวิต (สูตร)metE (สูตร)metH ตัวอย่างเช่น สายพันธ์กลายของ C. glutamicum หรือ E. coli สามารถใช้แหล่งซัลไฟด์ที่ปิดด้วยเมธิล เช่น ไดเมธิล ไดซัลไฟด์ (DMDS) เป็นแหล่งของทั้งหมู่กำมะถันและเมธิล โดยการเลี่ยงผ่านความต้องการกิจกรรม ของ MetH/MetE และ MetF และความต้องการที่จะรีดิวซ์ซัลเฟต เพื่อการสังเคราะห์เมธิโอนีน ที่ยัง ได้บรรยายในสิทธิบัตรคือข้อมูลที่เกี่ยวข้องกับ MetY (ที่ยังเรียกว่า MetZ) เป็นเอนไซม์ที่รวมเข้าแหล่ง ซัลไฟด์ที่ปิดด้วยเมธิล เช่น DMDS เข้าในเมธิโอนีน สายพันธ์ (สูตร)metF (สูตร)metB ของ C. glutamicum สามารถใช้แหล่งซัลไฟด์ที่ปิดด้วยเมธิล เช่น DMDS เป็นแหล่งของทั้งหมู่กำมะถันและเมธิล ยิ่งไป กว่านั้น การผลิตเมธีโอนีน โดยสิ่งมีชีวิตโปรโทโทรปิกที่ได้ถูกทำวิศวกรรมที่ผลิตเกิน O-อะซีทิล- โฮโมซีรีน ได้ถูกปรับปรุงโดยการเติมแหล่งซัลไฟด์ที่ปิดด้วยเมธิล เช่น DMDS

Claims (6)

ข้อถือสิทธฺ์ (ทั้งหมด) ซึ่งจะไม่ปรากฏบนหน้าประกาศโฆษณา :แก้ไข 15/06/59 1. วิธีการการผลิตเมธิโอนีน, ที่ประกอบรวมด้วยการเพาะเลี้ยงจุลชีพที่ผลิตเมธิโอนีนโดยมี สารประกอบเมธิล แคปด์ ซัลโฟด์ (meathyl capped sulfde compound) อยู่ด้วย, เพื่อว่าเมธิโอนีนได้ถูก ผลิตขึ้น, ที่ซึ่งสารประกอบเมธิล แคปด์ ซัลไฟด์ คือ H3C-(S)n-CH3 และ n คือ 2-50 2. วิธีการการผลิตเมโธโอนีน, ที่ประกอบรวมด้วยการเพาะเลี้ยงจุลชีพที่ผลิตเมธิโอนีนโดยมี ไดเมธิล ไดซัลโฟด์ (DMDS), เพื่อว่าเมธิโอนีนได้ถูกผลิตขึ้น 3. วิธีการของข้อถือสิทธที่ 1 หรือ 2, โดยที่มี DMDS อยู่ที่ 0.02% หรือสูงกว่าในการเพาะเลี้ยง 4. วิธีการของข้อถือสิทธที่ 1 หรือ 2, โดยที่มี DMDS อยู่ที่ 0.06% หรือสูงกว่าในการเพาะเลี้ยง 5. วิธีการของการผลิตเมธิโอนีน, ที่ประกอบรวมด้วยการเพาะเลี้ยงจุลชีพที่ผลิตเมธิโอนีน โดยมี ระบบขนส่งไดเมธิล ไดซัลไฟด์ (DMDS) ที่ปลดปล่อยอย่างช้าๆ, ในลักษณะซึ่งเมธิโอนีนถูกผลิตขึ้น 6. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 5, โดยที่ระบบขนส่ง DMDS ที่ปลดปล่อยอย่างช้าๆ ประกอบรวม ด้วยของเหลวที่ผสทกันไมได้กับน้ำ, แต่ละลายใน DMDS 7. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 6, โดยที่ระบบขนส่ง DMDS ที่ปลดปล่อยอย่างช้าๆ ประกอบ รวมด้วยของเหลวที่เลือกได้จากกลุ่มที่ประกอบด้วย: น้ำมันสัตว์, น้ำมันแร่, น้ำมันทางเคมี, น้ำมันพืช, น้ำมันสังเคราะห์, ตัวทำละลายอินทรีย์, คลอโร-คาร์บอน, ฟลูออโร-คาร์บอน, คลอโร-ฟลูออโร- คาร์บอน หรือการรวมกันของมัน 8. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 5, โดยที่ระบบขนส่ง DMDS ที่ปลดปล่อยอย่างช้าๆ คือ การป้อน DMDS ที่ถูกควบคุมอย่างช้าๆ 9. วิธีการของถือสิทธิที่ 5, โดยที่ระบบขนส่ง DMDS ที่ปลดปล่อยอย่างช้าๆ คือ การไหลหรือ การแพร่ของ DMDS ผ่านเมมเบรนที่สามารถซึมผ่านได้ต่อ DMDS 1 0. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 5, โดยที่ระบบขนส่ง DMDS ที่ปลดปล่อยอย่างช้าๆ ประกอบรวม ด้วยการป้อน DMDS ในสถานะแก๊ส 1 1. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 10, โดยที่ DMDS ในสถานะแก๊สได้ถูกสร้างขึ้นโดยการระเหย หรือต้ม DMDS ที่เป็นของเหลว 1 2. วิธีการของข้อถือสิทธิ์ที่ 10, โดยที่ DMDS ในสถานะแก๊สได้ถูกสร้างขึ้นโดยการให้ ฟองอากาศ หรือออกซิเจนผ่าน DMDS ที่เป็นของเหลว 1 3. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 2 และ ข้อใดข้อหนึ่ง, โดยที่จุลชีพที่ผลิตเมธิโอนีนอยู่ในสกุล Corynebacterium 1 4. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 2 และ ข้อใดข้อหนึ่ง, โดยที่จุลชีพผลิตเมธิโอนีน คือ Corynebacterium glutamicum 1 5. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 2 และ 5 ข้อใดข้อหนึ่ง, โดยที่จุลชีพที่ผลิตเมธิโอนีนถูกเลือกได้จาก กลุ่มทีประกอบด้วยแบคทีเรียแกรม-ลบ, แบคทีเรีย-บวก, ยีสต์ และอาร์เคีย 1 6. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 2 และ 5 ข้อใดข้อหนึ่ง, โดยที่จุลชีพที่ผลิตเมธิโอนีนมีเอนไซม์ที่ สังเคราะห์เมธิโอนีนทางชีวภาพถูกดีเรกกิวเลทอย่างน้อยที่สุดหนึ่งชนิด 1 7. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 16, โดยที่จุลชีพดังกล่าวมี O-อะซีทิล-โฮโมซีรัน ซัลฟ์ไฮดริเลส หรือ O-ซัลซินิล-ไฮโมซีรีน ซัลฟ์ไฮดริเลสที่ถูกดีเรกกิวเลท 1 8. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 2 และ 5 ข้อใดข้อหนึ่ง, โดยที่จุลชีพที่ผลิตเมธิโอนีนมีเอนไซม์ที่ สังเคราะห์เมธิโอนีนทางชีวภาพอย่างน้อยสองชนิดที่ถูกดีเรกกิวเลท 1 9. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 18, โดยที่จุลชีพดังกล่าวมีโฮโมซีรีน อะซีทิลทรานสเฟอเรส หรือ โฮโมซีรีน ซัคซินิลทรานสเฟอเรสที่ถูกดีเรกกิวเลท และโฮโมซีรีน ดีไฮโดรจีเนสที่ถูกดีเรกกิวเลท 2 0. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 18, โดยที่จุลชีพดังกล่าวมี O-อะซีทิล-โฮโมซีรีน ซัลฟ์ไฮดริเลส ที่ถูกดีเรกกิวเลท และโฮโมซีรีน อะซีทิลทรานสเฟอเรสที่ถูกดีเรกกิวเลท หรือ O-ซัคซินิล-โฮโมซีรีน ซัลฟ์ไฮดริเลสที่ถูกดีเรกกิวเลท และโฮโมซีรีน ซัคซินิลทรานสเฟอเรสที่ถูกดีเรกกิวเลท 2 1. วิธีการการผลิตเมธิโอนีน, ที่ประกอบรวมด้วยการเพาะเลี้ยงจุลชีพที่มีวิถีการสังเคราะห์ เมธิโอนีนทางชีวภาพที่ถูกดีเรกกิวเลทโดยมีไดเมธิล ไดซัลไฟด์ (DMDS) อยู่ด้วย, เพื่อว่าเมธิโอนีน ได้ถูกผลิตขึ้น 2 2. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 21 โดยที่จุลชีพอยู่ในสกุล Corynebacterium 2 3. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 21, โดยที่จุลชีพ คือ Corynebacterrium glutamicum 2 4. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 21, โดยที่จุลชีพอยู่ในสกุล Escherichaia 2 5. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 21, โดยที่จุลชีพถูกเลือกได้จากกลุ่มที่ประกอบด้วย: แบคทีเรีย แกรม-ลบ, แบคทีเรียแกรม-บวก, ยีสต์ และอาร์เคีย 2 6. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 21, โดยที่จุลชีพดังกล่าวมี O-อะซีทิล-โฮโมซีรีน ซัลฟ์ไฮดริเลส หรือ O-ซัคซินิล-โฮโมซีรีน ซัลฟ์ไฮดริเลสที่ถูกดีเรกกิวเลท 2 7. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 21, โดยที่จุลชีพดังกล่าวมีโฮโมซีรีน อะซีทิลทรานสเฟอเรส หรือ โฮโมซีรีน ซัลซินิลทรานสเฟอเรสที่ถูกดีเรกกิวเลท และโฮโมซีรีน ดีไฮโดรจีเนสที่ถูกดีเรกกิวเลท 2 8. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 21, โดยที่จุลชีพดังกล่าวมี O-อะซีทิล-โฮโมซีรันซัลฟ์ไฮดริเลส ที่ถูกดีเรกกิวเลท และโฮโมซีรีน อะซีทิลทรานสเฟอเรสที่ถูกดีเรกกิวเลท หรือ O-ซัคซินิล-โฮโมซีรีน ซัลฟ์ไฮดริเลสที่ถูกดีเรกกิวเลท และโฮโมซีรีนซัคซินิลทรานสเฟอเรสที่ถูกดีเรกกิวเลท 2 9. วิธีการของข้อถือสิทธิที่ 21, ที่ยังประกอบรวมด้วยขั้นตอนของการแยกเมธิโอนีน 3 0. จุลชีพพรีคอมบิแนนท์ที่ผลิตเมธิโอนีนโดยมีไดเมธิล ไดซัลไฟด์ (DMDS), จุลชีพดังกล่าว มีวิถีการสังเคราะห์เมธิโอนีนทางชีวภาพที่ถูกดีเรกกิวเลท 3 1. จุลชีพของข้อถือสิทธิที่ 30 อยู่ในสกุล Corynebacterium 3 2. จุลชีพของข้อถือสิทธิที่ 31 ซึ่งคือ Corynebacterium glutamicum 3 3. จุลชีพของข้อถือสิทธิที่ 30 อยู่ในสกุล Escherichia ------------------------------------------------------------------------ 1. วิธีของการผลิตเมธิโอนีนที่ประกอบรวมด้วยการเพาะเลี้ยงจุลชีพที่ผลิตเมธิโอนีน เมื่อมีสารประกอบซัลไฟด์ที่ปิดด้วยเมธิล ดังเช่น เมธิโอนีนได้ถูกผลิตขึ้น 2. วิธีของข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่สารประกอบซัลไฟด์ที่ปิดด้วยเมธิลเลือกได้จากกลุ่มที่ ประกอบด้วยไดเมธิลไดซัลไฟด์ (DMDS), ไดเมธิลไตรซัลไฟด์, ไดเมธิลเตตระซัลไฟด์ และพอลิเมอร์ ของซัลไฟด์ที่มีน้ำหนักโมเลกุลที่สูงกว่า ซึ่งปลายของมันถูกปิดด้วยหมู่เมธิล 3. วิธีของการผลิตเมธิโอนีนที่ประกอบรวมด้วยการเพาะเลี้ยงจุลชีพที่ผลิตเมธิโอนีน เมื่อมี ไดเมธิลไดซัลไฟด์ (DMDS) จนกระทั่งเมธิโอนีน ได้ถูกผลิตขึ้น 4. วิธีของข้อถือสิทธิที่ 1-3 ข้อใดข้อหนึ่ง โดยที่ DMDS มีอยู่ที่ 0.02% หรือสูงกว่าในการ เพาะเลี้ยง 5. วิธีของข้อถือสิทธิที่ 1-3 ข้อใดข้อหนึ่ง โดยที่ DMDS มีอยู่ที่ 0.06% หรือสูงกว่าในการ เพาะเลี้ยง 6. วิธีของการผลิตเมธิโอนีนที่ประกอบรวมด้วยการเพาะเลี้ยงจุลชีพที่ผลิตเมธิโอนีนเมื่อมี ระบบขนส่งไดเมธิลไดซัลไฟด์ (DMDS) ที่ปลดปล่อยอย่างช้าๆ จนกระทั่งเมธิโอนีนได้ถูกผลิตขึ้น 7. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 6 โดยที่ระบบขนส่ง DMDS ที่ปลดปล่อยอย่างช้าๆ คือ Amberlite TM XAD4 8. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 7 โดยที่ระบบขนส่ง DMDS ที่ปลดปล่อยอย่างช้าๆ ปลดปล่อย DMDS ที่ระดับ 0.1% หรือสูงกว่าในการเพาะเลี้ยง 9. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 7 โดยที่ระบบขนส่ง DMDS ที่ปลดปล่อยอย่างช้าๆ ปลดปล่อย DMDS ที่ระดับ 0.3% หรือสูงกว่าในการเพาะเลี้ยง 1 0. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 6 โดยที่ระบบขนส่ง DMDS ที่ปลดปล่อยอย่างช้าๆ ประกอบรวม ด้วยของเหลวที่ผสมกันไม่ได้กับน้ำ แต่ละลายใน DMDS 1 1. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 10 โดยที่ระบบขนส่ง DMDS ที่ถูกปลดปล่อยอย่างช้าๆ ประกอบ รวมด้วยของเหลวที่เลือกได้จากกลุ่มที่ประกอบด้วยน้ำมันสัตว์, น้ำมันแร่, น้ำมันทางเคมี, น้ำมันพืช, น้ำมันสังเคราะห์, ตัวทำละลายอินทรีย์, คลอโร-คาร์บอน, ฟลูออโร-คาร์บอน, คลอโร-ฟลูออโร- คาร์บอน หรือการรวมกันของมัน 1 2. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 6 โดยที่ระบบขนส่ง DMDS ที่ปลดปล่อยอย่างช้าๆ คือการป้อน DMDS ที่ถูกควบคุมอย่างงช้าๆ 1 3. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 6 โดยที่ระบบขนส่ง DMDS ที่ปลดปล่อยอย่างช้าๆ คือการไหลหรือ การแพร่ของ DMDS ผ่านเมมเบรนที่ให้ซึมผ่านได้ต่อ DMDS 1 4. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 6 โดยที่ระบบขนส่ง DMDS ที่ปลดปล่อยอย่างช้าๆ ประกอบรวม ด้วยการป้อน DMDS ในสถานะแก๊ส 1 5. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 14 โดยที่ DMDS ในสถานะแก๊สได้ถูกสร้างขึ้นโดยการระเหยหรือ ต้ม DMDS ที่เป็นของเหลว 1 6. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 14 โดยที่ DMDS ในสถานะแก๊สได้ถูกสร้างขึ้นโดยการให้ฟอง อากาศ หรือออกซิเจนผ่าน DMDS ที่เป็นของเหลว 1 7. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 1, 2, 3 หรือ 6 ข้อใดข้อหนึ่ง โดยที่จุลชีพที่ผลิตเมธิโอนีนอยู่ในสกุล Corynebacterium 1 8. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 1, 2, 3 หรือ 6 ข้อใดข้อหนึ่ง โดยที่จุลชีพที่ผลิตเมธิโอนีนอยู่ในสกุล Corynebacterium glutamicum 1 9. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 1, 2, 3 หรือ 6 ข้อใดข้อหนึ่ง โดยที่จุลชีพที่ผลิตเมธิโอนีนเลือกได้ จากลุ่มที่ประกอบด้วยแบคทีเรียแกรมลบ, แบคทีเรียแกรมบวก, ยีส์ และ อาร์เคีย 2 0. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 1, 2, 3 หรือ 6 ข้อใดข้อหนึ่ง โดยที่จุลชีพที่ผลิตเมธิโอนีนมีเอนไซม์ ที่ผลิตเมธิโอนีนทางชีวภาพได้ถูกทำให้ไม่มีการควบคุม 2 1. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 20 โดยที่จุลชีพดังกล่าวมี O-อะซีทิล-โฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลส หรือ O-ซัคซินิล-โฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลส ที่ถูกทำให้ไม่มีการควบคุม 2 2. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 1, 2, 3 หรือ 6 ข้อใดข้อหนึ่ง โดยที่จุลชีพที่ผลิตเมธิโอนีนมีเอนไซม์ ที่ผลิตเมธิโอนีนทางชีวภาพอย่างน้อยสองชนิดที่ได้ถูกทำให้ไม่มีการควบคุม 2 3. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 22 โดยที่จุลชีพดังกล่าวมีโฮโมซีรีนอะซีทิลทรานสเฟอเรส หรือ โฮโมซีรีนซัคซินิลทรานสเฟอเรส ที่ถูกทำให้ไม่มีการควบคุม และโฮโมซีรีนดีไฮโดรจีเนสที่ถูกทำให้ ไม่มีการควบคุม 2 4. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 22 โดยที่จุลชีพดังกล่าวมี O-อะซีทิล-โฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลส ที่ถูกทำให้ไม่มีการควบคุม และโฮโมซีรีนอะซีทิลทรานสเฟอเรส ที่ถูกทำให้ไม่มีการควบคุม หรือ O-ซัคซินิล-โฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลส ที่ถูกทำให้ไม่มีการควบคุม และโฮโมซีรีนซัคซินิล ทรานสเฟอเรสที่ถูกทำให้ไม่มีการควบคุม 2 5. วิธีการผลิตเมธิโอนีนที่ประกอบรวมด้วยการเพาะเลี้ยงจุลชีพที่มีวิถีการสังเคราะห์ เมธิโอนีนทางชีวภาพ ที่ถูกทำให้ไม่มีการควบคุมเมื่อมีไดเมธิลไดซัลไฟด์ (DMDS) จนกระทั้ง เมธิโอนีนได้ถูกผลิตขึ้น 2 6. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 25 โดยที่จุลชีพอยู่ในสกุล Corynebacterium 2 7. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 25 โดยที่จุลชีพอยู่ในสกุล Corynebacterium glutamicum 2 8. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 25 โดยที่จุลชีพอยู่ในสกุล Escherichia 2 9. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 25 โดยที่จุลชีพเลือกได้จากกลุ่มที่ประกอบด้วยแบคทีเรียแกรมลบ, แบคทีเรียแกรมบวก, ยีสต์ และอาร์เคีย 3 0. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 25 โดยที่จุลชีพดังกล่าวมี O-อะซีทิล-โฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลส หรือ O-ซัคซินิล-โฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลส ที่ถูกทำให้ไม่มีการควบคุม 3 1. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 25 โดยที่จุลชีพดังกล่าวมีโฮโมซีรีนอะซีทิลทรานสเฟอเรส หรือ โฮโมซีรีนซัคซินิลทรานสเฟอเรส ที่ถูกทำให้ไม่มีการควบคุม และโฮโมซีรีนดีไฮโดรจีเนสที่ถูกทำให้ ไม่มีการควบคุม 3 2. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 25 โดยที่จุลชีพดังกล่าวมี O-อะซีทิล-โฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลส ที่ถูกทำให้ไม่มีการควบคุม และโฮโมซีรีนอะซีทิลทรานสเฟอเรส ที่ถูกทำให้ไม่มีการคบวคุม หรือ O-ซัคซินิล-โฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลส ที่ถูกทำให้ไม่มีการควบคุม และโฮโมซีรีนซัคซินิล ทรานสเฟอเรส ที่ถูกทำให้ไม่มีการควบคุม 3 3. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 25 ที่ยังประกอบรวมด้วยขั้นตอนของการแยกเมธิโอนีน 3 4. องค์ประกอบที่ประกอบรวมด้วยเมธิโอนีนที่แยกได้ตามข้อถือสิทธิที่ 33 3 5. ผลิตภัณฑ์ที่มีเมธิโอนีนที่สังเคราะห์ตามวิธีของข้อใดข้อหนึ่งของข้อถือสิทธิข้างต้น 3 6. จุลชีพรีคอมบิแนนท์ที่อยู่ในสกุล Corynebacterium เพื่อการผลิตเมธิโอนีน เมื่อมีไดเมธิล ไดซัลไฟด์ (DMDS) จุลชีพดังกล่าวมีวิถีการสังเคราะห์เมธิโอนีนทางชีวภาพที่ถูกทำให้ไม่มีการ ควบคุม 3 7. จุลชีพรีคอมบิแนนท์ที่อยู่ในสกุล Corynebacterium glutamicum เพื่อการผลิตเมธิโอนีน เมื่อมีไดเมธิลไดซัลไฟด์ (DMDS) จุลชีพดังกล่าวมีวิถีการสังเคราะห์เมธิโอนีนทางชีวภาพที่ถูกทำให้ ไม่มีการควบคุม 3 8. จุลชีพรีคอมบิแนนท์ที่อยู่ในสกุล Escherichia เพื่อการผลิตเมธิโอนีน เมื่อมีไดเมธิล ไดซัลไฟด์ (DMDS) จุลชีพดังกล่าวมีวิถีการสังเคราะห์เมธิโอนีนทางชีวภาพที่ถูกทำให้ไม่มีการ ควบคุม 3 9. วิธีเพื่อการปรับปรุงการใช้ DMDS เพื่อการผลิตเมธิโอนีนที่ประกอบรวมด้วยการคัดเลือก ออกโซโทรปเมธิโอนีนที่เติบโตหรือเติบโตเร็วกว่าบนอาหารสูตรต่ำที่ขาดเมธิโอนีนแต่มี DMDS 4 0. จุลชีพที่ได้จากวิธีการคัดเลือกของข้อถือสิทธิที่ 39 หรือลูกหลานของจุลชีพดังกล่าว 4

1. จีนที่แยกได้ที่อนุพันทธ์จากจุลชีพที่ได้จากวิธีการคัดเลือกของข้อถือสิทธิที่ 39 4

2. วิธีเพื่อการบ่งชี้อัลลีลกลายพันธ์ที่ประมวลรหัส O-อะซีทิลโฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลส หรือ O-ซัคซินิลโฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลส ที่ต้านทานต่อการยับยั้งแบบป้อนกลับโดยเมธิโอนีนที่ประกอบ รวมด้วย a) การสัมผัสจุลชีพที่อาศัย DMDS และพลาสมิดที่ประมวลรหัส O-อะซีทิลโฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลส หรือ O-ซัคซินิลโฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลส เพื่อการเติบโตบนอาหารปลอดเมธิโอนีน ที่มีอะนาลอก เมธิโอนีนที่ยับยั้งการเติบโตของสิ่งมีชีวิตดังกล่าว b) การคัดเลือกแวเรียนต์สายพันธุ์กลายของสิ่งมีชีวิตดังกล่าวที่ต้านทานต่ออะนาลอกดังกล่าว c) การแยกแวเรียนต์สายพันธุ์กลายดังกล่าว โดยที่ฟีโนไทป์ที่ต้านทานได้ถูกประมวลรหัสโดย พลาสมิดดังกล่าว และ d) การหาลำดับดีเอ็นเอของส่วนที่สัมพันธ์กันของพลาสมิดดังกล่าวเพื่อบ่งชี้พลาสมิดกลายพันธ์ที่มี ลำดับที่ได้เปลี่ยนแปลงในบริเวณที่เป็นรหัสสำหรับ O-อะซีทิลโฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลส หรือ O-ซัคซินิลโฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลส ดังกล่าว จนกระทั่งอัลลีลกลายพันธ์ที่ประมวลรหัส O-อะซีทิล โฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลส หรือ O-ซัคซินิลโฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลส ที่ต้านทานต่อการยับยั้งแบบป้อน กลับโดยเมธิโอนีนได้ถูกบ่งชี้ 4

3. วิธีตามข้อถือสิทธิที่ 42 โดยที่สิ่งมีชีวิตดังกล่าวขาดเมธิโอนีนซินเธส (MetE และ/หรือ MetH) หรือเมธิลเตตระไฮโดรโฟเลทรีดักเทส (MetF) และอาหารปลอดเมธิโอนีนดังกล่าวมีไดเมธิล ไดซัลไฟด์ (DMDS) 4

4. วิธีของข้อถือสิทธิที่ 42 หรือ 43 โดยที่สิ่งมีชีวิตดังกล่าวคือสายพันธุ์ของ Corynebacterium glutamicum 4

5. วิธีของข้อถือสิทธิที่ 42 หรือ 43 โดยที่สิ่งมีชีวิตดังกล่าวคือสายพันธุ์ของ Escherichia coli 4

6. เอมไซม์ O-อะซีทิลโฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลส หรือ O-ซัคซินิลโฮโมซีรีนซัลฟ์ไฮดริเลส กลายพันธ์ที่แยกได้โดยวิธีตามข้อถือสิทธิที่ 42