TH53371A - ลำดับนิวคลิโอไทด์ใหม่ซึ่งใส่รหัสสำหรับจีน cls - Google Patents

Abstract

DC60 (02/07/44) การประดิษฐ์นี้สัมพันธ์กับคอรินิฟอร์มแบคทีเรียมที่ดัดแปลงทางพันธุกรรม จีน cls ของ แบคทีเรียมได้รับการทำ ให้เพิ่มขึ้น และกับพอลินิวคลิโอไทด์ที่แยกได้ซึ่งใส่รหัส สำหรับคาร์ดิโอลิพิน ซินเธสจากคอรินิฟอร์มแบคทีเรียและกับกระบวนการ สำหรับการผลิตโดยการหมักของกรด L-อะมิโน ด้วยการเพิ่มขึ้น ของจีน cls ในแบคทีเรีย และกับการใช้ของพอลินิวคลิโอไทด์ เป็นไพรเมอร์ หรือโพรบการทำให้ผสมกัน การประดิษฐ์นี้เกี่ยวข้องกับคอรินิฟอร์มแบคทีเรียที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรม จีน cis ของ แบคทีเรียมได้รับการทำ ให้เพิ่มขึ้น และกับพอลินิวคลิโอ ไทด์ที่แยกได้ซึ่ง ใส่รหัส สำหรับคาร์ดิโอลิพิน ซินเธสจากคอรินิฟอร์มแบคทีเรียและกับกระบวนการ สำรหับการผลิต โดยการหมักของกรด L-อะมิโน ด้วยการเพิ่มขึ้น ของจีน cis ในแบคทีเรีย และกับการใช้ของพอลินิวคลิโอไทด์ เป็นไพรเมอร์ หรือโพรบการทำให้ผสมกัน

Claims (19)

1. คอรีนีฟอร์มแบคทีเรียที่ดัดแปลงทางพันธุกรรม ซึ่งมีจีนcis ซึ่งใส่รหัสสำหรับ คาร์ดิโอลิฟินซินเธส ได้รับการทำให้ เพิ่มขึ้น

2. คอรีนีฟอร์มแบคทีเรียมที่ดัดแปลงทางพันธุกรรมดังที่ถือสิทธิในข้อถือสิทธิข้อ 1 ซึ่ง แบคทีเรีย เริ่มต้น (แบบชนิดเกิดขึ้นเอง) ได้รับการเลือกจากกลุ่ม คอรินิแบคทีเรียม กลูทามิคุม (ATCC13032) คอริ แบคทีเรียม แอซิโทกลูทามิคุม (ATCC 15806) คอริแบคทีเรียม แอซิโทแอซิโด ฟิลุม (ATCC13870) คอริแบคทีเรียม เทอร์โมอะมิ โนจินิส (FERM BP-1539) คอริแบคทีเรียม เมแลสซิโคลา (ATCC 17965) บรีวิแบคทีเรียมฟลาวุม (ATCC 14067) บรีวิ แบคทีเรียม แลกโทเฟอร์ เมนทุม (ATCC 13869) และบรีวิ แบคทีเรียม ไดวาริคาทุน (ATCC 14020)

3. คอรินิฟอร์มแบคทีเรียมที่ดัดแปลงทางพันธุกรรมอย่างที่ขอ ถือสิทธิในข้อถือสิทธิที่ 1 หรือ 2 ซึ่งจีน cis ได้รับ การทำให้เพิ่มขึ้น โดยการแสดงออกมากเกินของจีน โดยเฉพาะอย่าง ยิ่งโดยการ เพิ่มจำนวนสำเนาของจีน โดยการเลือกตัวส่งเสริมที่ แรงหรือบริเวณการควบคุมที่ทวนกระแสจาก กรอบการอ่าน โดยการกลายของตัว ส่งเสริม บริเวณการควบคุมหรือสถานที่ยึดเหนี่ยวไรโบโซมเกิด การลาย โดย การใส่แคสเซทท์การแสดงออกที่เหมาะสมทวนกระแสจากจีนโครงสร้างหรือ โดยการ ใส่ตัวส่งเสริมที่เหนี่ยวนำได้ โดยการยึดชั่วชีวิตของ เอ็มอาร์เอ็นเอที่สอดคล้องกัน โดยการลดการเสี่ยม ของโปรตีน ที่ได้รับการแสดงออก หรือ โดยการรวมความเป็นไปได้เหล่านี้ 2 วิธีหรือมากกว่า

4. คอรินิฟอร์มแบคทีเรียที่ดัดแปลงทางพันธุกรรมอย่างที่ขอ ถือสิทธิในข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของ ข้อที่ 1 ถึง 3 ซึ่ง สายเชื้อได้รับการแปลงด้วยสมิตเวกเตอร์ และพลาสมิตเวกเตอร์ มี ลำดับนิวคลีโอไทด์ที่มีรหัสสำหรับจีน cis

5. คอรินิฟอร์มแบคทีเรียมที่ดัดแปลงทางพันธุกรรมดังที่ถือ สิทธิในข้อใดข้อหนึ่งของ ข้อถือสิทธิข้อ 1 ถึง 4 ซึ่ง สอดคล้องทางจีโนไทป์กับสายเชื้อคอรินิแบคทีเรียม กลูทามิ คุม DSM13250

6. พอลินิวคลีโอไทด์ที่แยกได้จากคอรินิฟอร์มแบคทีเรียซึ่งลำดับพอลินิวคลิโอไทด์ที่ เลือกจากกลุ่ม a) พอลินิวคลีโอไทด์ซึ่งเป็นกำเนิดเดียวกันที่ระดับอย่าง น้อย 70% กับพอลินิวคลีโอไทด์ ซึ่งใส่ รหัสสำหรับพอลิเพพไทด์ ซึ่งประกอบรวมด้วยหรือประกอบด้วยลำดับกรดอะมิโนของ SEQ ID NO.2 b) พอลินิวคลีโอไทด์ซึ่งใส่รหัสสำหรับพอลิเพพไทด์ซึ่ง ประกอบรวมด้วยลำดับกรดอะมิโน ซึ่งเป็นกำเนิดเดียวกันที่ ระดับอย่างน้อย 70% ลำดับกรดอะมิโนของ SEQ ID NO.2 c) พอลินิวคลีโอไทด์ซึ่งเสริมซึ่งกันและกันต่อพอลินิวคลีโอ ไทด์ของ a) หรือ b) และ d) พอลินิวคลีโอไทด์ซึ่งประกอบรวมด้วยอย่างน้อย 15นิวคลิโอ ไทด์ที่ต่อเนื่องกันของลำดับ พอลินิวคลีโอไทด์ของ a), b) หรือ c)

7. พอลินิวคลีโอไทด์อย่างที่ขอถือสิทธิในข้อถือสิทธิที่ 6 ซึ่งพอลินิวคลีโอไทด์ อย่างที่ควร เลือกใช้เป็นรีคอมบีแนนท์ดี เอ็นเอ ซึ่งมีความสามารถถ่ายแบบได้ในคอรินิฟอร์มแบคทีเรีย

8. พอลินิวคลีโอไทด์อย่างที่ขอถือสิทธิในข้อถือสิทธิที่ 6 ซึ่งพอลินิวคลิโอไทด์ คือ อาร์เอ็นเอ

9. ดีเอ็นเอที่สามารถถ่ายแบบได้ดังที่ถือสิทธิในข้อถือ สิทธิข้อ 7 ซึ่งมี (i) ลำดับนิวคลีโอไทด์ที่แสดงใน SEQ ID เลขที่.1 หรือ (ii) อย่างน้อยที่สุด 1 ลำดับซึ่งสอดคล้องกับลำดับ (i) ภาย ในพิสัยการเสื่อมของรหัสทาง พันธุกรรม หรือ (iii) อย่างน้อยที่สุด 1 ลำดับ ซึ่งทำให้ผสมกับลำดับที่ เสริมซึ่งกันและกันกับลำดับ (i) หรือ (ii) และอย่างเป็นทาง เลือก (iv) การกลายทางฟังก์ชันในกลางใน (i) ซึ่งนำไปสู่กรดอะมิโน ที่มีกำเนิดเดียวกัน

10. ลำดับพอลินิวคลีโอไทด์อย่างที่ขอถือสิทธิในข้อถือสิทธิ ที่ 7, 8 หรือ 9 ข้อใดข้อหนึ่ง ซึ่ง ใส่หัสสำหรับพอลิเพปไทด์ที่มีลำดักรดอะมิโนอย่างที่แสดงใน SEQ ID เลขที่ 2

11. กระบวนการสำหรับการเตรียมโดยการหมักของกรด L-อะมิโน ซึ่งขั้นตอนต่อไปนี้ได้ รับการกระทำ a) การหมักคอลีนีฟอร์มแบคทีเรียซึ่งผลิตกรด L-อะมิโน ซึ่งอย่างน้อยที่สุดจีน cis หรือ ลำดับนิวคลีโอไทด์ที่มี รหัสสำหรับจีนได้รับการทำให้เพิ่มขึ้นโดยเฉพาะอย่างยิ่งได้ รับการทำ ให้แสดงออกมากเกิน b) การสะสมของกรด L-อะมิโนในตัวกลางหรือในเซลล์แบคทีเรีย และ c) การแยกกรด L-อะมิโน

12. กระบวนการอย่างที่ขอถือสิทธิในข้อถือสิทธิที่ 11 ซึ่ง สายเชื้อดังที่ขอถือสิทธิในข้อ หนึ่งของข้อถือสิทธิข้อ 1 ถึง 5 ได้รับการใช้

13. กระบวนการดังที่ถือสิทธิในข้อถือสิทธิที่ 11 หรือ 12 ซึ่งจีนอื่น ๆ ซึ่งใส่รหัส สำหรับโปรตีนของวิถีทางชีว สังเคราะห์ของกรด L-อะมิโนที่ต้องการ ได้รับการทำให้เพิ่มขึ้นใน แบคทีเรีย

14. กระบวนการดังที่ถือสิทธิในข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของ ข้อ 11 ถึง 13 ซึ่งวิถีทาง เมแทบอลิซึม ซึ่งลดการก่อเกิดกร ออะมิโนที่ต้องการได้รับการกำจัดอย่างน้อยที่สุดบางส่วนใน แบคทีเรีย

15. กระบวนการดังที่ถือสิทธิในข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของ ข้อ 11 ถึง 14 ซึ่งกรด อะมิโนที่ผลิต คือ L-กลูทาเมท

16. กระบวนการดังที่ถือสิทธิในข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของ ข้อ 11 ถึง 15 ซึ่งแบคทีเรีย ได้รับการหมักสำหรับการผลิตขอ งกลูทาเมทซึ่งมีจีน 1 ชนิดหรือมากกว่าซึ่งเลือกจากกลุ่ม a) จีน gdh ซึ่งใส่รหัสสำหรับกลูทาเมทดิไฮโดรจิเนส หรือ b) จีน pyc ซึ่งใส่รหัสสำหรับ ไพรูเวทคาร์บอคซิเลส ได้รับการทำให้เพิ่มขึ้นพร้อมกัน โดยเฉพาะอย่างยิ่งได้รับ การทำให้แสดงออกมากเกินหรือทำ ให้ขยาย

17. กระบวนการดังที่ถือสิทธิในข้อถือสิทธิข้อใดข้อหนึ่งของ ข้อ 11 ถึง 16 ซึ่งแบคทีเรีย ได้รับการหมักสำหรับการผลิตของ L-กลูทาเมทซึ่งจีน 1 ชนิดหรือมากกว่า ซึ่งเลือกจากกลุ่ม a) จีน odhA ซึ่งใส่รหัสสำหรับ (สูตร)-คีโทกลูทาเรทดี ไฮโดรจิเนส b) จีน dtsR1 ซึ่งใส่รหัสสำหรับโปรตีน DtsR1 หรือ c) จีน dtsR2 ซึ่งใส่รหัสสำหรับโปรตีน DtsR2 ได้รับการทำให้อ่อนฤทธิ์ลงพร้อมกัน

18. การใช้ลำดับพอลินิวคลีโอไทด์ หรือส่วนของลำดับพอลินิวค ลิโอไทด์ ดังที่ถือ สิทธิในข้อถือสิทธิข้อ 6 เป็นไพรเมอร์ สำหรับการเตรียมดีเอ็นเอของจีน ซึ่งใส่รหัสสำหรับคาร์ดิโอ ลิพิน ซินเธสโดยปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอร์เรส

19. การใช้ลำดับพอลินิวคลีโอไทด์ดังที่ถือสิทธิในข้อถือ สิทธิที่ 6 เป็นโพรบการทำ ให้ผสมกันสำหรับการแยกของซีดีเอ็น เอ หรือ จีน ซึ่งแสดงฮอมอโลจีที่สูงกับลำดับของจีน cis