Claims (4)
1. ขบวนการสำหรับเตรียมทรีฮาโลส (trehalose) ประกอบด้วย (a) การปล่อยให้เอนไซม์ทำปฏิกิริยาบนสารละลายที่มีนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่มี โครงสร้างทรีอาโลสเป็นหน่วยทางปลายและมีดีกรีกลูโคสพอลิเมอไรเซชันเป็น 3 หรือมากกว่า เพื่อสร้างทรีฮาโลสเอนไซม์ดังกล่าวสามารถไฮโดรไลซ์อย่างจำเพาะต่อกันพันธะรหว่างส่วนทรีฮาโลส และส่วนไกลโคซิลที่เหลืออยู่ในนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ดังกล่าว (b) การทำให้ทรีฮาโลสที่ได้บริสุทธิ์และ (c) การแยกทรีฮาโลสที่บริสุทธิ์แล้ว ออกมา 2.กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่งเอนไซม์ดังกล่าวในขั้นตอน (a) ถูกใช้ไปพร้อมกับ เอนไซม์สำหรับสร้างนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ ที่สามารถสร้างนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ ชนิดหนึ่งหรือ มากกว่าที่มีโครงสร้างทรีอาโลสเป็นหน่วยทางปลายและมีดีกรีของกลูโคสพอลิเมอไรเซชันเป็น 3 หรือมากกว่า 3. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่งขั้นตอน (a) ยังประกอบด้วยขั้นตอนของการยอมให้ กลูโคอะไมเลสทำปฏิกิริยาบนสารละลายที่ได้ในขั้นตอน (a) 4. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่งขั้นตอน (b) ประกอบด้วยขั้นตอนการนำสารละลาย ที่ได้ที่มีทรีฮาโลสในขั้นตอน (a) ไปยังคอลัมน์โครมาโตกราฟีที่ใช้ในคอลัมน์ที่บรรจุด้วยเรซินแลก เปลี่ยนแคทไอออนที่เป็นกรดแต่เพื่อให้ทรีฮาโลสบริสุทธิ์ 5. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่งขั้นตอน (b) ยังประกอบด้วยขั้นตอนการตกผลึก ของทรีฮาโลสในสารละลายที่ได้ในขั้นตอน (b) ให้เป็นทรีฮาโลสที่เป็นผลึกในรูปไฮดรัส หรือ แอนไฮดรัส 6. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่งส่วนไกลโคซิลดังกล่าวประกอบด้วยส่วนที่เหลือของ กลูโคสชนิดหนึ่งหรือมากกว่า 7. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งเอนไซม์ดังกล่าวมีคุณสมบัติทางเคมีฟิสิกส์ต่อไปนี้ (1) การออกฤทธิ์ ไฮโดรไลซ์อย่างจำเพาะต่อพันธระหว่างส่วนทรีฮาโลสและส่วนไกลโคซิลที่เหลืออยู่ใน นอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่มีโครงสร้างทรีฮาโลสเป็นหน่วยทางปลาย และมีดีกรีของกลูโคส พอลิเมอไรเซชันเป็น 3 หรือมากกว่า (2)น้ำหนักโมเลกุล ประมาณ 57,000 ถึง 68,000 ตาลตันบนโซเดียมโดเดซิลเฟต -พอลิอะคริลาไมด์ เจอลอีเลคโทรเรซิส (SDS-PAGE) (3) จุดไอโซอีเลคทริค (pl) ประมาณ 3.3 ถึง 4.6 บนไอโซอีเลคโทรโฟเรซิสที่ใช้แอมโฟไลท์ (4) อุณหภูมิที่เหมาะสม ประมาณ 35-45ํซ เมื่อบ่มที่ pH 7.0 เป็นเวลา 30 นาที (5) pH ที่เหมาะสม ประมาณ 6.0 ถึง 7.5 เมื่อบ่มที่ 40ํซ เป็นเวลา 30 นาที (6) ความเสถียรต่ออุณหภูมิ เสถียรที่อุณหภูมิประมาณ 30-45ํซ เมื่อบ่มที่ pH7.0 เป็นเวลา 60 นาที และ (7) ความเถียรต่อ pH เสถียรที่ pH ประมาณ 5.0-10.0 เมื่อบ่มที่ 25 ํซ เป็นเวลา 16 ซ.ม. 8. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 1 ซึ่งเอนไซม์ดังกล่าวมีลำดับกรดอะมิโนบางส่วนหนึ่งลำดับ หรือมากกว่าที่เลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย (1) ลิวซีน -แอสสปาติคแอซิด -ทริพโตเฟน -อะลามีน -กลูตามิคแอซิด-อะลานีน -X1-X2- ไกลซีน- แอสปาติคแอซิด (เมื่อ X1 หมายถึง ซีรีนหรืออะลานีน และ X2 หมายถึง อะลานีน หรือกลูตามิคแอซิด) (2)แอสปาติคแอซิด -กลูตามิคแอซิด-อาร์จีนีน -อะลานีน-วาลีน-ฮิสติดีน-ไอโซลิวซีน-ลิวซีน- กลูตามิคแอซิด -X3 (เมื่อ X3 หมายถึง กลูตามิคแอซิด หรือ แอสปาติคแอซิด ) และ (3) X4 ไกลซีน -กลูตามิคแอซิด-ไกลซีน -แอสปาราจีน-ธรีโอนีน -ทริพโตเฟน --ไกลซีน - แอสปาติคแอซิด-ซีรีน (โดยที่ X4 หมายถึง ฮิสติดีน หรือ กลูตามีน ) 9. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 1 ที่ซึ่งเอนไซม์ดังกล่าวเป็นเอนไซม์ที่อนุพัทธ์มาจากจุลชีพ 1 0. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 9 ที่ซึ่งจุลชีพดังกล่าวคือจุลชีพที่เลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย จุลชีพจากสกุล (Rhizobium ,Artrobacter,Brevibacterium และ Micrococcus 1 1. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 10 ที่ซึ่งจุลชีพดังกล่าวจากสกุล (Rhizobium หรือ Rhizobium s p. M-11(FERM BP-4310 1 2. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 10 ที่ซึ่งจุลชีพดังกล่าวจากสกุล Arthrobacter คือ Arthrobacter s p. Q36(FERM BP-4316) 1 3. ขบวนการสำหรับเตรียมองค์ประกอบของแซคคาไรด์ที่มีทรีฮาโลสที่ประกอบรวมด้วย (a) การปล่อยเอนไซม์ทำปฏิกิริยาบนสารละลายที่มีนอนรีดิวชิง แซคคาไรด์ที่มี โครงสร้างทรีฮาโลสเป็นหน่วยทางปลายและมีดีกรีของกลูโคสพอลิเมอไรเซชันเป็น 3 หรือมากกว่า เพื่อสร้างทรีอาโลส เอนไซม์ดังกล่าวสามารถไฮโดรไลซ์อย่างจำเพาะต่อพันธะรหว่างส่วน หรือฮาโลสและส่วนไกลโคซิลที่เหลืออยู่ในนอนรีดิวซิง แซคคาไรด์ และ (b) การแยกองค์ประกอบของแซคคาไรด์ที่ได้ที่ีธรีฮาโลสและแซคารไรด์อื่นออกมา 1 4. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 13 ซึ่งเอนไซม์ดังกล่าวในขั้นตอน (a) ถูกใช้ไปพร้อมกับ เอนไซม์สำหรับสร้างนอนรีดิวซิง แซคคาไรด์ที่สามารถสร้างนอนรีดิวซิง แซคคาไรด์ชนิดหนึ่งหรือ มากกว่า ที่มีโครงสร้างทรีฮาโลสเป็นหน่วยทางปลาย และมีดีกรีของกลูโคสพอลิเมอไรเซชันเป็น 3 หรือมากกว่า 1 5. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 13 ที่ซึ่งขั้นตอน (a) ยังประกอบด้วยขั้นตอนของการยอมให้ กลูโคอะไมเลสทำปฏิกิริยาบนสารละลายที่ได้ในขั้นตอน (a) 1 6. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 13 ที่ซึ่งขั้นตอน (a) ยังประกอบด้วยขั้นตอนการตกผลึก ของทรีฮาโลสในสารละลานยที่ได้ในขั้นตอน (a) ให้เป็นทรีฮาโลสที่เป็นผลึกในรูปไฮดรัส หรือ แอนไฮดรัส 1 7. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 13 ที่ซึ่งส่วนไกลโคซิลดักล่าวประกอบด้วยส่วนที่เหลือของ กลูโคสหนึ่งชนิดหรือมากกว่า 1 8.กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 13 ที่ซึ่งเอนไซม์ดังกล่าวมีสมบัติทางเคมีฟิสิกส์ต่อไปนี้ (1) การออกฤทธิ์ ไฮโดรไลซ์อย่างจำเพาะต่อพันธะระหว่างส่วนทรีฮาโลสและส่วนไกลโคซิลที่เหลืออยู่ใน นอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่มีโครงสร้างทรีฮาโลสเป็นหน่วยทางปลาย และมีดีกรีของกลูโคส พอลิเมอไรเซชันเป็น 3 หรือมากกว่า (2) น้ำหนักโมเลกุล ประมาณ 57,000 ถึง 68,000 ตาลตันบนโซเดียมโดเดซิลซัลเฟต -พอลิอะคริลาไมด์ เจล อีเลคโทรโฟเรซิส (SDS-PAGE) (3) จัดไอโซอีเลคทริค (pI) ประมาณ 3.3 ถึง 4.6 บนไอโซอีเลคโทรโฟเรซินโดยใช้แอนโฟไลท์ (4) อุณหภูมิที่เหมาะสม ประมาณ 35-45 ํซ เมื่อบ่มที่ pH 7.0 เป็นเวลา 30 นาที (5) pH ที่เหมาะสม ประมาณ 6 0. ถึง 7.5 เมื่อบ่มที่ 40 ํซ เป็นเวลา 30 นาที (6) ความเสถียรต่ออุณหภูมิ เสถียรถึงที่อุณหภูมิประมาณ 30-45 ํซ เมื่อบ่มที่ pH7.0 เป็นเวลา 60 นาที และ (7) ความเสถียรต่อ pH เสถียรที่ pH ประมาณ 5.0 ถึง 10.0 เมื่อบ่มที่ 25 ํซ เป็นเวลา 16ซ.ม. 1 9. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 13 ซึ่งเอนไซม์ดังกล่าวมีลำดับของกรดอะมิโนบางส่วน หนึ่งลำดับหรือมากกว่า ที่เลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย (1) ลิวซีน -แอสสปาติคแอซิด -ทริพโตเฟน -อะลามีน -กลูตามิคแอซิด-อะลานีน -X1-X2- ไกลซีน- แอสปาติคแอซิด (เมื่อ X1 หมายถึง ซีรีนหรืออะลานีน และ X2 หมายถึง อะลานีน หรือกลูตามิคแอซิด) (2)แอสปาติคแอซิด -กลูตามิคแอซิด-อาร์จีนีน -อะลานีน-วาลีน-ฮิสติดีน-ไอโซลิวซีน-ลิวซีน- กลูตามิคแอซิด -X3 (เมื่อ X3 หมายถึง กลูตามิคแอซิด หรือ แอสปาติคแอซิด ) และ (3) X4 ไกลซีน -กลูตามิคแอซิด-ไกลซีน -แอสปาราจีน-ธรีโอนีน -ทริพโตเฟน -ไกลซีน - แอสปาติคแอซิด-ซีรีน (โดยที่ X4 หมายถึง ฮิสติดีน หรือ กลูตามีน ) 2 0.กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 13 ที่เอนไซม์ดังกล่าวเป็นแอนไซม์ที่อนุพัทธ์มาจากจุลชีพ 2 1. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 20 ที่ซึ่งจุลชีพดังกล่าว คือ จุลชีพเลือกจากกลุ่มที่ประกอบ ด้วยจุลชีพจากสกุล (Rhizobium ,Artrobacter,Brevibacterium และ Micrococcus 2 2. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 21 ที่ซึ่งจุลชีพดังกล่าวจากสกุล Rhizobium คือ Rhizobium s p. M-11(FERM BP-4310) 2 3. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 21 ที่ซึ่งจุลชีพดังกล่าวจากสกุล Artrobacter คือ Artrobacter s p. Q36 (FERM BP -4316 2 4. ขบวนการสำหรับเตรียมองค์ประกอบที่มีทรีฮาโลส ประกอบรวมด้วย (a) การปล่อยเอนไซม์สำหรับสร้างนอนรีดิวซิง แซคคาไรด์ (I) ร่วมกับแอนไซม์ที่ ปลดปล่อยทรีฮาโลส (II) ทำปฏิกิริยาบนสารละลายที่มีไฮโดรไลเสทของแป้งชนิดไม่สมบูรณ์ที่มี พลังรีดิวซ์ชนิดหนึ่งหรือมากกว่า ซึ่ีงมีดีกรีของกลูโคสพอลิเมอไรเซชันเป็นเวลา 3 หรือมากกว่า เพื่อสร้าง ทรีอาโลส เอนไซม์ (I) ดังกล่าว สามารถสร้างนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ ที่มีโครงสร้างหรือฮาโลสเป็น หน่วยทางปลายและมีดีกรีของกลูโคสพอลิเมอไรเซซันเป็น 3 หรือมากกว่าและเอนไซด์ (II) ดังกล่าว สามารถไฮโดรไลซ์อย่างจำเพาะต่อพันธะระหว่างส่วนทรีฮาโลสและส่วนไกลโคซิลที่เหลือ อยู่ในนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ดังกล่าว (b) การแยกทรีฮาโลสที่ได้พร้อมด้วยหรือปราศจากแซคคาไรด์อื่น ๆ และ (c)การรวรมธรีฮาโลสเข้ากับหรือปราศจากแซคคาไรด์อื่นให้เป็นวัสดุสำหรับองค์ประกอบ 2 5.กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 24 ซึ่งเป็นผลิตภัณฑ์อาหาร 2 6. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 24 ซึ่งคือ องค์ประกอบของเครื่องสำอาง 2 7. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 24 ซึ่งคือ องค์ประกอบทางเภสัชกรรม 2 8. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 24 ที่ซึ่งส่วนไกลโคซิลดังกล่าว ประกอบด้วยส่วนที่เหลืออยู่ ของกลูโคสชนิดหนึ่งหรือมากกว่า 2 9. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 24 ที่ซึ่งเอนไซฒ์ที่ปลดปล่อยทรีฮาโลส (II) ดังกล่าว มีคุณสมบัติทางเคมีฟิสิกส์ต่อไปนี้ (1) การออกฤทธิ์ ไฮโดรไลซ์อย่างจำเพาะต่อพันธะระหว่างส่วนทรีฮาโลสและส่วนไกลโคซิลที่เหลือใน นอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่มีโครงสร้างทรีฮาโลสเป็นหน่วยทางปลาย และมีดีกรีของกลูโคส พอลิเมอไรเซชันเป็น 3 หรือมากกว่า (2) น้ำหนักโมเลกุล ประมาณ 57,000 ถึง 68,000 ตาลตันบนโซเดียมโดเดซิลซัลเฟต -พอลิอะคริลาไมด์ เจลอีเลคโทรโฟเรซิส (SDS-PAGE) (3) จัดไอโซอีเลคทริค (pI) ประมาณ 3.3 ถึง 4.6 บนไอโซอีเลคโทรโฟเรซินโดยใช้แอนโฟไลท์ (4) อุณหภูมิที่เหมาะสม ประมาณ 35-45 ํซ เมื่อบ่มที่ pH 7.0 เป็นเวลา 30 นาที (5) pH ที่เหมาะสม ประมาณ 6 0. ถึง 7.5 เมื่อบ่มที่ 40 ํซ เป็นเวลา 30 นาที (6) ความเสถียรต่ออุณหภูมิ เสถียรถึงที่อุณหภูมิประมาณ 30-45 ํซ เมื่อบ่มที่ pH7.0 เป็นเวลา 60 นาที และ (7) ความเสถียรต่อ pH เสถียรที่ pH ประมาณ 5.0 ถึง 10.0 เมื่อบ่มที่ 25 ํซ เป็นเวลา 16ซ.ม. 3 0.กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 24 ซึ่งเอนไซม์ที่ปลดปล่อยทรีฮาโลส (II) ดังกล่าวมีลำดับ ของกรดอะมิโนบางส่วนหนึ่งลำดับหนึ่งหรือมากกว่าที่เลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย (1) ลิวซีน -แอสสปาติคแอซิด -ทริพโตเฟน -อะลามีน -กลูตามิคแอซิด-อะลานีน -X1-X2- ไกลซีน- แอสปาติคแอซิด (เมื่อ X1 หมายถึง ซีรีนหรืออะลานีน และ X2 หมายถึง อะลานีน หรือกลูตามิคแอซิด) (2)แอสปาติคแอซิด -กลูตามิคแอซิด-อาร์จีนีน -อะลานีน-วาลีน-ฮิสติดีน-ไอโซลิวซีน-ลิวซีน- กลูตามิคแอซิด -X3 (เมื่อ X3 หมายถึง กลูตามิคแอซิด หรือ แอสปาติคแอซิด ) และ (3) X4 ไกลซีน -กลูตามิคแอซิด-ไกลซีน -แอสปาราจีน-ธรีโอนีน -ทริพโตเฟน -ไกลซีน - แอสปาติคแอซิด-ซีรีน (โดยที่ X4 หมายถึง ฮิสติดีน หรือ กลูตามีน ) 3 1. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 24 ที่ซึ่งแอนไซม์ที่ปลดปล่อยทรีฮาโลส (II) ดังกล่าวเป็น เอนไซม์ที่อนุพัทธ์มาจากจุลชีพ 3 2. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 31 ที่ซึ่งจุลชีพดังกล่าว คือ จุลชีพที่เลือกจากกลุ่มที่ประกอบ ด้วยจุลชีพจากสกุล (Rhizobium ,Artrobacter,Brevibacterium และ Micrococcus 3 3. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 32 ที่ซึ่งจุลชีพดังกล่าวจากสกุล Rhizobium คือ Rhizobium s p. M-11(FERM BP-4310) 3 4. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 32 ที่ซึ่งจุลชีพดังกล่าวจากสกุล Artrobacter คือ Artrobacter s p. Q36 (FERM BP -4316) 3 5.กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 1,13 หรือ 24 ที่ซึ่งสารละลายดังกล่าวมีนอนรีดิวซิง แซคคาไรด์ที่มีโครงสร้างทรีฮาโลสเป็นหน่วยทางปลาย และมีดีกรีของกลูโคสพอลิเมอไรเซชัน เป็น 3 หรือมากกว่า จะได้มาโดยการไฮโดรไลซ์บางสวนของสารละลายของสารที่มีเนื่อแป้ง โดยใช้ อะไมเลสที่มีหรือไม่มีเอนไซม์ที่เอาแขนงออก 3 6.วิธีการลดดีกรีของกลูโคสพอลิเมอไรเซชันของการดีดิวซ์ไฮโดรไลเสทของแป้งแบบ ไม่สมบูรณ์โดยไม่เพิ่มพลังรีดิวซ์ของมัน ซึ่งประกอบด้วยขั้นตอนของการยอมให้เอนไซม์ที่สร้าง นอนรีดิวซ์ แซคคาไรด์ (1) พร้อมกับเอนไซม์ที่ปลดปล่อยทรีฮาโลส (II) ทำปฏิกิริยาบนสารละลาย ที่มีไฮโดรไลเสทของแป้งแบบไม่สมบูรณ์ที่มีพลังรีดิวซ์ ชนิดหนึ่งหรือมากกว่าที่มีดีกรีของกลูโคส พอลิเมอไรเซชันเป็น 3 หรือมากกว่า เอนไซม์ (I) ดังกล่าวสมารถสร้างนอนรีดิวซ์ แซคคาไรด์ชนิด หนึ่งหรือมากกว่าที่มีโครงสร้างทรีอาโลสเป็นหน่วยทางปลาย และมีดีกลีของกลูโคสพอลิเมอไรเซชัน เป็น 3 หรือมากกว่าและเอนไซม์ (II) ดังกล่าวสามารถไฮโดรไลซ์อย่างจำเพาะต่อพันธะรหว่างส่วน ทรีฮาโลส และส่วนไกลโคซิลที่เหลืออยู่ในนอนรีดิวซิง แซคคาไรด์ดังกล่าว 3 7. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 36 ที่ซึ่งส่วนไกลโคซิลดังกล่าว ประกอบด้วยส่วนที่เหลือของ กลูโคสหนึ่งชนิดหรือมากกว่า 3 8. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 36 ที่ซึ่งแอนไซม์ที่ปลดปล่อยทรีฮาโลส (II) ดังกล่าว มีคุณสมบัติ ทางเคมีฟิสิกส์ต่อไปนี้ (1) การออกฤทธิ์ ไฮโดรไลซ์อย่างจำเพาะต่อพันธะระหว่างส่วนทรีฮาโลสและส่วนไกลโคซิลที่เหลือใน นอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่มีโครงสร้างทรีฮาโลสเป็นหน่วยทางปลาย และมีดีกรีของกลูโคส พอลิเมอไรเซชันเป็น 3 หรือมากกว่า (2) น้ำหนักโมเลกุล ประมาณ 57,000 ถึง 68,000 ตาลตันบนโซเดียมโดเดซิลซัลเฟต -พอลิอะคริลาไมด์ เจลอีเลคโทรโฟเรซิส (SDS-PAGE) (3) จัดไอโซอีเลคทริค (pI) ประมาณ 3.3 ถึง 4.6 บนไอโซอีเลคโทรโฟเรซินโดยใช้แอนโฟไลท์ (4) อุณหภูมิที่เหมาะสม ประมาณ 35-45 ํซ เมื่อบ่มที่ pH 7.0 เป็นเวลา 30 นาที (5) pH ที่เหมาะสม ประมาณ 6 0. ถึง 7.5 เมื่อบ่มที่ 40 ํซ เป็นเวลา 30 นาที (6) ความเสถียรต่ออุณหภูมิ เสถียรถึงที่อุณหภูมิประมาณ 30-45 ํซ เมื่อบ่มที่ pH7.0 เป็นเวลา 60 นาที และ (7) ความเสถียรต่อ pH เสถียรที่ pH ประมาณ 5.0 ถึง 10.0 เมื่อบ่มที่ 25 ํซ เป็นเวลา 16ซ.ม. 3 9.กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 36 ซึ่งเอนไซม์ที่ปลดปล่อยทรีฮาโลส (II) ดังกล่าว มีลำดับของ กรดอะมิโนบางส่วนหนึ่งลำดับหรือมากกว่า ที่เลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย (1) ลิวซีน -แอสสปาติคแอซิด -ทริพโตเฟน -อะลามีน -กลูตามิคแอซิด-อะลานีน -X1-X2- ไกลซีน- แอสปาติคแอซิด (เมื่อ X1 หมายถึง ซีรีนหรืออะลานีน และ X2 หมายถึง อะลานีน หรือกลูตามิคแอซิด) (2)แอสปาติคแอซิด -กลูตามิคแอซิด-อาร์จีนีน -อะลานีน-วาลีน-ฮิสติดีน-ไอโซลิวซีน-ลิวซีน- กลูตามิคแอซิด -X3 (เมื่อ X3 หมายถึง กลูตามิคแอซิด หรือ แอสปาติคแอซิด ) และ (3) X4 ไกลซีน -กลูตามิคแอซิด-ไกลซีน -แอสปาราจีน-ธรีโอนีน -ทริพโตเฟน -ไกลซีน - แอสปาติคแอซิด-ซีรีน (โดยที่ X4 หมายถึง ฮิสติดีน หรือ กลูตามีน ) 4 0.กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 36 ซึ่งเอนไซม์ที่ปลดปล่อยทรีฮาโลส (II) ดังกล่าว เป็นแอนไซม์ ที่อนุพันธ์มาจากจุลชีพ 41. The process for preparing trehalose consists of (a) the release of the enzyme to react on a solution containing non-redoxaccharide. The tetralose structure is a distal unit and has a degree of glucose polymerization of 3 or more to form trihalose. The enzyme can be specifically hydrolyzed to each other between the tri-part bonds. Halos And the remaining glycosyls in the aforementioned reduction saccharides (b) the purification of the tetrihalose and (c) the separation of pure trehalose. Out 2. Process according to claim 1, where the enzyme in step (a) is used along with Enzymes for the Generation of Non-Reducing Saccharides That can create non-redoxaccharides One of a kind or The tertiose structure is distal and has a degree of glucose polymerization of 3 or more. 3. Process according to claim 1, where step (a) also consists of the phase of glucose polymerization. Granting Glucoamylase reacts on the resulting solution in step (a) 4. Process according to claim 1 where step (b) consists of a solution conduction step. Obtained with trehalose in step (a) to the chromatographic column used in the exchange resin-filled column. Replace the acidic cation but to purify the trehalose. 5. Process according to claim 1 where step (b) also consists of a crystallization step. The solution obtained in the (b) step is to be crystalline trihalose in hydrous or anhydrous form. 6. Process according to claim 1, where the distal Such kosil consists of the rest of One or more types of glucose 7. Process according to claim 1, in which the enzyme has the following physicochemical properties: (1) its specific hydrolyzed action on the bond between the trihalose and glycosides. The remaining sill in Non-reducing saccharides with a tehalose structure as the end unit. And there are degrees of glucose Polymerization is 3 or more (2), a molecular weight of approximately 57,000 to 68,000 tonnes on sodium dodecylphate. - polyacrylamide Jail Electroresis (SDS-PAGE) (3) Isoelectric point (pl) Approx.3.3 to 4.6 on isoelectrophoresis using ampolite ( 4) The optimum temperature is approximately 35-45 ํ when cured at pH 7.0 for 30 minutes. (5) Optimal pH: 6.0 to 7.5 เมื่อ cured at 40 40 for 30 min. (6) Temperature stability. Stable at approximately 30-45 curing at pH7.0 for 60 min, and (7) stable pH approximately 5.0-10.0 when curing at 25 for 16 cm. 8. Process. According to claim 1, the enzyme has one partial amino acid sequence. Or more selected from a group containing (1) leucine-aspartic acid-tryptophan-alamine-glutamic acid-alanine-X1- X2-Glycine-Aspartic Acid (where X1 refers to serene or alanine and X2 refers to alanine or glutamic acid) (2) aspartic. Acid - Glutamic acid - Arginine -Alanine-valine-histidine-isoleucine-leucine-glutamic acid-X3 (when X3 means glutamic acid or aspartic acid M) and (3) X4 Glycine-Glutamic Acid-Glycine - Aspara Gene - Threonine - Tryptophan - Glycine - Aspartic Acid - Serene (where X4 stands for histidine or glutamine N) 9. Process according to claim 1, where the enzyme is a derivative of microorganism 1 0. Process in accordance with claim 9, where such microorganism is a microorganism selected from the group consisting of Microorganisms from the genus (Rhizobium, Artrobacter, Brevibacterium and Micrococcus 1 1. Process according to claim 10, where such microorganisms from the genus (Rhizobium or Rhizobium s p. M-11 (FERM BP-4310 1) 2. Right 10, where such microorganisms from the genus Arthrobacter are Arthrobacter s p. Q36 (FERM BP-4316) 1 3. Process for preparing the constituents of a saccharide containing trihalose (a) The release of the enzyme reacts on a non-reducing solution. Saccharides containing The trihalose is the distal unit and has 3 or more degrees of glucose polymerization to form the ttrialose. The enzyme is able to specifically hydrolyze the cross-sectional bonds. Or the halos and the remaining glycosyls in the non-redoxaccharides and (b) separation of the constituents of the saccharides obtained at thrihalose and saccharides. 1. Process according to claim 13, in which the enzyme in step (a) is used along with Enzyme for making non-redoxin Saccharides that can make non-reducing One or more saccharides with a tetrahalose structure. And have a degree of glucose polymerization of 3 or more 1. 5. Process according to claim 13 where step (a) also consists of a tolerance step. Glucoamylase reacts on the solution obtained in step (a) 1 6. Process according to claim 13 where step (a) also consists of a crystallization step. Of tetrahalose in the elastomer obtained in step (a) to be crystalline tetrahalose in anhydrous or anhydrous form 1 7. Process according to claim 13 at Which the glycosides said consisted of the rest of One or more Glucose 1. 8. Process according to claim 13, where the enzyme has the following physicochemical properties: (1) the specific hydrolyzed action on the bond between the tri-halose and cross-section. Remaining glycosyl in Non-reducing saccharides with a tehalose structure as the end unit. And there are degrees of glucose Polymerization is 3 or more (2), a molecular weight of approximately 57,000 to 68,000 tons on sodium dodecyl sulfate. -Polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) (3) isoelectric (pI) approximately 3.3 to 4.6 on isoelectrophoresis. By antholite (4), the optimum temperature was approximately 35-45 ํ when cured at pH 7.0 for 30 min. (5) The optimum pH was approximately 6 0. to 7.5 ํ when cured at 40 ํ for 30 min. (6) Temperature stability Stable to approx. 30-45 curing at pH7.0 for 60 min, and (7) pH stable at pH approximately 5.0 to 10.0 when curing at 25 for 16 cm 1 9. Process according to claim 13, in which the enzyme contains partial amino acid sequences. One or more sequences Selected from a group containing (1) leucine-aspartic acid-tryptophan-alamine-glutamic acid-alanine-X1-X2- Glycine - Aspartic Acid (where X1 refers to serine or alanine and X2 refers to alanine or glutamic acid) (2) aspartic acid. Yes - Glutamic acid - Arginine -Alanine-valine-histidine-isoleucine-leucine-glutamic acid-X3 (when X3 means glutamic acid or aspartic acid M) and (3) X4 Glycine-Glutamic Acid-Glycine - Aspara Gene - Threonine - Tryptophan - Glycine - Aspartic Acid - Serene (where X4 stands for histidine or glutamine ) 2 0. Process according to claim 13 where the enzyme is an anzyme derived from the microorganism 2. 1. Process according to claim 20, where the microorganism is a microorganism, is selected from the group that consists of With microorganisms from the genus (Rhizobium, Artrobacter, Brevibacterium and Micrococcus 2 2. Process according to claim 21, where the microorganisms from the genus Rhizobium is Rhizobium s p. M-11 (FERM BP-4310) 2 3. The process according to the The 21st right is that the microorganisms from the genus Artrobacter are Artrobacter s p. Q36 (FERM BP -4316 2 4. Process for preparing the tetrihalose component). It consists of (a) the release of a non-redoxaccharide (I) enzyme with an anzyme. Release trihalose (II). Reacts on solution containing incomplete starch hydrolyzate containing One or more reducing power Which has 3 or more degrees of glucose polymerization to form trialose. Such enzyme (I) can form non-redoxaccharide. That has a structure or a halose The distal units and the degree of glucose polymerization are 3 or more, and such enzides (II) can be specifically hydrolyzed to the bonds between the trihalose and glycosyl segments. The rest (B) the separation of the obtained trihalose with or without other saccharides, and (c) the trihalos. 2. Process according to claim 24, which is a food product 2. 6. Process according to claim 24, which is a cosmetic component 2. 7. Process according to claim 24. Claim 24, Pharmaceutical Composition 2 8. Process of Claim 24, where the glycosyl portion is Contains the rest 9. Process according to claim 24, where the trihalose (II) releasing enzyme has the following physicochemical properties: (1) Hydrolyzed action. Specific to the bond between the trihalose and the rest of the glycosyl in Non-reducing saccharides with a tehalose structure as the end unit. And there are degrees of glucose Polymerization is 3 or more (2), a molecular weight of approximately 57,000 to 68,000 tons on sodium dodecyl sulfate. - polyacrylamide Gel electrophoresis (SDS-PAGE) (3), isoelectric (pI) approximately 3.3 to 4.6 on isoelectrophoresis (4 ) The optimum temperature is approximately 35-45 ํ when cured at pH 7.0 for 30 min. (5) Optimal pH is approximately 6 0. to 7.5 cured at 40 for 30 min. (6) Temperature stability. Stable to approx. 30-45 ° C when cured at pH7.0 for 60 min and (7) pH stable at approximately 5.0 to 10.0 pH when cured at 25 ° C for 16 cm 3 0. Process according to claim 24, in which the enzyme that releases the trihalose (II) is sequenced. Of one or more partial amino acids selected from a group containing (1) leucine-aspartic acid-tryptophan-alamine-glutamic acid. Sid-alanine-X1-X2-Glycine-Aspartic Acid (where X1 refers to serine or alanine and X2 refers to alanine or glutamic acid (2) Aspartic acid - Glutamic acid - Arginine -Alanine-valine-histidine-isoleucine-leucine-glutamic acid-X3 (when X3 means glutamic acid or aspartic acid M) and (3) X4 Glycine-Glutamic Acid-Glycine - Aspara Gene - Threonine - Tryptophan - Glycine - Aspartic Acid - Serene (where X4 stands for histidine or glutamine ) 3 1. Process according to claim 24, where the anzyme releasing tetrahalose (II) is an enzyme derived from microorganisms 3 2. Process according to claim 31 where the microorganisms are That is, the microorganisms selected from the composite group With microorganisms from the genus (Rhizobium, Artrobacter, Brevibacterium and Micrococcus 3 3. Process according to claim 32, where such microorganisms from the genus Rhizobium is Rhizobium s p. M-11 (FERM BP-4310) 3 4. The process according to the Hold the rights 32, where the microorganisms from the Artrobacter genus Artrobacter s p. Q36 (FERM BP -4316) 3 5. Process according to claim 1,13 or 24, where the solution contains non-redoxing. Saccharides with a tehalose structure as a distal unit. And with a degree of glucose polymerization of 3 or more, it is obtained by partial hydrolysis of a solution of starchy substances using amylase with or without branched enzymes. Issue 3 6. Method for reducing the degree of glucose polymerization of the dehydration hydrolyzate of starch form. Incomplete without increasing its reducing power. It consists of the process of allowing the non-reducing enzyme saccharide (1) along with the trehalose (II)-releasing enzyme to react on the solution. Containing incomplete starch hydrolyzate with reducing power One or more types that have the degree of glucose Polymerization is 3 or more enzymes (I). Saccharides type One or more that have a trialose structure as an end unit. The glycosidation of glucose polymerization is 3 or more, and the enzyme (II) can be specifically hydrolyzed to the bond between the trihalose and the remaining glycosylate. In Non Reduxing 3 7. Process according to claim 36, where the glycosyl fraction. Consisted of the rest of One or more Glucose 3. 8. Process according to claim 36, where the anzyme releasing tetrahalose (II) has the following physicochemical properties: (1) Hydrolyzed action. Specific to the bond between the trihalose and the rest of the glycosyl in Non-reducing saccharides with a tehalose structure as the end unit. And there are degrees of glucose Polymerization is 3 or more (2), a molecular weight of approximately 57,000 to 68,000 tons on sodium dodecyl sulfate. - polyacrylamide Gel electrophoresis (SDS-PAGE) (3), isoelectric (pI) approximately 3.3 to 4.6 on isoelectrophoresis (4 ) The optimum temperature is approximately 35-45 ํ when cured at pH 7.0 for 30 min. (5) Optimal pH is approximately 6 0. to 7.5 cured at 40 for 30 min. (6) Temperature stability. Stable to approx. 30-45 ํ curing at pH7.0 for 60 min, and (7) pH stable at pH approximately 5.0 to 10.0 when curing at 25 for 16 cm 3. The process according to claim 36 in which the trihalose (II) enzyme contains one or more partial sequences of amino acids Selected from a group containing (1) leucine-aspartic acid-tryptophan-alamine-glutamic acid-alanine-X1-X2- Glycine - Aspartic Acid (where X1 refers to serine or alanine and X2 refers to alanine or glutamic acid) (2) aspartic acid. Yes - Glutamic acid - Arginine -Alanine-valine-histidine-isoleucine-leucine-glutamic acid-X3 (when X3 means glutamic acid or aspartic acid M) and (3) X4 Glycine-Glutamic Acid-Glycine - Aspara Gene - Threonine - Tryptophan - Glycine - Aspartic Acid - Serine (where X4 stands for histidine or glutamine ) 4 0. Process according to claim 36, in which the trihalose (II) releasing enzyme is an anzyme derived from microorganisms 4.
1. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 40 ที่ซึ่งจุลชีพดังกล่าว คื อจุลชีพที่เลือกจากกลุ่มที่ประกอบด้วย จุลชีพจากสกุล Rhizobium ,Artrobacter,Brevibacterium และ Micrococcus 41. Process according to claim 40, where such microorganisms are microorganisms selected from the group consisting of Microorganisms from the genus Rhizobium, Artrobacter, Brevibacterium and Micrococcus 4.
2. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 41 ที่ซึ่งจุลชีพดังกล่าวจากสกุล Rhizobium คือ Rhizobium s p.M-11(FERM BP-4310) 42. Process according to claim 41, where the microorganisms from the genus Rhizobium is Rhizobium s p.M-11 (FERM BP-4310) 4.
3. กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 41 ที่ซึ่งจุลชีพดังกล่าวจากสกุล Artrobacter คือ Artrobacter s p. Q36 (FERM BP -4316) 43. Process according to claim 41, where the microorganisms from the genus Artrobacter is Artrobacter s p. Q36 (FERM BP -4316) 4.
4.กระบวนการตามข้อถือสิทธิที่ 36 ที่ซึ่งสารละลายดังกล่าวที่มีนอนรีดิวซิงแซคคาไรด์ที่มี โครงสร้างทรีฮาโลสเป็นหน่วยทางปลาย และมีดีกรีของกลูโคสพอลิเมอไรเซชันเป็น 3 หรือมากกว่า จะได้มาโดยการไฮโดรไลซ์บางส่วนของสารละลายของสารที่มีเนื้อแป้งโดยใช้อะไมเลสที่มีหรือไม่มี เอนไซม์ที่เอาแขนงออก4. Process according to claim 36, where such solutions containing non-redoxaccharides The trehalose is an end unit. And having a degree of glucose polymerization of 3 or more, it is obtained by partial hydrolysis of a solution of starchy substance using amylase with or without. Enzyme that removes the branches