Claims (1)
------03/03/2563------(OCR) หน้า 1 ของจำนวน 1 หน้า ข้อถือสิทธิ 1. กรรมวิธีการเตรียมสารกลุ่มซาโปนิน (saponin) ความเข้มข้นสูงจากปลิงดำที่มีขั้นตอน ดังต่อไปนี้ ก. นำปลิงดำมาตัดแยกส่วนของผนังลำตัวและท่อคูเวียร์ออกมาจากตัวปลิงดำ แล้วทำให้มีขนาดเล็กลง ข. นำส่วนของผนังลำตัวหรือท่อคูเวียร์ ส่วนใดส่วนหนึ่งหรือรวมกันมากกว่าหนึ่งส่วนมาทำให้แห้งด้วยวิธีการที่เลือกได้จาก เทคโนโลยีการทำแห้งเยือกแข็งแบบสุญญากาศ (vacuum technology),หรือการทำแห้งเยือกแข็งแบบฟรีซดราย (freeze dried technology), การทำแห้งแบบใช้ความร้อน(hot air technology), การทำแห้งด้วยอินฟราเรด (infrared dried technology), การทำแห้งด้วยการอบด้วยแสงอาทิตย์ (solar dried technology), การทำแห้งด้วยวิธีออสโมซิส (osmotic dehydration)อย่างใดอย่างหนึ่งหรือรวมกันมากกว่าหนึ่งอย่าง ค. นำส่วนของผนังลำตัวหรือท่อคูเวียร์ ส่วนใดส่วนหนึ่งหรือรวมกันมากกว่าหนึ่งส่วน ที่ทำให้แห้งแล้ว มาทำการสกัดสารกลุ่มซาโปนิน (saponin) ด้วยวิธีการไหลย้อนกลับ (reflux) ด้วย 70% เอทานอล(70% ethanol) จำนวน 5 รอบ รวมสารสกัดที่ได้เข้าด้วยกัน ได้ แล้วระเหยเอทานอลออกภายใต้ความดันตํ่าด้วยเครื่องระเหยแบบหมุนเหวี่ยง (rotary evaporator) ได้สารสกัดเข้มข้นในน้ำ ง. นำสารสกัดเข้มข้นในน้ำที่ได้ไปสกัดเอาสารที่มีขั้วตํ่าออกด้วยการแยกส่วน (partition) ในตัวทำละลายแต่ละชนิด คือ ไดคลอโรมีเทน (dichloromethane (CH2Cl2)) และ เอธิล อะซีเตด (ethylacetate (EtOAc)) แล้วแยกสารละลายที่อยู่เฉพาะในชั้นน้ำออกมาทำการแยกส่วน (partition) ต่อด้วยตัวทำละลาย เอน-บิวทานอล (n-butanol (n-BuOH)) แล้วนำสารละลายที่อยู่ในชั้น เอน-บิวทานอล(n-butanol (n-BuOH)) ภายหลังการแยกมาทำการระเหยเอา เอน-บิวทานอล (n-butanol (n-BuOH))ออก จะได้สารสกัดหยาบที่มีสารกลุ่มซาโปนิน (saponin) ความเข้มข้นสูง ------------ หน้าที่ 1 ของจำนวน 1 หน้า ข้อถือสิทธิ 1. กรรมวิธีการเตรียมสารกลุ่มซาโปนิน (saponin) ความเข้มข้นสูงจากปลิงดำ ที่มีฤทธิ์ช่วย ลดระดับไขมันในเลือดและลดความดันโลหิต ที่ซึ่งเป็นการสกัดสารจากส่วนของผนังลำตัวและท่อคูเวียร์ ของปลิงดำ มีขั้นตอน ตังต่อไปนี้ ก. นำปลิงดำมาตัดแยกส่วนของผนังลำตัวและท่อคูเวียร์ออกมาจากตัวปลิงดำ แล้วทำให้มีขนาด เล็กลง ข. นำส่วนของผนังลำตัวหรือท่อคูเวียร์ ส่วนใดส่วนหนึ่งหรือรวมกันมากกว่าหนึ่งส่วนมาทำให้ แห้งด้วยวิธีการที่เลือกได้จาก เทคโนโลยีการทำแห้งเยือกแข็งแบบสุญญากาศ (vacuunn technology), หรือการทำแห้งเยือกแข็งแบบฟรีซดราย (freeze dried technology), การทำแห้งแบบใช้ความร้อน (hot air technology), การทำแห้งด้วยอินฟราเรด (infrared dried technology), การทำแห้งด้วยการ อบด้วยแสงอาทิตย์ (solar dried technology), การทำแห้งด้วยวิธีออสโมซิส (osmotic dehydration) อย่างใดอย่างหนึ่งหรือรวมกันมากกว่าหนึ่งอย่าง ค. นำส่วนของผนังลำตัวหรือท่อคูเวียร์ ส่วนใดส่วนหนึ่งหรือรวมกันมากกว่าหนึ่งส่วน ที่ทำให้แห้ง แล้ว มาทำการสกัดสารกลุ่มซาโปนิน (saponin) ด้วยวิธีการไหลย้อนกลับ (reflux) ด้วย 70% เอทานอล (70% ethanol) จำนวน 5 รอบ รวมสารสกัดที่ได้เข้าด้วยกัน ได้ แล้วระเหยเอทานอลออกภายใต้ความ ดันตํ่าด้วยเครื่องระเหยแบบหมุนเหวี่ยง (rotary evaporator) ได้สารสกัดเข้มข้นในน้ำ ง. นำสารสกัดเข้มข้นในน้ำที่ได้ไปสกัดเอาสารที่มีขั้วตํ่าออกด้วยการแยกส่วน (partition) ในตัว ทำละลายแต่ละชนิด ได้แก่ ไดคลอโรมีเทน (dichloromethane (CH2Cl2)) และ เอธิล อะซีเตด (ethyl acetate (EtOAc)) แล้วแยกสารละลายที่อยู่เฉพาะในชั้นน้ำออกมาทำการแยกส่วน (partition) ต่อด้วย ตัวทำละลาย เอน-บิวทานอล (n-butanol (n-BuOH)) แล้วนำสารละลายที่อยู่ในชั้น เอน-บิวทานอล (n-butanol (n-BuOH)) ภายหลังการแยกมาทำการระเหยเอา เอน-บิวทานอล (n-butanol (n-BuOH)) ออก จะได้สารสกัดหยาบที่มีสารกลุ่มซาโปนิน (saponin) ความเข้มข้นสูง------03/03/2563------(OCR) Page 1 of 1 page. Claims 1. A method for preparing high-concentration saponins from black sea cucumbers with the following steps: a. The body wall and cuvier ducts are separated from the black sea cucumber and reduced in size. b. The body wall or cuvier ducts, or a combination thereof, are dried using a selected method from vacuum freeze-drying technology, freeze-drying technology, hot air drying technology, infrared drying technology, solar drying technology, or osmotic dehydration, either individually or in combination. c. The dried body wall or cuvier ducts, or a combination thereof, are then processed. Saponins were extracted using the reflux method with 70% ethanol for 5 rounds. The resulting extracts were combined, and the ethanol was evaporated under low pressure using a rotary evaporator to obtain a concentrated aqueous extract. The low-polarity compounds from this concentrated aqueous extract were then partitioned in different solvents: dichloromethane (CH2Cl2) and ethyl acetate (EtOAc). The solutions remaining in the aqueous layer were further partitioned using n-butanol (n-BuOH). n-butanol (n-BuOH), after separation and evaporation to obtain a crude extract with a high concentration of saponins. ------------ Page 1 of 1. Claims 1. A method for preparing high-concentration saponins from black sea cucumbers, which have the effect of reducing blood lipid levels and blood pressure, by extracting the substances from the body wall and cuvier ducts of black sea cucumbers. The steps are as follows: a. The body wall and cuvier ducts are separated from the black sea cucumber body and reduced in size. b. The body wall or cuvier ducts, or a combination of more than one section, are dried using a method of choice from vacuum freeze-drying technology, freeze-drying technology, hot air drying technology, infrared drying technology, or other drying methods. Drying can be done using solar drying technology or osmotic dehydration, either individually or in combination. A portion or a combination of these dried parts of the body wall or cuvier tubules is then subjected to saponin extraction using reflux with 70% ethanol for five cycles. The resulting extracts are combined, and the ethanol is evaporated under controlled conditions. A concentrated aqueous extract was obtained by using a rotary evaporator. The low-polarity compounds were then separated by partitioning in different solvents: dichloromethane (CH2Cl2) and ethyl acetate (EtOAc). The aqueous solution was then further partitioned using n-butanol (n-BuOH). The n-butanol solution was then evaporated to obtain a crude extract with a high concentration of saponins.