Claims (8)
ข้อถือสิทธฺ์(ทั้งหมด)ซึ่งจะไม่ปรากฏบนหน้าประกาศโฆษณา:------25/12/2562------(OCR)หน้า1ของจำนวน2หน้าข้อถือสิทธิ 1.กรรมวิธีการสกัดสารกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุที่มีสารโรโดไมรโทนเป็นสารหลักประกอบด้วยขั้นตอนดังนี้ก.คัดเลือกส่วนใบของกระทุจากนั้นล้างทำความสะอาดแล้วนำมาทำให้แห้งอบที่อุณหภูมิ60-75องศาเซลเซียสจากนั้นนำใบกระทุแห้งไปบดละเอียดในขั้นตอนนี้ได้ใบกระทุแห้งบดละเอียดข.นำใบกระทุแห้งบดละเอียดที่ได้จากขั้นตอนกมาแช่ในตัวทำละลายที่อุณหภูมิ25-28องศาเซลเซียสเป็นเวลา3-15วันจากนั้นกรองและแยกเอากากออกแล้วนำสารละลายที่ได้มาระเหยตัวทำละลายออกที่อุณหภูมิ40-45องศาเซลเซียสในขั้นตอนนี้จะได้สารสกัดหยาบจากใบกระทุค.บรรจุซิลิกาเจล(silicagel)ขนาดหยาบลงในคอลัมน์โดยคอลัมน์ที่มีเส้นผ่าศูนย์กลาง8ซม.บรรจุซิลิกาเจลให้ได้ความสูง32เซนติเมตรใช้เฮกเซน(C6H14)ทำให้ซิลิกาเจลเปียกในขั้นตอนนี้จะได้ซิลิกาเจลคอลัมน์ง.นำสารสกัดหยาบจากใบกระทุที่ได้จากขั้นตอนขมาละลายด้วยตัวทำละลายจากนั้นใส่ซิลิกาเจลชนิดหยาบลงในสารละลายสกัดหยาบคนจนสารละลายสกัดหยาบแห้งเป็นผงร่วนจากนั้นค่อยๆถ่ายลงไปในคอลัมน์อย่างช้าๆเพื่อให้ผิวหน้าของซิลิกาเจลเรียบอยู่เสมอจากนั้นใช้ตัวทำละลายผสมเฮกเซน-เอทิลอะซิเตตเป็นตัวชะสารสกัดกึ่งบริสุทธิ์ออกจากคอลัมน์ตามลำดับในขั้นตอนนี้จะได้สารสกัดกึ่งบริสุทธิ์ที่มีสารโรโดไมรโทนจ.สารสกัดกึ่งบริสุทธิ์ที่มีสารโรโดไมรโทนที่ได้จากขั้นตอนง.มาทำการแยกต่อด้วยวิธีคอลัมน์โครมาโทกราฟีใช้ตัวทำละลายผสมเฮกเซน-เอทิลอะซิเตตจากนั้นนำไประเหยด้วยเครื่องกลั่นระเหยสารแบบหมุน(RotaryEvaporator)จะได้สารสกัดย่อยโรโดไมรโทนลักษณะเป็นผงละเอียดสีเขียวเข้มออกดำฉ.นำสารสกัดย่อยโรโดไมรโทนที่ได้จากขั้นตอนจ.มาทำการแยกต่อด้วยวิธีคอลัมน์โครมาโทกราฟีใช้ตัวทำละลายผสมเฮกเซนและไดคลอโรมีเทนและเมนทานอลจากนั้นนำไประเหยด้วยเครื่องกลั่นระเหยสารแบบหมุน(RotaryEvaporator)จะได้สารสกัดกึ่งบริสุทธิ์ที่มีโรโดไมรโทนเป็นสารหลักโดยมีลักษณะเป็นผงละเอียดสีเขียวอ่อน 2.กรรมวิธีการสกัดสารกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุที่มีสารโรโดไมรโทนเป็นสารหลักตามข้อถือสิทธิ1ที่ซึ่งในขั้นตอนขตัวทำละลายเลือกได้จากอะซิโตน(C3H6O)เอทานอล(CH3CH2OH)หรืออะซิโตน 3.กรรมวิธีการสกัดสารกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุที่มีสารโรโดไมรโทนเป็นสารหลักตามข้อถือสิทธิ1ที่ซึ่งในขั้นตอนขอาจจะเปลี่ยนตัวทำละลายทุกๆ3วันแทนการแช่สารละลายเป็นเวลา3-15วัน 4.กรรมวิธีการสกัดสารกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุที่มีสารโรโดไมรโทนเน้นสารหลักตามข้อถือสิทธิ1ที่ซึ่งในขั้นตอนงตัวทำละลายเลือกได้จากคลอโรมีเทน(CH2Cl2)หรือเอทิลอะซิเตท(C4H8O2) 5.กรรมวิธีการสกัดสารกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุที่มีสารโรโดไมรโทนเป็นสารหลักตามข้อถือสิทธิ1ที่ซึ่งอัตราส่วนระหว่างตัวทำละลายเฮกเซนและเอทิลอะซิเตตในขั้นตอนงคืออัตราส่วน80-96ต่อ4-20%โดยปริมาตร 6.กรรมวิธีการสกัดสารกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุที่มีสารโรโดไมรโทนเป็นสารหลักตามข้อถือสิทธิ1ที่ซึ่งอัตราส่วนระหว่างตัวทำละลายเฮกเซนและเอทิลอะซิเตตในขั้นตอนจคืออัตราส่วน94ต่อ6%โดยปริมาตรหน้า2ของจำนวน2หน้า 7.กรรมวิธีการสกัดสารกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุที่มีสารโรโดไมรโทนเป็นสารหลักตามข้อถือสิทธิ1ที่ซึ่งอัตราส่วนตัวทำละลายผสมเฮกเซน-ไดคลอโรมีเทน-เมนทานอลในขั้นตอนฉคืออัตราส่วน80ต่อ16ต่อ4%โดยปริมาตร 8.กรรมวิธีการสกัดสารกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุที่มีสารโรโดไมรโทนเป็นสารหลักตามข้อถือสิทธิ1-5ข้อใดข้อหนึ่งที่ซึ่งสามารถเพิ่มเติมขั้นตอนการทดสอบปริมาณสารสกัดดังนี้ช.นำ100%ไดคลอโรมีเทนมาเป็นเฟสเคลื่อนที่ทำการตรวจสอบสารละลายที่ถูกชะออกมาด้วยทินเลเยอร์โครมาโตกราฟีที่มีซิลิกาเจลเป็นเฟสอยู่กับที่และทำการรวมสารละลายที่มีลักษณะของจุดสารบนทินเลเยอร์โครมาโตกราฟีที่คล้ายกันเข้าด้วยกันจากสารสกัดไดคลอโรมีเทนให้ได้สารกึ่งบริสุทธิ์ใช้เครื่องโครมาโทกราฟีของเหลวสมรรถนะสูงวิเคราะห์ปริมาณสารโรโดไมรโทนในสารสกัดย่อยกึ่งบริสุทธิ์เทียบกับสารโรโดไมรโทนบริสุทธิ์ที่ทำการวิเคราะห์หาสูตรโครงสร้างด้วยเอ็นเอ็มอาร์สเปคโทรสโคปี(1Dและ2DNMRspectroscopy)และแมสสเปกโทรสโครปี(massspectroscopy)------------หน้า1ของจำนวน2หน้าข้อถือสิทธิClaims (all) which will not appear on the classifieds page:------25/12/2019------(OCR)Page 1 of 2 Claims Pages. 1. The process of extracting semi-pure substances from Kra Krathong leaves that contain Rhodomyroton as the main substance consists of the following steps: A. Selecting the leaves of Kra Krathong, then washing it and drying it at a temperature of 60-75 degrees. celsius, then the dried kratom leaves are crushed. At this stage, the dried kraut leaves are crushed. b. The crushed dried kraut leaves obtained from the process are soaked in a solvent at a temperature of 25-28 degrees Celsius for 3 -15 days, then filter and separate the residue and bring the solution obtained to evaporate the solvent at 40-45 degrees Celsius, at this stage will get a coarse extract from Kratuk leaves. Contains silicagel (silicagel). Coarse size into columns by columns with a diameter of 8 cm. contain silica gel to a height of 32 cm. Use Hexane (C6H14) to wet the silica gel. In this step, column silica gel is obtained. The coarse extracted from the kratom leaves obtained from the bitter process is dissolved by the solvent, then put the coarse silica gel into the coarse extraction solution, stir until the coarse extraction solution is dried into a crumbly powder, then slowly transferred into the column to The surface of the silica gel was always smoothed, then a hexane-ethyl acetate mixture was used to eluate the semi-pure extracts from the respective columns at this stage. Semi-pure extracts containing rhodomirotones E. Semi-pure extracts containing rhodomirotones obtained from step D will be further separated by column chromatography method. The hexane-ethyl acetate mixed solvent was then evaporated with a rotary evaporator to obtain a fine, dark green to black rhodomirotone sub-powder. Rhodomyrtone sub-extracts obtained from step E were further separated by column chromatography using hexane and dichloromethane and mentanol-mixed solvents. To evaporate with a rotary evaporator, a semi-pure extract with rhodomirtones as the main substance is obtained as a light green fine powder. 2. A semi-pure extraction process from kratom leaves containing rhodomirotone as the main substance according to claim 1, where in step B the solvent was selected from acetone (C3H6O), ethanol ( CH3CH2OH) or acetone 3. The semi-pure extraction process from kratom leaves containing rhodomirotone as the main substance according to claim 1, in which step B may change the solvent every 3 days instead of soaking the solution for 3-15 days. day 4. The semi-pure extraction process from kratom leaves containing rhodomirotone emphasizes the main substance according to claim 1, where the solvent can be selected from chloromethane (CH2Cl2) or ethyl acetate. (C4H8O2) 5. A semi-pure extraction process from kratom leaves containing rhodomirotone as the main substance according to claim 1 where the ratio between hexane and ethyl acetate in the process D is a ratio of 80-96 to 4-20% by volume. 6. The semi-pure extraction process from kratom leaves contains rhodomirotone as the main substance under claim 1, where the ratio between hexane and ethyl acetate in the E step is 94. per 6% by volume of 2 pages of 2 pages 7. The semi-pure extraction process from kratom leaves containing rhodomirotone as the main substance according to claim 1, where the hexane-dichloromethane-mentanol mixed solvent ratio in the process f is the ratio of 80 to 16 to 4% by volume. 8. The process of extracting semi-purified substances from Krauthu leaves containing Rhodomyrotone as the main substance according to claims 1-5, one of which can be added to the extraction test steps as follows: 100% Dichloromethane as a mobile phase was examined for the elution solution with tin-layer chromatography containing stationary phase silica gel, and the solution with speckle nature was incorporated on the tin layer. Similar chromatography was combined from dichloromethane extracts to obtain semi-pure substances using high-performance liquid chromatography to analyze rhodomirotone content in the sub-extracts. Semi-pure vs. pure rhodomirtones analyzed by NMR spectroscopy (1D and 2DNMRspectroscopy) and massspectroscopy--- ---------Page 1 of the number 2 claims page
1.กระบวนการสกัดสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากสารสกัดกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุประกอบด้วยขั้นตอนดังนี้ก.คัดเลือกส่วนใบของกระทุจากนั้นล้างทำความสะอาดแล้วน่ามาทำให้แห้งอบที่อุณหภูมิ60-75องศาเซลเซียสจากนั้นน่าใบกระทุแห้งไปบดละเอียดในขั้นตอนนี้ได้ใบกระทุแห้งบดละเอียดข.นำใบกระทุแห้งบดละเอียดที่ได้จากขั้นตอนกมาแซในตัวทำละลายที่อุณหภูมิ25-28องศาเซลเซียสเป็นเวลา3-15วันจากนั้นกรองและแยกเอากากออกแล้วน่าสารละลายที่ได้มาระเหยตัวทำละลายออกที่อุณหภูมิ40-45องศาเซลเซียสในขั้นตอนนี้จะได้สารสกัดหยาบจากใบกระทุค.บรรจุซิลิกาเจล(silicagel)ขนาดหยาบลงในคอลัมน์ใช้เฮกเซน(C6H14)ทำให้ซิลิกาเจลเปียกในขั้นตอนนี้จะได้ซิลิกาเจลคอลัมน์ง.น่าสารสกัดหยาบจากใบกระทุที่ได้จากขั้นตอนขมาละลายด้วยตัวทำละลายจากนั้นใส่ซิลิกาเจลชนิดหยาบลงในสารละลายสกัดหยาบคนจนสารละลายสกัดหยาบแห้งเป็นผงร่วนจากนั้นค่อยๆถ่ายลงไปในคอลัมน์อย่างข้าๆเพื่อให้ผิวหน้าของซิลิกาเจลเรียบอยู่เสมอจากนั้นใช้ตัวทำละลายผสมเฮกเซน-เอทิลอะซิเตตเป็นตัวซะสารสกัดกึ่งบริสุทธิ์ออกจากคอลัมน์ตามลำดับในขั้นตอนนี้จะได้สารสกัดกึ่งบริสุทธิ์ที่มีสารโรโดไมรโทนจ.สารสกัดกึ่งบริสุทธิ์ที่มีสารโรโดไมรโทนที่ได้จากขั้นตอนง.มาทำการแยกต่อด้วยวิธีคอลัมน์โครมาโทกราฟีใช้ตัวทำละลายผสมเฮกเซน-เอทิลอะซิเตตจากนั้นนำไประเหยด้วยเครื่องกลั่นระเหยสารแบบหมุน(RotaryEvaporator)จะได้สารสกัดย่อยโรโดไมรโทนลักษณะเป็นผงละเอียดสีเขียวเข้มออกดำฉ.นำสารสกัดย่อยโรโดไมรโทนที่ได้จากขั้นตอนจ.มาทำการแยกต่อด้วยวิธีคอลัมน์โครมาโทกราฟีใช้ตัวทำละลายผสมเฮกเซนและไดคลอโรมีเทนและเมนทานอลจากนั้นนำไประเหยด้วยเครื่องกลั่นระเหยสารแบบหมุน(RotaryEvaporator)จะได้สารสกัดกึ่งบริสุทธิ์ที่มีโรโดไมรโทนเป็นสารหลักโดยมีลักษณะเป็นผงละเอียดสีเขียวอ่อน1. The process of extracting bioactive compounds from semi-pure extracts from Kra Krathuk leaves consists of the following steps. A. Selecting the leaves of Kra Krathum, then washing it, then drying it at a temperature of 60-75 degrees Celsius. Dried and crushed. At this stage, finely ground kracha leaves are obtained. B. The granulated dried kracha leaves obtained from the sap process in a solvent at a temperature of 25-28 °C for 3-15 days are then filtered. And separate the residue and then the resulting solution should evaporate the solvent at a temperature of 40-45 degrees Celsius. At this stage, coarse extracts from Kratuk leaves will be obtained. Hexane (C6H14) wetted the silica gel. At this stage, column D silica gel was obtained. The coarse extracts from the kratom leaves obtained from the cauterization stage were dissolved by solvent, and then the coarse silica gel was added. Into the coarse extraction solution, stir until the coarse extraction solution dries into a crumbly powder, then slowly transfer it into the column sideways to keep the surface of the silica gel smooth, then use the hexane-ethylacetic solvent. Tate is a semi-pure extract from the column, respectively, at this stage a semi-pure extract containing rhodomirotone. The domirotone obtained from step D was further separated by column chromatography using a hexane-ethyl acetate mixed solvent, and then evaporated by an evaporative distillation apparatus. Rotary Evaporator will obtain rhodomirotone sub-extract as fine powder, dark green to black F. Rhodomyrotone sub-extract obtained from step J. is further separated by co-column method. Hexane and dichloromethane and mentanol are mixed solvents, then evaporated with a rotary evaporator to obtain a semi-pure extract containing rhodomite. Ratone is the main substance in appearance as a light green fine powder.
2.กระบวนการสกัดสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากสารสกัดกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุตามข้อถือสิทธิ1ที่ซึ่งในขั้นตอนขตัวทำละลายเลือกได้จากอะซีโตน(C3H6O)เอทานอล(CH3CH2OH)หรืออะซิโตน2. The process of extraction of bioactive compounds from semi-pure extracts from kratom leaves according to claim 1, where in step B the solvent is selected from acetone (C3H6O), ethanol (CH3CH2OH) or acetone.
3.กระบวนการสกัดสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากสารสกัดกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุตามข้อถือสิทธิ1ที่ซึ่งในขั้นตอนขอาจจะเปลี่ยนตัวทำละลายทุกๆ3วันแทนการแช่สารละลายเป็นเวลา3-15วัน3. The process of extracting bioactive compounds from semi-pure extracts from kratom leaves according to claim 1, where in step B the solvent may be replaced every 3 days instead of soaking the solution for 3-15 days.
4.กระบวนการสกัดสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากสารสกัดกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุตามข้อถือสิทธิ1ที่ซึ่งในขั้นตอนงตัวทำละลายเลือกได้จากคลอโรมีเทน(CH2Cl2)หรือเอทิลอะซิเตท(C4H8O2)4. The process of extraction of bioactive compounds from semi-pure extracts from kratom leaves according to claim 1, where the solvent is selected from chloromethane (CH2Cl2) or ethyl acetate (C4H8O2).
5.กระบวนการสกัดสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากสารสกัดกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุตามข้อถือสิทธิ1ที่ซึ่งอัตราส่วนระหว่างตัวทำละลายเฮกเซนและเอทิลอะซิเตตในขั้นตอนงคืออัตราส่วน80-96ต่อ4-20%โดยปริมาตร5. The process of extracting bioactive compounds from semi-pure extracts from kratom leaves according to claim 1, where the ratio between hexane and ethyl acetate in step D is 80-96 to 4-20. % by volume
6.กระบวบการสกัดสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากสารสกัดกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุตามข้อถือสิทธิ1ที่ซึ่งอัตราส่วนระหว่างตัวทำละลายเฮกเซนและเอทิลอะซิเตตในขั้นตอนจคืออัตราส่วน94ต่อ6%โดยปริมาตรหน้า2ของจำนวน2หน้า6. The process of extracting bioactive compounds from semi-pure extracts from kratom leaves according to claim 1, where the ratio between hexane and ethyl acetate in the E step is 94 to 6%. Volume of page 2 of the number of 2 pages
7.กระบวนการสกัดสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากสารสกัดกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุตามข้อถือสิทธิ1ที่ซึ่งอัตราส่วนตัวทำละลายผสมเฮกเซน-ไดคลอโรมีเทน-เมนทานอลในขั้นตอนฉคืออัตราส่วน80ต่อ16ต่อ4%โดยป'ริมาตร7. The process of extraction of bioactive compounds from semi-pure extracts from kratom leaves according to Claim 1 where the hexane-dichloromethane-mentanol solvent ratio in the F step is 80:16. per 4% by volume
8.กระบวนการสกัดสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพจากสารสกัดกึ่งบริสุทธิ์จากใบกระทุตามข้อถือสิทธิ1-5ข้อใดข้อหนึ่งที่ซึ่งสามารถเพิ่มเติมขั้นตอนการทดสอบปริมาณสารสกัดตังนี้ซ.นำ100%ไดคลอโรมีเทนมาเป็นเฟสเคลื่อนที่ทำการตรวจสอบสารละลายที่ถูกซะออกมาด้วยทินเลเยอร์โครมาโตกราฟที่มีซิสิกาเจลเป็นเฟสอยู่กับที่และทำการรวมสารละลายที่มีลักษณะของจุดสารบนทินเสเยอร์โครมาโตกราฟที่คล้ายกันเข้าด้วยกันจากสารสกัดไดคลอโรมีเทนให้ได้สารกึ่งบริสุทธิ์ใช้เครื่องโครมาโทกราฟของเหลวสมรรถนะสูงวิเคราะห์ปริมาณสารโรโดไมรโทนในสารสกัดย่อยกึ่งบริสุทธิ์เทียบกับสารโรโดไมรโทนบริสุทธิ์ที่ทำการวิเคราะห์หาสูตรโครงสร้างด้วยเอ็นเอ็มอาร์สเปคโทรสโคปี(1Dและ2DNMRspectroscopy)และแมสสเปกโทรสโครปี(massspectroscopy)8. The process of extracting bioactive compounds from semi-pure extracts from Kraut leaves according to claims 1-5, one of which can be added to the test procedure for the amount of this Tang extract, which is 100% dichloromethane. As a mobile phase, the released solution was examined with a tin layer chromatography containing stationary phase sisicagel and the solution with a dotted nature was incorporated on the tinsier chromatin. Similar tographs were combined from dichloromethane extracts to obtain semi-pure substances using a high-performance liquid chromatography to analyze rhodomirotone content in the semi-pure extracts compared to that of ro. Pure domyrotones were analyzed for structural formulas using NMR spectroscopy (1D and 2DNMRspectroscopy) and massspectroscopy.