Claims (7)
หน้า 1 ของจำนวน 2 หน้า ข้อถือสิทธิPage 1 of 2: Claims
1. ชุดไพรเมอร์สำหรับตรวจหาเชื้อไวรัสเอสดีดีวี ที่ประกอบด้วย ดังนี้ ไพรเมอร์สำหรับขั้นตอนการทำพีซีอาร์ RB ATPase-Fl = 5’-ATG TCT GTT CCT GTG AAG GAA-3’ RB ATPase-Rl = 5’-TTA TTC AAC AAC AGC AAT TGC G-3’ ไพรเมอร์สำหรับขั้นตอนการทำเซมิ-เนสเตด พีซีอาร์ RB ATPase-Fl = 5’-ATG TCT GTT CCT GTG AAG GAA-3’ RB ATPase-R2 = 5’-ACA AGT TCC AAT GTC TAC CGT-3’1. A primer kit for detecting SDDV virus, consisting of the following: Primers for the PCR procedure: RB ATPase-Fl = 5’-ATG TCT GTT CCT GTG AAG GAA-3’; RB ATPase-Rl = 5’-TTA TTC AAC AAC AGC AAT TGC G-3’. Primers for the semi-nested PCR procedure: RB ATPase-Fl = 5’-ATG TCT GTT CCT GTG AAG GAA-3’; RB ATPase-R2 = 5’-ACA AGT TCC AAT GTC TAC CGT-3’.
2. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อไวรัสเอสดีดีวีด้วยชุดไพรเมอร์ ตามข้อถือสิทธิ 1 ที่ซึ่ง กรรมวิธีดังกล่าว ประกอบด้วยขั้นตอนดังนี้ ก) นำตัวอย่างเนื้อเยื่อปลามาสกัดดีเอ็นเอ ข) นำดีเอ็นเอที่ได้มาทำปฏิกิริยาพีซีอาร์ โดยใช้ไพรเมอร์จำเพาะ ค) นำผลิตผลพีซีอาร์ที่ได้มาทำปฏิกิริยาเซมิ-เนสเตด พีซีอาร์ โดยใช้ไพรเมอร์จำเพาะ ง) วิเคราะห์ผลที่ได้ด้วยวิธีอะกาโรสเจลอิเล็กโตรโฟรีซีส2. The procedure for detecting SDDV virus using a primer kit, as per claim 1, consists of the following steps: a) DNA extraction from fish tissue samples; b) PCR reaction of the extracted DNA using specific primers; c) Semi-nested PCR reaction of the resulting PCR product using specific primers; d) Analysis of the results using agarose gel electrophoresis.
3. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อไวรัสเอสดีดีวี ตามข้อถือสิทธิ 2 ที่ซึ่ง ตัวอย่างเนื้อเยื่อปลาที่ใช้ เลือกได้จาก กล้ามเนื้อ เหงือก หัวใจ ม้าม ไส้ กระเพาะ ตับ ไต อย่างใดอย่างหนึ่งหรือหลายอย่างรวมกัน3. The procedure for detecting the SDDV virus under claim 2, whereby the fish tissue samples used can be selected from muscle, gills, heart, spleen, intestine, stomach, liver, kidney, either individually or in combination.
4. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อไวรัสเอสดีดีวี ตามข้อถือสิทธิ 2 ที่ซึ่ง สารละลายที่ใช้ในการทำปฏิกิริยาพีซีอาร์ มี ดังนี้ RB ATPase-Fl 0.5 ไมโครลิตร RB ATPase-Rl 0.5 ไมโครลิตร สารละลายบัฟเฟอร์สำหรับทำปฏิกิริยา 2.5 ไมโครลิตร ดีเอ็นทีพีเอส 0.5 ไมโครลิตร แทคดีเอ็นเอโพลิเมอเรส 0.25 ไมโครลิตร ดีเอ็นเอแม่แบบ 2.0 ไมโครลิตร น้ำกลั่น 18.75 ไมโครลิตร4. Procedure for detecting the SDDV virus according to Patent 2, where the PCR reaction solution consists of the following: RB ATPase-Fl 0.5 µl, RB ATPase-Rl 0.5 µl, reaction buffer solution 2.5 µl, DNTPS 0.5 µl, TAC DNA polymerase 0.25 µl, template DNA 2.0 µl, distilled water 18.75 µl.
5. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อไวรัสเอสดีดีวี ตามข้อถือสิทธิ 2 ที่ซึ่ง สภาวะที่ใช้ในการทำปฏิกิริยาพีซีอาร์ มีดังนี้ 94 องศา C, 5 นาทํ 94 องศา C, 30 วินาที, 60 ?C, 30 วินาที, 72 ?C, 30 วินาที 30 รอบ หน้า 2 ของจำนวน 2 หน้า และ 72 องศา C, 5 นาที5. The method for detecting the SDDV virus, as per claim 2, where the PCR reaction conditions are as follows: 94 °C, 5 min; 94 °C, 30 sec; 60 °C, 30 sec; 72 °C, 30 sec; 30 cycles; and 72 °C, 5 min. (Page 2 of 2)
6. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อไวรัสเอสดีดีวี ตามข้อถือสิทธิ 2 ที่ซึ่ง สารละลายที่ใช้ในการทำปฏิกิริยาเซมิ- เนสเตด พีซีอาร์ มีดังนี้ RB ATPase-Fl 0.4 ไมโครลิตร RB ATPase-R2 0.4 ไมโครลิตร สารละลายบัฟเฟอร์สำหรับทำปฏิกิริยา 2.0 ไมโครลิตร ดีเอ็นทีพีเอส 0.4 ไมโครลิตร แทคดีเอ็นเอโพลิเมอเรส 0.2 ไมโครลิตร ผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ 5.0 ไมโครลิตร น้ำกลั่น 11.6 ไมโครลิตร6. Procedure for detecting the SDDV virus according to Patent 2, where the solutions used in the semi-nested PCR reaction are as follows: RB ATPase-Fl 0.4 µl, RB ATPase-R2 0.4 µl, reaction buffer solution 2.0 µl, DNTPS 0.4 µl, TAC DNA polymerase 0.2 µl, PCR product 5.0 µl, distilled water 11.6 µl.
7. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อไวรัสเอสดีดีวิ ตามข้อถือสิทธิ 2 ที่ซึ่ง สภาวะที่ใช้ในการทำปฏิกิริยาเซมิ-เนสเตด พีซีอาร์ มีดังนี้ 94 องศา C, 5 นาที 94 องศา C, 30 วินาที , 67 องศา C, 30 วินาที, 72 องศา c, 30 วินาที 30 รอบ และ 72 องศา C, 5นาที7. The method for detecting the SDG virus under claim 2, where the conditions used for the semi-nested PCR reaction are as follows: 94°C, 5 minutes; 94°C, 30 seconds; 67°C, 30 seconds; 72°C, 30 seconds (30 cycles); and 72°C, 5 minutes.