TH10137A -
Heat-stable cytosine-aminase
- Google Patents
Heat-stable cytosine-aminase
Info
Publication number
TH10137A
TH10137ATH9001000814ATH9001000814ATH10137ATH 10137 ATH10137 ATH 10137ATH 9001000814 ATH9001000814 ATH 9001000814ATH 9001000814 ATH9001000814 ATH 9001000814ATH 10137 ATH10137 ATH 10137A
ไซโดซีนดีแอมมิเนสที่เสถียรต่อความร้อน (CDase) และยีนซึ่งถอดรหัสสำหรับเอนไซม์ดังกล่าวได้รับการเปิดเผยเช่น เดียวกันกับวิธีการแยกและการทำให้บริสุทธิ์และวิธีการทางรี คอมบิแนนที่ในการผลิตดังกล่าวด้วย เอนไซม์ไซโดซีนดีแอม มิเนสที่เสถียรต่อความร้อนสามารถแยกได้จาก Saccharomyces cereyisiae เอนไซม์ที่แยกได้จากยีสต์มีน้ำหนักโมเลกุล ประมาณ 32 กิโลดาลตัน (kDa) เมื่อวิเคราะห์ด้วยเทคนิคเจล โครมาโตกราฟฟี และประกอบด้วย 2 หน่วยย่อย (Subunit) แต่ละ หน่วยย่อยมีน้ำหนักโมเลกุลประมาณ 17 กิโลดาลตัน ไซโดซีน ดี แอมมิเนสที่เสถียรต่อความร้อนได้ถูกทำให้บริสุทธิ์และมาก กว่าไม่มีลำดับของกรดอะมิโนเหมือนกันกับลำดับของกรดอะมิโน ที่ ได้จากโปรตีนชนิดอื่นที่รู้จักมาก่อนเลยThe heat-stable cydocine deamminase (CDase) and the gene transcribing it have been revealed, along with the isolation and purification methods and recombinant methods used to produce it. The heat-stable cydocine deamminase can be isolated from Saccharomyces cereyisiae. The yeast-isolated enzyme has a molecular weight of approximately 32 kilodaltons (kDa) as analyzed by gel chromatography and consists of two subunits, each with a molecular weight of approximately 17 kilodaltons. The heat-stable cydocine deamminase was purified and, moreover, does not share any amino acid sequences with any previously known proteins.
Claims (10)
1. วิธีการเพื่อได้มาซึ่งลำดับนิวคลิโอไทด์ที่ทอดรหัสให้ไซโดซีนดีแอมมิเนสที่เสถียรต่อความร้อน หรือโปรตีนซึ่งทำ หน้าที่อย่างเดียวกัน วิธีการดังกล่าวประกอบด้วยการแยกลำ ดับนิวคลิโอไทด์ที่กล่าวถึงจากห้องสมุดยีน (genomic library) หรือห้องสมุดคอมพลิเมนตารี ดีเอนเอ (compliomentary DNA) หรือ ลำดับนิวคลิโอไทด์ที่ผลิตได้ ด้วยวิธีสังเคราะห์1. Methods for obtaining nucleotide sequences that encode heat-stable cytosine deamminase or similar proteins involve isolating the aforementioned nucleotide sequences from a genomic library, a complementary DNA library, or synthetically produced nucleotide sequences.2. วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 1 โดยที่ลำดับตัวจริงเหมือน กับที่แสดงไว้ในรูปที่ 102. The method according to claim 1, where the actual sequence is the same as shown in Figure 10.3. พาหะแสดงออกรีคอมมิแนนท์ซึ่งประกอบขึ้นด้วยและมี ประสิทธิภาพการแสดงออกของลำดับนิวคลิโอไทด์ตามข้อถือสิทธิ ที่ 1 หรือ 23. Recomminant expression carriers composed of and exhibiting the expression efficiency of nucleotide sequences according to claim 1 or 2.4. พาหะแสดงออกรีคอมมิแนนท์ของข้อถือสิทธิที่ 3 โดยที่ลำ ดับนิวคลิโอไทด์ถูกติดต่อให้เชื่อมกับลำดับควบคุมตรงกันกับ ของเซลล์เจ้าเรือน4. The carrier expresses the recomminant of claim 3, where the nucleotide sequence is ligated to the control sequence of the host cell.5. เซลล์เจ้าเรือนซึ่งถูกทรานสฟอร์ม (transformed) ด้วย พาหะแสดงออกรีคอมบิแนนท์ตามข้อถือสิทธิที่ 45. Host cells that are transformed by a carrier expressing recombinant material according to claim 4.6. กรรมวิธีในการผลิตรีคอมมิแนนท์ ไซโดซีนดีแอมมิเนสที่ เสถียรต่อความร้อนหรือโปรตีนซึ่งทำหน้าที่เหมือนกันซึ่ง ประกอบด้วยขั้นตอนของการเจริญ เซลล์เจ้าเรือนของข้อถือ สิทธิที่ 56. A procedure for producing heat-stable recomminant cytosine deamminase or similar protein, which involves the host cell growth steps of claim 5.7. วิธีการเพื่อให้ได้มาซึ่งไซโดซีนดีแอมมิเนสเสถียรต่อ ความร้อนหรือโปรตีนที่ทำหน้าที่เหมือนกัน วิธีการดังกล่าว ประกอบด้วยการแสดงออกของรหัสลำดับนิวคลิโอไทด์ดังกล่าวที่ ให้ไซโดซีนดีแอมมิเนสที่เสถียรต่อความร้อน หรือที่ สังเคราะห์ขึ้นเพื่อผลิตไซโดซีนดีแอมมิเนสที่เสถียรต่อความ ร้อนดังกล่าวหรือการแยกไซโดซีนดีแอมมิเนสที่เสถียรต่อความ ร้อนจากสิ่งมีชีวิตที่ผลิตเอนไซม์นี้7. Methods for obtaining heat-stable cyclosine deamminase or similar proteins. Such methods involve expressing the nucleotide sequence that yields heat-stable cyclosine deamminase, or synthesizing heat-stable cyclosine deamminase to produce it, or isolating heat-stable cyclosine deamminase from organisms that produce this enzyme.8. วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 7 โดยที่ไซโดซีนดีแอมมิเนส ประกอบขึ้นด้วยลำดับของกรดอะมิโนเหมือนกับรูปที่ 6 หรือ 10 หรือลำดับกรดอะมิโนส่วนใหญ่เหมือนกันหรือทำหน้าที่อย่าง เดียวกัน8. The method under claim 7, whereby cyclosine deamminase is composed of the same amino acid sequence as in Figure 6 or 10, or has the same majority of amino acid sequences, or performs the same function.9. วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 7 โดยที่ไซโดซีนดีแอมมิเนส ดังกล่าวแยกได้จากยีสต์9. The method under claim 7, whereby the aforementioned cyclosine deamminase is isolated from yeast.10. วิธีการตามข้อถือสิทธิที่ 7 โดยที่ ไซโดซีนดีแอมมิเนส ดังกล่าวแยกได้จาก Saccharomyces cderevisiae (ข้อถือสิทธิ 10 ข้อ, 1 หน้า, 12 รูป)10. The method according to claim 7, where the aforementioned cytosine deamminase is isolated from Saccharomyces cderevisiae (Clause 10, page 1, figure 12).
Recombinant plasmid dna pvgib encoding bovine gamma-interferon, method of its preparing and yeast strain saccharomyces cerevisiae - a producer of bovine gamma-interferon
A gene encoding a chitosanase derived from Bacillus subtilis CH2, an expression vector containing the gene, a transformant transformed with the expression vector and a protein produced therefrom