SU967392A1

SU967392A1 - Способ определени морозостойкости растений

Info

Publication number: SU967392A1
Application number: SU813245801A
Authority: SU
Inventors: Валентин Николаевич Савин; Лариса Ивановна Никитина
Original assignee: Агрофизический научно-исследовательский институт
Priority date: 1981-02-06
Filing date: 1981-02-06
Publication date: 1982-10-23

Description

(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МОРОЗОСТОЙКОСТИ

РАСТЕНИЙ

Изобретение относитс к сельскому хоз йству и может быть использовано дл определени устойчивости растений к действию естественных физических факторов, а также дл выведени морозостойких сортов растений, и отбора морозостойких сортообразцов . Известен способ оценки морозостойкости по числу выживших особей, включающий промораживание образцов при постепенном снижении температуры, последующее оттаивание , отращивание и анализ материала 1. Однако способ обладает небольшой точностью , трудоемкостью. сравнительно большой длительностью (ЗОсут.). После проведени анализа растени погибают. Известен способ определени морозостойкости растений, заключающийс в проращивании при 20-25° сем н до достижени длины колеоптил 5-8 мм, отделении кончика колеоптил длиной 2-3 мм, разделении его на две части, последующем выдерживании половинок колеоптилей в разных температурных режимах в течении сут при -1Ь3° и при 20-25°, фиксации, окрашиваниигаллоцианин-хромовыми квасцами и определении суммарного количества нуклеиновых кислот (ДНК + РНК) в драх колеоптилей методом цитофотометрии . По изменению содержани нуклеиновых кислот в клеточных драх под вли нием 24часового охлаждени колеоптилей суд т о степени морозостойкости растений: у высокоморозостойких растений содержание нуклеиловых кислот при охлаждении увеличиваетс , у неморозостойких уменьшаетс или остаетс без изменений 2. Этот способ не позвол ет получить точную количественную оценку морозостойкости внутри сорта или близких по морозостойкости сортов. Это св зано с тем, что способ анализирует специализированные ткани (колеоптиль), где нет синтеза ДНК и клеточных делений. Дл определени изменений в геноме под действием стрессового фактора определ етс суммарное содержание различных нуклеиновых кислот с помощью красител галлоцианин-хромовые квасцы. Эта цитохимическа реакци не вл етс строго количественной и не позвол ет достаточно точно определ ть содержание нуклеиновых кислот. В св зи с этим невозможен точный количественный подход

к определению степени морозостойкости. Способ не позвол ет раздел ть близкие по морозостойкости образцы и вносит субъективность в отнесение образца к той или иной категории морозостойкости.

Цель изобретени - повышение точности определени .

Поставленна цель достигаетс тем, что в качестве ткани дл цитофотометрического анализа используют корневую меристему при достижении корнем длины 1,0-1,5 мм, воздействие пониженной температурой оказывает на семена при их проращивании в пределах температур от -|-3 до Ч-8°С, при этом к высокоморозостойким растени м относ тс растени , у которых отношение содержани дезоксирибонуклеиновых кислот в клеточных драх при проращивании при низкой и нормальной температурах равно 0,8-0,9, к морозостойким - 0,9-1,0, к среднеморозостойким - 1,0-1,1, а к неморозостойким - 1,1 -1,3.

Способ основан на установленном физиологическом влении затормаживании при низкой положительной температуре синтеза ДНК в прора(тающих семенах морозостойких растений (te меристематической ткани). Выбор в качестве объекта исследовани наиболее чувствительного к понижению температуры процесса синтеза. ДНК обеспечивает возможность определени морозостойкости разных растений внутри одного сорта и близких по морозостойкости сортов с высокой степенью точности. Проросшие семена с удаленным дл анализа кончиком корн при помещении их в грунт сохран ют свою жизнеспособность и развиваютс нормально.

Указанные интервалы температур обусловлены следующим. При низкотемпературном проращивании температуры ниже 3° значительно увеличивают врем опыта, выше 8° возможно снижение коэффициента коррел ции между морозостойкостью и определ емым соотношением.

Пример выполнени способа.

Семена разных сортов озимых пшениц, различающихс по морозостойкости, проращивают при 4° и при 22°. На 27-й ч при 22° и на 240-ой ч при 4°, когда средн длина главного корн в попул ции проросших сем н достигает ,5 мм, кончики корешков {мернстематическа ткань) фиксируют

в уксусном алкоголе (1:3), после гидролиза в 5й. сол ной кислоте в течение 30мин при температуре 20-211° окрашивают в течение двух часов реактивом Шиффа, промывают в сернистых водах и готов т временные давленые препараты. Методом одноволновой цитофотометрии при 545 нм измер ют плотность окрашивани ДНКфуксина в драх меристематических клеток и вычисл ют отношение величин средней плотности ДНК-фуксина при проращивании при К° и при 22°.

Использование предлагаемого способа обеспечивает возможность количественной оценки степени морозостойкости изучаемых образцов и вы влени различий по степени

морозостойкости внутри сорта и среди близких по морозостойкости сортов.

Claims

Формула изобретени

Способ определени морозостойкости растений, включающий проращивание сем н , воздействие пониженной температурой, цитофотометрический анализ на содержание нуклеиновых кислот в клеточных драх

тканей органов растений и последующий анализ результатов по отношению содержани нуклеиновых кислот в растени х, подвергнутых и не подвергнутых воздействию пониженной температурой, отличающийс тем, что, с целью повышени точности определени , в качестве ткани дл цитофотометрического анализа используют корневую меристему при-достижении корнем длины 1,0-1,5 мм, воздействие пониженной температурой оказывают на семена при их

5 проращивании в пределах температур от +3 до +8°С, при этом к высокоморозостойким растени м относ т растени , у которых отношение содержани дезоксирибонуклеиновых кислот равно 0,8-0,9, к морозостойким- 0,9-1,0, к среднеморозостой0 КИМ - 1,0-1,1, а к неморозостойким - 1,1 -1,3.

Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе , 1. Методы определени морозостойкости растений. М., 1967, с. 77-84.
2. Авторское свидетельство СССР № 628850, кл. А 01 Н 1/04, 1977.