SU935787A1 - Колонка дл жидкостной хроматографии - Google Patents

Description

(54). КОЛОНКА ДЛЯ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

1

Изобретение относитс  к технике жидкостной колоночной хроматографии, конкретно к оборудованию.дл  гель- проникающей и ионообменной хроматографии с применением в .качестве.сорбентов м гких гелей, и может быть. . использовано в научных исследовани х в области биохимии, биоорганической химии, молекул рной биологии, генетики, медицины.

Известны хроматрграфические колонки в виде пр мых трубок с соотношением диаметра и высоты 1:10 1:100 , снабженных в верхнем конце переходником дл  подачи из резервуара или от насоса жидкой фазы, а в нижнем конце отвод щим переходником , соединенным с детектором и опорой дл  сорбента из пористого стекла или стекловаты 1.

Однако применение таких колонок не эффективно в случае работы с м гкими гел ми, значительна  сжимаемость которых под действием давлени  приводит к снижению скорости потока элюента, вплоть до полной закупорки колонки.

Известны также колонки, позвол ющие уменьшить сжатие гелевой насадки путем разделени  столба гел  на р д

секций. Секционирование достигаетс  заполнением всей колонки при набивке ее гелем стекл нньми шариками .

Однако при использовании колонок со стекл нными шариками дл  сохранени  полезного объема колонки, зан того гелем, приходитс  значительно увеличивать ее высоту (почти в 2 раза при стандартно диаметре шариков

10 6 мм) .

Наиболее близким к изобретению по технической сущности и достигаемьил результатам  вл етс  система последовательно соединенных друг с другом

15 колонок дл  жидкостной хроматографии, включающих цилиндрический корпус с коммуникаци ми подвода элюента и отвода элюата соединительными элементами 3 .

20 Однако применение такой системы усложн ет процесс подготовки к анализу и, кроме того, ведет к увеличению мертвых зон на стыках колонок, что ухудшает качество хроматографи25 ческого разделени .

Целью изобретени   вл етс  упрощение конструкции колонки.

Поставленна  цель достигаетс  тем, что в колонке дл  жидкостной

30 хроматографии, йключакщей цилиндрический корпус с коммуникаци ми подвода элюента и отвода элюата и соединительными элементами, в корпусе выполнены углублени , образующие внутри корпуса конические выступы с высотой, равной радиусу колонки.

Выступы расположены перпендикул рно продольной оси колонки и равномерно по всему корпусу или  русами , равноотсто щими друг от друга , причем выступы распределены во круг продольной оси колонки так, что через одинаковые интервалы высоты колонки, составл ющие 2-10 радиусов колонки, достигаетс  полное перекрытие внутреннего просвета колонки .

Выступы распределены вокруг продольной оси колонки так, что через определенные отрезки высоты колонки достигаетс  полное перекрытие внутреннего просвета колонки, при этом сумма площадей горизонтального сечени  выступов, приход щихс  на данную единицу объема колонки, равна или превышает площадь поперечного сечени  колонки. Таким образом колонка как бы делитс  на р д одинаковых секций. Высота секции зависит от природы используемого сорбента и составл ет 2-10 радиусов колонки. Чем м гче гель, тем меньше должна быть высота секции. Предельные же величины этого параметра определ ютс , с одной стороны, высотой всей колонки при заданном полезном ее объеме, а с другой стороны, ее эффективностью (при более частом расположении секций возрастает занимаемый выступами объем, а при более редком увеличиваетс  сжатие сорбента под дейгствием давлени .

На фиг. 1 изображена колонка, общий вид; на фиг. 2 - разрез А-А на фиг. 1(горизонтальный разрез); на фиг. 3 - разрез Б-Б на фиг. 1.

В стенке колонки 1 выполнены углублени  2, образующие внутри колонки конические выступы, доход щие до центра с углом при вершине близким к 45°. Выступы перпендикул рны продольной оси колонки и размещены  русами по 4 выступа в каждом. Соседние выступы одного и того же  руса расположены под углом 90 друг относительно друга (фиг.2).

Выступы соседнего  руса (фиг.З) сдвинуты вокруг продольной оси колонки на 45°. Выступы двух соседних  русов полностью закрывают внутренний просвет колонки. Колонка снабжена переходником 3, соединенным с входной трубкой 4, идущей от резервуара с буфером, который расположен выше нижнего конца выходной трубки 5. Зауженный нижний конец колонки снабжен опорой дл  сорбента в виде фильтра из пористого стекла б.

Устройство работает следующим образом.

Колонку известными приемами равномерно заполн ют сорбентом. Анализируемую смесь веществ, растворенную

в небольшом объеме буфера, нанос т на поверхность сорбента, после чего колонку соедин ют с резервуаром, содержащим подвижную фазу. В процессе хроматографии анализируемые

вещества элюируютс  согласно своим физико-химическим свойствам и через выходную трубку подаютс  на детектор.

При соблюдении основного требовани  - постепенного перекрыти  выступами внутреннего просвета колонки через определенные интервалы высоты - предлагаема  конструкци  допускает изменение формы выступов,

Q например, в виде плоского сектора или в виде пирамиды.

Наличие выступов внутри колонки, вызыва  увеличение высоты колонки лишь на 10-15%, приводит к значительному увеличению скорости элюции, особенно в случае применени  м гких . гелей, по сравнению с известной секционной колонкой с пр мьми стенками того же диаметра и заполненной тем же количеством сорбента. Так, приведенна  опытна  проверка показала/

что при использовании в качестве сорбента сефадекса Г/200 (Pharmacia, Швеци ) Б разработанной колонке скорость элюировани  возрастала в 3 раза,

5 при использовании биогел  А-15 м

(Bio-Rad, США) - в 12 раз, а в случае применени  еще более м гких сорбентов биогель А-150 м (Bio-Rad и биогель P-300/Ferak, Берлин) - более,

0 чем в 16 раз.

В предлагаемой конструкции колонки в св зи с тиеныпением сжати  сорбента фильтрационные свойства сорбента сохран ютс  в течение большого

5 числа циклов хроматографии, тогда как при использовании известной колоюки с пр мыми стенками . дл  врсстановлени  скорости фильтрации приходитс  перенабивать колонку сорбентом через

каждые 5-7 хроматографических циклов. Так, за врем  испытаний предлагаема  колонка вьщержала более 50 циклов хроматографии без замены сорбента .

Claims (1)

1. Колонка дл  жидкостной хроматографии , включающа  цилиндрический

корпус с коммуникаци ми подвода элюента и отвода элюата и соединительными элементами, отличающа с  тем, что, с целью упрощени  конструкции колонки, в корпусе выполнены углублени , образующие внут