SU897245A1

SU897245A1 - Супрессор синтеза иммуноглобулинов

Info

Publication number: SU897245A1
Application number: SU792808827A
Authority: SU
Inventors: Ефим Владимирович Бененсон; Валерий Григорьевич Панов; Викторас Владович Василенкайтис
Original assignee: Семипалатинский Государственный Медицинский Институт
Priority date: 1979-08-01
Filing date: 1979-08-01
Publication date: 1982-01-15

Description

(54) СЗШРЕССОР СИНТЕЗА ИММУНСУЛОБУЛИНСв

Изобретение относитс к медицине, а именно иммунологии и может быть использовано дл подавлени трансплантационных реакций и лечени аутоиммунных заболеваний. Известно применение поливинилпирролидона в качестве противовоспалительного средства f13. Цель изобретени - расширение ассортимента сугфессоров синтеза иммуноглобулинов .1 Поставленна цель достигаетс применением поливинилпирролидона в качает ве супрессора синтеза иммуноглобулинов. Супресси синтеза иммуноглобулинов иммунокомпетентными клетками (наприме лимфоцитами) поливинилпирролидоном включает следующие этапы. Получение лимфоцитов периферической крови болЕэных , культивирование лимфоцитов, определение иммуноглобулинов в культуральной жидкости методом диск-электрофоае ра, регистрацию полученных данных на. спектрофотометре, обработку полученных спектрофотограмм с целью коли- чёственного определени иммуноглобулиновых функций. Методом, осаждени венозной гепарин (13(фованной крови получают лейкоциты периферической крови больных. ,Вьщеление. лимфоцитов производ т в градиенте плотности верографина. Затем в чистый пеннциллйновый флакон помещают 2-1О имфо .цитов в 2,0 мл среды 199 с 0,5 мл попиЪинилпирролидона . Экспозицию продолжа-. т в течение 60 мин при . Затем культуральную жидкость сливают, лимфо.циты заливакгг 2,0 мл среды 199 и инкубируют в течение 5-7 сут в термоста те при 37 С. Во втором флаконе инкубируют лимфоциты не обработаннью поливинилпирролидоном . Культуральную жидкость в количестве О,2 мл подвергают диск-электрофорезу в полиакриламидном геле (система гел N I рН раздел ющего гел 8, 6, рН концентрирующего гел 7,3, рН электродного триглицинового буфера 8, 5, электрофорей в рез дел ющем rgne при 5 милиамперах на гель I ч, окрашивание амидовым черным). Количественное определение полученных фракций иммуноглобулинов производ т на спектрофотометре, снабженном микрометрической Приставкой и подставкой дл гел . При перемещении столбика гел с наход щимис в нем фракци ми иммуноглобулинов относительно источника света и фотоэлемента по показани м спектрофотомера на миллиметровой бумаг стро т спектрофотограмму. По оси абсцисс откладывают длину соответствующей фракции , определ емую по шкале микрометриче кой щ)иставки. По оси ординат откладывают соответствующее фракции количество единиц поглощени . Окончательный результат определ ют площадью, под кривой на спектрофотограм ме и выражают в единицах поглощени . Площадь под кривой определ ют по фор5сК-С- а 5 - площадь под кривой; К - 1,064; С - ордината максимума кривой а - длина отрезка, соедин ющего две точки кривой, проход щего .параллельно оси обцисс на уровне с/2. По калибровочной кривой, построенной по рнтрольным иммуноглобулинам с известной концентрацией, единицы поглощен перевод т в мг%. Пример 1. Выдел ют культуру лимфоцитов из венозной крови больного Диагноз - ревматовдный трит. Инкубацию провод т вдвух пениииллиновых флаконах по 210 клеток в 2,0 мл сре ды 199 в течение 5-7 сут при 37°С. В одном флаисоне лимфоциты инкубируют

Обследуемый контиJ нгент

ogM

11 1,3 ± 0,016 9 3,5 +

11 - 0,24

11 1,2 + 0.2

О,ОО1 0,ОО1

0,О1 О,О5 после взаимодействи с 15% водным расвором поливинилпирролидона с молекул рным весом 10000 в течение 60 мин, в другом флаконе лимфоциты, не подвергавшиес взаимодействию с поливинилпирролвдоном . Культуральную жидкость 5 суточной культуры лимфоцитов в количестве 0,2 мл подвергают диск-электрофорезу в полиакриламидном геле с последующей спектрофотометрией иммуноглобулиновых фракций. В культуральной жидкости лимфоцитов, не подвергавшихс взаимодействию с поливинилпирролидоном содержитс 1,3 мг% иммуноглобулинов М и 2,6 мг% иммуноглобулинов J . в культуральной жидкости лимфоцитов , подвергнувшихс взаимодействию с поливинилпирролидоном содержитс 0,43 мг% иммуноглобулинов М к О,О21 мг% иммуноглобулинов J . Были проведены исследовани у 2О больных достоверным ревматоидным артритом , 11 больных ревматизмом, 8 больных системной красной волчанкой, 9 больных неревматическими заболевани ми (хронический гастрит, звенна болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки, гипертоническа болезнь, шиемическа болезнь сердца и др.) и 12 здоровых доноров . Во всех случа х наблюдаетс эффект супрессии синтеза иммуноглобулинов поливинилпирролвдоном . Данные исследований по супрессии синтеза иммуноглобулинов поливиннлпирролидоном при различных заболевани$1х сведены в таблицу, (уровень иммуноглобулинов 1 J М , :Jc J мг%, в культуральной жидкости лимфоцитов, не обработанных поливинилпйрролндоном А н обработанных поливинилпирролидоном Б). 1,75 t19,4 t 0,55 t Больные 8 системной 0,41,70,08 красной волчанкой Больные 90,3 ±l,46t неревма-0,0220,15 тическими заболевани ми 0,27 ± . 1,15 Здоровые 12 0,О380,18 доноры

Claims

Больные хроническими гастритами звеннойболезнью 12-ти перстной ,кишки, гипертонической болезнью, хроническим бронхитом, ишемической болезнью сердца и др. Как. видно из таблицы, при всех заболевани х и у здоровых поливинилпирроли- ДОН обладает достоверным супрессорным действием на клетки, синтезирующие им- мунноглобулины. Применение поливинилпирролидона обеспечивает значительное уменьшение возникновени у больных нежелательных побочных действий 1фи лечении аутоиммунных заболеваний и подавлении трансплантационных реакций. Это позвол ет по лучать высокий лечебный эффект, гфивоПроаолжение таблваы 0,024 i 0,01 0,001 0,018 0,14 ±,6.032 t i O,OO1 O,030,01 0,08 ± 0,О15 t 0,ОО1 О,О01 О,0180,011 дат к сокращению сроков лечени больных . Формула изобретени Применение полившшлпирролидова в качестве супрессора синтеза иммуноглобулинов . Источники информации, прин ты во внимание при экспертизе 1. Рабинович И. М. Применение поли- меров в медицине, Л., Медицина, 1972.