SU877437A1 - Способ количественного определени липопротеидов в биологических жидкост х - Google Patents
Способ количественного определени липопротеидов в биологических жидкост х Download PDFInfo
- Publication number
- SU877437A1 SU877437A1 SU802882576A SU2882576A SU877437A1 SU 877437 A1 SU877437 A1 SU 877437A1 SU 802882576 A SU802882576 A SU 802882576A SU 2882576 A SU2882576 A SU 2882576A SU 877437 A1 SU877437 A1 SU 877437A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- solution
- lipoproteins
- anilinonaphthalene
- sulfonate
- lipoprotein
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к способам количественного определения липопротеидов в биологических жидкостях с диагностической целью.
Известен способ, количественного определения липопротеидов в биологических жидкостях путем выделения липопротеидов с последующей обработкой их химическими реактивами [1].
Однако известный способ сложен и трудоемок, требует сложной аппаратуры и не обеспечивает надежных результатов из-за низкой чувствительности.
Цель изобретения - повышение чувствительности способа и упрощение его.
Указанная цель достигается тем, что при осуществлении способа количественного определения липопротеидов в биологических жидкостях пу^гем выделения липопротеидов с. последующей обработкой их химическими реактивами, липопротеиды последовательно обрабатывают 0,01-0,15 молярным трис· •НС) буфером, 5-15%-ным раствором хлористого натрия и 0 ,1-0.5.%· раствора ЭДТА, в полученный раствор вводят 10-100 мкм 1-анилинонафталин-8~сульфоната, проводят флуориметрирование раствора при возбуждений флоуресценции от 340 до 420 нм при длине волны испускания 460-530 нм и определяют концентрацию липопротеида по формуле г _ А · Д е В ’ Р ' где С - количество липопротеида, мг/1 мм раствора;
Д - содержание фосфолипидов в конкретном классе липопротеида ;
А - интенсивность флуоресценции
1-анилинонафталин-8-сульфоната в растворе липопротеида;
В - интенсивность флуоресценции 1-анилинонафталии-8-сульфоната в 35%-ном растворе этанола;
Р - коэффициент зависимости интенсивности флуоресценции раствора 1-анилинонафталин-
8-сульфоната от концентрации фосфолипидов. ,
Пример 1. У донора В, 37' лет, через 12 ч после приема пищи берут кровь для анализа. Из полученной после осаждения клеточных элементов плазмы методом последовательного :ультрацентрифугирования вьщеляют липопротеиды высокой и низкой плотности. По предлагаемому методу определяют концентрацию липопротеидов. Для этого выделенные липопротеиды растворяют в 0,01 молярном трис. НС1, добавляют 5% хлористого натрия, 0,1% этилендиаминтетраацетата и раствор 1-анилинонафталин-8- cj/льфоната до конечной концентрации 50 мкМ. Измеряют флуоресценцию полученного раствора при 480 нм и возбуждении при 365 нм. Полученное значение интенсивности флуоресценции делят на интенсивность флуоресценции 1-анилинбнафталин-8-сульфоната в 35%-ном этаноле, умножают на процентное содержание фосфолипидов в данном классе липопротеида и делят на коэффициент Р. Время анализа 5 мин, объем плазмы для определения концентрации липопротеидов 7 мкл. Концентрация липопротеидов высокой плотности и низкой плотности у донора В. равны 225 м 2% и 250 мг% соответственно.
Приме р2. У пациента К., 48 лет, который страдал атеросклерозом коронарных артерий, что клинически проявлялось в приступах стенокардии, специфических изменениях ЭКГ, брали кровь из кубительной вены. Выделенные ^последовательным ультрацентрифугированием липопротеиды высокой и низкой плотности растворами в 0,15 молярном трис HCI, добавляют 15% хлористого натрия и 0,5% этилендиамининтетраацетата. В полученный раствор вводят 1.0 мк’М 1-анилинонафталин-8-сульФоната и проводят флуорометрирование раствора при 400 км (при возбуждении 340 нм). Концентрацию липопротеидов определяют также как В примере .1. Объем используемой плазмы 5 мкл, время анализа 5 мин. Кон.центрация липопротеидов высокой плотности и низкой плотности у пациента К,· равны 180 мг% и 350 мг % соответственно.
Пример 3. У кролика-самца породы Шиншилла весом 2,5 кг вызывали экспериментальный атеросклероз скармливанием холестерина из расчета 0,2 г/1 кг веса животного. Через 4 мес кормления кролика забивают, из крови выделяют липопротеиды высокой и низкой плотности последовательным ультрацентрифугированием. Липопротеиды растворяют в 0,01 молярном трис. НС1, добавляют 5% хлористого натрия, 0,1% этилендиаминтетраацетата и раствор 1-анилинонафталин-8“сульфоната до конечной концентрации 100 мкМ. Далее проводят флуорометрирование полученного раствора при 530 нм и возбуждении при 420 нм. Осуществляют расчет концентрации липопротеидов аналогично примеру 1. Время анализа : 5 мин, объем плазмы 6 мкл. Содержание липопротеидов низкой и высокой плотности у кролика с алиментарной гиперхолестеринемией равно 735 мг % и 123 мг % соответственно. Предлагаемый способ обладает большой чувствительностью, что повышает точность и информативность полученных результатов, при этом способ '0 прост и экономичен и не требует дефицитных и дорогих химических реактивов и сложной аппаратуры.
Claims (1)
- 'Способ количественного определения липопротеидов в биологических жидкостях путем выделения липопротеи2Q дов с последующей обработкой их химическими реактивами, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности способа и упрощения его, липопротеиды последовательно обрабатывают 0,01-0,15 молярным 25 трис· НС 1 буфером·, 5-15%-ным раствором хлористого натрия и 0,1-0,5 % раствора ЭДТА, в полученный раствор вводят 10-100 мкм. 1-анилинонафталин8-сульфоната, проводят флуориметриро30 вание раствора при возбуждении флуо-3 ресценции от 340 до 420 нм при длине волны испускания 460-530 нм и определяют концентрацию липопротеида по формуле Р = А · Д В v Р. ' количество липопротеида, мг/1 мм раствора;содержание фосфолипидов в конкретном классе липопротеида;интенсивность флуоресценции 1-анилинонафталин-8-сульфоната в растворе липопротеида; интенсивность флуоресценции 1-анилинонафталин-8-сульфоната в 35%-ном растворе этанола;коэффициент зависимости интенсивности флуоресценции раствора 1-анилинонафталин8-сульфоната от концентрации фосфолипидов.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU802882576A SU877437A1 (ru) | 1980-02-28 | 1980-02-28 | Способ количественного определени липопротеидов в биологических жидкост х |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU802882576A SU877437A1 (ru) | 1980-02-28 | 1980-02-28 | Способ количественного определени липопротеидов в биологических жидкост х |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU877437A1 true SU877437A1 (ru) | 1981-10-30 |
Family
ID=20877752
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU802882576A SU877437A1 (ru) | 1980-02-28 | 1980-02-28 | Способ количественного определени липопротеидов в биологических жидкост х |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
SU (1) | SU877437A1 (ru) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2001053829A1 (en) * | 2000-01-18 | 2001-07-26 | Council For The Central Laboratory Of The Research Councils | Lipoprotein assay |
WO2007144601A2 (en) * | 2006-06-15 | 2007-12-21 | L3 Technology Limited | Lipoprotein assay |
-
1980
- 1980-02-28 SU SU802882576A patent/SU877437A1/ru active
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2001053829A1 (en) * | 2000-01-18 | 2001-07-26 | Council For The Central Laboratory Of The Research Councils | Lipoprotein assay |
US7211441B2 (en) | 2000-01-18 | 2007-05-01 | Council For The Central Laboratory Of The Research Councils | Lipoprotein assay |
WO2007144601A2 (en) * | 2006-06-15 | 2007-12-21 | L3 Technology Limited | Lipoprotein assay |
WO2007144601A3 (en) * | 2006-06-15 | 2008-02-21 | Stfc Science & Technology | Lipoprotein assay |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Gill et al. | The mechanism of action of cholera toxin in pigeon erythrocyte lysates | |
Stone et al. | Radioimmunoassay of myoglobin in human serum. Results in patients with acute myocardial infarction. | |
Lopes-Virella et al. | Serum high density lipoprotein in diabetic patients | |
Mikes et al. | Elicitins, proteinaceous elicitors of plant defense, are a new class of sterol carrier proteins | |
Dale et al. | Poisoning by DDT: relation between clinical signs and concentration in rat brain | |
Shapiro et al. | Variation among commercial activated partial thromboplastin time reagents in response to heparin | |
Zheng et al. | Highly sensitive fluorescence detection of heparin based on aggregation-induced emission of a tetraphenylethene derivative | |
Siraganian et al. | Basophil activation by concanavalin A: characteristics of the reaction | |
US5770355A (en) | Heart disease test kit and method of determining a heart disease risk factor and efficacy of a treatment for heart disease | |
Willerson et al. | Radioimmunoassay of creatine kinase-B isoenzyme in human sera: results in patients with acute myocardial infarction. | |
EP0533764A1 (en) | ANTIOXIDANT TEST. | |
Johnstone | Rejoining of DNA strand breaks is an early nuclear event during the stimulation of quiescent lymphocytes | |
Sandholm et al. | D-dimer improves the prognostic value of combined clinical and laboratory data in equine gastrointestinal colic | |
Burnett et al. | The enzymatic assay of plasma digitoxin levels | |
SU877437A1 (ru) | Способ количественного определени липопротеидов в биологических жидкост х | |
DE1057022T1 (de) | Assay für spezifische stämme von mit mehreren krankheiten zusammenhängenden proteinkonformationen | |
Benson et al. | Optimal discrimination of mild hyperparathyroidism with total serum calcium, ionized calcium and parathyroid hormone measurements | |
DE69216583T2 (de) | Bestimmungsverfahren fur protein s | |
US5618683A (en) | Diagnostic kit for cholesteryl ester transfer protein (CETP) activity measurement and a new synthetic particle used therein | |
WO1994006014A1 (en) | Diagnostic aid for early detection of cancer and diabetes | |
US7642065B2 (en) | Ex vivo method for determination of CETP activity and efficacy of heart disease treatment | |
US4609630A (en) | Method for improving the specificity of immunoassays | |
Dahlberg et al. | The ribosome-binding sites in turnip yellow mosaic virus RNA. | |
Pickering et al. | Modifications of the Michel Δ pH method for the estimation of plasma, erythrocyte and brain cholinesterase activities of various species of laboratory animals | |
JP2003520963A (ja) | リポタンパク質のアッセイ方法 |