Изобретение относитс к микробиологии , а точнее к исследовани м развити микроорганизмов, клеток культуры тканей и других биологических микрообъектов. Дл прижизненного изучени роста и развити микроорганизмов под контролем микроскопа используютс микрокамеры и микрокультиваторы. Известны микрокамеры, содержащие предметное стекло, пластинку агара и покровное стекло 1. Выращивание бактерий в них производ т на границе раздела сред агар-жидка питательна среда. Известен также нагревательный сто лик-термс1стат к микроскопу, содержаний чашеобразный нагревательный столик и крышку с отверстием дл объектива . Вместе они образуют камеру, внутри которой размещены, нагреватель ный элемент , терморегул тор и предметное стекло с микрокамерой дл жид кой культуры. На дне столика вмонти ровано выдвижное устройство-салазки В него вставл ют препарат (предметн стекло с микрокамерой), после чего салазки с препаратом вдвигают внутр камеры 2 . Недостатком микрокамер вл етс то, что они ЦП могут быть использрв ны дл исследовани процесса формировани многослойных колоний микроорганизмов , клеток культуры тканей и других биологических микрообъектов. Цель изобретени - расширение области применени и повышение надежности прибора, способного обеспечить длительное нормальное развитие колоний микроорганизмов, клеток культуры тканей, прижизненное наблюдение за их ростом и фоторегистрацию наблюдаемых процессов. Указанна цель достигаетс тем, что в микрокультиваторе, содержащем полную камеру с крышкой, предметное стекло и нагревательный элемент, св занный с терморегул тором, на крышке полой камеры вдоль ее оси установлена втулка дл оптической части микроскопа , на внешней поверхности которой размещен нагреватель. При этом масса полой камеры превышает массу крышки в 2-4 раза, что позвол ет использовать полость культиватора в качестве рабочей камеры выращивани , исключа применение дополнительных микрокамер, а также созЛТГьThe invention relates to microbiology, and more specifically to research on the development of microorganisms, tissue culture cells and other biological microobjects. Microcameras and microcultivators are used for the in vivo study of the growth and development of microorganisms under the control of a microscope. Microcameras are known that contain a glass slide, an agar plate and a cover glass 1. The bacteria are grown in them at the interface between agar-liquid nutrient medium. Also known is a heating station for a microscope to a microscope, the contents of a bowl-shaped heating table and a lid with an opening for the lens. Together they form a chamber, inside of which are placed, a heating element, a thermostat and a slide with a microcamera for a liquid culture. A sliding device-slide is mounted on the bottom of the table. A preparation (glass slide with a microcamera) is inserted into it, after which the slide with the preparation is inserted into the inner chamber 2. The disadvantage of microcameras is that they can be used to study the process of forming multi-layered colonies of microorganisms, tissue culture cells and other biological microobjects. The purpose of the invention is to expand the field of application and improve the reliability of the device, capable of ensuring the long-term normal development of colonies of microorganisms, tissue culture cells, in vivo observation of their growth and photo registration of the observed processes. This goal is achieved by the fact that in a micro-cultivator containing a full chamber with a lid, a glass slide and a heating element associated with a thermostat, a sleeve for the optical part of the microscope is installed on the lid of the hollow chamber along its axis, on the outer surface of which is a heater. At the same time, the mass of the hollow chamber exceeds the mass of the lid by 2-4 times, which allows the cultivator cavity to be used as a working chamber for growing, excluding the use of additional microcameras, as well as
оптимальный микроклимат дл роста культур. Толщина питательного агара может быть увеличена во много раз. При этом изображение объекта остаетс хорошим. Надежна герметичность культиватора устран ет потерю влаги и обеспечивает стерильность, благодар чему продолжительность выращивани культур в нем практически не ограничена во времени. С целью равномерного прогревани камеры, уменьшени перепадов температуры масса чашки камеры превышает массу крышки в 2-4 раза.optimal microclimate for crop growth. The thickness of the nutrient agar can be increased many times. At the same time, the image of the object remains good. The reliable tightness of the cultivator eliminates moisture loss and ensures sterility, due to which the duration of crop cultivation in it is practically unlimited in time. For the purpose of uniform heating of the chamber, to reduce temperature drops, the mass of the chamber cup exceeds the mass of the lid by 2-4 times.
На чертеже приведена схема микрокультиватора , общий вид.The drawing shows a diagram of a microcultivator, a general view.
Микрокультиватор содержит полую камеру 1, расположенную в чашке 2, в отверстии дна которой установлено предметное стекло 3, на которое помещаетс агаризованна среда 4. Крьичка 5 полой камеры 1 имеет втулку 6 дл объектива 7 микроскопа. На внешней поверхности втулки б монтируетс нагреватель 8. На поверхности крышки камеры имеетс втулка 9 дл контактного термометра (10). Контактный термометр и нагреватель подключены к терморегул тору 11. В вьфез боковой стенки камеры вмонтирован контрольный термометр 12. Дл смены газовой среды в камере, в ее боковой стенке, выполнены соосные отверсти 13 с запорными винтами 14. При выращивании клеток культуры тканей вместо предметного стекла камеры используетс плоска кювета 15. Чашка и крышка микрокультиватора выполнены из металла .The microcultivator contains a hollow chamber 1 located in the cup 2, in the bottom hole of which a glass slide 3 is mounted, on which the agar medium 4 is placed. The pin 5 of the hollow chamber 1 has a sleeve 6 for the microscope objective 7. A heater 8 is mounted on the outer surface of the sleeve B. On the surface of the chamber lid there is a sleeve 9 for a contact thermometer (10). A contact thermometer and a heater are connected to a thermostat 11. A control thermometer 12 is mounted in the side of the chamber. A coaxial hole 13 with shut-off screws 14 is made in the chamber to change the gaseous medium in the chamber, in its side wall a flat cuvette 15 is used. The microcultivator cup and lid are made of metal.
Микрокультиватор действует следующим образом.Microcultivator operates as follows.
На предметное стекло 3 полой камеры 1 наноситс остывша до 50-60°С агаризованна среда (толщиной 1-2 мм После застывани агара его поверхность засеваетс культурой микроорганизмов . Дл лучшей герметизации все соприкасающиес поверхности механических деталей и оправу объектива смазывают тонким слоем стерильного вазелинового масла. Чашку 2 закрывают крышкой 5 со вставленным во втулку 6 объективом микроскопа. Включаетс нагревательный элемент 8. Температура в рабочей камере доводитс до оптимальной (по контрольному термометру), после чего термостатирование устанавливаетс на автоматический режим. Состав газа в камере регулируетс с помощью соосных отверстий и запорных винтов.The glass of the hollow chamber 1 is applied to the cooled to 50-60 ° C agar medium (1-2 mm thick. After the agar solidifies, its surface is seeded with a microorganism culture. For a better sealing, all the contacting surfaces of the mechanical parts and the lens mount are smeared with a thin layer of sterile vaseline oil. The cup 2 is closed with the lid 5 with the microscope lens inserted into the sleeve 6. The heating element 8 is turned on. The temperature in the working chamber is brought to the optimum (by the control thermometer), after temperature control is set to the automatic mode. The gas composition in the chamber is controlled by coaxial bores and locking screws.
Предлагаемый микрокультиватор может быть использован в фундаментальных исследовани х в области микробиологии при регистрации медленно протекающих процессов, таких как: размножение одноклеточных организмов, деление клетки иее органелл, формирование колоний микроорганизмов, а также в црикладных исследовани х.The proposed micro-cultivator can be used in basic research in the field of microbiology when registering slow processes such as: reproduction of unicellular organisms, cell division and its organelles, formation of colonies of microorganisms, as well as in chemical studies.