SU775692A1

SU775692A1 - Способ определени белковой ценности м са

Info

Publication number: SU775692A1
Application number: SU782681430A
Authority: SU
Inventors: Николай Григорьевич Григорьев; Альберт Иванович Сычев; Леонид Васильевич Орлов; Анзури Борисович Гобечия
Original assignee: Всесоюзный Научно-Исследовательский Институт Физиологии,Биохимии И Питания Сельскохозяйственных Животных
Priority date: 1978-10-26
Filing date: 1978-10-26
Publication date: 1980-10-30

Description

(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ БЕЛКОВОЙ ЦЕННОСТИ

1

Изобретение относитс к технике определени химическими методами белковой ценности м са, примен емой в лабораторной и производственной практике .5

Известен способ определени белковой ценности м са, предусматривающий определение в гомогенатах оксипролина, вл ющегос показателем содержани неполноценных белков, и содержани Ю общих белков 1 .

Однако этот способ не позвол ет с достаточной точностью определ ть белковую ценность м са и проводить сопоставление белковой ценности м са 15 животных разных пород и возрастов в зависимости от условий их содержани и кормлени ,так как он не учитывает различные формы коллагена.

Целью изобретени вл етс повыше-20 ние точности определени .

Поставленна цель достигаетс тем, что параллельно с определением содержани неполноценных и общих белков гомогенат обрабатывают 19-20%-ной 25 мочевиной, затем его экстрагируют 0,14-0,15 М раствором хлорида натри в течение 46-48 ч при температуре -5°С дл определени содержани нейтральнорастворимого коллагена, 30 МЯСА

остаток ткани подвергают экстракции 0,1-0,11 М цитратным буфером в течение 46-48 ч при температуре 4-5° С дл определени содержани цитратрастворимого коллагена, после чего провод т автоклавирсзвание остатка в дистиллированной воде при 2,42 ,6 атм в течение 5-6 ч дл определени содержани нерастворимого коллагена , а о белковой ценности м са суд т по соотношени м содержани полноценных белков и суммы нейтральнорастворимого и цитратрастворимого коллагена к нерастворимому коллагену.

Способ по сн етс конкретным примером его осуществлени .

Образцы №1шц дважды пропускают через охлажденную м сорубку. В измельченной ткани определ ют содержание белкового азота по Кьельдалю, общий белок вычисл ют, умножа показатели белкового азота на 6,25.

Дл определени содержани общего коллагена предварительно провод т гидролиз мышц (20 мг сухой обезжиренной мышцы или 100 мг сырой ткани на 2мл смеси кислот) в смеси 12 н сол ной и 85%-ной муравьиной кислот в объемном соотношении 3:1 в стекл нных мерных пробирках со шлифом.

закрытых стекл нными пробками, в течение 8 ч в кип щей вод ной бане,. Гидролизаты нейтрализуют 2 М раствором углекислого натри и доводзтт до. 10 мл дистиллированной водой. В нейтрализованных гидролизатах определ ют содержание оксипролина. К 0,5 мл анализируемого раствора рН 6,0, содержсцдего от 2 до 20 мкгЛлл оксипролина и в контрольные про 5ирки с 0,5 мл дистилированной воды добавл ют 1 МП изопропилового спирта см ешивают и вливают 0,5 ш окислительной смеси, состо щей из 7%-ного раствора хлорг мина и ацетатноцитратного буфера рН 6,0 в отношении ,тщательно взбалтывают и оставл ют на 4 мин при комнатной температуре . Добавл ют 6,5 мл раствора Эрлиха (2-г h -диметиламинобензальцегида раствор ют.в 3 мл 57%-ной хлорной кислоты и в день проведени цветной реакции в этот раствор добавл ют 13 мл изопропанола), закрывают пробками, смешивают содержимое и нагревают в вод ной бане в тече- ние 25 мин при . Затем пробирки перенос т в холодную воду на 2 3 мин, после чего фильтруют. Спектрофотометрируют при 558 нм против контрол . Содержание общего коллагенс вычисл ют , умножа концентрацию оксипрлина на -7,14. Устанавливают содержание полноценных белков по разности между концентрацией общих белков и коллагена.

Дл определени содержани фрс1кционного состава предварительно удал ют неколлагеновые белки, обрабатыва измельченные мышцы 20%-ной мочевиной, .1000 мг ткани в течение часа встр хивают с 50 мл раствора моч:евины, после чего пробу центрифугируют и промывают водой. ,3атем пробы мышц экстрагируют дес тикратным по весу О,.5 М раствором хлорида натри в течение 48 ч при 5°С дл выделени нейтральнорастворичого коллагена. Фильтрацию провод т через льн ную ткань.

Дл выделени цитратрастворимого коллагена остаток экстрагируют дес тикратным по весу 0,1 М цитратным буфером рН 3,5 в течение 48 ч при 5°С. Экстракты фильтруют через льн ную ткань.

Выделение нерастворимого коллагена провод т автоклавированием остатка в дистиллированной воде при 2,5атм в течение 5 ч. Растворы желатина (продукт, полученный при автоклавировании нерастворимого коллагена в дистилированной воде) довод т дистиллированной водой до определенного объема.

В экстрактах нейтральнорастворимого , цитратрастворимого коллагена и в растворе желатина после выпаривани и 24-х часового гидролиза 5,7н Сол ной кислотой при температуре также как и в общем гидролизате мышечной ткани определ ют содержание оксипролина и вычисл ют концентрации коллагена в исследованных фракци х.

Белковую ценность м са определ ют по отношени м содержани полноценных белков к нерастворимому коллагену и

суммы растворимых фракций коллагена

к не.растворимому коллагену.

Исследовани белковой ценности м са провод т на петушках породы корниш плимутрок, которые раздел ют по принципу аналогов на 2 группы по 100 голов. Рационы должны быть полностью сбалансированы по всем питательным веществам в соответствии с нормами за исключением уровн энергии. Рацион цыпл т первой группы содержит

0 12,18 МДж/кг обменной энергии и 23% протеина в первом (ло 30 дней) и 20% во втором (30-56 дней) периодах выращивани . Дл цыпл т II-группы количество обменной энергии довод т

5 кормовым жиром до 14,65 МДж/кг

за счет снижени уровн балластного вещества. Образцы грудных мышц берут у 5 цыпл т каждой группы и провод т анализ описанным способом.

Данные, полученные в эксперименте,

представлены в таблице. Анализ данных показывает, что при уровне обменной энергии 14,65 М.аж/кг корма биологическа ценность м са цыпл т выше, чем

при 12,18 МДж/кг. Отношение полноценных белков к нерастворимому коллагену соответственно 96,3 и 68,8, отношение растворимого коллагена к нерастворимому коллагену 1,09 и 1,03.

0 Полноценным следует считать м со животных, имеющих показатель дл средней пробы не ниже 70:1, в отдельных мышг;ах показатели могут быть ниже. Примечание:

Дл сравнени в тех же гомогенатах определ ют белковую ценность м са по известному способу. Белкова ценность м са цыпл т I группы равна 12,39, цыпл т И-группы - 14,92, т.е. коэффициент отношени тирозина к оксипролину в грудной мышце цыпл т 11 группы на 20% превышает тот же коэффициент цыпл т I группы, а различи между отношением полноценных белков к нерастворимому коллагену во и и I группах составл ет 39,97%. Следовательно, учет различных форм коллагена позвол ет повысить точность оценки качества м са в два раза.

Claims

1. Авторское свидетельство СССР № 544916, кл. G 01 N 33/12, 1975 (прототип).

45 содержание приведенных в таблице белков дано р г/100 г натуральной ткани.