SU745907A1 - 4,6-3-Капронилгидразон-прегнадиен17 -ол-20-он-ацетат, обладающий гестагенным действием - Google Patents

Description

(54) Д -3-КАПРОНИЛГИДРАЗОН-ПРЕП1АДИЕН-17а-ОЛ-20-ОН-АЦЕТАТ , ОБЛАДАЮЩИЙ ГЕСТАГЕМНЫМ ДЕЙСТВИЕМ который раствор ют в ацетоИе и высаживают в гексан. Получают 2 г целевого .продукта с т. пл. J26-128°C., - Най ено,%: С 71,9; Н 8,85; N 5,93; C29H42N204 Вычислено,%: С 72,2; Н 8,71; N 5,81 ЙК-спектры: 3170 (NH), 1730 (), 1670 (, 1600 (). Изучение специфической активности синтезированного вещества провод т на 60 инфантильных кроликах самках весом 0,8-1,0 кг по методу C.Ctauberg и модификации K.Jun- , основанной на структурных изменени х слизистой оболочки матки под вли нием тгрогестерона. Животные подвергаютс  предварительному (в течение недели) эстрогенному- воздействию путем ежедневного подкожного введени  фолл кулина в дозе 10 ME в 0,2 мл косточкового масла. Fla восьмой день от начала опыта кроликам однократно внутримышечно ввод т испытуемое вещество в дозах, эквивалентных 0,2-0,6-0,8 и 1,0 кг прогестерона, с последующими ежедневными инъекци ми поддерживающих дозу фолликулина (1 ME) вплоть до забо . - Испытани  заканчивают спуст  3,7 10 и 14 дней после введенит вещества умерщвлением крольчих путем внутривенного введени  возду в краевую вену уха. Тело и рога матки тщатоЛьно отсепаровывают от соединительной тка Специфическа  ацетата спуст  активность -капронилгидразон-прегнадиен- 17о:-ол-20-он 3 дн  после однократного внутримышечного введени  в дозах, эквивалентных прогестерону. 4 и жира, взвешивают, фиксируют в 10%-ном растворе формалина и подвергают гистологичес-, кой обработке. Матки заливают в целлоидинпарафин с последующим получением серийных срезов толщиной 5 мкм, которые окрашивают , гематоксилин-эозином. Полученные гистологически (г препараты изучают с помогцью микроскопа МБИ-1. Оценку гестагенной активности провод т по четырехбальной шкале; Чиста  эстрогенна  пролифераци  + Явна  /естагенна  активность ++ Сильна  гестагенна  активность +-ИОчень сильна  гестагенна  активность ....-+-нКаждук дозу испытуемого вещества изучают не менее чем на 3-5 животных. В качестве контрол  используют кроликов того же веса, находившихс  в одинаковых услови х с подопытными , но подвергавшимс  лишь эстрогенной подготовке фолликулином. Действие изучаемого вещества сравнивают с прогестероном, международна  единица действи  которого составл ет 1 мг. Дл  этого в равноценных услови х провод т серию опытов на 33 кроликах, примен   различные доЗы прогестерона (от 0,1 до 1,0 мг) и провод  наблюдени  после однократного воздействи  в разные сроки (3,7, 10 и 14 дней). Результаты изучени  специфического действи  А -З-капронилгидразон-прегнадиен-Па -оЛ20-он ацетата представлены в табл. 1. Таблица 1

853,31133,31516,6 1381,3 +88,6 81,2205,585,6 171,2 0,05

800,0 870,0 37,855,9

±Sx

Продолжение таблицы

618,6 732,3 99,31076 Как видно из табл. 1, спуст  3 да  после однократного впутримышешого введени  испытуемого вещества в дозе, эквивалентной 0,2 мг прогестерона, гестагеш1а  активность вы влена у двух из трех подопытных животных. Гистологическа  KapTfraa слизистой оболочки матки кроликов при этом свидетельствует о значительном ее разрастании и выраженном развитии маточных желез. Отмечаетс  также утолщение мьгщечно1о и соедикительнотканиого слоев. Вы вленные изменени  соответствуют согласно схеме Клуберга  вной гестагенной активности (++). При анализе структурных изменений в матке третьего подопытного кролик:а вьшвлена лишь эстрогенна  пролифераци , обозначаема  согласно общеприн той классификагщи (+). Подобные изменени  в структуре слизистой оболочки матки возникают у контрольных животных, подвергавптихс  воздействию одного фолликулина.. С увеличением дозы вещества до 0,6 мг специфическа  активность становитс  более выраженной и соответствует  вной гестагенной реакции (++) у двух из трех подопьттных кроликов и сильной (++-I-) у одного животного. Гистологическа  картина слизистой оболочки рогов матки свидетельствует о выражедаом ее разрастании, развитии складок слизистой со значительным увеличением количества желез. Ввиду указанных изменений поверхность маткй приобретает выраженную складчатость с выступающими в просвет ее древовидными выроста .ми, имеющими сложный извилистый контур (+++). Гистологические изменени , отмеченные в матке под вли нием испытуемого вещества Специфическа  актив однократного внутримыш

1,0

740 1,0 1,0 1,0 1,0

.3 3 3 3 650 700 880 1150 930

833

900

+++ 750

1373

+-Н-+ 750

1667

++++ 890

3202

1626

+++ в дозах 0,2 и 0,6 мг, сопровождаютс  повышением веса матки по сравнению с центральными животными в среднем на 77-89% (Р 0,05). Применение -3 -капронипгидразон-прегнадаен-17о:-рл-20-ок-ацетата в дозе, эквивал енгной 1 мг прогестерона, вызь1ваег у большей части подопытных Животных резкую пролифераплю слизистой оболочки матки, сопровождаю1цуюс  развитием большого числа глубоких складок слизистой к увеличением количества желез, что соответствует по схеме очень сильной гестагенной активности (++-Н-), У двух подопытных животных гестагенна  акгивносгь соответствует сильной гестагенной peaкции(), В(5с полового аппарата подопытных животных значительно увеличиваетс  по сравнению с контрольными кроликами (на 255,8%). Следовательно, спуст  3 дн  после однократнего внутримышечного введени  А -3-капронилгидразон-прегиаднен-17а -ол-20-он-аце1ата вы влено наличие сильного и очень сильного гестагенного действи  при воздействии дозы, равной 1 мг прогестерона, сильный и  вной гестагенной реакции - 0,6 мг и  вной спепифической реакции - 0,2 мг. Сопоставление активности испытуемого вещества с действием прогестерона (см. табл. 2), Р которого установлена международна  единица действи , равна  I мг, позвол ет заключить , что испытуемое вещество по своему специфическому действию спуст  3 дн  после внутримыщечного введени  приближаетс  к прогестерону, оказыва  анало.гичное вли ние на структуру слизистой оболочки матки. Таблица2 прогестеро 1а после о введени 

745907

10 Продолжение таблицы 2

n

813,3 920,0

X 20,547,9

±Sx

745907

12 Продолжение таблицы 2

536,6 589,0 -19,6 . 0,05 41,1 137,5 Примечание С целью вы снени  вопроса о длительности действи  испытуемого вещества провод т серию опытов, в которой животных забивают спуст  7, 10 и 14 дней после однократного внутримышечного введени  вещества в дозе, равной 1 мг. Полученные при этом результаты (см. табл. 3) свидетельствует о том, что через 7 дней пскхпе однократного применени  вещества у всех годопытных животт1х обнаруживаетс  сильна  гесгагенна  активность ,(+++), в то врем  как Длительность специфической ак -прегнадиен-17о;-ол-20-он-ацетата ного введени  в дозе, эквивал

Продолжение таблицы 2

+++

++++

+++ Достоверность результатов определ ют по отношению к контрольной группе животных, приведенной в табл. 1. под вли нием прогестерона в тех же услови х опьтга имеет место лишь  вна  гестагенна  активность (++). Вес полового аппарата подопытных животных, получавших импытуемое вещество- , сохран етс  увеличенным по сравнению с контрольными на 132,3% (Р 0,05), под вли 1шем же прогестерона вес полового аппарата не отличаетс  достоверно от веса полового аппарата контрольных животных, т. е. нормализуетс .: Таблица 3 тивности Д -3-капронилгидразон- после однократного внутримышеч- . ентной 1 мг прогестерона

15

745907

16 Продолжение таблицы 3 yBcjinietmH нромежугка времени после воздействи  испытуемого вещества до 10 даей со стороны слизистой оболочки матки отмечаетс   вна  гестагенна  реакци  (у двух кроли ков) и у одного животного - сильна . Вес по лового аппарата при этом сохран етс  увеличенным на 155,1% (Р 0,05). Под вли нием гфогестерона в те же сроки наблюдени  изменени  структуры слизистой оболочки матки соответствует лишь эстрогенной пролиферавди {+), т. е. гестагенна  реакци  отсутствует; В группе животных, забитьгх спуст  14 дне после однократного внутримьгшечного, введени вещества в указанной дозе,  вна  гестаге1ша  реакци  отмечаетс  лицгь у одного кролика ), у остальных животных специфичес1 :а  реакци  слизистой оболочки матки соответству ет МСопоставление длительности действи  испьгтуемого вещества с активностью прогестерона свидетельствует о том, гго Д| -3-капроню7гидразон-прегнадиен-17а -ол-20-он-ацетат обладает более выраженным пролонгированным эффектом. Так, если прогестерон спуст  7 дней после введени  .оказывает лишь  вную, гестагенную активность (++), испытуемое вещество в той же дозе вызывает сильное гестагенное действие (+++). Спуст  10 дней. прогестерон не оказьгеает гестагенного вли ima , в то врем  как Л -3-капронилгидразон-прегнадиен-17о:-ол-20-он-ацетат вызывает  вное гестагенное действие. Аналогичные изменени  отмечены у некоторых животных даже спуст  14 дней после воздействи  испытуемого вещества. Следовательно, длительность действи  испьгтуемого вещества составл ет в среднем Ю-14 дней, в то врем  как прогестерона - 7 дней.

Остра  токсичность Д -3-капронилгидразон-прегнадиен-17а-ол-20-он-ацетата при внутрибрюшинном введении

500

10

2500

50

3750

75

5000

100

Таблица4

33,3

50,0JUl,

Claims (3)

1. 66,6 07.}8 С целью вы снени  вопроса об эффективности Д -3-капронилгидразон-прегнадисн- h7a-ол-20-он-ацетата при различных пут х воздействи  проведены опыту на 8 кроликах с введением вещества peros в дозе 1 мг. Полученные результаты свидетельствуют о том, что соединение обладает  вной и сильной гестагенной активностью на прот жении 10 дней. Таким образом, полученные данные позвол ют считать, что предложенное зветцество обладает гестагенным действием, приближающимс  по силе своей эффективности к прогестерону , но превьщ1ающим последний по длительности эффекта. Вещество активно при парентеральном и пероральном применении. Токсичность Д -3-капронилгидразон-прегнадиен-17о;-ол-20-он-ацетата в острых опытах на 40 белых мыщах самцах массой 20-22 г при однократном внутрибрющинном введении в оливковом масле в объеме 0;5-1 мл в дозах, равных Ю, 50, 75, 100 и 200 мг на мыщь, что составл ет соответственно 500, 2500, 3750, 5000 и 100000 мг/кг веса. На прот жении двух недель после воздействи  учитываетс  выживаемость животных, а также изменени  внещнего вида, веса, двигательной и пищевой активности. Результаты изучени  токсичности в острых опытах (см. табл. 4) свидетельствуют о том, гто введение испытуемого вещества в дозе, равной 500 мг/кг веса, не вызывает гибели животных . В состо нии подопытных мьплей на прот ении всего времени наблюдени  не отмечаетс  аких-либо отклонений по сравнению с контольными животными. Повышение дозы испытуемого вещества до 2500 мг/кг веса вызывает гибель 33,3% живот иых. Последующее увеличение количества введенного вещества до 3750 и 5000 мг/кг веса способствует гибели соответственно 50 и 66,6% мышей. Применение вещества в дозе 10000 мг/к веса вызывает гибель всех подопытных животны Гибель наблюдаетс  как правило на прот жении первых 2-3 дней после введени . Летальному исходу пред1иествуют  влени  общего угнетени , которые смен ютс  адинамией, прерывистым дыханием. Наблюдение за весом выживших животнь1х не вы вл ет сушествени ых изменений у подопытных мышей по сравнению с контрольными . Все ЖИВОТНЫЕ равномерно прибавл ют в весе. На основании полученных результатов можно считать, что изученное вещество мало токсичноего ЛДзо составл ет 3631 (1815-7262) мг/кг веса. Таким образом, в результате изучени  специфического действи  и токсичности Л -3-капронилгидразон- прегнадион-17а -оп-20-он-ацетата установлено, что целевое вещество обладает геетагенным свойством, приближающимс  по силе своей эффективности к прогестерону, но превышающим последний по продолжительности действи . Вещество активно не только при паПродолжение таблицы 4. рентеральном, но и при пероральном применении , мало токсично в острых опытах на мышах. Формула изобретени  -3- Капронилгидразон- прегнадиен-17ot -ол-20-он-ацетат общей формулы Д1ц-0-( C H tO-NH-N обладающий гестагенным действием. Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе 1.Физер Л., Физер М. Стероиды. М.,Мир, 1964, с. 570.
2. 2.P.Ruggeiri, G.Gandolfi, D.Chiaromonti. Line пепе Reie von Steroiden mit Protein- anaboli seher Wirung, Boll.See. Ital.Biol. Sperim 38,985 (1962).
3. 3.Воловельский Л. Н. ЖОХ, сб. Синтез щ)иродных соединений, их аналогов и фрагментов , 103 (1965).