SU646251A1 - Микроколоночный радиохроматограф - Google Patents

Description

(54) МИКРОКОЛОНОЧНЫЙ РАДИОХРОМАТОГРАФ

если его активность не менее 3 ООимп/сек. Учитыва , что число пиков может достигать 5О -f 60,  сно, что устройство не сможет разрешить их все, особенно это относитс  к послеаним 1икам.

Чувствительность описанного радиохроматографа не менее устроенного среднего квадратичного отклонени  от суммарной активности в пробе и  вл етс  недостаточной.

Цель предлагаемого изобретени  повышение чувствительности измерени .

Поставленна  цель достигаетс  за счет того, что радиометрический детектор снабжен дополнительным спиральiibiM капилл ром, установленным параллельно первому капилл ру, выходы обоих капилл ров через двухлозиционный переключатель подключены к насосу и. сливной емкости, а между выходом из кблойки и входами в капилл ры установлен второй двухпозициониый переключагепь , к которому подключен микроколлектор фракции.

На фиг. 1 схематически изображена схема микроколончатого хроматографа; на фиг. 2 дан график изменени  скорости счета импульсов от первой и второй накопительной кюветы в зависимости от вида реальной хроматограммы.

Градиентное устройство 1 соединено с кнопкой 2. Между автоматическими кранами-переключател ми 3 и 4 включены два накопительных спиральных капилл ра 5 и € с объемом пор дка sbO-lOOO мкл. Они расположены в иммерсионной жидкости между входными окнами световодов 7 и 8. К кранупереключателю 4 подключен микроколлектор 9 фракций, а к крану 3 шприцевой микронасос 10, заполненный химически инертной жидкостью в Количестве ,. Не менее суммарного объема элюата К крану 3 подключена также сливна  емкость, 11. Насосы, детекторы, краны и коллектор фракций подключены к управл ющему блоку.

Работа предлагаеммо: микроколоночного радиохроматографа заключаетс  в следующем.

Из градиентного устройства 1 подают элюирующий раствор на микрокопонк 2, при этом происходит разделение смеси меченных веществ.

Пусть в начальный момент краныпереключатели 3 и 4 наход тс , в положени х , обозначенных на фиг. 2 сплошной линией. При этом элюат поступает

в спиральную накопительную кювету 5 радиометрического детектора, а залолн юший ее раствор выдавливаетс  в сливную емкость 11,

Радиометрический детектор регистрирует вход щий в него пик меченого вещества по нарастанию скорости счета импульсов схемой совпадений. При этом управл ющий блок получает информацию о моменте начала выхода пика (начало повышени  скорости счета над фоном), о моменте выхода максимума пика (максимальное приращение скорости счета) и о моменте окончани  пика (окончание роста скорости счета).

В случае, если пики недостаточно разделены, об окончании первого из них свидетел: ствует сигнал, В момент окончани  выхода пика одновременно по сигналу вычислительной управл ющей системы срабатьшают краны-переключатели 3 и 4, переход  при этом в положение, обозначенное двойным пунктиром. Накопление элюата начинает происходить в капилл рной кювете 6. В момент срабатывани  кранов 3 и 4 начинает работать насос 1О, который подает в накопительную кювету 5 химически-инертную жидкость и выдавливает зону, содержащую уже измеренный пик ,в коллектор 9 фракций. При этом объемную скорость подачи насоса 10 выбирают такой, чтоЗы дл  управл ющего блока, в который поступают импульсы от схемы совпадеНИИ , процесс выдавливани  пика из кюветы проходал мгновенно, то есть был бы меньше времени .осреднени  измерител  скорости счета.

Реально это процесс может длитьс  от единиц до дес тков секунд.

В процессе выдавливани  в коллектор хроматогра4и1ческой зоны происходит срабатывание коллектора 9 фракций в момейт, когда из накопительной кюветы полностью вышел активный пик, так что промежуток между пиками собирают в отдельную емкость коллектора. Команду на срабатывание коллектора подает управл ющий блок на основании информации о моментах начала накоплени  пика и eroi конца

Точки, соответствующие началу , максимуму и концу пиков которой отмече- ны цифрами 1-14 на горизонтальной оси (см. фиг. 2).

Периоды накоплени  дл  каждой кюветы обозначены горизонтальными стрелками , границы периодов определ ютс  точками 3, 6, 9, 12. Вертикальные участки интегральных кривых соответствуют процессу мгновенного выдавливани  хроматографических зон из кювет. Обнаружение точек 1, 4,7,10,12 фиксируетс  управл ющей вычислительно системой, поскольку они служат дл  управлени  работой коллектора фракций в процессе выдавливани  :фоматографичес ких зон. Интервалы срабатывани  коллектора в этом случае во столько раз короче реальных продолжительностей пика, во сколько раз объемна  скорость подачи раствора насосом превосходит объемную скорость элюата, В точках 2,5,8,, 11,13 наклон интегральных кривых максимален и они идентифицируютс  вычислительной системой как максимумы хроматографических пиков . На основании изменени  суммарной скорости счета в обеих кюветах управл ю шее вычислительное устройство воспро1ИЗВОДИТ форму реальной радиохроматограммы в дифференциальной форме. 1 изобретени  Формула Микроколоночный радиохроматограф, содержащий градиентное устройство, колонку , насос, радиометрический детектор со спиральным капилл ром, микроколлектор фракций и управл ющий блок, отличающийс  тем, что, с целью повышени  чувствительности измерени , радиометрический детектор снабжен дополнительным спиральным капилл ром , установленным параллельно первому капилл ру, выходы обоих капилл ров через двухпозиционный переключатель подключены к насосу и сливной емкости, а между выходом из колонки и входами в капилл ры установлен второй двухпозиционный переключатель, к которому подключен микроколлектор фракции.. Источники информации, прин тые во внимание при экспертизе l.NucBear llnstrum Metodes, /1О2, 2, 257-60, 1972. 2. Авторское свидетельство СССР № 525881, кл. Cj О1 N 31/08/ 27.О5.75.

гП

иииии

./

1

ftoKonjieHue

i 1

s

I

23 t 5 6 f 8 9 W

ffoffotifl  к

fOKot оени

/

X

Jic(ifan/ie.

HaifanfleHiie

/

/

у

V

/

/

X

/

/

11 iy 13 n

Фич z