SU563436A1

SU563436A1 - Method of cultivating cells of animal tissue

Info

Publication number: SU563436A1
Application number: SU7502172992A
Authority: SU
Inventors: Энрик Иванович Лежнев; Борис Карпович Гаврилюк; Вячеслав Петрович Панкратов
Original assignee: Институт биологической физики
Priority date: 1975-09-05
Filing date: 1975-09-05
Publication date: 1977-06-30

Description

1one

Изобретение относитс к технике культивировани клеток животных и человека и может найти /применение в научных исследовани х, а также дл получени вирусологических .препаратов .The invention relates to a technique for culturing animal and human cells and can be found / used in scientific research, as well as for the production of virological preparations.

Известен способ -культивировани клеток ткапи животных и человека, заключающийс в том, что клетки помещают на твердую поаложку , к которой они прикрепл ютс , и периодически вместе с подлолжой внос т в питательную среду, чем обеспечивают услови аэрации и циркул ции культуральной жидкости ,1.The known method is the cultivation of animal and human tkapi cells, which consists in placing the cells on a solid bed to which they are attached, and periodically together with the basement they are introduced into the nutrient medium, thus providing conditions for aeration and circulation of the culture fluid, 1.

Однако способ культивировани клеток на твердой (подложке имеет малый выход продукта (биомассы). Кроме того, дл него характерна травматизаци клеток, а дл реализадии свойственны 1громозакость оборудовани , ограниченна поверхность .подложки.However, the method of cultivating cells on a solid (substrate has a low yield of the product (biomass). In addition, it is characterized by cell traumatization, and for the realization of the equipment there is a 1-frostiness of equipment, limited surface of the substrate.

Цель изобретени - создать способ культивировани клеток животной ткани, который позволит повысить выход конечного продукта и его качество за счет увеличени межфазной поверхности при одновременном уменьшении травматизации «леток.The purpose of the invention is to create a method for culturing animal tissue cells, which will increase the yield of the final product and its quality by increasing the interfacial surface while simultaneously reducing the trauma of the cell.

Это достигаетс тем, что 70-90% суспензии культуральной жидкости и клеток вспенивают до образовани устойчивого мелкодисперсного пенного столба, располагают его над оставшеис культуральной жидкостью и орошают пенный столб этой культуральной жидкостью.This is achieved by the fact that 70-90% of the suspension of the culture fluid and cells foams up to the formation of a stable fine foam column, position it over the remaining culture fluid and irrigate the foam column with this culture fluid.

Способ осуществл ют следующим образом.The method is carried out as follows.

Культуральную жидкосгь с клетками вспенивают при умеренной подаче небольших объемов газовой смеси, насыща ее газами и создава таким образом пенный столб с развнтой устойчивой подлолской, на которой культивируемые клетки закрепл ютс .The culture fluid with the cells is foamed with a moderate supply of small volumes of the gas mixture, filling it with gases and thus creating a foam column with a developed stable Podolola, on which the cultured cells are fixed.

В отличие от газожидкостной эмульсии, котора не вл етс структурированной системой , пена - чеисто-пленочна дисперсна система , образовапна мнолч;еством пузырьков газа, разделенны.ч сравнительно тонкими пленками л идкости. Эта структурировапиа система, представл юща собой как бы упругий каркас, устойчивой подвижной подлол кой дл культивируемых клеток.Unlike gas-liquid emulsion, which is not a structured system, foam is a cellular-film dispersed system, formed by a set of gas bubbles, separated by relatively thin films of liquid. This structure is a kind of resilient skeleton, a stable, mobile base for cultured cells.

Насыща культуральиую Лчидкость тазами, добиваютс того, что 70-90% ее вспениваетс до образовани пенного столба, который располагаетс пад оставшейс частью л идкости . Невспененную Лчидкость одновременно перекачивают дл орошени верхнего сло пенного столба, т. е. дл питани клеток, закрепившихс на подвижной подложке пенного столба.By saturating liquid culture with the pelvis, it is achieved that 70-90% of it foams up to the formation of a foam column, which is located in the remaining part of the liquid. Non-foamed liquid is simultaneously pumped to irrigate the upper layer of the foam column, i.e., to nourish the cells attached to the moving substrate of the foam column.

Изменение производительности побудителей расхода лчидкости и газа по сигналу от датчика уровн пепы обеспечивает управление иенообразованием . По достижении пеной заданного уровн по сигналу с блока управлени уменьшают производительность вспенивани , пена начинает оседать. По достижении пеной нижнего заданного уровн по сигналу с блока управлени увеличивают расход газа и поток культуральной жидкости. Культуральна жидкость непрерывно циркулирует через пену, причем лсидкость и газ движутс во встречных направлени х, что способствует интенсивному массооб:мену в пенном столбе.Changing the performance of liquidity and gas consumption boosters according to the signal from the pepa level sensor provides control over the formation of oxygen. When the foam reaches a predetermined level according to the signal from the control unit, the foaming performance decreases, and the foam begins to settle. When the foam reaches a lower predetermined level, the gas flow rate and the flow of culture liquid increase according to the signal from the control unit. The culture fluid is continuously circulating through the foam, with the viscosity and gas moving in opposite directions, which contributes to an intensive mass transfer in the foam column.

Создание одвилсной устойчивой вспененной поверхности позвол ет повысить выход продукта за счет увеличени площади культивировани клеток ткани, не требу при этом существенного увеличени габаритов оборудовани , отпадает необходимость в твердой подложке. Выращивание ведут в м гких гидродинамических услови х.The creation of a single, stable foamed surface allows for an increase in the yield of the product by increasing the area of culturing tissue cells, without requiring a significant increase in the size of the equipment, eliminating the need for a solid substrate. Cultivation is carried out under mild hydrodynamic conditions.

Иапользоваиие способа культивировани клеток ткани по сравнению с известными способами значительно увеличивает выход биомассы , например в системах с перемешиванием- примерно в 2 раза, в системах выращивани на твердой неподвижной подложке - ла 40-50%, и повышает качество продукта.The use of tissue cell cultivation as compared with the known methods significantly increases the biomass yield, for example in systems with mixing, about 2 times, in systems growing on a solid fixed substrate - 40-50%, and improves the quality of the product.

Claims

1. Zh-Danov V.M., Ershov F.I. Molecular basis of the biology of arboviruses, M., Medicine, 1973, p. 62.