SU553653A1 - Способ получени модели клеточной мембраны - Google Patents

Description

1

Изобретение относитс  к учебным модел м, а точнее к способам получени  моделей клеточных мембран.

Известен способ получени  модели клеточной мембраны, например, бимолекул рных фосфолипидных мембран (БФМ), заключающийс  в нанесении фосфолинидной смеси в водном растворе КС1 на отверстие в тефлоновом наконечнике (1).

Таким способом нельз  получить мембраны с ионной проницаемостью, близкой к проницаемости реальных мембран и малых размеров .

Предложенный способ не имеет этих недостатков и отличаетс  от известного тем, что к фосфолипидной смеси добавл ют белок-цитохром «с, а тефлоновый наконечник устанавливают на шприц и выдувают пленку сферической формы.

Предлагаемую модель получают из белково-фосфолипидного комплекса. При этом используют общие фосфолипиды, полученные из мозга быка и белок-цитохром «с.

Берут цитохром «с из сердца лошади, фирмы «Реанал. Препарат предварительно восстанавливают аскорбатом и дополнительно очищают гель-фильтрацией на колонке с сефадексом С-75 и с целлюлозой ДЕ-32, собира  центральные окрашенные фракции. Опыты с высокоочищенным цитохромом «с из коры надпочечников дали аналогичные результаты .

Берут белково-фосфолипидный комплекс 1:10. Растворы фосфолипидов в н-гептане (в концентрации 80 мг/мл) и белка в фосфатном буфере (концентраци  белков 1-5Х10 м), встр хивают в течение 3-5 мин. Полученную смесь оставл ют в холодильнике на 2-3 час. За это врем  происходит полное отслаивание

водной и гидрофобной фаз, причем, по крайней мере, часть переходит в гидрофобную фазу за счет образовани  комплекса с фосфолинидами .

Берут каплю смеси белок-фосфолипид и нанос т на отверстие в тефлоновом наконечнике, погруженном в раствор в кювете (0,1 М КС1). Паконечник устанавливают на шприц. При помощи шприца из отверсти  выдувают сферическую мембрану.

При онисанном способе мембраны обладают следующими преимуществами перед БФМ:

1)наличие сферической формы и больших размеров (от 9 до 12 мм), что дает возможность точнее исследовать проницаемость ионов , чем на модели БФМ.

2)проницаемость названных мембран практически равна проницаемости клеточных.

3)палпчие белково-фосфолипидпого комплекса структурно приближает их к биологической поверхности клетки. 34

Claims (1)

1. Формула изобретени сти, к фосфолипидной смеси добавл ют белокСпособ получени  модели клеточной мем-навливают на шнриц и выдувают пленку сфебраны путем нанесени  фосфолипидной смесирической формы.

   в водном растворе КС1 на отверстие в тефло-5 Источники информации, прин тые во вниновом наконечнике, отличающийс  тем,мание при экспертизе:

   что, с целью приближени  свойств мембраны«I. Physical chemistry, v. 67, 1963, p. 534

   к реальным и улучшени  ионной проницаемо-(прототип).

   553653

   цитохром «,с, а тефлоновый наконечник уста