SU1830080A3 - Serumless nutrient medium for tissue culture - Google Patents
Serumless nutrient medium for tissue culture Download PDFInfo
- Publication number
- SU1830080A3 SU1830080A3 SU904743208A SU4743208A SU1830080A3 SU 1830080 A3 SU1830080 A3 SU 1830080A3 SU 904743208 A SU904743208 A SU 904743208A SU 4743208 A SU4743208 A SU 4743208A SU 1830080 A3 SU1830080 A3 SU 1830080A3
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- insulin
- tissue culture
- aao
- cells
- party
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/0018—Culture media for cell or tissue culture
- C12N5/0037—Serum-free medium, which may still contain naturally-sourced components
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
- C12N5/0018—Culture media for cell or tissue culture
- C12N5/0056—Xeno-free medium
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
- C12N2501/30—Hormones
- C12N2501/33—Insulin
Description
Изобретение относится к области биохимии. в частности к области Культуры ткани.The invention relates to the field of biochemistry. in particular to the field of tissue culture.
Настоящее изобретение охватывает способ выращивания клеток млекопитающих животных в не содержащей сыворотки среде культуры ткани, в котором клетки способны к росту в культуре ткани и имеют положительную реакцию на присутствие инсулина в среде культуры тканй, где среда культуры ткани содержит примерно от 0.1 до 10000 нанограммов аргинил-А-О-инсулина на миллилитр.The present invention encompasses a method of growing mammalian animal cells in a serum-free tissue culture medium, in which the cells are capable of growth in tissue culture and have a positive reaction to the presence of insulin in a tissue culture medium, where the tissue culture medium contains from about 0.1 to 10,000 nanograms of arginyl- A-O-insulin per milliliter.
Настоящее изобретение охватывает также не содержащую сыворотки среду для разведения пригодную для роста клеток млекопитающих в культуре ткани, которая содержит примерно от 0.1 до 10000 нанограммов аргинил-А-О-инсулина на миллилитр.The present invention also encompasses a serum-free dilution medium suitable for mammalian cell growth in tissue culture, which contains from about 0.1 to 10,000 nanograms of arginyl-A-O-insulin per milliliter.
Отличительной особенностью данного изобретения является использование аргинил-А-О-инсулина (ААО-инсулйна) как агента улучшения роста клеток млекопитающих в среде культуры ткани. ААО-инсулин является побочным продуктом процесса получения человеческого инсулина (HI) из человеческого проинсулина. Данный процесс опубликован в имеющейся литературе более подробно, и в качестве исходного продукта используется человеческий проинсулин, ковалентно связанный с расщепляемой главной последовательностью, которая синтезируется посредством микроорганизмов, генетически модифицированных для данной цели. Проинсулин расщепляется трипсином и карбоксипептидазой В. предпочтительно в присутствии металлических ионов.A distinctive feature of this invention is the use of arginyl-A-O-insulin (AAO-insulin) as an agent for improving the growth of mammalian cells in a tissue culture medium. AAO-insulin is a by-product of the process of obtaining human insulin (HI) from human proinsulin. This process is published in more detail in the available literature, and human proinsulin is used as the initial product, covalently linked to a cleavable main sequence, which is synthesized by microorganisms genetically modified for this purpose. Proinsulin is cleaved by trypsin and B. carboxypeptidase, preferably in the presence of metal ions.
Как уже сейчас хорошо известно, человеческий инсулин состоит из 30-аминокислотной цели В, связанной с 21-аминокислотной цепью А посредством дисульфидных мостиков, которые связывают цистеины в положении А-7 и В-7, и цистеины в положении А-20 и В-19. Человеческий проинсулин является белком, содержащим 86 аминокислот, в которомAs is already well known, human insulin consists of a 30-amino acid target B linked to the 21-amino acid chain A via disulfide bridges that bind cysteines at positions A-7 and B-7, and cysteines at positions A-20 and B- 19. Human proinsulin is a protein containing 86 amino acids in which
1830080 АЗ глицин в положении А-1 человеческого инсулина (HI) связан стреонином в положении В-30 посредством внутреннего связывающего пептида, 35-аминокислотной цепи. Этот связывающий пептид удаляется путем расщепления в процессе, в ходе которого человеческий проинсулин превращается в Hl.1830080 AZ glycine at position A-1 of human insulin (HI) is coupled with streonin at position B-30 via an internal binding peptide, a 35-amino acid chain. This binding peptide is removed by cleavage during the process during which human proinsulin is converted to Hl.
Этот процесс расщепления безусловно не является идеально эффективным, и в результате неполного расщепления образуются некоторые побочные продукты. Одним таким побочным продуктом является аргинил-А-О-инсулин, который отличается от HI тем, что имеет одну нижнюю аргинильную группу, присоединенную в положении А-1 к концевой аминогруппе, человеческого инсулина. Этот побочный продукт может быть отделен от HI путем катинообменной хроматографии, как показано ниже в Приготовлении препарата 1. Интересен тот факт, что ААО-инсулин является менее эффективным, чем HI в отношении эффектов снижения глюкозы в крови в условиях ин виво” у кроликов. При проведении испытания на кроликах определено, что ААО-инсулин проявляется 75% эффективности, моль на моль, от самого HI. Однако, ААО-инсулин имеет, по меньшей мере, такую же эффективность, как и инсулин в стимулировании роста клеток в культуре ткани. При первых работах биологов и биохимиков по выращиванию клеток млекопитающих в культуре ткани было принято выращивать их в среде культуры ткани, содержащей кислотную сыворотку в пределах концентрации от 5 до 10%. Сыворотка служила в качестве ценного питательного сырья для клеток, и многие очень важные эксперименты проводились в таких культурах. Однако желание в более точных экспериментах привело к выращиванию клеток культуры ткани в специфической среде, в которой все составляющие компоненты очищены и имеют точные характерные для них химические названия. Одним из таких веществ, которое может или должно вводиться в специфическую среду для желаемого роста многих клеток, является инсулин.This cleavage process is certainly not ideally effective, and some by-products are formed as a result of incomplete cleavage. One such by-product is arginyl-A-O-insulin, which differs from HI in that it has one lower arginyl group attached at position A-1 to the terminal amino group of human insulin. This by-product can be separated from HI by cation exchange chromatography, as shown in Preparation 1 below. An interesting fact is that AAO-insulin is less effective than HI with respect to the effects of reducing blood glucose in vivo in rabbits. In a rabbit test, it was determined that AAO-insulin is 75% effective, mole per mole, of the HI itself. However, AAO-insulin has at least the same effectiveness as insulin in stimulating cell growth in tissue culture. During the first work of biologists and biochemists on the cultivation of mammalian cells in tissue culture, it was customary to grow them in a tissue culture medium containing acid serum within a concentration range of 5 to 10%. Serum served as a valuable nutritious raw material for cells, and many very important experiments were carried out in such cultures. However, the desire for more accurate experiments led to the growth of tissue culture cells in a specific environment in which all the constituent components are purified and have exact chemical names characteristic of them. One such substance that can or should be introduced into a specific medium for the desired growth of many cells is insulin.
Так например, в литературе описаны следующие типы клеток, как положительно реагирующих н'а ввод инсулина в среду культуры ткани.For example, in the literature, the following cell types are described as positively reacting to the introduction of insulin into the tissue culture medium.
Карцинома гипофиза крысыRat pituitary carcinoma
Человеческая цервикальная карцинома Карцинома собачьей почкиHuman Cervical Carcinoma Canine Kidney Carcinoma
Крысиная нейробластомаRat Neuroblastoma
Мышиная меланомаMouse melanoma
Крысиная глиомаRat glioma
Карцинома человеческой молочной железыHuman breast carcinoma
Яичник крысыRat Ovary
Эмбриональная мышиная карциномаFetal Mouse Carcinoma
Мышиные семенникиMouse testes
Карцинома человеческой толстой кишки Мышиные эмбрионы Balb/c Крысиный миобластHuman colon carcinoma Mouse embryos Balb / c Rat myoblast
Эпидермоидная карцинома человеческого легкого Почка хомякаHamster Kidney Epidermoid Carcinoma Hamster Kidney
Человеческий фибробласт Человеческая эпидермоидная карциномаHuman fibroblast Human epidermoid carcinoma
Крысиная щитовидная железа Мышиный эмбрион Мышиная лимфома Овечий адиноцитRat Thyroid Mouse embryo Mouse lymphoma Ovine adinocyte
Инсулин является общим необходимым или желательным фактором в среде для выращивания клеток млекопитающих. Использование настоящего изобретения желательно в культурах всех клеток млекопитающих. которые стимулируются инсулином в среде разведения культуры. Так, природа или источник клеток, которые должны использоваться, не является ограничивающим фактором при осуществлении данного изобретения. Среда культуры ткани также не является ограничивающим фактором. Ранее уже была тщательно изучена не содержащая сыворотки среда культуры ткани. и в литературе были опубликованы данные работы на 30 лет или более. Для информации можно привести нижеследующие источники, которые приводятся здесь как ссылочный материал.Insulin is a common necessary or desirable factor in a medium for growing mammalian cells. The use of the present invention is desirable in cultures of all mammalian cells. which are stimulated by insulin in the culture medium. Thus, the nature or source of the cells to be used is not a limiting factor in the practice of this invention. The tissue culture environment is also not a limiting factor. A serum-free tissue culture medium has already been carefully studied. and the literature published work data for 30 years or more. For information, the following sources can be cited, which are given here as reference material.
Обычно не содержащая сыворотки питательная среда выращивания клеток млекопитающих приготавливается из многочисленных ингредиентов, включающих основные аминокислоты, такие как аргинин, цистеин, гистидин, метионин и другие; неосновные аминокислоты, такие как аланин, аспарагин, глицин, и другие; и аминокислотные производные, такие как глютатион. оксипролин, путросцин и другие. Обычно они содержат такие витамины, такие как фолиевая кислота, биотин, никотинамид, пантотеновая кислота, пиридоксин, рибофлавин и витамин В12. Часто используются углеводы, такие как глюкоза и пируват, а также производные нуклеиновой кислоты, такие как аденин, гипоксантин и тимидин. Такая питательная среда выращивания содержит источник липидов, например холин и и-инозитол, и неорганические ионы, включая ионы кальция, магния, натрия, фосфата и другие. Часто она включает неорганические элементы в следовых количествах, наTypically, a serum-free mammalian cell growth medium is prepared from numerous ingredients including basic amino acids such as arginine, cysteine, histidine, methionine and others; minor amino acids such as alanine, asparagine, glycine, and others; and amino acid derivatives such as glutathione. oxyproline, putroscin and others. They usually contain vitamins such as folic acid, biotin, nicotinamide, pantothenic acid, pyridoxine, riboflavin and vitamin B12. Carbohydrates such as glucose and pyruvate are often used, as well as nucleic acid derivatives such as adenine, hypoxanthine and thymidine. Such a growth medium contains a source of lipids, for example, choline and i-inositol, and inorganic ions, including ions of calcium, magnesium, sodium, phosphate and others. Often it includes inorganic elements in trace amounts, on
1830G80 пример кобальт, железо, селен, цинк. Часто питательная среда выращивания приготавливается в форме буферного раствора для поддержания желаемого значения pH, часто с использованием бикарбонатного иона или газообразной двуокиси углерода. Как разъяснялось выше, ААО-инсулин является побочным продуктом процесса получения HI из человеческого проинсулина, и согласно этому он легко получается для использования в настоящем изобретении путем простого извлечения из продукта загрязненного HI.1830G80 example cobalt, iron, selenium, zinc. Often, the growth medium is prepared in the form of a buffer solution to maintain the desired pH, often using a bicarbonate ion or gaseous carbon dioxide. As explained above, AAO-insulin is a by-product of the process for producing HI from human proinsulin, and according to this, it is readily prepared for use in the present invention by simply extracting contaminated HI from the product.
Нижеследующий раздел Приготовление препарата 1 иллюстрирует процедуру хроматографического разделения, используемую для этого извлечения, и этап кристаллизации с целью очистки ААО-инсулина.The following section Preparation of Preparation 1 illustrates the chromatographic separation procedure used for this extraction and the crystallization step to purify AAO-insulin.
ПРИГОТОВЛЕНИЕ ПРЕПАРАТА 1 ХРОМАТОГРАФИЯPREPARATION OF THE PRODUCT 1 CHROMATOGRAPHY
Смесь, содержащая ААО-инсулин и HI. растворяется в 32 мл буферного раствора, с концентрацией 7 моль мочевины. 0,05 моль ацетата натрия и 0,1 моль хлорида натрия, величина pH 3,8. Хроматографическая колонка размерами 1x15 см наполняется сульфопропиловой ТРИЗАКРИЛ смолой, изготавливаемой фирмой Reactib IBF, отделением Rhone-Poulenc с размером частиц 40-80 мкм. Раствор ААО-инсулина вводится в колонку и элюируется градиентным буфером (в количестве, составляющим 9-кратный обьем колонки) того же состава, что описан выше, с той разницей, что концентрация хлорида натрия в нем увеличена до 0,2 моль. Скорость прохождения в колонке составляет 1 мл/мин. Поток продукта, выходящего из колонки, контролируется по спектру поглощения при 280 нм. Инсулин выходит из колонки первым, он практически весь элюируется в первых 70 мл после начала градиентного элюирования. Затем выходит ААО-инсулин. который собирается в выходящей фракции 72-105 мл для получения фракции, обогащенной ААО-инсулином с очень небольшой примесью HI.A mixture containing AAO-insulin and HI. soluble in 32 ml of buffer solution, with a concentration of 7 mol of urea. 0.05 mol of sodium acetate and 0.1 mol of sodium chloride, pH 3.8. A 1x15 cm chromatographic column is filled with TRIZACRYL sulfopropyl resin manufactured by Reactib IBF, a Rhone-Poulenc unit with a particle size of 40-80 microns. AAO-insulin solution is introduced into the column and eluted with a gradient buffer (in the amount of 9 times the volume of the column) of the same composition as described above, with the difference that the concentration of sodium chloride in it is increased to 0.2 mol. The passage speed in the column is 1 ml / min. The flow of the product exiting the column is controlled by the absorption spectrum at 280 nm. Insulin leaves the column first, it is almost completely eluted in the first 70 ml after the start of gradient elution. Then comes AAO-insulin. which is collected in the exit fraction 72-105 ml to obtain a fraction enriched with AAO-insulin with a very small admixture of HI.
КРИСТАЛЛИЗАЦИЯCRYSTALLIZATION
Величину pH раствора ААО-инсулинового продукта в количестве 840 мл (с содержанием 2.32 г ААО-инсулина) доводят до 8,0 посредством 10%-ного гидрата окиси натрия. Раствор концентрируется до объема 260 мл при 4°С с использованием отсасывающей мембраны молекулярной массой 3000. Концентрированный раствор затем диафильтруется с использованием 280 мл деионизированной воды. Раствор разбавляется до концентрации 2 г белка на 1 л. В него добавляют 16.2 мл ледяной уксусной кисло ты и 850 мл деионизированной воды, так чтобы концентрация уксусной кислоты данного раствора составляет 0,25 моль. Затем он нагревается до 23°С, в него вводится 0,93 мл 20%-ного водного раствора хлорида цинка. Величина pH доводится до 6,0 посредством концентрированного раствора гидрата окиси аммония.( Смесь перемешивается в течение 4 ч при 23°С. Затем она охлаждается до 4°С, а смесь инкубируется при указанной температуре в течение 16 ч без перемешивания. Затем поверхностный слой декантируется, а оставшийся густой кристаллический шлам центрифугируется. Кристаллы промываются двукратно очищенной водой, затем двукратно абсолютным этанолом, используемым в количестве 23 мл на каждую промывку. Кристаллы высушиваются в вакууме при комнатной температуре. и в результате получается 2,11 г практически чистого ААО-инсулина.The pH of a solution of AAO-insulin product in an amount of 840 ml (containing 2.32 g of AAO-insulin) was adjusted to 8.0 with 10% sodium hydroxide. The solution is concentrated to a volume of 260 ml at 4 ° C. using a suction membrane with a molecular weight of 3000. The concentrated solution is then diafiltered using 280 ml of deionized water. The solution is diluted to a concentration of 2 g of protein per 1 liter. 16.2 ml of glacial acetic acid and 850 ml of deionized water are added to it, so that the concentration of acetic acid in this solution is 0.25 mol. Then it is heated to 23 ° C, 0.93 ml of a 20% aqueous solution of zinc chloride is introduced into it. The pH is adjusted to 6.0 with a concentrated solution of ammonium hydroxide. (The mixture is stirred for 4 hours at 23 ° C. Then it is cooled to 4 ° C and the mixture is incubated at this temperature for 16 hours without stirring. Then the surface layer it is decanted and the remaining thick crystalline sludge is centrifuged. The crystals are washed twice with purified water, then twice with absolute ethanol, used in an amount of 23 ml per wash. The crystals are dried in vacuo at room temperature. and the result is 2.11 g of almost pure AAO-insulin.
Пример. Используется ААО-инсулин для роста клеток яичника Китайского хомяка в не содержащей сыворотки среде, которая, как было показано, эффективна для роста таких клеток. Эта среда состоит из трех частей модифицированной Dulbecco среди Eagle (ДМЕ)и одной части (по объему) соеды Г12, с введенными в нее селеном (10 8 моль) этаноламином (50 мкмоль), оксиэтилпиперазинэтансульфокислотой (20 ммоль) и человеческим трансферрином (1 мкг/мл). Количества ААО-инсулина. которые указаны в нижеследующей таблице, вводятся в различных пропорциях от количества среды. Клетки выращиваются в 12-ячеистых чашках Конинга, которые предварительно обрабатываются ламинином, белком, который способствует прилипанию · клеток и распределению их в ячейках разведения культуры. Эксперимент для каждого условия осуществляется двукратно. Каждая ячейка с питательной средой разведения инокулируется 25000 клетками на 0-й день эксперимента, и подсчет осуществляется на 6-ой день с помощью счетчика Колтера. В данных экспериментах используются четыре различных партии ААО-инсулина. Концентрации ААО-инсулина, вводимого в питательную среду разведения в виде раствора в 0,1 н. соляной кислоте, выражаются в нанограммах на миллилитр во всех случаях. В контрольных экспериментах без ввода инсулина или ААО-инсулина в среду разведения, число клеток составляет от 10000 до 200000 на ячейку. Те же клетки в той же среде, содержащей HI или коровий инсулин вместо ААО-инсулина, растут так же, как и в описанных здесь экспериментах.Example. AAO-insulin is used to grow Chinese hamster ovary cells in a serum-free environment that has been shown to be effective for the growth of such cells. This medium consists of three parts of modified Dulbecco among Eagle (DME) and one part (by volume) of G12, with selenium (10 8 mol) ethanolamine (50 μmol), hydroxyethylpiperazine ethanesulfonic acid (20 mmol) and human transferrin (1 μg) added / ml). Amounts of AAO-insulin. which are indicated in the following table, are introduced in various proportions of the amount of medium. Cells are grown in 12-mesh Coning dishes that are pretreated with laminin, a protein that promotes cell adhesion and distribution in culture cells. The experiment for each condition is carried out twice. Each cell with breeding broth was inoculated with 25,000 cells on day 0 of the experiment, and counting was performed on day 6 using a Colter counter. In these experiments, four different batches of AAO-insulin are used. The concentration of AAO-insulin introduced into the breeding medium in the form of a solution in 0.1 N. hydrochloric acid are expressed in nanograms per milliliter in all cases. In control experiments without injecting insulin or AAO-insulin into the dilution medium, the number of cells is from 10,000 to 200,000 per cell. The same cells in the same medium containing HI or bovine insulin instead of AAO-insulin grow in the same way as in the experiments described here.
ΊΊ
Приведенные выше экспериментальные данные показывают эффективность ААО-инсулина в стимулирований роста клеток, которые реагируют на инсулин в культуре ткани, Среднее число клеток на ячейку в 5 этих испытаниях увеличивается от 240000 до 610000 в зависимости от концентрации ААО-инсулина;The above experimental data show the effectiveness of AAO-insulin in stimulating the growth of cells that respond to insulin in tissue culture. The average number of cells per cell in these 5 tests increases from 240,000 to 610,000 depending on the concentration of AAO-insulin;
Claims (1)
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US31588789A | 1989-02-27 | 1989-02-27 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
SU1830080A3 true SU1830080A3 (en) | 1993-07-23 |
Family
ID=23226497
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU904743208A SU1830080A3 (en) | 1989-02-27 | 1990-02-26 | Serumless nutrient medium for tissue culture |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0390327A3 (en) |
JP (1) | JPH02261376A (en) |
CN (1) | CN1045125A (en) |
AU (1) | AU620499B2 (en) |
CA (1) | CA2010424A1 (en) |
HU (1) | HUT53671A (en) |
IE (1) | IE900685L (en) |
IL (1) | IL93463A0 (en) |
NZ (1) | NZ232641A (en) |
PT (1) | PT93217A (en) |
SU (1) | SU1830080A3 (en) |
ZA (1) | ZA901280B (en) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
MD3569G2 (en) * | 2007-07-13 | 2008-11-30 | Национальный Научно-Практический Центр Превентивной Медицины Министерства Здравоохранения Республики Молдова | Medium for cultivation of human and animal cells |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
GB9022545D0 (en) * | 1990-10-17 | 1990-11-28 | Wellcome Found | Culture medium |
IL102929A (en) * | 1992-08-24 | 1996-11-14 | Interpharm Lab Ltd | Serum-free medium for mammalian cells |
WO2001051624A2 (en) * | 2000-01-12 | 2001-07-19 | Eli Lilly And Company | Carboxypeptidase b free of animal products and contaminating enyzme activity |
Family Cites Families (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
USRE30985E (en) * | 1978-01-01 | 1982-06-29 | Serum-free cell culture media | |
AU4254489A (en) * | 1989-10-03 | 1991-04-11 | Ajinomoto Co., Inc. | Method of induction and activation of cytotoxic t cells |
-
1990
- 1990-02-20 CA CA 2010424 patent/CA2010424A1/en not_active Abandoned
- 1990-02-20 IL IL93463A patent/IL93463A0/en unknown
- 1990-02-20 ZA ZA901280A patent/ZA901280B/en unknown
- 1990-02-21 PT PT93217A patent/PT93217A/en not_active Application Discontinuation
- 1990-02-22 JP JP2044292A patent/JPH02261376A/en active Pending
- 1990-02-22 EP EP19900301902 patent/EP0390327A3/en not_active Withdrawn
- 1990-02-22 NZ NZ23264190A patent/NZ232641A/en unknown
- 1990-02-23 AU AU50154/90A patent/AU620499B2/en not_active Ceased
- 1990-02-26 IE IE900685A patent/IE900685L/en unknown
- 1990-02-26 SU SU904743208A patent/SU1830080A3/en active
- 1990-02-26 HU HU901046A patent/HUT53671A/en unknown
- 1990-02-26 CN CN90100961A patent/CN1045125A/en active Pending
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
MD3569G2 (en) * | 2007-07-13 | 2008-11-30 | Национальный Научно-Практический Центр Превентивной Медицины Министерства Здравоохранения Республики Молдова | Medium for cultivation of human and animal cells |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
EP0390327A2 (en) | 1990-10-03 |
AU5015490A (en) | 1990-08-30 |
CA2010424A1 (en) | 1990-08-27 |
PT93217A (en) | 1990-08-31 |
IL93463A0 (en) | 1990-11-29 |
JPH02261376A (en) | 1990-10-24 |
AU620499B2 (en) | 1992-02-20 |
NZ232641A (en) | 1991-08-27 |
HUT53671A (en) | 1990-11-28 |
IE900685L (en) | 1990-08-27 |
EP0390327A3 (en) | 1990-11-14 |
HU901046D0 (en) | 1990-05-28 |
ZA901280B (en) | 1991-10-30 |
CN1045125A (en) | 1990-09-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4443546A (en) | Process and composition for propagating mammalian cells | |
EP0309050B1 (en) | Human insulin-like growth factor analogs with reduced binding to serum carrier proteins and their production in yeast | |
Cohen et al. | Epidermal growth factor: chemical and biological characterization | |
US4959351A (en) | Crystal suspensions of insulin derivatives, processes for their preparation and their use | |
EP0216832B1 (en) | Novel insulin derivatives and pharmaceutical preparations containing these derivatives | |
DE602005002829T2 (en) | USE OF A SERUM-FREE CELL CULTURE MEDIUM FOR THE PRODUCTION OF IL-18BP IN MAMMALIAN CELLS | |
US4440860A (en) | Stimulating cell growth | |
FI66751B (en) | FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV ETT STABILT INSULINPREPARATMED LAONGTIDSVERKAN | |
Mosier | Primary in vitro antibody responses by purified murine B lymphocytes in serum-free defined medium. | |
KR920006868B1 (en) | Method for producing interferons | |
JPS61212598A (en) | Insulin compound | |
DeLuca et al. | Altered glycoprotein synthesis in mouse epidermal cells treated with retinyl acetate in vitro | |
Carpenter et al. | Epidermal growth factors | |
CA2583027A1 (en) | Serum-free cell culture medium for mammalian cells | |
RU2073686C1 (en) | Method for production of stable somatotropins, stable somatotropins and composition of stable somatotropin | |
Nilausen | Role of fatty acids in growth‐promoting effect of serum albumin on hamster cells in vitro | |
Spencer | Synthesis by cultured hepatocytes of somatomedin and its binding protein | |
Scher et al. | Dissociation of cell division stimulating capacity for Balb/c-3T3 from the insulin-like activity in human serum | |
JPH04503154A (en) | modified human growth hormone | |
SU1830080A3 (en) | Serumless nutrient medium for tissue culture | |
JPH03501856A (en) | Novel somatotropin | |
EP0310887B1 (en) | Vasoconstrictor peptide | |
Vasiliev et al. | The 30 S ribosomal subparticle retains its main morphological features after removal of half the proteins | |
US4452893A (en) | Cell growth medium supplement | |
Abdel-Meguid et al. | Crystallization of methionyl porcine somatotropin, a genetically engineered variant of porcine growth hormone |