SU1708400A1 - Method of producing sorbent for hemosorption - Google Patents

Method of producing sorbent for hemosorption Download PDF

Info

Publication number
SU1708400A1
SU1708400A1 SU884496333A SU4496333A SU1708400A1 SU 1708400 A1 SU1708400 A1 SU 1708400A1 SU 884496333 A SU884496333 A SU 884496333A SU 4496333 A SU4496333 A SU 4496333A SU 1708400 A1 SU1708400 A1 SU 1708400A1
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
fibrinogen
thrombin
concentration
solution
hemosorption
Prior art date
Application number
SU884496333A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Зоя Уриэловна Ниязова
Любовь Константиновна Гончарова
Ольга Георгиевна Новикова
Андрей Алексеевич Дмитриев
Пинхас Моисеевич Аширов
Original Assignee
Таджикский государственный университет им.В.И.Ленина
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Таджикский государственный университет им.В.И.Ленина filed Critical Таджикский государственный университет им.В.И.Ленина
Priority to SU884496333A priority Critical patent/SU1708400A1/en
Application granted granted Critical
Publication of SU1708400A1 publication Critical patent/SU1708400A1/en

Links

Landscapes

  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Abstract

Изобретение относитс  к получению сорбентов с полимерными покрыти ми и позвол ет увеличить эффективность гемосор- бции. Толщина фибринной пленки V,покрывающей 1 см угл , может измен тьс  варьированием концентрации тромбина 1- 3 мг/мл, фибриногена 35-45 мг/мл без обра- зовани  конгломератов при такой последовательности введени  компонентов в процессе образовани  фибринной пленки: угольные гранулы, подготовленные к покрытию, центрифугируют до полного удалени  фаз раствора, обрабатывают раствором тромбина концентрацией 1-3 мг/мл в течение 20-30 мин, удал ют избыток тромбина промывкой физраствором, повторно центрифугируют, затем обрабатывают раствором фибриногена концентрацией 35-45 мг/мл в течение 5-10 мин t/t полученный сорбент с фибринной пленкой промывают от избытка фибриногена физиологическим раствором. 2 табл.слThe invention relates to the preparation of sorbents with polymer coatings and allows to increase the efficiency of hemosorption. The thickness of the fibrin film V covering 1 cm of coal can be varied by varying the concentration of thrombin 1–3 mg / ml, fibrinogen 35–45 mg / ml without the formation of conglomerates with the following sequence of introduction of the components during the formation of the fibrin film: carbon granules prepared to the coating, centrifuged until the phases of the solution are completely removed, treated with a solution of thrombin with a concentration of 1-3 mg / ml for 20-30 minutes, remove the excess of thrombin by washing with saline, re centrifuging, then treating with fibrinogen with a concentration of 35-45 mg / ml for 5-10 min t / t, the resulting sorbent with a fibrin film is washed from excess fibrinogen with saline. 2 tablets

Description

Изобретение относитс  к области получени  сорбентов с полимерными покрыти ми и может быть использовано в медицинской практике, а именно при очистке крови от токсинов.The invention relates to the field of the preparation of sorbents with polymer coatings and can be used in medical practice, namely in the purification of blood from toxins.

Целью изобретени   вл етс  повышение эффективности процесса гемосорбции за счет предотвращени  образован  конгломератов гранул сорбента.The aim of the invention is to increase the efficiency of the process of hemosorption by preventing the formation of a conglomerate of sorbent granules.

Предотвращение образовани  конгломератов угольных гранул достигаетс  обработкой гранул раствором тромбина с концентрацией 1-3 мг/мл. удалением неабсорбированного тромбина, последующей обработкой гранул раствором фибриногена с концентрацией 35-45 мг/мл с последующим удалением остатка непрореагировавшего тромбина.Preventing the formation of coal granule conglomerates is achieved by treating the granules with a solution of thrombin with a concentration of 1-3 mg / ml. removing unabsorbed thrombin, followed by treating the granules with a solution of fibrinogen with a concentration of 35-45 mg / ml, followed by removal of the residue of unreacted thrombin.

П р и м е р. В качестве исходного сорбента дл  покрыти  фибринной пленкой берут флоконизированный гемосорбент СКН-1К крупнопористый. Размер сферических гранул 0,5-1 мм, Прочность гемосорбента не менее 80%, обьем сорбционных пор (по бензолу) не менее 0,9 см /г.PRI me R. As a starting sorbent for coating the fibrin film, take the floconic hemosorbent SKN-1K large-pore. The size of spherical granules is 0.5-1 mm. The strength of hemosorbent is at least 80%, the volume of sorption pores (for benzene) is at least 0.9 cm / g.

Флакон с углем откупоривают и отбирают гемосорбент из физиологического раствора , перенос т гранулы в пластиковую пробирку с перфорированным дном до метки , соответствующей объему 1 см, дают физиологическому раствору стечь и в течен.ие 1 мин центрифугируют гранулы с пластиковой пробиркой дл  более полного удалени  остатков физиологического раствора. Этот остаточный объем физиологического раствора измерен и составл ет 0.4 мл. К подготовленным таким образом угольнымThe coal bottle is uncorked and the hemosorbent is removed from the saline solution, the granules are transferred into a plastic tube with a perforated bottom to a mark corresponding to a volume of 1 cm, the saline is drained and the granules with a plastic tube are more centrifuged for more complete removal of the physiological residues for 1 min. solution. This residual volume of saline is measured and is 0.4 ml. To coal prepared in this way

гранулам приливают 0,5 мл раствора тромбина соответствующей концентрации (т.е. объем немного превышает 0,4 мл). Раствор тромбина выдерживают с уг.ольными гранулами в течение 20-30 мин. За это врем  практически полностью осуществл етс  физическа  сорбци  тромбина в порах гранул. Затем угольные гранулы промывают от несорбированного тромбина п тнадцатикратным по сравнению с объемом угл  объемом физиологического раствора. Гранулы повторно центрифугируют в течение 1 мин дл  удалени  остатков физиологического раствора , чтобы не разбавл ть концентрацию фибриногена в процессе следующей за центрифугированием стадией сорбции фибриногена .0.5 ml of the thrombin solution of the corresponding concentration (ie, the volume slightly exceeds 0.4 ml) is poured into the granules. The thrombin solution is incubated with angular granules for 20-30 minutes. During this time, the physical sorption of thrombin is almost completely carried out in the pores of the granules. Then, the coal granules are washed from un-sorbed thrombin by fifteen times compared to the volume of coal with a volume of saline. The granules are re-centrifuged for 1 minute to remove residual saline in order not to dilute the fibrinogen concentration in the process of fibrinogen sorption following the centrifugation.

Исходную концентрацию раствора фибриногена до сорбции готов т растворением навески- фибриногена в соответствующем объеме физиологического раствора, В данном случае объем раствора фибриногена составл ет 0,4 мл на каждый 1 см угл  СКН 1К, т.е. минимальный объем, необходимый только дл  смачивани  пор угольных гранул.The initial concentration of the fibrinogen solution prior to sorption is prepared by dissolving a portion of fibrinogen in an appropriate volume of saline. In this case, the volume of the fibrinogen solution is 0.4 ml for every 1 cm of SKN 1K coal, i.e. minimum volume required only for wetting the pores of the coal granules.

Угольные гранулы выдерживают в растворе фибриногена в течение 5-10 мин. За это врем  в зависимости от концентрации фибриногена сорбируетс  и одновременно полимеризуетс  65-90% фибриногена. Полученный гемосорбент, покрытый фибринной пленкой, промывают вновь п тнадцатикратным объемом по сравнению с объемом угл  физиологического раствора, в который переходит несорбированный фибриноген. Объем промывочных растворов учитывают. Промывку ведут до полного Отсутстви  в промывочных растворах следов несорбированного белка. Концентрацию несорбированного фибриногена определ ют измерением оптической плотности промывочных растворов при длине волны 280 нм на спектрофотометре СФ-26. С помощью зависимости оптической плотности от концентрации фибриногена (калибровочному графику) наход т концентрацию несорбированного фибриногена. Зна  объем промывочных растворов и концентрацию фибриногена, определ ют количество фибриногена в сливе после сорбции. По разнице количества фибриногена на входе в уголь(0,4мл)и в сливе определ ют величину сорбции фибриногена.Coal granules are kept in the fibrinogen solution for 5-10 minutes. During this time, depending on the concentration of fibrinogen, 65-90% of fibrinogen is sorbed and simultaneously polymerized. The resulting hemosorbent coated with fibrin film is washed again with a volume of fifteen times as compared with the volume of carbon of the saline solution into which non-sorbed fibrinogen passes. The volume of washing solutions taken into account. Washing is carried out to the complete absence of traces of non-sorbed protein in the washing solutions. The concentration of non-sorbed fibrinogen is determined by measuring the optical density of the washing solutions at a wavelength of 280 nm using an SF-26 spectrophotometer. Using the dependence of optical density on the concentration of fibrinogen (calibration graph), the concentration of non-adsorbed fibrinogen is found. Knowing the volume of washing solutions and the concentration of fibrinogen, the amount of fibrinogen in the discharge after sorption is determined. The difference in the amount of fibrinogen at the entrance to coal (0.4 ml) and in the discharge determines the magnitude of fibrinogen sorption.

Результаты исследований вли ни  концентраций растворов тромбина и фибриногена , а также последовательности сорбцииThe results of studies of the influence of concentrations of solutions of thrombin and fibrinogen, as well as the sequence of sorption

тромбины (Т) - фибриногены (Ф) или Ф-Т сведены в табл.1.thrombin (T) - fibrinogen (f) or ft are summarized in table 1.

Из табл.1 следует, что сорбент, полученный с помощью обработки тромбинFrom table 1 it follows that the sorbent obtained by processing thrombin

(1-3 мг/мл) - фибриноген (35-45 мг/мл), обладают оптимальной дл  гемосорбции толщиной фибриновой пленки, предотвращающей слипание гранул.(1-3 mg / ml) - fibrinogen (35-45 mg / ml), are optimal for hemosorption fibrin film thickness, preventing adhesion of the granules.

Повыщение эффективности гемосорбции . Сорбенты СКН-1К промыщленного изготовлени  СКН-1К, покрытые фибринной пленкой по схеме Ф-Т из растворов фибриногена 35 и 45 мг/мл, а также покрытые фибринной пленкой по схеме Т-Ф из растворов фибриногена 35 и 45 мг/мл и концентрацией тромбина 2мг/мл, испытаны в лабораторных услови х на сорбцию средних молекул с помощью маркера средних молекул Pi2(M.в. 1350),Improving the efficiency of hemosorption. Sorbents SKN-1K of commercial production of SKN-1K, coated with fibrin film according to F-T scheme from 35 and 45 mg / ml fibrinogen solutions, as well as coated with fibrin film according to T-F from 35 and 45 mg / ml fibrinogen solutions and thrombin concentration 2 mg / ml, tested in laboratory conditions for the sorption of medium molecules using the marker of medium molecules Pi2 (M.v. 1350),

Дл  этого по 3 мл витамина Bi2, содержащих 600 мкг витамина, инкубируют в течение 1 ч с 1 см указанных сорбентов и периодически встр хивают. После инкубации из флакона отбирают надосадочнуюTo do this, 3 ml of vitamin Bi2, containing 600 µg of vitamin, are incubated for 1 hour with 1 cm of the indicated sorbents and shaken periodically. After incubation, the supernatant is removed from the vial.

жидкость и спектрофотометрируют дл  определени  оптической плотности несорбированного витамина Bi2 на спектрофотометре СФ-26 при длине волны 361 нм. С помощью калибровочного графика зависимости оптической Г1лотности стандартного раствора витамина В12 от его концентрации определ ют содержание несорбированного витамина Bi2. По разности содержани  витамина до инкубации с сорбентами и послеliquid and spectrophotometrically measured to determine the optical density of unabsorbed vitamin Bi2 on an SF-26 spectrophotometer at a wavelength of 361 nm. Using the calibration graph of the dependence of the optical G1 density of a standard solution of vitamin B12 on its concentration, the content of non-adsorbed vitamin Bi2 is determined. According to the difference in vitamin content before incubation with sorbents and after

наход т величину сорбции. Результаты испытаний приведены в табл.2.find the amount of sorption. The test results are shown in table 2.

Из данных табл.2 видно, что сорбци  . витамина Bi2 на сорбенте, полученного по схеме Т-Ф, на 3-9% больше, чем наFrom the data of table 2 it can be seen that sorbtsi. vitamin Bi2 on the sorbent, obtained by the scheme TF, 3-9% more than

угле, покрытом фибриновой пленкой по схеме Ф-Т.coal covered with fibrin film according to the ft scheme.

Claims (1)

Формула изобретени  Способ получени  сорбента дл  гемосорбции , включающий обработку угольных гранул растворами тромбина и фибриногена , отличающийс  тем, что, с целью повышени  эффективности процесса гемосорбции за счет предотвращени  образовани  конгломератов гранул сорбента, угольные гранулы обрабатывают раствором тромбина с концентрацией 1-3 мг/мл, затем удал ют i неабсор&1рованный тромбин и обрабатывают раствором фибриногена сClaims A method for producing a sorbent for hemosorption, comprising treating coal granules with thrombin and fibrinogen solutions, characterized in that, in order to increase the efficiency of the hemosorption process by preventing the formation of conglomerates of sorbent granules, coal granules are treated with a solution of thrombin with a concentration of 1-3 mg / ml then i-non-absorber & thrombin thrombin is removed and treated with fibrinogen solution with концентрацией 35-45 мг/мл с последующим удалением остатка непрореагировавшего фибриногена.concentration of 35-45 mg / ml, followed by removal of the residue of unreacted fibrinogen. т а б ji и к « 1t a b ji and k "1 Т а 6 Л и ц а 2T a 6 L and c a 2
SU884496333A 1988-06-06 1988-06-06 Method of producing sorbent for hemosorption SU1708400A1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU884496333A SU1708400A1 (en) 1988-06-06 1988-06-06 Method of producing sorbent for hemosorption

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU884496333A SU1708400A1 (en) 1988-06-06 1988-06-06 Method of producing sorbent for hemosorption

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU1708400A1 true SU1708400A1 (en) 1992-01-30

Family

ID=21405131

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU884496333A SU1708400A1 (en) 1988-06-06 1988-06-06 Method of producing sorbent for hemosorption

Country Status (1)

Country Link
SU (1) SU1708400A1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007012754A1 (en) * 2005-07-27 2007-02-01 Aventis Pharma S.A. Method for affinity chromatography of antithrombin iii

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Синтетические полимеры медицинского назначени . Тез. докладов VII ВсесонЭзн. симпозиума. Минск, 1985, с. 33. *

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007012754A1 (en) * 2005-07-27 2007-02-01 Aventis Pharma S.A. Method for affinity chromatography of antithrombin iii
FR2889078A1 (en) * 2005-07-27 2007-02-02 Aventis Pharma Sa NOVEL CHROMATOGRAPHY METHOD OF AFFINITY OF ANTITHROMBIN III
CN101262919B (en) * 2005-07-27 2011-07-27 艾文蒂斯药品公司 Method for affinity chromatography of antithrombin III

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SU688124A3 (en) Method of separating protein
RU2025129C1 (en) Method of preparing of concentrate of factor viii and von villebrand factor
US5112949A (en) Method of and apparatus for separating proteins
JP5332090B2 (en) Spherical sulfated cellulose and method for producing the same
US4137127A (en) Process for the preparation of thrombin-like enzymes from snake venoms
SU1708400A1 (en) Method of producing sorbent for hemosorption
JPS58880B2 (en) A mixture of granular activated carbon and bone charcoal that has a high ability to remove colored substances from sugar solution
SU628804A3 (en) Method of purification of organic solutions from accompoanying admixtures
JPS59227744A (en) Granular and powdery glass for recovering dna
SU787033A1 (en) Method of obtaining hemosorbent
FI62103B (en) REQUIREMENTS FOR THE REQUIREMENT OF HEPARIN MED HOEG SPECIFIC ACTIVITIES
RU2042358C1 (en) Method of preparing factor ix concentrate
JPH11347017A (en) Manufacture of glass fiber filter paper
US4559182A (en) Method for purifying cresidine sulfonic acid by resin extraction
US2969298A (en) Purification of beet sugar solutions
SU1039881A1 (en) Method of producing purified sodium bicarbonate
JPH0240380B2 (en)
SU100668A1 (en) The method of obtaining purified and adsorbed on aluminum hydroxide diphtheria toxoid
JPH09169698A (en) Purification of methacrylate ester
JPH10503653A (en) Process for producing refined sugar
JPS589686A (en) Purifying method of superoxide dismutase
SU1520100A1 (en) Method of refinement of sugar solution
SU721100A1 (en) Hemoglobin producing method
SU1247078A1 (en) Method of sorption extraction of cesium
SU1033444A1 (en) Method for purifying aqueus solutions from mercury