SU1706608A1

SU1706608A1 - Medium for dilution and cryoconservation of agricultural animal sperm

Info

Publication number: SU1706608A1
Application number: SU884467011A
Authority: SU
Inventors: Виктор Константинович Милованов; Анатолий Федорович Лизунков; Людмила Ивановна Парамонова; Анатолий Арсентьевич Дмитровский
Original assignee: Всесоюзный научно-исследовательский институт животноводства; Институт биохимии им.А.Н.Баха
Priority date: 1988-06-22
Filing date: 1988-06-22
Publication date: 1992-01-23

Abstract

Изобретение относитс к искусственному осеменению сельскохоз йственных животных , преимущественно баранов. Цель изобретени - повышение биологической полноценности сперматозоидов. Среда содержит сахар 9,9-10,1 г. комплексную соль ЭДТА 0,69-0.71 г, желток куриного йца 5,0- 7,0 мл, хлорофилл 0,0003-0.0005 г, воду до 100 мл. Среда повышает выживаемость при 37&deg;Сдо 10,0-0,72 ч, сохранность акросом до 70,0-3% и абсолютный показатель живучести до 3,1-0,20. 8 табл.This invention relates to the artificial insemination of farm animals, mainly sheep. The purpose of the invention is to increase the biological usefulness of sperm. The medium contains sugar 9.9-10.1 g. Complex salt of EDTA 0.69-0.71 g, yolk of an egg of 5.0-7.0 ml, chlorophyll 0.0003-0.0005 g, water up to 100 ml. The medium increases the survival rate at 37 ° C to 10.0-0.72 h, the safety of acros up to 70.0-3% and the absolute survival rate to 3.1-0.20. 8 tab.

Description

Изобретение относитс к искусственному осеменению сельскохоз йственных животных .FIELD: artificial insemination of farm animals.

Известна среда дл замораживани и хранени спермы баранов, содержаща дистиллированную воду 100 мл, сахарозу 10 г, желток куриного йца 20 мл, глицерин 4 мл, двунатриевую соль этилендиаминтетраук- сусной кислоты (хелатон-3, трилон Б) 0,08 г, фосфорнокислый однозамещенный калий 0,10 г, альфа-токоферол-ацетат, 10%-ный масл ный раствор витамина Е 2 мл, левоми- цетин 25-50 тыс.ЕД., полимиксин 25-50 тыс.ЕД.The known medium for freezing and storing ram sperm containing distilled water 100 ml, sucrose 10 g, chicken egg yolk 20 ml, glycerin 4 ml, disodium ethylenediaminetetraacetic acid (chelaton-3, Trilon B) 0.08 g, phosphate monosubstituted potassium 0.10 g, alpha-tocopherol acetate, 10% oil solution of vitamin E 2 ml, levomycetin 25-50 thousand U., polymyxin 25-50 thousand U.

Известна сложна многокомпонентна среда дл разбавлени и замораживани спермы животных, содержаща дистиллированную воду 100 мл, лактозу 14,5 г, гуммиарабик (порошок) 6 г, трис(оксиметил)- аминометан 0,6 г, лимонную кислоту по ГОСТу 0,27 г, желток диетического куриногоKnown complex multicomponent medium for diluting and freezing the sperm of animals, containing distilled water 100 ml, lactose 14.5 g, gum arabic (powder) 6 g, tris (oxymethyl) - aminomethane 0.6 g, citric acid according to GOST 0.27 g, diet chicken yolk

йца 20 мл, глицерин 17 мл, спермосан-ППК 25-100 тыс.ЕД.eggs 20 ml, glycerin 17 ml, spermosan-PPK 25-100 thousand U.

Однако указанные среды недостаточно эффективны, содержат в своем составе большое количество желтка куриного йца, что приводит к накоплению вредных перекисей в семени, затрудн ет микроскопическую оценку состо ни акросом сперматозоидов , не улучша их сохранности, и св зано с потреблением большого количества ценного продукта питани людей - куриных иц. Кроме того, они содержат избыточное количество трехатомного спирта-глицерина , оказывающего токсическое действие на сперматозоиды в период выдержки перед замораживанием и период оттаивани семени.However, these media are not effective enough, contain a large amount of yolk of chicken eggs, which leads to the accumulation of harmful peroxides in the seed, makes it difficult to microscopically assess the state of acrosome sperm cells, and is associated with the consumption of large amounts of valuable human food - Chicken eggs In addition, they contain an excess amount of trihydric alcohol-glycerin, which has a toxic effect on spermatozoa during the period of exposure to freezing and the period of thawing of the seed.

Наиболее близкой по технической сущности и достигаемому результату вл етс среда, содержаща сахарозу в количестве 9.0-10.0 г, 2,4-ди-трет-бутил-1,4-крезол 0,015-0,050 г, кальциевый комплекс динатVJThe closest in technical essence and the achieved result is a medium containing sucrose in the amount of 9.0-10.0 g, 2,4-di-tert-butyl-1,4-cresol 0.015-0.050 g, calcium complex dinat VJ

ОABOUT

о о оLtd

соwith

риевой соли ЭДТА 0,8-0,9 г. глицерин 4,0- 6,0 мл, желток куриного йца 3,0-5,0 мл, дистиллированную воду до 100 мл.EDTA sodium salt 0.8-0.9 g. glycerin 4.0–6.0 ml, chicken egg yolk 3.0–5.0 ml, distilled water to 100 ml.

Однако эта среда не способна защитить сперматозоиды в процессе подготовки к замораживанию и во врем оттаивани от пе- рекисного окислени их мембран, что снижает биологическую полноценность сперматозоидов.However, this medium is not able to protect sperm cells during preparation for freezing and during thawing from transoxidation of their membranes, which reduces the biological usefulness of spermatozoa.

Целью изобретени вл етс повышение биологической полноценности сперматозоидов .The aim of the invention is to increase the biological usefulness of spermatozoa.

Среда дл разбавлени и криоконсерва- ции спермы сельскохоз йственных животных , включающа сахар, комплексную соль этилендиаминтетрауксусной кислоты, желток куриного лица, глицерин и воду, допол- нительно содержит ксантофилл и хлорофилл при следующем соотношении ингредиентов:The medium for diluting and cryopreserving sperm of farm animals, including sugar, ethylene diamine tetraacetic acid complex salt, chicken face yolk, glycerin and water, additionally contains xanthophyll and chlorophyll in the following ratio of ingredients:

Сахар, г9,9-10,1Sugar, 9.9-10.1

Комплексна сольComplex salt

этилендиаминethylenediamine

тетрауксуснойtetraacetic

кислоты, г0,69-0,71acids, g0,69-0,71

Желток куриногоChicken yolk

йца, мл5,0-7,0eggs, ml5.0-7.0

Глицерин, мл1,9-2,1Glycerin, ml1.9-2.1

Ксантофилл, г0,0001-0,0005Xanthophyll, 0,0001-0,0005

Хлорофилл, г0,0003-0,0005Chlorophyll, g0,0003-0,0005

Дистиллированна Distilled

вода, млДо 100water, mlDo 100

Выделение и очистку ксантофилла и хлорофилла провод т по методике T.W. Godwin (Chemistry and biochemistry of plant pigments. - London N.Y.: Academic press, 1965).Isolation and purification of xanthophyll and chlorophyll was carried out according to the method of T.W. Godwin (Chemistry and biochemistry of plant pigments. - London N.Y.: Academic press, 1965).

Пример 1. Отта нное сем разбавл ли в три раза средой, содержащей ингредиент и дистиллированную воду, доведенную до 100 мл,Example 1. Thawed seed was diluted three times with medium containing the ingredient and distilled water brought to 100 ml.

Результаты подбора оптимального соотношени ингредиентов среды представлены в табл.1-6.The results of the selection of the optimal ratio of medium ingredients are presented in Tables 1-6.

Оптимальное содержание желтка куриного йца в среде составл ет 5,0-7,0 мл.The optimum content of chicken egg yolk in the medium is 5.0-7.0 ml.

Оптимальное содержание глицерина в среде составл ет 1,9-2,1 мл.The optimal content of glycerol in the medium is 1.9-2.1 ml.

Оптимальное содержание ЭДТА в среде составл ет 0,69-0,71 г.The optimum content of EDTA in the medium is 0.69-0.71 g.

Оптимальное содержание ксантофила в среде составл ет 0,0001-0,0005 г.The optimal xanthophil content in the medium is 0.0001-0,0005 g.

Оптимальное содержание хлорофилла в среде составл ет 0,0003-0,0005 г.The optimum content of chlorophyll in the medium is 0.0003-0.0005 g.

Оптимальное содержание сахара в среде составл ет 9,9-10,1 г.The optimum sugar content in the medium is 9.9-10.1 g.

Пример 2. Сравнивают качество отта нного семени, разбавленного предлагаемой и известной средами.Example 2. Compare the quality of thawed seed diluted with the proposed and known media.

Результаты представлены в табл.2.The results are presented in table 2.

Предлагаема среда улучшает биологическую полноценность отта нного семени.The proposed medium improves the biological usefulness of thawed seed.

Пример 3. В совхозе на двух группахExample 3. In a state farm on two groups

овец кавказской породы в возрасте двух летCaucasian sheep breed at the age of two years

средней упитанности изучали вли ниеaverage fatness studied the effect

предлагаемой среды по сравнению с известной на выход гн т в расчете на 100 овцематок . Осеменение овец проведено в период 1-15 августа 1987 г. Овец осемен ли утром в 7 ч и вечером в 17 ч в групповом станке. Использовали оттаиватель конструкции И.И. Соколовской, влагалищный расширитель и шприц-катетер конструкции Ю.Н. Трофимова. Доза осеменени за один прием 0,2 мл с концентрацией 60-80 млн. сперматозоидов.the proposed medium compared to the known yield is calculated per 100 ewes. Sheep insemination was carried out in the period from 1 to 15 August 1987. Sheep was inseminated in the morning at 7 o'clock and in the evening at 17 o'clock in a group machine. Used defroster designs I.I. Sokolovskaya, vaginal dilator and syringe catheter designed by Yu.N. Trofimova. Insemination dose in a single dose of 0.2 ml with a concentration of 60-80 million spermatozoa.

Результаты опыта представлены в табл.8.The results of the experiment are presented in table 8.

Среда с добавлением ксантофилла и хлорофилла способствует повышению доли объ гнившихс овец от числа осемененныхThe medium with the addition of xanthophyll and chlorophyll promotes an increase in the proportion of the volume of rotten sheep in the number of inseminated

на 17,1% и увеличению выхода гн т в расчете на 100 осемененных овцематок на 19,2 головы.by 17.1% and an increase in yields per 100 inseminated ewes per 19.2 heads.

3535

Claims

Invention Formula

Medium for diluting and cryopreservation of seed of farm animals, including sugar, ethylene diamine tetraacetic acid complex salt, chicken egg yolk, glycerin, and water, in order to increase the biological usefulness of spermatozoa, the medium additionally contains xanthophyll and chlorophyll following ingredients:

Sugar, 9.9-10.1

Complex salt

ethylenediamine

tetraacetic acid, g0,69-0.71

Chicken yolk

yatsa ml5-7

Glycerin, ml 1.9-2.1

Xanthophyll, g0,0001-0,0005 Chlorophyll, 0.0003-0,0005 g

Distilled

water, mlDo 100

Table 1

table 2

Table 3

Table 4

Table 5

Table 6

p 0.05.

Table 7

Table 8