SU1702317A1 - Способ определени инсулина в эритроцитах - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к клинической биохимии, а именно к количественному определению инсулина, локализованного на мембранах эритроцитов крови человека, и предназначено дл  использовани  в медицине . Цель изобретени  - снижение трудоемкости и сокращение времени исследовани . Способ заключаетс  в отмывании эритроцитов крови физиологическим раствором с последующим добавлением 20%- ного раствора твин-20 в объемном соотношении 1:1, инкубированием его в течение 30-40 мин при 18-20°С. Далее осуществл ют в полученном растворе радиоиммунологическое определение содержани  инсулина. Положительный эффект способа обусловлен значительным снижением трудоемкости, а также сокращением времени исследовани .

Description

СП

С

Изобретение относитс  к клинической биохимии, а именно к количественному определению инсулина, локализованного на мембранах эритроцитов крови человека, и предназначено дл  использовани  в медицине .

Цель изобретени  - снижение трудоемкости и сокращение времени исследовани .

Поставленна  цель достигаетс  тем, что после отмывани  в физиологическом растворе эритроциты обрабатывают 20%-ным раствором твин-20 в объемном соотношении 1:1 в течение 30-40 мин при 18-20°С и в полученном растворе определ ют содержание инсулина методом радиоиммунологического анализа,

Способ подтверждаетс  следующими примерами.

Пример 1. Испытуемый А., м., 30 лет. Диагноз: практически здоров. Кровь в количестве 2,0 мл забирают из кубитальной вены и центрифугируют при 2000д в течение 15 мин. Плазму отбирают и к оставшейс  эрит- роцитарной массе добавл ют 10,0 мл физиологического раствора. Перемешивают, центрифугируют, удал ют супернатант и еще дважды отмывают клетки физиологическим раствором. К 0,2 мл эритроцитарной массы добавл ют 0,2 мл 20%-ного раствора твин-20 и инкубируют 40 мин при 18-20°С, периодически встр хива  содержимое пробирки . Берут 0,1 мл полученного раствора и определ ют в нем радиоиммунологическим методом содержание инсулина согласно инструкции, прилагаемой к наборам Содержание инсулина составило 538,9 ммоль/л.

VI

О ND СО

А

VJ

Положительный эффект способа подтверждаетс  тем, что в предлагаемом способе по сравнению с прототипом более чем в два раза снижаютс  временные затраты и трудоемкость метода, за счет чего и дости- гаетс  цель изобретени . Кроме того, предлагаемый способ позвол ет проводить определение инсулина в эритроцитах в серии , состо щей из 100 проб, что дает воз- мо|жность использовать метод дл  проведени  массовых обследований.

У одних и тех же пациентов проведено определение уровн  инсулина в эритроцитах с помощью предлагаемого способа по сравнению с прототипом. При использова- нии предлагаемого способа уровень инсулина составил 116,44± 6,62 ммоль/л (п 10), по способу-прототипу - 58,73±1,58 ммоль/л (п 1iO). Следовательно, при использовании предлагаемого способа концентрации инсу- лина более чем в 2 раза выше, чем при применении прототипа, что указывает на более высокую точность предлагаемого способа. Это вполне объ снимо, так как при использовании твин-20 определ ютс  все формы инсулина эритроцитов, в то врем  как в прототипе регистрируетс  только свободный инсулин эритроцитов человека.

Claims (1)

1. Формула изобретени  Способ определени  инсулина в эритроцитах путем отмывани  эритроцитарной массы физиологическим ра&твором с последующим количественным анализом, отличающийс  тем, что, с целью снижени  трудоемкости и сокращени  времени исследовани , к эритроцитарной массе добавл ют 20%-ный раствор твин-20 в объемном соотношении 1:1, инкубируют 30-40 мин при 18-20°С и в полученном растворе производ т радиоиммуннологическое определение содержани  инсулина.