SU1698780A1 - Способ вы влени патологического состо ни организма - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к медицине , а именно к иммунологии, и может быть использовано дл  динамической характеристики и прогнозировани  течени  воспалительных заболеваний путем оценки активности системы комплемента Целью изобретени   вл етс  Изобретение относитс  к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано дл  динамической характеристики и прогнозировани  течени  воспалительных заболеваний. Целью изобретени   вл етс  повышение точности, сокращение времени и снижение трудоемкости. Способ осуществл етс  следующим образом. Кровь центрифугируют в режиме 4000 g 5 мин, сыворотку сразу отдел - ют от сгустка и при необходимости хран т до использовани  при -70°С. повышение точности способа, сокращение времени, снижение трудоемкости. Дл  осуществлени  способа кровь центрифугируют в режиме 4000 g 5 мин. Готов т реакционную смесь, включающую соответствующий буфер, исследуемую сыворотку и взвесь эритроцитов кролика (альтернативный путь активации комплемента) или сенсибилизированных эритроцитов барана (классически . путь). Измерени  производит путем периодической регистрации количества- эритроцитов, подвергающихс  лизису в процессе активации системы комплемента с помощью лабораторного счетчика частиц Picoseal при комнатной температуре . В соответствии с данными динамического измерени  стро т кривые лизиса эритроцитов, отражающие функциональные возможности системы комплемента у здоровых и больных детей . Положительный эффект способа подтверждаетс  клиническим материалом . I IB Дл  исследовани  кинетики активации системы комплемента по классическому пути готовили изотонический раствор вероналмединалового буфера (рй 7,4), состо щего из 2,875 г веронала , 1500 мг мединалаи 42,500 г хлорида натри  в 1,0 мл дистиллиро- ванно 4 воды, к полученному раствору добавл ли 2,5 мл 1 М хлорида магни  и 0,75 мл 1 М хлорида кальци . Исследование кинетики активации комплемента по альтернативному пути проводили с использованием 100 мл 0,1 М этиленгликольтетрауксусС со 00 00

Description

кой кислоты и 50 мп 0,1 М хлорида магни  (рН 7,4).

Сенсибилизированные эритроциты барана , представл ющие собой иммунные комплексы антиген-антитело, использовали дл  активации классического пути системы комплемента, эритроциты кролика - дл  активации альтернативного пути. Эритроциты разводили перед использованием соответствующим буфером до концентрации 10 клеток/мл. Все измерени  производили с помощью лабораторного прибора дл  подсчета частиц Picoscal.

К 1,5 мл буфера добавл ли 300 мкл исследуемой сыворотки и 7,5 мкл пензии эритроцитов. Измерение количества эритроцитов производили сразу же после смешивани  всех компонентов реакции и затем через 10 мин в течение 30 мин. Реакци  протекает при комнатной температуре.

В соответствии, . данными динамического измерени  строили кривые кинетики лизиса эритроцитов, выражающиес  соотношением N - f(T), где N - число гемолитических единиц, соответ ствующее показани м счетчика эритроцитов Picoscal ; Т - врем  исследовани  .

Способ подтверждаетс  следующими примерами.

Пример 1. Больной А. Диагноз: двусторонн   бронхопневмони , средне-т жела  форма.

Кровь в количестве 50 мкл брали у детей в день исследовани  и центрифугировали 5 мин при 4000 g. Дл  опре- делени  кинетики активации системы комплемента по классическому пути к

0

1,5 мл веронал-мединалового буфера, содержащего ионы кальци  и магни , добавл ли 30 мкл исследуемой сыворотки и 7,5 мкл сенсибилизированных эритроцитов барана в концентрации 10 клеток/мл . Измерение числа эритроцитов в смеси производили через каждые 10 мин в течение 30 мин при комнатной температуре с помощью лабораторного счетчика частиц Picoscal.

Результаты кинетического исследовани  системы .комплемента у больных представлены графически. Отклонение кривой Ч. от нормы составл ет + 120 гем.ед., а кривой А --180 гем.ед, что свидетельствует о нарушении резервов иммунной системы у этих дете й в св зи с развитием у них т желых воспалительных заболеваний.

Положительный эффект способа подтверждаетс  данными, показывающими достижение цели изобретени .

Claims (1)

1. 25 Формула изобретени 

   Способ вы влени  патологического состо ни  организма путем определени  активности системы комплемента по лизису эритроцитов в исследуемой сыворотке, отличающийс  тем, что, с целью повышени  точности, сокращени  времени, снижени  трудоемкости способа при обследовании детей , готов т одно разведение исследуемой , сыворотки, провод т пр мой подсчет количества оставшихс  нелизи- рованных эритроцитов в течение 30 мин и оценивают патологическое состо ние организма по отклонению полученной кинетической кривой от эталонной кривой здоровых доноров.