SU1665306A1 - Способ оценки иммунорегул торной активности лимфоцитов - Google Patents
Способ оценки иммунорегул торной активности лимфоцитов Download PDFInfo
- Publication number
- SU1665306A1 SU1665306A1 SU874289279A SU4289279A SU1665306A1 SU 1665306 A1 SU1665306 A1 SU 1665306A1 SU 874289279 A SU874289279 A SU 874289279A SU 4289279 A SU4289279 A SU 4289279A SU 1665306 A1 SU1665306 A1 SU 1665306A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- lymphocytes
- membrane
- membranes
- proliferation
- immunoregulatory
- Prior art date
Links
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к медицине и может быть использовано дл диагностики растройств иммунорегул торных процессов в иммунной системе по оценке иммунорегул торной активности лимфоцитов. Цель изобретени - повышение точности и упрощение способа. Дл этого исследуемые лимфоциты дел т на две части, каждую из которых культивируют в течение 24 ч на полупроницаемых мембранах, одну - в присутствии конканавалина А, а другую - без него, после чего мембраны с лимфоцитами располагают друг над другом в среде с конканавалином А и культивируют 72 ч совместно, в услови х, исключающих возможность смешивани попул ций, регистрируют пролиферативную активность лимфоцитов об обоих попул ци х. Способ позвол ет сократить врем исследовани и получить больше информации об иммунорегул торной активности лимфоцитов, что повышает точность исследовани .
Description
Изобретение относитс к медицине, точнее к клинической иммунологии, и может быть использовано дл диагностики расстройств иммунорегул торных процессов в иммунной системе.
Цель изобретени - повышение точности способа и его упрощение.
Способ осуществл етс следующим образом .
При проведении экспериментов по оценке иммунорегул торной активности берут три сосуда дл культивировани со средой культивировани . В первый сосуд помещают две полупроницаемые мембраны AI и Аа, на которые нанос т по 0,5x10 исследуемых мононуклеарных клеток, а в среду культивировани добавл ют конканавалин А таким образом, что его концентраци составл ет 5 мкг/мл. Во второй сосуд помещают такие же две полупроницаемые мембраны Вт и В2, на которые также нанос т по 0,5x106 исследуемых клеток, но вереду культивировани конканавалин А не добавл ют. В третий сосуд помещают полупроницаемые мембраны Ci и С2, на которые не нанос т исследуемых клеток, а в среду культивировани не добавл ют конканавалин А. Все три сосуда с мембранами инкубируют при 37°С 24 ч. За это врем на мембранах AI и А2 под вли нием конканавалина А происходит индукци иммунорегул торных клеток.
На следующем этапе эксперимента дл того, чтобы определить, как иммунор егул - торные клетки, индуцированные на мембранах AI и А2, вли ют на пролиферацию лимфоцитов на мембранах Bi и В2, и наоборот , совмещают мембраны AI и Bi одну над
О О
ел
СА)
О
о
другой, разделенные тонким слоем среды культивировани , и стимулируют пролиферацию лимфоцитов на мембране Bi вторич- ным добавлением конканавалина А. Совмещение мембран А2 и Ci и добавление конканавалина А в среду культивировани обеспечивает контроль пролиферации лимфоцитов на мембране AI в отсутствие вли ни лимфоцитов, растущих на мембране Bi.
Совмещение мембран Ва и С2 и добавление в среду конканавалина А обеспечивает кон1 троль пролиферации лимфоцитов на мембране Bi в отсутствие вли ни со стороны лимфоцитов, растущих на мембране Аи Все
три сосуда с совмещенными мембранами
| инкубируют при 37°С еще 72 ч, а затем на каждой мембране в отдельности определ ют уровень пролиферации лимфоцитов радиоиммунологическим методом.
10 мл крови здорового донора, вз той в раствор с этилендиаминтетрауксусной кислотой (10 мл крови на 2 мл 2,7%-ного раствора) наслаивают на раствор фиколла- верографина, имеющего плотность 1,077. После центрифугировани при 400 G 45 мин собирают мононуклеарные клетки, сконцентрировавшиес над слоем фиколла, трижды отмывают центрифугированием в фосфатном буфере (1500 об/мин 15 мин), ресуспендируют в среде 199, содержащей
0
5
0
5
0
20% инактивированной сыворотки человека , антибиотики, глютамин. Довод т концентрацию клеток до ЮхЮ6 в мл. Нанесение мононуклеарных клеток на мембраны , культивирование и совмещение мембран осуществл ли согласно методике. Уровень пролиферации составил: на мембране AI 1048 имп/ммн, на мембране А2 839 имп/ммн, на мембране Bi 537 имп/мин, на мембране В2 3820 имп/мин, на мембранах Ci и С2 60 имп/мин.
Таким образом, попул ци мммунорегу- л торных клеток, индуцированных на мембране AI, подавл ла пролиферацию лимфоцитов на мембране BI по сравнению с их пролиферацией в аналогичных услови х , но при отсутствии вли ни со стороны иммунорегул торных клеток (совмещение мембран Вг и С2). Попул ци лимфоцитов, пролиферирующих на мембране BL стимулировала рост иммунорегул торных клеток на мембране Ai no сравнению с их ростом в отсутствии вли ни со стороны лимфоцитов мембраны Ai (совмещение мембран Аа и Ci),
Дл характеристики степени регулирующего вли ни , оказываемого лимфоцитами мембраны AI на пролиферацию лимфоцитов на мембране В-,, вычисл ли индекс регул ции (ИРО
/ уровень пролиферации на мембране BI)
уровень пролифе
на мембране Ва
уровень пролиферации на мембране &2
Дл характеристики степени регулирующего вли ни , оказываемого лимфоцитами , растущими на мембране Bi, на
/ уровень пролиферации на мембране AI
}
уровень пролифе на мембране А2
уровень пролиферации на мембране Аа
Дл данного донора величина HPi составила - 16%. а ИР2 24%.
П р и м е р 1. Выдел ли мононуклеарные клетки из крови больной системной красной волчанкой и разносили их на полупроницаемые мембраны. После культивировани клеток, совмещени мембран, оценки пролиферации на каждой из них и вычислени индексов регул ции получили следующие результаты: уровень пролиферации на мембране Ai 2500 имп/мин, AZ 500 имп/мин, Bi 1500 имп/мин, В2 1570 имп/мин, ИР1 - 4,5%, ИРа 400%. Эти данные указывают на отсутствие выраженного супрессор- ного действи иммунорегул торных клеток
уровень пролиферации
на мембране Ва
/
на мембране &2
- X 130
пролиферацию иммунсрегул торных клеток на мембране AI, вычисл ли индекс регул ции (ИР2)
уровень пролиферации на мембране А2 /
на мембране Аа
X 100
мембраны AI на пролиферацию л, (фоцмтоз мембраны В2.
П р и м е р 2. Выдел ли иононуклеарные клетки из крови больного с вторичным иммунодефицитом , разносили на полупроницаемые мембраны. После культивировани клеток, совмещени мембран, оценки пролиферации на каждой из них м вычислени индексов регул ции получили следующие результаты: уровень пролиферации на мембране AI 1400 имп/мин, А2 700 имп/мик, Bi 100 имп/мин, 82 2100 имп/мин, HPi -91 %, ИР2 100%. Таким образом, на про- лифермрующих клетках мембраны Bi зарегистрировано гиперсупрессорное действие, оказываемое иммунорегул торньши клетками , растущими на мембране AI (ИPi - -91 %), а на иммунорегул торных клетках мембраны AI зарегистрировано хелперное (усиливающее) действие, сказы ваемое на них пролиферирующими клетками мембраны Bi (ИР2 100%).
Таким образом, предлагаемый способ в отличие от известного вл етс более быстрым , экономичным, более оправданным с точки зрени врачебной этики, а также дающим больший объем научной информации о процессах взаимодействи попул ции им- мунокомпетентных клеток у человека, позвол ющей повысить точность способа. Нарушени таких взаимодействий привод т к возникновению различных иммунопатологических состо ний. Положительный эффект изобретени заключаетс в разработке простого, пригодного дл клиники способа, позвол ющего регистрировать нарушени таких взаимодействий, контролировать эффективность иммунокоррегиру- ющей терапии вторичных и первичных иммунодефицитов, в том числе и синдрома
0
5
0
5
приобретенного иммунодефицита, проблемы диагностики и лечени которого привлекают в насто щее врем внимание исследователей всего мира.
Claims (1)
- Формула изобретени Способ оценки иммунорегул торной активности лимфоцитов путем культивировани исследуемых лимфоцитов в присутствии конканавалина А с последующим их взаимодействием с тест-системой лимфоцитов того же донора и оценкой пролифе- ративной активности тест-системы, отличающийс тем, что, с целью повышени точности способа и его упрощени , культивирование исследуемых лимфоцитов и тест- системы осуществл ют одновременно на отдельных полупроницаемых мембранах в течение 24 ч, взаимодействие лимфоцитов ведут путем расположени мембран друг над другом в среде, содержащей конканава- лин А в течение 72 ч, и дополнительно оценивают пролиферативную активность исследуемых лимфоцитов.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU874289279A SU1665306A1 (ru) | 1987-06-19 | 1987-06-19 | Способ оценки иммунорегул торной активности лимфоцитов |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU874289279A SU1665306A1 (ru) | 1987-06-19 | 1987-06-19 | Способ оценки иммунорегул торной активности лимфоцитов |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1665306A1 true SU1665306A1 (ru) | 1991-07-23 |
Family
ID=21321383
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU874289279A SU1665306A1 (ru) | 1987-06-19 | 1987-06-19 | Способ оценки иммунорегул торной активности лимфоцитов |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU1665306A1 (ru) |
-
1987
- 1987-06-19 SU SU874289279A patent/SU1665306A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Стенина М.А. и др. Бюллетень эксп. би- ол. и медицины. 1986, № 8, с. 215-218. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Richards et al. | Blood-pressure response to moderate sodium restriction and to potassium supplementation in mild essential hypertension | |
| Strong et al. | In vitro stimulation of murine spleen cells using a microculture system and a multiple automated sample harvester | |
| Bullock Jr et al. | Studies of immune mechanisms in leprosy: III. The role of cellular and humoral factors in impairment of the in vitro immune response | |
| Olding et al. | Thymus-derived peripheral lymphocytes from human newborns inhibit division of their mothers' lymphocytes | |
| Rammelkamp et al. | A method for determining the concentration of penicillin in body fluids and exudates | |
| Miller et al. | Scanning electron microscopy studies in muscular dystrophy | |
| Doria et al. | Enhancing activity of thymocyte culture cell-free medium on the in vitro immune response of spleen cells from neonatally thymectomized mice to sheep RBC | |
| Murph et al. | The natural history of acquired cytomegalovirus infection among children in group day care | |
| Peitersen et al. | The incidence of herpes zoster antibodies in patients with peripheral facial palsy1 | |
| Dancis et al. | The prognosis of hyperlysinemia: an interim report. | |
| Shagass et al. | Reactivity cycle of somatosensory cortex in humans with and without psychiatric disorder | |
| Ogryzlo | The LE (lupus erythematosus) cell reaction | |
| Young et al. | Suppressive effect of alcoholic liver disease sera on lymphocyte transformation | |
| Faine et al. | Rapid microbiological assay of antibiotic in blood and other body fluids | |
| Dixon et al. | Immune recognition of Echinococcus granulosus. 1. Parasite‐activated, primary transformation by normal murine lymph node cells | |
| Miller et al. | Host immune status in uraemia. I. Cell-mediated immune mechanisms. | |
| SU1665306A1 (ru) | Способ оценки иммунорегул торной активности лимфоцитов | |
| Spink et al. | Diagnostic criteria for human brucellosis: Report No. 2 of the national research council, committee on public health aspects of brucellosis | |
| Meredith et al. | Age-related changes in the PHA: Con A stimulatory ratios of cells from spleens of a long-lived mouse strain | |
| Sivanandan et al. | Immune profile of infectious bursal disease (IBD). II. Effect of IBD virus on pokeweed-mitogen-stimulated peripheral blood lymphocytes of chickens | |
| Kondo et al. | Effects of serum from human subjects of various ages on proliferation of human lung and skin fibroblasts | |
| SU1455317A1 (ru) | Способ дифференциальной диагностики стволового и полушарного ишемического инсульта при нарушении мозгового кровообращени | |
| Ferguson et al. | Correlation of cutaneous hypersensitivity with lymphocytic response to Candida albicans | |
| Gery et al. | Transformation of lymphocytes from patients with rheumatic fever by streptolysin S | |
| Grayston et al. | Adenoviruses. I. The effect of total incubation time in HeLa cell cultures on the isolation rate |