SU1652342A1 - Способ получени пепсина рыб - Google Patents
Способ получени пепсина рыб Download PDFInfo
- Publication number
- SU1652342A1 SU1652342A1 SU894709574A SU4709574A SU1652342A1 SU 1652342 A1 SU1652342 A1 SU 1652342A1 SU 894709574 A SU894709574 A SU 894709574A SU 4709574 A SU4709574 A SU 4709574A SU 1652342 A1 SU1652342 A1 SU 1652342A1
- Authority
- SU
- USSR - Soviet Union
- Prior art keywords
- pepsin
- fish
- centrifuged
- incubated
- activity
- Prior art date
Links
Landscapes
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относитс к биотехнологии , а именно к способу получени пепсина из внутренних органов рыб. Цель изобретени -повышение удельной активности целевого продукта и его выхода, а также упрощение способа. Способ заключаетс в том, что в качестве сырьевого источника пепсина используетс вс масса внутренних органов, содержащихс в брюшной полости рыб (желудок, кишечник, печень, почки и т.д.), которые гомогенизируют в растворе рН 2-6, Гомогенат инкубируют в течение 3-20 ч при комнатной температуре и центрифугируют. Значение рН супернатан- та довод т до 1,7-2.4 и инкубируют 15-30 мин при комнатной температуре. Значение рН довод т до 4,4 центрифугируют, диализу- ют и подвергают очистке методом ионообменной хроматографии на ДЭАЭ-носителе. Удельна активность пепсина по отношению к гемоглобину равна 1400-2800 ед/мг белка, выход по активности равен 30-87%. Ё
Description
Изобретение относитс к биотехнологии , а именно к способу получени препарата пепсина из внутренних органов рыб, который может найти применение в научно- исследовательской де тельности, медицине, пищевой и кожевенной промышленности.
Цель изобретени - повышение удельной активности целевого продукта и его выхода , а также упрощение способа.
Способ заключаетс о том, что в качестве сырьевого источника пепсина используют всю массу внутрених органов, содержащихс в брюшной полости рыб (желудок , кишечник, печень, почки и т.д.), которые гомогенизируют в растворе рН 2-6. Затем гомогенат инкубируют в течение 3-20 ч при комнатной температуре и центрифугируют в течение 30 мин при 19000 д, 4°С. Дл активации пепсиногена рН гомогената довод т до 1,7-2.4 и инкубируют 15-300 мин при комнатной температуре. Дл окончани реакции активации рН поднимают до 4,4 с помощью 4 М раствора ацетата натри . Дл отделени образовавшегос осадка раствор центрифугируют при 19000 g в течение 40 мин. Супернатант диализуют против 5 мМ ацетатного буфера, рН 5, а в последствии нанос т на колонку с ДЭАЭ-носителем, уравновешенным тем же буфером. Ферментативную активность элюируют тем же буфером . Удельна активность пепсина по отношению к гемоглобину равна 1400-2800 ед/мг белка. Выход по активности равен 30-87%.
э ел
N3 CJ J hO
При проведении гомогенизации при рН выше 6 наблюдают понижение удельной активности целевого продукта. Аналогичный эффект наблюдают в растворах с рН ниже 2. Экстракци пепсина в течение менее 3 ч приводит к понижению выхода. В интервале 3-20 ч величина выхода не измен етс . 20-часовую экстракцию провод т в течение ночи, что позвол ет более рационально проводить процесс. Дальнейшее увеличение времени экстракции нецелесообразно.
Инкубаци ферментного раствора при рН выше 2,4 и ниже 1,7 приводит к понижению удельной активности целевого продукта и его выхода.
Врем инкубации пепсина при кислых рН выбрано на основании того факта, что при инкубации меньше 15 мин удельна активность пепсина невысока. Вместе с тем инкубаци в течение более 300 мин (по-видимому , за счет инактивации) понижает величину активности целевого продукта.
Пример1.175г внутренних органов мойвы гомогенизируют в 500 мл 5 мМ ацетатного буфера, рН 5. Гомогенат инкубируют в течение 20 ч при комнатной температуре, а затем центрифугируют в течение 30 мин при 19000 д, 4°С. Дл активации пепсиногена рН гомогената довод т до 2 с помощью 2 н. HCI и инкубируют 30 мин при комнатной температуре. Дл окончани реакции активации рН поднимают до 4,4 с помощью 4 М раствора ацетата натри . Дл отделени образовавшегос осадка раствор центрифугируют при 19000 g в течение 40 мин. Супернатант диализу ют против 5 мМ ацетатного буфера, рН 5. а впоследствии нанос т на колонку с ДЭАЭ-целлюлозой, уравновешенной тем же буфером. Ферментативную активность элюируют тем же буфером . Удельна активность пепсина по отношению к гемоглобину равна 1400 ед/мг белка. Выход по активности равен 64%.
П р и м е р 2.175 г внутренних органов анчоуса гомогенизируют в 500 мл 10 мМ HCI, рН 2. Гомогенат инкубируют в течение 30 мин при 19000 д, 4°С. Дл окончани реации активации рН поднимают до 4,4 с помощью 4 М раствора ацетата натри . Дл отделени образовавшегос осадка раствора центрифугируют при 19000д в течение 40 мин. Супернатант диализуют против 5 мМ ацетатного буфера, рН 5, а впоследствии нанос т на колонку с ДЭАЭ-целлюлоэой, уравновешенной тем же буфером. Ферментативную активность элюируют тем же буфером . Удельна активность пепсина по отношению к гемоглобину равна 1400 ед/мг белка. Выход по активности равен 87%.
П р и м е р 3. 175 г внутренних органов анчоуса гомогенизируют в 500 мл 5 мМ ацетатного буфера, рН 6. Гомогенат инкубируют в течение 4 ч при комнатной
температуре, а затем центрифугируют в течение 30 мин при 19000 д, 4°С. Дл активации пепсиногена рН гомогената довод т до 1,7 с помощью 2 н. HCI и инкубируют 15 мин при комнатной температуре. Дл окончани
реакции активации рН поднимают до 4.4 с помощью 4 М раствора ацетата натри . Дл отделени образовавшегос осадка раствор центрифугируют при 19000 g в течение 40 мин. Супернатант диализуют против 5 мМ
ацетатного буфера, рН 5. а впоследствии нанос т на колонку с ДЭАЭ-сферонитом, уравновешенным тем же буфером. Ферментативную активность элюируют тем же буфером . Удельна активность пепсина по
отношению к гемоглобину равна 1500 ед/мг белка. Выход по активности равен 37%.
П р и м е р 4. 175 г внутренних органов сельди гомогенизируют в 500 мл 5 мМ ацетатного буфера, рН 4. Гомогенат инкубируют в течение 3 ч при комнатной температуре, а затем центрифугируют в течение 30 мин при 19000 д, 4°С. Дл активации пепсиногена рН гомогената довод т до 2,4 с помощью 2 н.НС и инкубируют 300 мин
при комнатной температуре. Дл окончани реакции активации рН поднимают до 4,4 с помощью 4 М раствора ацетата натри . Дл отделени образовавшегос осадка раствора центрифугируют при 19000 g в течение 40
мин. Супернатант диализуют против 5 мМ ацетатного буфера, рН 5, а впоследствии нанос т на колонку с ДЭАЭ-сфероном, уравновешенным тем же буфером. Ферментативную активность элюируют тем же
буфером. Удельна активность пепсина по отношению к гемоглобину равна 2800 ед/мг белка. Выход по активности равен 30%.
45
Claims (1)
- Формула изобретениСпособ получени пепсина рыб. включающий гомогенизацию исходного сырь , активацию и очистку, отличающийс тем, что, с целью повышени удельной активности целевого продукта и его выхода, атакже упрощени способа, в качестве исходного сырь используют все внутренние органы из брюшной полости рыб, гомогенизацию ведут в растворе с рН 2-6 в течение 3-20 ч, активацию провод т при рН1,7-2,4 в течение 15-300 мин, а очистку осуществл ют методом ионообменной хроматографии на анионообменнике, содержащем диэтиламиноэтильные группы.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU894709574A SU1652342A1 (ru) | 1989-06-26 | 1989-06-26 | Способ получени пепсина рыб |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SU894709574A SU1652342A1 (ru) | 1989-06-26 | 1989-06-26 | Способ получени пепсина рыб |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SU1652342A1 true SU1652342A1 (ru) | 1991-05-30 |
Family
ID=21456272
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU894709574A SU1652342A1 (ru) | 1989-06-26 | 1989-06-26 | Способ получени пепсина рыб |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| SU (1) | SU1652342A1 (ru) |
-
1989
- 1989-06-26 SU SU894709574A patent/SU1652342A1/ru active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Sanchez-Chiang L, Cisternas Е., Pones О. Partlae purification of pepsins from aduet and juvenal salmon fish Orcorhynchus keta. - Comporative Biochemistry and Physiology, 1987, v. 87 B, p. 793-797. Gllberg A. Purification and characterization of pepsins arctic fish Mallotus villonis. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES8104412A1 (es) | Procedimiento para la preparacion de un hidrolizado de pro- teinas purificado. | |
| SE7505716L (sv) | Enzymatiskt forfarande for hydrolysering av protein. | |
| Fruton et al. | The mechanism of pepsin action | |
| Hashimoto et al. | Studies on Xylanase from Trichoderma viride Part I. Isolation and Some Properties of Crystalline Xylanase | |
| NO167676C (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av dermatan-sulfat av hoey renhet. | |
| SU1652342A1 (ru) | Способ получени пепсина рыб | |
| IE801358L (en) | Gelling of whey proteins. | |
| Kagan et al. | Activity of glutamine synthetase toward threo-γ-methyl-L-glutamic acid and the isomers of γ-hydroxyglumatic acid | |
| IE42521L (en) | Treating a sodium lauryl sulphate-whey protein complex. | |
| Srere et al. | Citrate lyase: a pantothenate-containing enzyme | |
| JP2590373B2 (ja) | 新規なすり身とその製造方法 | |
| FR2548671B1 (fr) | Procede de preparation de globine a partir d'hemoglobine et globine obtenue par ce procede | |
| Larson et al. | Production, Isolation and Components of the Antibiotic Streptolin1 | |
| US4650762A (en) | Isolation of carboxypeptidase B enzyme | |
| SU1723123A1 (ru) | Способ получени пепсина | |
| Pruess et al. | ANTIMETABOLITES PRODUCED BY MICROORGANISMS. XI. 1) 1-(S)-HYDROXY-2-(S, S)-VALYLAMIDO-CYCLOBUTANE-1-ACETIC ACID | |
| Weiss et al. | Formation of lodinated Protein in Saliva | |
| US2876169A (en) | Riboflavin process | |
| SU975797A1 (ru) | Способ выделени лейцинаминопептидазы из aSpeRGILLUS oRYZae | |
| US2953499A (en) | Process for producing l-glutamic acid from hardly soluble amino-acid | |
| SU663714A1 (ru) | Способ получени анатоксина | |
| SU860765A1 (ru) | Способ получени белкового гидролизата | |
| JPH08238059A (ja) | 低アレルゲン性乳蛋白質の製造法 | |
| Peters et al. | Isolation of the Lactobacillus bulgaricus Factor from Natural Sources1 | |
| RU2278166C1 (ru) | Способ получения белкового гидролизата |