SU1649446A1

SU1649446A1 - Method for disaggregation of thrombocytes

Info

Publication number: SU1649446A1
Application number: SU894607941A
Authority: SU
Inventors: Александр Николаевич Тулупов; Наталия Анатольевна Щеглова; Леонид Николаевич Шейпак; Лев Васильевич Филев; Андрей Николаевич Бельских; Рамона Ивановна Русинова; Арслан Чуриевич Акмурадов
Original assignee: Военно-Медицинская Краснознаменная Академия Им.С.М.Кирова; Всесоюзный Научно-Исследовательский Институт Особо Чистых Биопрепаратов
Priority date: 1989-11-25
Filing date: 1989-11-25
Publication date: 1991-05-15

Abstract

Изобретение относитс к медицине и касаетс способа дезагрегации тромбоци- тоз с применением вещества интерлок в качестве дезагреганта тромбоцитов. Цель изобретени - повышение степени дезагрегации тромбоцитов. Способ осуществл етс путем инкубации тромбоцитов, взвешенных в плазме крови с препаратом интерлок, в конечной концентрации 50-500 ед/п в течение 2-4 ч. 3 табл.The invention relates to medicine and relates to a method for disaggregating thrombocytosis using an interlock substance as a platelet disaggregant. The purpose of the invention is to increase the degree of platelet disaggregation. The method is carried out by incubating platelets suspended in blood plasma with an interlock preparation in a final concentration of 50-500 units / p for 2-4 hours. 3 tab.

Description

Изобретение относитс к медицине, а именно к веществам, обладающим дезагре- гантным воздействием на тромбоциты крови .The invention relates to medicine, namely to substances having a disintegrant effect on blood platelets.

Цель изобретени - повышение степени дезагрегации тромбоцитов за счет инкубации тромбоцитов с препара том интерлок в конечной концентрации 50- 500 ед/л в течение 2-4 ч.The purpose of the invention is to increase the degree of platelet disaggregation by incubating platelets with an interlock preparation at a final concentration of 50-500 units / l for 2-4 hours.

Способ осуществл ют следующим образом .The method is carried out as follows.

В 4 силиконированные кварцевые кюветы емкостью 2 мл помещали плазму венозной стабилизированной при помощи 3,8%-ного раствора нитрата натри в соотношении 1:9 крови больных с тромбоцитами в концентрации 300-400 10 /л. Первую пробу исследовали сразу. Во вторую кювету вносили раствор интерлока до конечной концентрации в пробе 50-500 ед/л, в третью - такое же количество по объему раствора персантина до конечной концентрации 3-4 мг/л (прототип), в четвертую такое же количество (20 мкл) физиологического раствора (контроль). Вторую, тре i ью п четвертую кюветы инкубировали при +37° С в течение 2-4 ч. Дл индукции агрегации в пробы добавл ли аденозиндифосфат фирмы Reanal ВНР в конечной концентрации 3 -10 Ми фотоэлектрометрическим способом регистрировали процесс агрегации и дезагрегации тромбоцитов. 8 работе использовано устройство, измерительной частью которого был фотоэлектроколиметр ФЭК-56М, регистрирующей частью - лабораторный компенсационный дфухкоорди- натный самопишущий прибор ЛКД-4. Перемешивание тромбоцитов в кювете производили круглой фторопластовой мешалкой со скоростью вращени 500-700 оборотов в минуту.In 4 siliconized 2 ml quartz cuvettes, plasma of venous stabilized with the help of 3.8% sodium nitrate solution was placed in a ratio of 1: 9 in blood of patients with platelets at a concentration of 300-400 10 / l. The first sample was examined immediately. An interlock solution was applied to the second cuvette to a final concentration in the sample of 50-500 units / l, in the third - the same amount by volume of persantin solution to a final concentration of 3-4 mg / l (prototype), in the fourth the same amount (20 μl) saline (control). The second, third, and fourth cells were incubated at + 37 ° C for 2-4 hours. To induce aggregation, Reanal BHP adenosine diphosphate was added to the samples in a final concentration of 3 -10 Mi and platelet disaggregation was recorded by photoelectrometric method. In this work, a device was used, the measuring part of which was the FEK-56M photoelectrocolimeter, the recording part — the laboratory compensating dual-coordinate self-recording LCD-4 instrument. The mixing of the platelets in the cuvette was carried out with a round fluoroplastic agitator with a rotational speed of 500-700 revolutions per minute.

В качестве основного показател тром- боцитарной агрегатограммы вз та степень дезагрегации тромбоцитов относительно степени их агрегации под действием адено- зиндифосфата В норме этот показатель состаал л от 70 до 100%, при патологии показатель снижалс вплоть до нул .As the main indicator of the platelet aggregatogram, the degree of disaggregation of platelets relative to the degree of their aggregation under the action of adenosine diphosphate was taken. Normally, this indicator was from 70 to 100%; in pathology, the indicator decreased down to zero.

Дезагрегантна активность интерлока зарегистрирована на тромбоцитах 64 хирургических т желобольных. У 24 из них диагностированы острые абсцессы и гангрена легких, у 20 - остра эмпиема плезры и пиопневмоторакс, у 12 - острый сепсис, у 18 -рак легкого. Результаты проведенного исследовани изложены в табл 1-3.Interaglok disaggregant activity is registered on platelets of 64 surgical patients. Acute abscesses and gangrene of the lungs were diagnosed in 24 of them, pleural empyema and pyopneumothorax acute in 20, acute sepsis in 12, acute lung cancer in 18. The results of the study are set out in Tables 1-3.

Как видно из табл, 1 и 2, отклонение от граничных (оптимальных) значений указанных параметров в строну увеличени приводит к снижению дезагрегантной активности интерлока или к увеличению продолжи тельности анализаAs can be seen from Tables 1 and 2, the deviation from the boundary (optimal) values of the indicated parameters in the direction of increase leads to a decrease in the disaggregant activity of the interlock or to an increase in the duration of the analysis.

- -

Как видно из габл. силе пр мого дезагрегантного воздействи на тромбоциты интерлок превосходит персантин ъ среднем в 4 раза. Интерлок в выбранных дозах и режимах инкубации на показатели дезагрегации тромбоцитов 10 здоровых людей никак не повли л.As can be seen from the gab. Due to the direct disaggregant effect on platelets, interlock exceeds persantin by an average of 4 times. Interlock in selected doses and incubation regimens did not affect platelet disaggregation rates of 10 healthy people.

П р и м е р 1. Больной Щ., 28 лет Диагноз: Острый перитонеальный сепсис. Из ве- ны было вз то 18 мл крови, стабилизированном при помощи 2 мл, 3,8%- ного раствора цитрата натри , В 4 силико- нированные кварцевые кюветы поместили по 1,8 мл плазмы вз той крови с тромбоцитами в концентрации 300 10/V В первую кювету добавили интерлок до конечной концентрации 50 ед/л, во вторую - персантин до конечной концентрации 3 мг/л, в третью - 10 мкл физиологического раствора (контроль). Все три кюветы инкубировали в течение 2 ч в термостате при +37° С. После этого при помощи фотоэлектроколоримет- рического агреографа после добавлени в пробы аденозиндифосфата в конечной концентрации 3 107 М при перемешивании плазмы круглой фторопластовой мешалкой диаметром 1,5 мм со скоростью вращени 500 оборотов в минуту регистрировалиPRI me R 1. Patient S., 28 years old Diagnosis: Acute peritoneal sepsis. From the vein, 18 ml of blood, stabilized with 2 ml of 3.8% sodium citrate solution, were taken, and 4 ml of plasma of plasma with platelets at a concentration of 300 10 were placed into 4 silicated quartz cuvettes. / V Interlok was added to the first cuvette to a final concentration of 50 U / l, to the second - persantin to a final concentration of 3 mg / L, to a third - 10 μl of saline (control). All three cuvettes were incubated for 2 hours in a thermostat at + 37 ° C. Then, using a photoelectric colorimetric aggregometer, after adding adenosine diphosphate at a final concentration of 3,107 M to the samples while mixing the plasma with a 1.5 mm round fluoroplastic mixer with a rotation speed of 500 revolutions per minute were recorded

- -

тромбоцитарные агрегатограммы и оценивали степень дезагрегации тромбоцитов. До инкубации она составл ла 0%, после инкубации: в контроле 0%, с персэнтином 5,6%,platelet aggregatogram and assessed the degree of disaggregation of platelets. Before incubation, it was 0%, after incubation: in the control 0%, with persistenin 5.6%,

5 с интерлоком 18,4%.5 with interlock 18.4%.

Пример показывает, что по мощности дезагрегантного воздействи на тромбоциты интерлок превосходит персантин более , чем в 3 раза.The example shows that interlock is more than 3 times as much as persantin in terms of the capacity of the disaggregant effect on platelets.

10 П р и м е р 2. Проведено исследование крови больного И., 51 год, с диагнозом гангрены легкого, осложненной пиопневмото- раксом. Изучение вли ни препаратов на дезагрегации тромбоцитов крови проведе- 15 но по методике, аналогичной описанной в примере 1, за исключением того, что концентраци тромбоцитов в пробах составл ла 400 Юул, доза интерлока 560 ед/л, персантина 4 мг/л, врем инкубации - 4 ч.10 PRI mme R 2. A study was conducted on the patient's blood I., 51 years old, with a diagnosis of lung gangrene complicated by pyopneumotoxia. The study of the effect of drugs on blood platelet disaggregation was carried out 15 but according to the method similar to that described in Example 1, except that the platelet concentration in the samples was 400 Yuul, the interlock dose was 560 units / l, persantin 4 mg / l, the incubation time - 4 hours

20Степень дезагрегации тромбоцитов до20The degree of platelet disaggregation to

инкубации составл ла 9,3%, после инкубации : в контроле 11,4%, с персантином 13,8%, с интерлоком 35,6%. В данном случае дезагрегантный эффект интерлока вIncubation was 9.3%, after incubation: in the control 11.4%, with persantin 13.8%, with an interlock of 35.6%. In this case, the disaggregant effect of interlok in

25 2,5 раза был более выражен, чем у персантина .25 2.5 times was more pronounced than that of persantin.

Таким образом, из проведенных примеров очевидно, что применение препарата интерферона интерлок по сравнению сThus, from the examples carried out it is obvious that the use of the drug interferon interlock compared to

30 персантином позвол ет повысить степень дезагрегантного воздействи на тромбоциты в 3 раза.30 persantin allows to increase the degree of disaggregant effect on platelets by 3 times.

Изобретение позвол ет повысить степень воздействи дезагрегации тромбоци35 тов.The invention makes it possible to increase the extent of the effect of platelet disaggregation.

Claims

The invention of the method of platelet disaggregation after exposure to adenosine diphosphate by incubating platelets suspended in

40 blood plasma, with a drug, characterized in that, in order to increase the degree of disaggregation of platelets, incubation is carried out with the preparation of interpaps in a final concentration of 5045 500 units / l for 2-4 hours.

The effect of the dose of platelet disaggregant effect of interlok during incubation of samples for 2-4 hours.

(M ± m, n 27)

Table 1

The effect of incubation time on severity

platelet disaggregant effect of interlock

at a final concentration of 50-500 units / l (M ± m, n 19)

The severity of disaggregant effects on platelets of persantin (prototype) at a final concentration of 3-4 mg / l and interlock at a final concentration of 50-500 units / l after incubation for 2-4 hours.

Table 2

Table 3