SU1597387A1

SU1597387A1 - Способ получени культуры клеток животных

Info

Publication number: SU1597387A1
Application number: SU884465008A
Authority: SU
Inventors: Анна Анатольевна Олешкевич; Валентин Бабкенович Акопян; Лидия Павловна Смирнова
Original assignee: Московская ветеринарная академия им.К.И.Скрябина
Priority date: 1988-07-22
Filing date: 1988-07-22
Publication date: 1990-10-07

Abstract

Изобретение относитс к биотехнологии и может быть использовано в производстве лечебно-профилактических и диагностических препаратов. Цель изобретени - увеличение прироста клеточной массы. Стимул ци пролиферации клеток в культуре достигаетс кратковременной обработкой высокочастотным ультразвуком низкой интенсивности клеток перед пассированием. Облучение суспензии перевиваемых клеток почти теленка МДВК, ВНК провод т в непрерывном режиме. Дл воздействи ультразвуком суспензию клеток помещают в стекл нную кювету, куда погружают ультразвуковой излучатель. Частота действующего ультразвука 880 кГц, интенсивность 0,02-0,08 Вт^.см^-2, врем экспозиции 5-30 с. При всех режимах обработки наблюдаетс повышение индекса пролиферации клеток. 1 табл.

Description

Изобретение относитс к биотехнологии и может быть использовано в производстве лечебно-профилактических и диагностических препаратов.

Целью изобретени вл етс увеличение прироста клеточной массы.

Пример 1. Клетки, не обработанные ультразвуком (контрольный образец ) , в посадочной концентрации 8-10 кл/мл засевают на матрасные колбы. Объем клеточной суспензии 10 мл. Монослой формируетс на третьи сутки. Концентраци клеток 31 х X 10 кл/мл, индекс пролиферации 3,8.

Пример 2. Объем и концентраци клеточной суспензии аналогичны примеру 1. Образец обрабатывают ультразвуком частотой 880 кГц с интенсивностью 0,005 Вт-см в течение 5 с. Максимальный прирост клеточной массы

соста вл ет 620 тыс. кл/мл .(62 10 кл/ьт), индекс пролиферации 7,7.

Пример 3. Объем, концентраци клеточной суспензии и врем образовани моносло аналогичны примеру 2 . Суспензию клеток обрабатывают ультразвуком частотой 880 кГц с интенсивностью 0,02 Вт-см в течение ,10 с. Индекс пролиферации 6,7, что соответствует максимальному приросту клеточной массы 53 10 кл/мп.

Пример 4. Объем, концентраци клеточной суспензии, врем образовани моносло , частота и интенсивность действующего ультразвука анало- гичны примеру 2. Врем озвучивани суспензии клеток 30 с. Индекс пролиферации 5,0, что соответствует максимальному приросту клеточной массы 40-10 кл/мл.

сл

vl

со

00

Обща зависимость выхода клеточной массы от интенсивности и длительности ультразвуковой обработки приведена в таблице.

Из данных таблицы видно, что оптимальный режим составл ет 0,02 - 0,08 Вт. экспозиции 5-30 с. В этом случае наблюдают максимальньй i ,прирост клеточной массы - от 35 10 до 72-10 кл/мл, что соответствует - индексу пролиферации 4,4-9,0. .

Способ прост в исполнении, не тре- бует дл осуществлени дорогосто ще- |5 го оборудовани , позвол ет увеличить

прирост клеток и сократить врем на получение единицы объема клеточной массы (МДВК, ВНК и др.).,

Форму-л а изобретени

Способ получени культуры клеток животных путем пассировани клеток в синтетической питательной среде, отличающийс тем, что, с целью увеличени прироста клеточной массы, на клетки перед пассированием воздействуют ультразвуком с частотой 880 кГц и интенсивностью 0,02 - 0,08 BTiCM в течение 5-30 с.

ез обработки 5

10

30

0,02 0,03 0,05 0,06 0,08 0,02 0,03 0,05 0,06 0,08 0,02 0,03 0,05 0,06 0,08

Редактор И.Дербак

Составитель А.Маныкин

Техред М.Дидык Корректор Л.Бескид

Заказ 3032

Тираж 486

ВШШПИ Государственного комитета по изобретени м и открыти м при ГКНТ СССР 113035, Москва, Ж-35, Раушска наб., д. 4/5

3,8 5,6 7,4 7,7 7,0 5,5 6,7 8,7 9,0 8,5 7,4 5,0 6,2 7,2 6,2 4,4

Подписное

Claims

Формула изобретения

Способ получения культуры клеток животных путем пассирования клеток в синтетической питательной среде, отличающийся тем, что, с целью увеличения прироста клеточной массы, на клетки перед пассированием воздействуют ультразвуком с частотой 880 кГц и интенсивностью 0,02 0,08 Вт>см*^г в течение 5-30 с.

I

Способ прост в исполнении, не требует для осуществления дорогостоящего оборудования, позволяет увеличить I

-------------------------η Время воздействия ультразвуком, с Интенсивность действующего ультразвука, Вт · см ~² Прирост клеточной массы, кл/мл Индекс пролиферации Без обработки 31.10* 3,8 5 0,02 45-10* 5,6 0,03 59-10* 7,4 0,05 62-10* 7,7 0,06 55-10* .7,0 0,08 44-10* 5,5 10 0,02 53-10* 6,7 0,03 70-10* 8,7 0,05 72-10* 9,0' 0,06 68-10* 8,5 0,08 59-10* 7,4 30 0,02 40-10* 5,0 0,03 50-104 6,2 0,05 58-10* 7,2 0,06 50-10* 6,2 0,08 35 -10* 4,4