SU1569706A1 - Способ диагностики гетерозиготного носительства при болезни Вильсона-Коновалова - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к медицине и может быть использовано при диагностике и лечении заболеваний печени, в частности болезни Вильсона-Коновалова. Способ включает получение антител к оксидазоной и неоксидазной фракци ми церулоплазмина, проведение ракетного иммуноэлектрофореза, определение площадей ракет неоксидазной и оксидазной фракции и их отношени . Полученные значени  дл  ребенка и одного из родителей соотнос т между собой и в случае здорового родител  при отношении, равном 1, а в случае больного родител  при отношении 1/3 диагностируют гетерозиготное носительство. Способ обладает минимальной травматичностью и практически безвреден дл  больного, а также диагностировать доклиническую стадию болезни Вильсона-Коновалова.

Description

Изобретение относитс  к медицине и может быть использовано при диагностике заболеваний печени, в частности болезни Вильсона-Коновалова.

Целью изобретени   вл етс  снижение травматичности способа и его упрощение .

Способ осуществл етс  следующим образом.

50 мл сыворотки больного болезнью Вильсона-Коновалова подвергают хроматографии на колонке с аффинным к це- рулоплазмину сорбентом, Полученные после аффинной хроматографии оксидаз- ную и неоксидазную фракции раздел ют препаративным электрофорезом в 7,5%- ном полиакриламидном геле,, Обе фракции элюируют из гел  и получают к ним антитела при внутрикожной иммунизации кроликов. Полученные антитела перекрестно истощают и получают моноспецифические антитела, В дальнейшем эти антитела используют дл  ракетного иммуноэлектрофореза сывороток, используемых из одного из его роди телей , после чего определ ют отношение площади пика (ракеты) неоксидаэ ной фракции к площади ракеты оксидазной фракции, а затем соотнос т получившиес  отношени  площадей ракет у ребенка и родител „ В случае здорового родител  при отношении, равном единице, а в случае больного родител  при отношении, равном 1/3, диагностируют гетерозиготное носительство0

Пример 1 о Больной Г.. , 7 лет диагноз: болезнь Вильспн..-Коновалова.

СЛ

о &

®

Специфическое лечение не дало результатов ,

По 5 мкл сыворотки больного и его матери исследованы методом ракетного иммуноэлектрофореза в 1%-ном агароз - ном геле, содержащем 50 мкг моноспецифических антител в 1 мл. Иммунограм- му, содержащую антитела против окси- дазной формы, окрашивали 0,04%-ным раствором ортодианизидина. Иммунограм- му с антителами против неоксидазной формы окрашивали на белок Отношени  площади ракеты неоксидаэной фракции к площади ракеты оксидаэной фракции у больного и у его матери равны 1,55 и 1,52 соответственное, Соотношение этих значений - единица„ Так как мать здорова, а отношение равно единице , диагностировали гетерозиготное .носительство, что отрицает диагноз болезнь Вильсона-Коновалова. Пожизненное получение препарата пеницил- амина отменено. При томографическом обследовании в мозге больного обнару- жена опухоль.

Пример 2. Ребенок года, рождена в браке между здоровой женщиной и больным болезнью Вильсона- Коновалова. Родители происход т из одной местности. Девочка клинически здорова, Сыворотка крови ребенка и его отца исследованы предлагаемым способом с целью медико-генетического консультировани .

Отношение площади ракеты неокси дазной фракции к площади ракеты ок- сидазной фракции у ребенка и отца составл ют 1,06 и 3,00 соответственно, Соотношение этих значений равно 1/3. Диагноз: гетерозиготное носительство вильсоновской мутации. Рекомендовано медико-генетическое консультирование при вступлении в брак,

Пример 3, Больной М., 16 пет с вильсоноподобной симптоматикой. Мать больна болезнью Вильсона-Коновалова , Диагноз - болезнь Вильсона-Коновалова оставалс  под сомнением в св зи с тем, что отец здоров. Сыворотки больного и обоих родителей исследовали методом ракетного иммуноэлектрофореза с моноспецифическими антителами. Отьошени  площади ракеты неоксидазной фракции к площади ракеты оксидазной

Фракции у больного, его матери и отч

Q 5 0 5

0

0

45 CQ

5

55

ца равны 1,50; 1,52 и 0,50 соответственно . Соотношение этих значений в случае здорового родител  (отца) равно 1/3, а в случае больного родител  (матери) - единице.

Диагноз: больной  вл етс  гомозиготным носителем мутации Вильсона - болен болезнью Вильсона-Коновалова. Специфическое лечение, назначенное после установлени  диагноза, привело к улучшению состо ни  больного.

По сравнению с известным предлагаемый способ диагностики гетерозиготного носительства болезни Вильсона- Коновалова  вл етс  совершенно безвредным дл  пациента, так как кровь дл  анализа может быть вз та из пальца . I

Предлагаемый способ не уступает известному по точности, что подтверждаетс  при анализе тридцати семей с больными болезнью Вильсона-Коновало - ва, где диагноз подтвердилс  во всех случа х.

Способ позвол ет диагностировать доклиническую стадию болезни Вильсона-Коновалова .

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Способ диагностики гетерозиготного носительства при болезни Вильсона-Коновалова путем исследовани  обмена меди в организме больного и одного из его родителей, отличающийс  тем, что, с целью снижени  травматичности способа и его упрощени , провод т ракетный иммуноэлек- трофорез с использованием антител к оксидазной и неоксидазной фракци м, полученным сочетанием аффинной хроматографии и электрофореза в полиакрил- амидном геле, с последующим обогащением антител перекрестным истощением, после чего определ ют отношение площади пика неоксидазной фракции к площади пика оксидаэной фракции, полученные значени  дл  ребенка и родител  соотнос т между собой и в случае здорового родител  при отношении, равном единице,.а в случае больного родител  при отношении 1/3 диагностируют гетерозиготное носительство у ребенка.