SU1569705A1 - Способ определени сенсибилизации к аллергенам - Google Patents

Abstract

Изобретение относитс  к медицине, в частности к аллергологии, и может быть использовано дл  вы влени  сенсибилизации организма к аллергенам. Целью  вл етс  упрощение и повышение точности способа. Способ заключаетс  в том, что из крови больного выдел ют лимфоциты и определ ют их спонтанную хемилюминесценцию и хемилюминесценцию после 10 - 20 мин инкубации с 20 мкл р-ра аллергена (0,01 - 0,05 мкг/мл) и при возрастании уровн  хемилюминесценции на 11% и более после инкубации с аллергеном диагностируют сенсибилизацию к данному аллергену. Изобретение позвол ет с точностью 100% в течение 40 мин. проводить вы вление сенсибилизации к аллергену. 2 табл.

Description

Изобретение относитс  к медицине, а именно к аллергологии, и может быть использовано дл  вы влени  сенсибилизации организма к аллергенам.

Целью изобретени   вл етс  упрощение и повышение точности способа.

Способ осуществл ют следующим образом .

Лимфоциты выдел ют из 2 мл гепари- низированной крови (20 ед/мл) на градиенте плотности 1,077 г/см3 по методу Бойум (Воушп). Лимфоциты двукратно отмывают в растворе Хенкса без индикатора, центрифугиру  5 мин при 1500 об /мин, и под считывают число клеток в камере Гор ева. Раствором Хенкса довод т концентрацию клеток до 1,0- 1,5 млн/мл и помещают в пластиковые кюветы по 1 мл суспензии клеток. Выдерживают 5 мин в биостате хемилюмино- метра (ХЛМ1Ц-01) при 37°С . Измер ют

уровень спонтанной хемилюминесценции (ХЛ) клеток за 500 с в импульсах в секунду, внос т в пробу 20 мкл раствора аллергена в конечной концентрации 0,01-0,05 мкг/мл, разведенного на растворе Хенкса или физрастворе, инкубируют 10-20 мин в биостате при 37 С и измер ют ХЛ в течение 500 с. При возрастании показател  ХЛ на 11% и более после инкубации с аллергеном диагностируют сенсибилизацию к данному аллергену.

Пример 1. Больной М, Посту- пил в клинику с жалобами на приступы затруднени  дыхани  до 3-4 раз в сутки , кашель с трудноотдел емой мокротой , слабость, недомогание. В результате клинико-лабораторного обследовани  установлен диагноз: бронхиальна  астма I ст., течение средней т жести, фаза обострени , хронический бронхит, дыхательна  недостаточность Т ст. Хеел

О

со VI

ел

милюминометри  лимфоцитов по предлагаемому способу покачала сенсибилизацию больного к стафилококковому аллергену (} табл.1).

Как видно из данных таблицы, прирост уровн  ХЛ на 11% наблюдалс  на стафилококковый аллерген, что подтверждаетс  результатами кожных проб и ИИМЛ. Прирост уровн  ХЛ на 7% не сопровождаетс  изменением кожных проб И ИИМЛ, что свидетельствует об отсутствии сенсибилизации. После проведени  курса специфической десенсибили- зирующей терапии этот больной выпивай из клиники в удовлетворительном состо нии.

Пример 2. Больной Г. Поступил в клинику с жалобами на сухой кашель без мокроты, нос щий приступообразный характер, периодическую заложенность носа, недомогание. На основании клинико-лабораторного обследовани  больному поставлен диагноз: хро Нический обструктивный бронхит в фазе обострени , ЛСН I ст. Сенсибилизаци  к бытовым аллергенам. Хемилюминомет- лимфоцитов крови по предлагаемому способу вы вила сенсибилизацию к ал- Бергену пыльцы тимофеевки и библиотечной пыли № 133, при этом использова- лись различные дозы каждого аллергена Q,01-0,05i 0,005; 0,1 мкг/мл (табл.2)

Специфическа  десенсибилизирующа  терапи  привела к улучшению состо ни  больного и выписке его из клиники (положительный результат способа).

Пример 3, Больной П. Посту- лил в клинику с жалобами на слабость, потливость, периодические высыпани 

на коже, боли в области сердца, ХЛ по предлагаемому способу с набором аллергенов показала повышение показател  на 6% на стафилококковый аллерген и на 7% на аллерген кишечной палочки (отрицательный результат). Кожные пробы также отрицательные. У больного обнаружены положительные ревмапробы. При дальнейшем клинико-лабораторном обследовании установлен диагноз: ревматизм , активна  фаза, I ст. активности . Курс противоревматической терапии привел к улучшению состо ни  больного и выписке его из клиники. Всего обследовано 25 больных с сенсибилизацией к стафилококковому аллергену, аллергену библиотечной пыли и др. Изобретение позвол ет увеличить точность вы влени  сенсибилизации на 78% - 100%, а также упростить способ за счет уменьшени  числа реактивов, этапов исследовани , отсутстви  необходимости применени  токсичных реактивов и уменьшени  до 40 мин времени исследовани .

Claims (1)

1. Формула изобретени 

   Способ определени  сенсибилизации к аллергенам путем инкубации лейкоцитов с аллергеном и без него с последующим физико-химическим исследованием образцов, отличающий - с   тем, что, с целью упрощени  и повышени  точности способа, выдел ют фракцию лимфоцитов, измер ют их хе- милюминесценцию и при увеличении уровн  хемилюминесценции после инкубации с аллергеном на 11% и более по сравнению с исходной определ ют сенсибилизацию к аллергену0

   + Отрица- Отрицательна  тельна  0,97 1,05 0,91

   Таблица 1

   6319

   0,97 1,05 .0,71

   Отрица-Отрица-+++ тельна  тельна 

   Таблица 2

   4 0,94

   22

   0,57

   Отрица- ++++ тельна