SU1544778A1

SU1544778A1 - Способ получени пептидов

Info

Publication number: SU1544778A1
Application number: SU874335277A
Authority: SU
Inventors: Татьяна Николаевна Головина; Юрий Александрович Давидович; Сергей Васильевич Рогожин
Original assignee: Институт элементоорганических соединений им.А.Н.Несмеянова
Priority date: 1987-10-26
Filing date: 1987-10-26
Publication date: 1990-02-23

Abstract

Изобретение относитс к химии пептидов, в частности к получению пептидов, и может найти применение в пептидной химии. Цель - повышение выхода и упрощение процесса. Получение пептидов ведут реакцией N - защищенного производного аминокислоты - карбоксильной компоненты с производным другой аминокислоты или пептида (содержащим реакционноспособную N-концевую аминогруппу - аминокислотной компоненты) в присутствии цианурилхлорида (конденсирующий агент) и пиридина в среде этилацетата. Процесс ведут при мол рном соотношении карбоксильный компонент: цианурилхлорид: аминокомпонент: органическое основание 3:1:3:3. Способ позвол ет полностью избежать рацемизацию аминокислоты и сократить врем проведени процесса. Выход 85-91%. 1 табл.

Description

Изобретение относитс к усовершенствованному способу получени пептидов , который может найти применение в пептидной химии.

Целью изобретени вл етс упрощение процесса и повышение выхода.

Пример 1. Получение этилового эфира М-бензилоксикарбонилглицил- глицина.

К раствору 1,04 г (5,0 ммоль) N-бензилоксикарбонилглицина и 0,5 г (5,0 ммоль) пиридина в 20 мл этил- ацетата при перемешивании и С/С прибавл ют по капл м раствор 0,31 г (1,66 ммоль) цианурилхлорида в 5 мл серного эфира. После п тиминутной выдержки при 0°С в реакционную смесь

внос т 0,5 г (5,0 ммоль) триэтилами- на и 0,69 г (5,0 ммоль) гидрохлорида этилового эфира глицина. Температуру реакционной смеси поднимают до 18-20°С и делают выдержку в течение 10 ч, затем разбавл ют ацета- том,промывают водой. Органический слой сушат сульфатом натри , растворитель удал ют. В остатке белое кристаллическое вещество - этиловый эфир N-бензилоксикарбонилглицилглицина . Вещество хроматографически гомогенно . Rf 0,75 (хлороформ: метано л 9:1, силуфол:нннгидрин: 100 , 10 мин).Выход 1,47 г (98%).

Вычислено, %: С 57,14; Н 6,16; N 9,51

СП

Јъ Ј

J

00

С 57,34; Н 6,01;

С14Н „N,05

Найдено, %; N 9,35

П р и м е р 2. Получение метилово- j го эфира N-бензилоксикарбонилаланил- глицина.

К раствору 1,0 г (4,48 ммоль) КБЗ-аланина и 0,35 г (4,48 ммоль) пиридина в 15 мл этилацетата прибав- ю л ют по капл м при перемешивании и +5°С раствор 0,29 г (1,49 ммоль) цианурилхлорида в 5 мл этилацетата. Через 5 мин в реакционную смесь внос т 0,62 г (4,93 ммоль) гидрохлори- 15 да метилового эфира глицина и 0,95 г (9,39 ммоль) триэтиламина. Температуру поднимают до комнатной (20°С). Через 8 ч реакционную смесь перенос т в делительную воронку, разбавл - 20 ют 30 мл этилацетата, промывают 0 мл дистиллированной воды, 10 мл 5 -ного водного раствора бисульфата кали , насыщенным раствором бисульфата кали , насыщенным раствором хло- 25 ристого натри , сушат безводным сульфатом натри . Растворитель удал ют, в результате получа целевой продукт в виде белого кристаллического вещеС 56,75; Н 7,35;

вещества, т.пл. 141-143°С. Выход 83%, Ы J D -24,84° (, метанол); R,, 0,21 (хлороформ:метанол 9:1: силуфол: ничгирдин: 100°-, 10 мин).

Вычислено, %: С 56,67; Н 7,66; N 14,69

CrgH7,N,05

Найдено, % N 14,51

П р и м е р 5. Получение метилового эфира N-бензилоксикарбонилфенилаланил- глицина.

Реакцию провод т аналогично при- 2. Продукт получают с количественным-выходом в виде белого кристаллического вещества, т.пл. 118-119°С. Rf 0,70 (хлороформ:метанол 9:1: силу- фол :нингидрин: 100°: -71,43и(, метанол).

Вычислено, %: С 64,85; Н 5,98; N 7,56

ci HaiNi°s

Найдено, %: С 64,68; Н 5,91; N 7,74

П р и м е р 6. Получение метилового эфира N-трет.-бутилоксикарбониллейцил- глицина.

Реакцию провод т по методике приме10 мин); Ы1 ™

ства. Выход 1,19 г (85%), т.пл. , 30 Ра 2- Пептидный продукт получают с вы- (VJ -17,5° (, хлороформ); Rfходом 92%, т.пл. 133-134°С, Rf 0,50

0,50 (хлороформ:метанол 9:1, силуфол:

„f.У

(хлороформ:метанол 9:1, силуфол:ниннингидрин 100° , 10 мин).

Вычислено, %: С 57,13; Н 6,16; N 9,51

35

гидрин: 100°; 10 мин);Гй ;1 -34,6° (, метанол).

Вычислено, %: С 55,61; Н 8,67; N 9,26

Ci4H14N205

Найдено, %: С 57,45; Н 6,48; N 9,51

П р и м е р 3. Получение метилового эфира N-трет,-бутилоксикарбонил- пропилметионина.

Реакцию провод т по методике примера 2. Целевой пептидный продукт получают в виде белого кристаллического вещества, т.пл. 95-97°С, выход 93%: О D -18,0° (, ДМФ); Rf 0,66 (хлороформ:метанол 9:1, силу- фол:нингидрин: 100°}10 мин).

Вычислено, %: С 53,32; Н 7,83; N 7,77; S 8,88

Сц,

еще 5 мин и затем добавл ют 5,0 ммол аминокомпонента. Протекание реакции аминолиэа контролируют методом тонкослойной хроматографии (по исчезноНайдено , %: С 53,45; Н 7,63; N 7,85; S 8,65

П р и м е р 4. Получение метилового эфира N-трет.-бутилоксикарбонил-55 вению на хроматограмме п тна амино- лейцилгистидина.компонента). Когда ТСХ-проба показыРеакцию провод т по методике приме- вает исчеРпание аминокомпонента (мера 2. Целевой продукт получают в виде рез Реакционную смесь перено- слегка желтоватого кристаллическогос т в Делительную воронку и промываС 56,75; Н 7,35;

Вычислено, %: С 56,67; Н 7,66; N 14,69

CrgH7,N,05

Найдено, % N 14,51

Вычислено, %: С 64,85; Н 5,98; N 7,56

ci HaiNi°s

Найдено, %: С 64,68; Н 5,91; N 7,74

Ра 2- Пептидный продукт получают с вы- ходом 92%, т.пл. 133-134°С, Rf 0,50

„f.У

(хлороформ:метанол 9:1, силуфол:нин

5

0

5

0

гидрин: 100°; 10 мин);Гй ;1 -34,6° (, метанол).

Вычислено, %: С 55,61; Н 8,67; N 9,26

С14Н2 Ц,05

Найдено, %: С 55,53; Н 8,-75; N 9,13

Приме р 7. Синтез пептидных продуктов (указаны в таблице) провод т по следующей общей методике.

К раствору 5,0 ммоль соответствующей N-защищенной аминокислоты и 5,0 ммоль пиридина в 20 мл этилацетата прибавл ют при перемешивании и охлаждении до 0°С раствор 1,67 ммоль цианурилхлорида в 10 мл этилацетата.

После завершени прибавлени реакс ционную смесь перемешивают при О С

еще 5 мин и затем добавл ют 5,0 ммоль аминокомпонента. Протекание реакции аминолиэа контролируют методом тонкослойной хроматографии (по исчезно5 вению на хроматограмме п тна амино- компонента). Когда ТСХ-проба показыют водой дл удалени гидрохлорида пиридина и циануровой кислоты, после чего промывают при необходимости 5%-ным водным раствором бикарбоната натри и/или биосульфата кали . Далее э тилацетатный слой сушат и упаривают; последующее выделение и очистку продукта провод т обычными методами.

Осуществление предлагаемого способа за счет сокращени расхода реагентов , использовани вместо триэтилами- на пиридина и в качестве растворител - этилацетата позвол ет увеличить вдвое выход целевого продукта, полностью избежать рацемизации аминокислоты , используемой в качестве карбоксильной компоненты, сократить врем проведени процесса.

;

544778

Ф о

10

15

20

рмула изобретени . | Способ получени пептидов путем взаимодействи N-защищенного производного одной аминокислоты - карбоксильной компоненты с производным другой аминокислоты или пептида, содержащим реакционно-способную N-концевую аминогруппу аминокислотной компоненты, в присутствии цианурилхлорида как конденсирующего агента и органического основани в среде органического растворител , отличающий- с тем, что, с целью повыпени выхода и упрощени процесса, взаимодействие провод т при мол рном соотношении карбоксильный компонент: цианурилхлорид:аминокомпонент:органическое основание 3:1:3:3, в качестве органического основани используют пиридин, а в качестве органического растворител - этнлацетат.

BOC-Leu-OH H-Tyr-OMe

H-Ala-His-OMe BOC-Lys(Z)- 91 Ala-His-OMe

H-Pro-Ser

(OBzI)-Gly-OEt BOC-Ala-Pro- 90

-Ser(OBzI)-Gly-OEt

Z Val ОН

H-Gly OEt

85

91

-20,0° -20,Oc (, MeOH)

-20,9° -21,0 (, MeOH)

90

92

-24,1° -24,2° (, ДМФА)

-26,5° (, EtOH)

Claims

Формула изобретения, ι Способ получения пептидов путем взаимодействия N-защищенного производ· ного одной аминокислоты - карбоксильной компоненты с производным другой аминокислоты или пептида, содержащим реакционно-способную N-концевую аминогруппу аминокислотной компоненты,

Осуществление предлагаемого способа за счет сокращения расхода реагентов, использования вместо триэтиламина пиридина и в качестве растворителя - этилацетата позволяет увеличить вдвое выход целевого продукта, полностью избежать рацемизации аминокислоты, используемой в качестве карбоксильной компоненты, сократить время проведения процесса.

в присутствии циаиурилхлорида как конденсирующего агента и органического основания в среде органического растворителя, отличающий с я тем, что, с целью повыпения вы15 хода и упрощения процесса, взаимодействие проводят при молярном соотношении карбоксильный компонент: цианурилхлорид:аминокомпонент:органическое основание =3:1:3:3, в каче20 стве органического основания используют пиридин, а в качестве органического растворителя - этилацетат.

------------- Карбоксильный компонент ——— ———————————- Аминокомпонент Продукт Выход, % Удельное оптическое вращение Найденное Литературные данные

BOC-Leu-OH H-Tyr-OMe BOC-Leu-Tyr- 85 OMe -20,0° (c=1, MeOH) BOC-Lys-OH I Z H-Ala-His-OMe BOC-Lys(Z)- 91 Ala-His-OMe -20,9° (c=l, MeOH) BOC-Ala-OH H-Pro-Ser (OBzI)-Gly-OEt BOC-Ala-Pro- 90 -Ser(OBzI)-Gly-OEt -24,1° (c=l, ДМФА) Z Vai OH H-Gly OEt Z Vai Gly OEt 92 -26,5° (c=l, EtOH)