SU1527590A1 - Method of determining t-lymphocytes in human blood - Google Patents

Method of determining t-lymphocytes in human blood Download PDF

Info

Publication number
SU1527590A1
SU1527590A1 SU874332839A SU4332839A SU1527590A1 SU 1527590 A1 SU1527590 A1 SU 1527590A1 SU 874332839 A SU874332839 A SU 874332839A SU 4332839 A SU4332839 A SU 4332839A SU 1527590 A1 SU1527590 A1 SU 1527590A1
Authority
SU
USSR - Soviet Union
Prior art keywords
text
lymphocytes
particles
melamine
formaldehyde resin
Prior art date
Application number
SU874332839A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Арег Артемович Тотолян
Наталья Владимировна Шамкова
Original Assignee
1-Й Ленинградский Медицинский Институт Им.Акад.И.П.Павлова
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 1-Й Ленинградский Медицинский Институт Им.Акад.И.П.Павлова filed Critical 1-Й Ленинградский Медицинский Институт Им.Акад.И.П.Павлова
Priority to SU874332839A priority Critical patent/SU1527590A1/en
Application granted granted Critical
Publication of SU1527590A1 publication Critical patent/SU1527590A1/en

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

Изобретение относитс  к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано при оценке иммунного статуса человека. Цель изобретени  - сокращение времени анализа и упрощение способа. У обследуемых производ т забор крови, выделение лимфоцитов, инкубацию их с частицами меламин-формальдегидной смолы в течение 30 мин при температуре 4 °С, препараты высушивают, окрашивают и подсчитывают число розеткообразующих клеток на 100 лимфоцитов. В сравнении с прототипом сокращено в 2 раза врем  анализа. В результате использовани  частиц меламин-формальдегидной смолы упрощена процедура анализа путем исключени  этапов фиксации и отмывки и, кроме того, частицы меламин-формальдегидной смолы дают одинаковые результаты в сравнении с эритроцитами барана независимо от сроков их хранени . 2 табл.The invention relates to medicine, in particular to immunology, and can be used in assessing a person’s immune status. The purpose of the invention is to reduce the analysis time and simplify the method. Blood samples were taken, lymphocytes were isolated, they were incubated with particles of melamine-formaldehyde resin for 30 minutes at 4 ° C, the preparations were dried, stained, and the number of rosetting cells per 100 lymphocytes was counted. In comparison with the prototype, the analysis time is 2 times shorter. As a result of the use of particles of melamine-formaldehyde resin, the analysis procedure is simplified by eliminating the steps of fixation and washing and, in addition, the particles of melamine-formaldehyde resin give the same results in comparison with ram erythrocytes, regardless of how long they are stored. 2 tab.

Description

1one

(21)4332839/28-14(21) 4332839 / 28-14

(22)03.12.87(22) 12/03/87

(46) 07.12.89. Бюл. № 45(46) 12/07/89. Bul Number 45

(71)1-й Ленинградский медицинский институт им. акад. И.П.Павлова(71) 1st Leningrad Medical Institute. Acad. I.P.Pavlova

(72)А.А.Тотол н и Н.В.Шамкова(72) A.A.Totoln and N.V.Shamkova

(53)615.375 (088.8)(53) 615.375 (088.8)

(56)Джондал М. Лимфоциты, выделение , фракционирование и характеристика . -М.: Медицина, 1980, с. 100-111.(56) Jondal M. Lymphocytes, isolation, fractionation and characterization. -M .: Medicine, 1980, p. 100-111.

(54)СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ Т-ЛШФОиИТОВ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА(54) METHOD FOR DETERMINING T-LCHPHAITI OF HUMAN BLOOD

(57)Изобретение относитс  к медицине , в частности к иммунологии, и может быть использовано при оценке иммунного статуса человека. Цель изобретени  - сокращение времени анализа(57) The invention relates to medicine, in particular to immunology, and can be used in assessing a person’s immune status. The purpose of the invention is to reduce the analysis time.

и упрощение способа. У обследуемых производ т забор крови, выделение лимфоцитов, инкубацию их с частицами меламинформальдегидной смолы в течение 30 мин при температуре 4 С, препараты высушивают, окрашивают и под- считьшают число розеткообразующих клеток на 100 лимфоцитов. В сравнении с прототипом сокращено в 2 раза врем  анализа. В результате использовани  частиц меЛаминформальдегвдной смолы упрощена процедура анализа путем исключени  этапов фиксации и отмывки и, кроме того, частицы неламин- формальдегидной смолы дают одинаковые результаты в сравнении с эритроцитами барана независимо от сроков их хранени . 2 табл.and simplify the way. Blood samples were taken, lymphocytes were isolated, they were incubated with particles of melamine formaldehyde resin for 30 minutes at 4 ° C, the preparations were dried, stained, and the number of rosetting cells per 100 lymphocytes was counted. In comparison with the prototype, the analysis time is 2 times shorter. As a result of using particles of melamine-formaldehyde resin, the analysis procedure is simplified by eliminating the steps of fixation and washing and, in addition, particles of non-amine-formaldehyde resin give the same results in comparison with sheep erythrocytes, regardless of the storage time. 2 tab.

гg

(Л(L

Изобретение относитс  к медицине, в частности к иммунологии, и может быть использовано при оценке иммунного статуса человека.The invention relates to medicine, in particular to immunology, and can be used in assessing a person’s immune status.

Целью изобретени   вл етс  сокращение времени анализа и упрощение способа.The aim of the invention is to reduce the analysis time and simplify the method.

Способ осуществл ют следующим образом .The method is carried out as follows.

В каждую лунку микрокамеры дл  иммунологических реакц1Ш (планшет Терасаки) внос т по 0,005мл лейкоцитов в концентрации 1,0-1,510 /мл и 0,005 мл суспензии частиц меламинфор- малъдегвдной смолы с диаметром частиц 5,0 мкм в концентрации 6,0-7,0 10 /мл. Камеры центрифугируют 5 мин при 1000 об/мин, инкубируютIn each well, microcameras for immunological reactions (Terrazaki plate) are added with 0.005 ml of leukocytes at a concentration of 1.0-1.510 / ml and 0.005 ml of a suspension of particles of melamine-maldehyde resin with a particle diameter of 5.0 µm at a concentration of 6.0-7, 0 10 / ml. Chambers are centrifuged for 5 min at 1000 rpm, incubated

30 мин при 4°С, фильтровальной бумагой удал ют надосадок, камеры вы- .сушивают и окращивают по Лейшману. При микроскопировании подсчитывают количество розеткообразующих лимфоцитов на 100 лимфоцитов (за розетку принимают лимфоцит, присоединивший 3 и более частиц меламинформапьде- гвдной смолы) .30 minutes at 4 ° C, the supernatant is removed with filter paper, the chambers are dried and colored according to Leishman. During microscopic examination, the number of rosette lymphocytes per 100 lymphocytes is counted (a lymphocyte that attaches 3 or more melamine-forma-de-adherent resin particles is taken as a rosette).

Пример 1.У16 практически здоровых людей определ ют количество Т-лимфоцитов по предлагаемому способу .Example 1. U16 practically healthy people determine the number of T-lymphocytes by the proposed method.

Полученные результаты приведены в табл. 1.-, The results are shown in Table. one.-,

Пример 2.У5 практически здоровых людей из венозной крови выдел ют фракцию мононуклеаров, которую используют дл  постановки розеткооб- разовани  с частицами меламинформаль- дегвдной смолы. Затем полученную сус- пенэию лейкоцитов и частиц меламин- формальдегидной смолы инкубируют с моноклональными антителами ОКТ-11, меченньми флюоресценном. Определ ют количество розеткообраэутощих лимфо- дитов (Е-РОЛ) и ОКТ-1 I лимфоцитов.Example 2. U5 of practically healthy people a fraction of mononuclear cells is isolated from venous blood, which is used to form rosettes with particles of melamine formaldehyde resin. Then, the obtained suspension of leukocytes and particles of melamine-formaldehyde resin is incubated with OCT-11 monoclonal antibodies labeled with fluorescent. The number of rosette lymphodites (E-ROL) and OCT-1 lymphocytes is determined.

Полученные результаты приведены в табл. 2.The results are shown in Table. 2

Таким образом, в предлагаемом спосебе отсутствуют этапы фиксации глу- таровым альдегидом (который  вл етс  сильным канцерогеном и отмывани  клеток физиологическим раствором. Кроме того, более чем в 10 раз сокращена длительность этапа приготовлени  суспензии индикаторных частиц, обща  длительность способа составл ет не более 60 мин, в то врем  как длительность известного способа 120-135мин,Thus, in the proposed method, there are no stages of fixation with glutaraldehyde (which is a strong carcinogen and cell washing with saline. In addition, the duration of the preparation of suspension of indicator particles is reduced by more than 10 times, the total duration of the method is no more than 60 minutes while the duration of the known method is 120-135min,

Кроме того,при хранении эритроци- ты барана тер ют свою активность (срок хранени  не более 2 недель), частицы меламинформальдегидной смолы . дают одинаковые результаты независимо от сроков хранени ., In addition, during storage, sheep erythrocytes lose their activity (storage time is not more than 2 weeks), particles of melamine formaldehyde resin. give identical results regardless of shelf life.,

изобретени  the invention

Способ определени  Т-лимфоцитов крови человека, включающий забор крови , выделение лимфоцитов, инкубацию их в присутствии индикаторных частиц, подсчет числа розеткообразующих клеток , отличающийс  тем, что, с целью сокращени  времени анализа и упрощени  способа, в качестве индикаторных частиц используют частицы меламинформальдегидной смолы.A method for determining T-lymphocytes of human blood, including blood sampling, lymphocyte isolation, incubating them in the presence of indicator particles, counting the number of rosetting cells, characterized in that, in order to reduce the time of analysis and simplification of the method, particles of melamine formaldehyde resin are used as indicator particles.

Таблица ITable I

Таблица 2table 2

Claims (5)

<claim-text>Формула изобретения</claim-text></td><td> <claim-text>15</claim-text></td><td> <claim-text>67</claim-text></td><td> </td></tr> <tr><td> <claim-text>Способ определения Т-лимфоцитов '</claim-text></td><td> <claim-text>16</claim-text></td><td> <claim-text>56</claim-text></td><td> </td></tr> <tr><td> <claim-text>крови человека, включающий забор кро-</claim-text></td><td> </td><td> </td><td> </td></tr> <tr><td> </td><td> <claim-text>&gt;</claim-text> <claim-text>Таблиц</claim-text></td><td> <claim-text>а 2</claim-text></td><td> </td></tr> </table> <claim-text>Обследо- Количество ванный Е-РОЛ и ОКТ11* лимфоцитов, %</claim-text> <claim-text>Количество только ЕРОЛ, %</claim-text> <claim-text>Количество только ОКТ-11<sup>+ </sup>лимфоцитов, %</claim-text> <claim-text>1 67 1</claim-text> <claim-text> Formula of the invention </ claim-text> </ td> <td> <claim-text> 15 </ claim-text> </ td> <td> <claim-text> 67 </ claim-text> </ td> <td> </ td> </ tr> <tr> <td> <claim-text> T-lymphocyte detection method </ claim-text> </ td> <td> <claim-text> 16 </ claim-text> </ td> <td> <claim-text> 56 </ claim-text> </ td> <td> </ td> </ tr> <tr> <td> <claim-text> human blood, including blood sampling - </ claim-text> </ td> <td> </ td> <td> </ td> <td> </ td> </ tr> <tr> <td> </ td> <td> <claim-text> > </ claim-text> <claim-text> Spreadsheets </ claim-text> </ td> <td> <claim-text> a 2 </ claim-text> </ td> <td> </ td> </ tr> </ table> <claim-text> Examined E-ROL and OKT11 * lymphocytes,% </ claim-text> <claim-text> Number of EPRO only,% </ claim-text> <claim-text> Number of OCT-11 <sup> + </ sup> lymphocytes,% </ claim-text> <claim-text> 1 67 1 </ claim-text> 2 73 * 22 73 * 2 3 .70 23 .70 2 4 61 44 61 4 5 64 35 64 3 5five 3 2 23 2 2 4four
SU874332839A 1987-12-03 1987-12-03 Method of determining t-lymphocytes in human blood SU1527590A1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU874332839A SU1527590A1 (en) 1987-12-03 1987-12-03 Method of determining t-lymphocytes in human blood

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SU874332839A SU1527590A1 (en) 1987-12-03 1987-12-03 Method of determining t-lymphocytes in human blood

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SU1527590A1 true SU1527590A1 (en) 1989-12-07

Family

ID=21338082

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SU874332839A SU1527590A1 (en) 1987-12-03 1987-12-03 Method of determining t-lymphocytes in human blood

Country Status (1)

Country Link
SU (1) SU1527590A1 (en)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Gillis et al. Immunological studies of aging. Decreased production of and response to T cell growth factor by lymphocytes from aged humans.
Chiao et al. Human peripheral lymphocytes bearing both B-cell complement receptors and T-cell characteristics for sheep erythrocytes detected by a mixed rosette method
Morantz et al. Macrophages in experimental and human brain tumors: part 2: studies of the macrophage content of human brain tumors
Schiff et al. Membrane receptors and in vitro responsiveness of lymphocytes in human immunodeficiency
Wunder et al. Report on the European workshop on peripheral blood stem cell determination and standardization—Mulhouse, France, February 6-8 and 14-15, 1992
Friberg et al. Measurements of natural killer (NK) activity and NK-cell quantification
TALBOT et al. The relevance of a more sensitive crossmatch assay to renal transplantation
Hodge et al. Increased levels of apoptosis of leukocyte subsets in cultured PBMCs compared to whole blood as shown by Annexin V binding: relevance to cytokine production
Appel et al. Experimental and clinical significance of endotoxin-dependent HLA-DR expression on monocytes
Caraux et al. Human autologous rosettes: I. Mechanism of binding of autologous erythrocytes by T cells
Thorne et al. Partial purification and biological properties of an eosinophil‐activating factor
Fox et al. Macrophage migration stimulation factor, migration inhibition factor and the role of suppressor cells in their production
SU1527590A1 (en) Method of determining t-lymphocytes in human blood
Gorski et al. Leukocyte migration inhibitory factor (LMIF) induced by concanavalin A: standardized microassay for production in vitro.
Robbins et al. Functional subsets of human T cells defined by “active” rosette formation
Volenec et al. Mononuclear cell analysis of peripheral blood from burn patients
Farmer et al. Inhibition of interleukin 2 production and expression of the interleukin 2 receptor by plasma from acquired immune deficiency syndrome patients
US4474876A (en) Flow cytometric analysis of histamine receptors
Clark et al. Mediator release from basophil granulocytes in chronic myelogenous leukemia: Demonstration of the eosinophil chemotactic activity of histamine
SU1527591A1 (en) Method of determining b-lymphocytes in human blood
Sears et al. Advantages Cryopreserved Lymphocytes for Sequential Evaluation of Human Immune Competence. II. Mixed Lymphocyte Cultures and of Mononuclear Cell Subpopulations
Hodgkinson et al. In vivo assay of viability of amastigotes of Leishmania donovani
RU2054172C1 (en) Method for studying phagocytosis in the whole blood
JPH116831A (en) Method for detecting and measuring blood platelet including premature rete blood platelet and adoption of the same to clinic
Van Epps et al. Chemotaxis as a preparative technique for human polymorphonuclear leukocytes