SU1500231A1

SU1500231A1 - Состав дл криоконсервации артерий и способ подготовки их к трансплантации

Info

Publication number: SU1500231A1
Application number: SU874308135A
Authority: SU
Inventors: Владимир Игоревич Кирпатовский; Андрей Викторович Верзин
Original assignee: Научно-Исследовательский Институт Трансплантологии И Искусственных Органов
Priority date: 1987-07-21
Filing date: 1987-07-21
Publication date: 1989-08-15

Abstract

Изобретение относитс к медицине , в частности, к трансплантологии. Целью изобретени вл етс сохранение атромбогенных свойств сосудистой стенки артерии и увеличение сохранности за счет этого ее функциональной полноценности при длительном хранении в замороженном состо нии. В качестве раствора дл криоконсервации используют солевой раствор, содержащий (в г/л) однозамещенный фосфат кали 1,0-1,04

двузамещенный фосфат кали 3,6-4,0

бикарбонат натри 0,82-0,86

цитрат натри 0,28-0,32

сукцинат натри 0,48-0,52

маннитол 0,38-0,40 и воду дистиллированную до 1 л, в который дополнительно ввод т диметилсульфоксид в концентрации 5-15 г/л, альбумин сыворотки крови человека в концентрации 20-50 г/л и селенит натри в концентрации 2^.10^-5 - 4^.10^-5 г/л. После помещени артерии в раствор концентрацию диметилсульфоксида постепенно увеличивают от 5 до 15 г/л в течение 25-30 мин, после чего артерию выдерживают в растворе еще 25-30 мин и замораживают до (-50)-(-70)°С со скоростью 1-3°С/мин. После отогрева артерии из замороженного состо ни ее погружают на 20-30 мин. в консервирующий раствор, дополнительно содержащий 30-40 г/л маннитола. После этого артери готова к пересадке. Изобретение позволит создать запас полноценных сосудистых трансплантатов, хран щихс в замороженном состо нии, которые в нужный момент могут быть использованы хирургами дл замены поврежденных артерий.

Description

Изобретение относитс к медицине, в частности к трансплантологии.

Цель изобретени - сохранение ат- рвмбогенных свойств сосудистой стенки артерий.

Состав готовитс простым смешиванием компонентов.

пример 1. Берут компоненты, г/л: однозамещенный фосфат кали 1,0; двузамещенный фосфат кали 3,6; бикарбонат натри 0,82; цитрат натри 0,28; сукцинат натри 0,48; маннитол 38,0; диметилсульфоксид (ДМСО) 5,0; альбумин сьшоротки человека

20,0; селенит натри вода дистиллированна до 1 л.

При консерватщи данным ра твором отек сосудов составил в среднем 14,4+ 4%, что меньше прототипа (46+6%).

Пример 2. Берут компоненты, г/л: однозамещенный фосфат кали 1.04; двузамещенный фосфат кали 4,0; бикарбонат натри 0,86; цитрат натри 0,32; сукцинат натри 0,52; ман- нитол 40,0; диметилсульфоксид 15.0; альбумин сыворотки человека 50,0; селенит натри 4-10 ; вода дистиллиро

ванна до 1 л.

При консервации данным раствором отек сосудов составил в среднем 20+4%.

Способ осуществл ют следующим образом .

Удаленную артерию промывают в, солевом изоосмотическом растворе любого состава дл удалени крови и сгустков фибрина и после этого помещают в предлагаемый раствор, содержащий 5% ДМСО. После этого в раствор постепенно добавл ют дополнительное количество ДМСО, повыша его концентрацию с 5 до 15% в течение 25-30 мин и выдерживают в этом растворе еще 25-30 мин при комнатной температуре. Затем артерию извлекают, помещают в контейнер дл замораживани , охлаждают со скоростью 1-З С/мин до -50 - -70 С и хран т при этой темпера:Туре, При необходимости контейнер с артерией извлекают, отогревают в вод ной бане при комнатной температуре и перенос т в раствор, содержащий-5% ДМСО и дополнительно содержащий 30-40 г/л маннитола, дл удалени избытка ДМСО из стенки сосуда при минимальных осмотических перепадах на клеточной мембране. В этом растворе вьщерживают

15

15% в течение 30 мин. После выдерживани артерии в растворе епдё 30 мин их извлекают, помещают в контейнер и замораживают со скоростью 1-3 С/мин до -50 С. Артерии хран т при этой температуре от 5 дней до 1 мес.После отогрева в вод ной бане до комнатной температуры артерии извлекают из кон тейнера, погружают на 20-30 мин в ра створ , содержащий все компоненты раствора дл криоконсервации; концентраци ДМСО в нем составл ла 5%, а содержание маннитола увеличивают на 30-40 г/л (до 80 г/л). Затем артерии пересаживают крысам-реципиентам заменив криоконсервированным трансплантатом соответствующий сегмент брюшной аорты. При пересадке используют микрохирургическую технику и ат равматический шовный материал 10/0. У всех животных после пересадки трансплантат нормально функционировал весь период наблюдени (до 4 мес.), обеспечива полноценное кровоснабжение нижней половины туловища животного . При осмотре через 4 мес все 5 трансплантатов были проходимы, внешне выгл дели нормально без признаков стенозировани или аневризматическог расширени . На резрезе в просвете ар терии никаких тромбов не бьшо обнару жено. Интима была гладка и блест ща . Предлагаемый состав дл криоконсервации и способ подготовки артерий к трансплантации обеспечивают надежное длительное хранение донорских артерий в течение длительного времени с сохранением атромбогенных свойств сосудистой стенки. После пе ресадки этих артерий в 100% случаев трансплантат нормаль но функционирует длительное врем . При пересадке артерий , криоконсервированных по спо20

25

30

35

40

.20-30 мин и перенос т артерию в изо- дз собу-прототипу, функци трансплантаосмотический солевой раствор любого состава; при этом артери готова к пересадке.

Пример 1. У5 крыс удал ют сегмент брюшной аорты ниже места отхожденй почечных артерий длиной 0,6-0,9 см, отмывают от крови и сгустков в солевом изоосмотическом растворе (НИИТиИО-2) и помещают в пр едла- гаемый раствор, содержащий 5% ДМСО, 20 г/л альбумина, сьшоротки человека и 3-. селенита натри . После этого постепенно увеличивают концентрацию ДМСО в этом растворе с 5 до

50

55

та длительно сохрани лась лишь в 40% Способ обеспечивает сохранение атромбогенных свойств интимы сосудов и длительное функционирование пересаженных артерий.

Claims

1. Состав дл криоконсервации артерий , содержащий одно- и двузамещен- ный фосфат кали , бикарбонат натри , цитрат натри , сукцинат натри , мен- нитол и дистиллированную воду, отличающийс тем, что, с

5

10

15

02314

15% в течение 30 мин. После выдерживани артерии в растворе епдё 30 мин их извлекают, помещают в контейнер и замораживают со скоростью 1-3 С/мин до -50 С. Артерии хран т при этой температуре от 5 дней до 1 мес.После отогрева в вод ной бане до комнатной температуры артерии извлекают из контейнера , погружают на 20-30 мин в раствор , содержащий все компоненты раствора дл криоконсервации; концентраци ДМСО в нем составл ла 5%, а содержание маннитола увеличивают на 30-40 г/л (до 80 г/л). Затем артерии пересаживают крысам-реципиентам. заменив криоконсервированным трансплантатом соответствующий сегмент брюшной аорты. При пересадке используют микрохирургическую технику и ат- равматический шовный материал 10/0. У всех животных после пересадки трансплантат нормально функционировал весь период наблюдени (до 4 мес.), обеспечива полноценное кровоснабжение нижней половины туловища животного . При осмотре через 4 мес все 5 трансплантатов были проходимы, внешне выгл дели нормально без признаков стенозировани или аневризматического расширени . На резрезе в просвете ар- терии никаких тромбов не бьшо обнаружено . Интима была гладка и блест ща . Предлагаемый состав дл криоконсервации и способ подготовки артерий к трансплантации обеспечивают надежное длительное хранение донорских артерий в течение длительного времени с сохранением атромбогенных свойств сосудистой стенки. После пе ресадки этих артерий в 100% случаев трансплантат нормаль но функционирует длительное врем . При пересадке артерий , криоконсервированных по спо20

25

30

35

40

собу-прототипу, функци транспланта

та длительно сохрани лась лишь в 40%. Способ обеспечивает сохранение атромбогенных свойств интимы сосудов и длительное функционирование пересаженных артерий.

Формула изобретени

целью сохранени атромб свойств сосудистой стенки он дополнительно содержит сульфоксид, альбумин сыво человека и селенит натри дующих соотношени х компо

Однозамещенный фосфат

кали

Двузамещенный фосфат

кали

Бикарбонат натри

Цитрат натри

Сукцинат натри

Маннитол

Диметип сульфоксид

Альбумин сыворотки

крови человека

Селенит натри

Дистиллированна

вода

,

2

0

5

2. Способ подготовки артерий к трансплантации, включающий выдерживание артерий в консервирующем растворе , замораживание, хранение в замороженном состо нии и оттаивание до комнатной температуры, отличающийс тем, что, с целью увеличени сохранности функциональной полноценности за счет сохранени атромбогенных свойств сосудистой стенки артерий, после погружени в консервирующий раствор, концентрацию диметилсульфоксида довод т до 5-15 г/л в течение 25-30 мин, затем инкубируют 25-30 мин, замораживают

со скоростью 1 - оттаивани дополнидо (-50)-(-70) С 3 С/мин, а после тельно внос т в раствор 30-40 г/л маннитола и погружают в него артерию на 20-30 мин.