SU1327882A1

SU1327882A1 - Способ определени жизнеспособности мирацидиев трематод

Info

Publication number: SU1327882A1
Application number: SU864046989A
Authority: SU
Inventors: Светлана Михайловна Герман; Сергей Алексеевич Беэр; Николай Михайлович Стратан
Original assignee: Институт медицинской паразитологии и тропической медицины им.Е.И.Марциновского
Priority date: 1986-03-28
Filing date: 1986-03-28
Publication date: 1987-08-07

Abstract

Изобретение относитс к области медицинской и ветеринарной паразитологии (гельминтологии). Цель изобретени - повышение точности определени жизнеспособности мирацидиев трематод . Вначале провод т обработку иц Dicrocoelium lanceatum стимулирующим раствором, состо щим из смеси бутанола и О,1-0,5%-ного водного раствора хлорида натри (или 0,05- 0,4%-ного водного раствора хлорида кали ) в соотношении (5-7): (93-95). После этого йца инкубируют при 27- З8 с в течение 1-5 мин. Перед микро- скопированием полученный субстрат выдерживают 1,5-2 ч на предметном стекле, периодически добавл в него 0,5-1,5%-ный водньш раствор бутанола. Сочетание указанных приемов приводит к открыванию крьшечки у иц и выходу мирацидиев именно у данного вида трематод. Эффективность способа определени жизнеспособности мирацидиев трематод составл ет 85%. 1 з.п. ф-лы. (Л со to vj 00

Description

1

Изобретение относитс к области медицинской и ветеринарной паразитологии (гельминтологии), а именно к способам определени жизнеспособности мирацидиев трематод,, патогенных дл человека и хоз йственно полезных животных.

Цель изобретени - повышение точности определени жизнеспособности мирацидиев.

Пример 1, Предварительно осуществл ют приготовление среды и водного.раствора бутанола.

Среду готов т из 5 ч, бутанола и 95 ч. 0,5%-ного раствора NaCl, приготовленного на дистиллированной воде. Приготавливают 1,5%-ный раствор бутанола.на дистиллированной воде . Среда и раствор могут хранитьс 3 сут.

Определение жизнеспособности мира цидиев.

Одну каплю взвеси иц гельминта в воде внос т пипеткой в центрифужную пробирку. Пробирка со взвесью Должна содержать 100-500 иц (мен-ь- шее их число может повли ть на репрезентативность результатов, а большее затрудн ет подсчет), Пробирка становитс в штатив на 1--2 мин дл тогО), чтобы йца опустились на дно„ Полоской фильтровальной бумаги осторожно отсасывают воду и пастеровской пипеткой в пробирку с подсушенными таким образом йцами добавл ют 0,1 мл Среды и инкубируют на вод ной бане при 27 С 5 мин. Затем пробирку встр хивают и содержимое пипеткой перенос т на предметное стекло и оставл ют на 1,5-2 ч при комнатной температуре (18-22 с), через каждые 25-35 мин (по мере подсыхани капли) добавл 0,05 мл 1,5%-ного раствора бутанола.

Препарат просматривают под обычным световым микроскопом при 100- 200-кратном увеличении. Перечисленны операции занимают 2-2,5 ч. .

Пример 2. Приготовление среды и раствора.

Среду готов т из 7 ч, бутанола и 93 ч. 0,1%-ного раствора NaCl, приготовленного на дистиллированной воде . Раствор готов т из 0,5 ч„ бутанола и 99,5 ч. дистиллированной воды Определение жизнеспособности мирацидиев проводит как в примере 1, но

278822

пробирку со взвесью иц в среде инкубируют при 35 С 2 мин.

Пример 3. Приготовление среды и раствора.

Среду готов т из 6 ч. бутанола и 94 ч, 0,3%-ного раствора NaCl, приготовленного на дистиллированной воде о Раствор готов т из 1 ч, бутанола и 99 ч. дистиллированной воды. Определение жизнеспособности мирацидиев провод т как в примерах 1 и 2, но пробирку со взвесью иц в среде ин10

кубируют при 38 С 1 мин,

Пример 4, Приготовление среды и раствора.

Среду готов т из 6 ч. бутанола и 94 ч. 054%-ного раствора КС1, приготовленного на дистиллированной воде . Раствор готов т из 0,8 ч. бутанола и 99,2 ч. дистиллированной воды. Определение жизнеспособности мираци- диев провод т как в примерах 1,2 и 3, но пробирку со взвесью иц в среде инкубируют при 30 С 3 мин.

Испытание метода проводили на йцах дикроцелиумов (Dfcrocoelium lanceatum), полученных из гельмин-. той % желчи спонтанно инвазирован- ных овец из очагов дикроцелиоза в Курской .области и Молдавской ССР. Полученные таким образом йца гельминтов- различное врем (от нескольких недель до 6 мес) содержались в воде при 5-10°С.

Эффективность предлагаемого способа определени жизнеспособности ми- ацидиев трематод составл ет 85%,

Claims

Формула изобретени

I„ Способ определени жизнеспособ- ности мирацидиев трематод, включающий обработку иц стимулирующим раствором с последующим микроскопировани- ем и подсчетом мирацидиев, отличающийс тем, что, с целью повьшени точности определени , после обработки иц стимулирующим раствором провод т инкубирование иц при 27-38 0 в течение 1-5 мин, а перед микроскопированием полученный субст- рат выдерживают при комнатной температуре на предметном стекле в течение 1,5-2 ч, при этом периодически через 25-35 мин добавл ют в него 0,5-1,5%- ньш раствор бутанола в дистиллирован31327882

ной воде, при этом в качестве стимули-
2. Способ по п.1, о т л и ч а ю- рующего раствора используют смесь, щ и и с тем, что концентраци содержащую бутанол и водный раствор водных растворов хлоридов натри и хлоридов натри или кали в соотно- кали составл ет соответственно 0,1- шении {5-7):(93-95). 0,5% и 0,05-0,4%.