SU1263045A1

SU1263045A1 - Liquid chromatograph

Info

Publication number: SU1263045A1
Application number: SU843806513A
Authority: SU
Inventors: Н.А. Макаров; Ю.Б. Алахов; Е.Н. Твердохлебов
Original assignee: Институт Белка Ан Ссср; Институт молекулярной биологии АН СССР; Специальное Конструкторское Бюро Биологического Приборостроения Научно-Технического Объединения Ан Ссср
Priority date: 1984-08-27
Filing date: 1984-08-27
Publication date: 1990-04-23

Abstract

ЖВДКОСТНЫЙ ХРОМАТОГРАФ, содержащий последовательно соединенные сосуд с элюентом, насос, хроматографическую колонку, детектор, измеритель массы отдельной фракции и сборник фракций, а также весоизмеритель , на котором установлен сосуд с элюентом, интегратор площади пика, дискриминатор урдвн сигнала детектора и блок управлени сборником фракций, отличающийс тем, что, с целью повшпени точности определени количества выдел емого вещества в отдельной фракции, он до . полнительно снабжен блоком умножени , который соединен с выходами измерител массы отдельной фракции, дискриминатора и интегратора площади пика. 1C о со о 4 СПZHDKOSTNY KHROMATOGRAF, containing successively connected vessel with eluent, pump, chromatographic column, detector, individual fraction mass meter and collection of fractions, as well as a weight meter on which the vessel with eluent is installed, peak area integrator, discriminator of detector signal, and a collection collector control unit, characterized in that, in order to improve the accuracy of determining the amount of emitted substance in a separate fraction, it is up to. It is additionally equipped with a multiplication unit, which is connected to the outputs of the mass meter of a separate fraction, the discriminator and the integrator of the peak area. 1C о со о 4 СП

Description

Изобретение относится к устройствам разделения и анализа сложных смесей методом жидкостной хроматографии и может найти применение й химии, молекулярной биологии и медицине.The invention relates to devices for the separation and analysis of complex mixtures by liquid chromatography and may find application in chemistry, molecular biology and medicine.

Целью изобретения является повышение точности определения количества выделяемого вещества в отдельной фракции.The aim of the invention is to improve the accuracy of determining the amount of emitted substance in a separate fraction.

На чертеже изображен жидкостный хроматограф.The drawing shows a liquid chromatograph.

Жидкостный хроматограф состоит из сосуда 1 с элюентом, , насоса 2 подачи элгоента, хроматографической колонки 3, детектора 4 сборника 5 фракций, весоизмерителя 6, интегратора 7 площади пика, дискриминатора 8 уровня сигнала детектора (сепара тора пиков) ₅ блока 9 управления сбор'” никем фракций, измерителя 10 массы отдельной фракции элюента, блока I I умножения массы отдельной фракции элюента на площадь пика.A liquid chromatograph consists of a vessel 1 with an eluent,, an eGent supply pump 2, a chromatographic column 3, a detector 5 of a collection of 5 fractions, a weight meter 6, a peak area integrator 7, a discriminator 8 of the detector signal level (peak separator) ₅ of the collection control unit 9 ' no fractions, 10 mass meter of an individual eluent fraction, block II of multiplication of the mass of an individual eluent fraction by the peak area.

В частном случае исполнения измеритель 10 массы отдельной фракции может быть выполнен в виде.блока .измерения скорости потока элюента» & блок 1ί умножения сначала производит интегрирование скорости потока, а после этого умножает результат на сигнал интегратора площади пиков.In the particular case of execution, the mass meter 10 of an individual fraction can be made in the form of a unit for measuring the flow rate of the eluent ”& multiplication unit 1ί first integrates the flow rate and then multiplies the result by the signal of the peak area integrator.

Работает хроматограф следующим образом.The chromatograph operates as follows.

Насос 2 подает элюент из сосуда t на вход хроматографической колон— ’ ки 3, После ввода образца разделяемые фракции из колонки 3 проходят через детектор 4 и собираются в пробирки сборника 5 фракций.Pump 2 delivers the eluent from vessel t to the inlet of the chromatographic column 3. After the sample has been introduced, the separated fractions from column 3 pass through detector 4 and are collected in test tubes of the collection of 5 fractions.

По мере прохождения отдельных фракций через детектор 4 на выходе последнего формируется сигнал, про— порциональной концентрации искомого вещества в элюенте. Этот переменный сигнал поступаетна вход интегратора 7 площади пика и на вход дискриминатора 8 уровня сигнала детектора. По мере расходования элюента из сосуда 1 изменяется- , электрический сигнал весоизмерителя 6, который поступает на вход измерителя ?<Э массы отдельной фракции элюента.As individual fractions pass through detector 4, a signal is formed at the output of the latter, which is proportional to the concentration of the desired substance in the eluent. This variable signal is input to the integrator 7 of the peak area and to the input of the discriminator 8 of the detector signal level. As the consumption of the eluent from the vessel 1 changes, the electrical signal of the load meter 6, which is fed to the input of the meter? <E mass of a separate fraction of the eluent.

Как только сигнал детектора 4 возрастает до заданного уровня началй выхода очередного пика,, на выходе дискриминатора 8 вырабатывается сигнал начала сбора данного пика. Этот сигнал одновременно разрешает через блок 9 управления смену пробирки в сборнике 5 фракций, начала измерения текущего значения 5 массы сосуда элюента и начала интегрирования площади пика.As soon as the signal of detector 4 rises to a predetermined level of the beginning of the output of the next peak, a signal is generated at the output of discriminator 8 to begin collecting this peak. This signal simultaneously allows through the control unit 9 the change of the tube in the collector of 5 fractions, the beginning of the measurement of the current value 5 of the mass of the eluent vessel and the beginning of the integration of the peak area.

После снижения выходного сигнала детектора ниже установленного уровня дискриминатор 8 фиксирует момент окончания выхода данной фракции и вырабатывает сигналы на смену пробирок в сборнике 5 фракций, на окончание измерения текущего значения массы сосуда 1 и на прекращение интегрирования площади пика. По этой же команде значение массы элюента, Отобранного из сосуда 1 за . время прохождения фракции, и значение интеграла площади пика передают2® ся на блок 11 умножения и результат iперемножения выдается в виде количества анализируемого вещества.After the detector output signal is lower than the set level, the discriminator 8 captures the moment the output of this fraction ends and generates signals to replace the tubes in the collection of 5 fractions, to complete the measurement of the current value of vessel mass 1 and to stop the integration of the peak area. According to the same command, the mass value of the eluent, Selected from the vessel 1 per. the passage time of the fraction and the value of the peak area integral are transferred 2® to the multiplication block 11 and the result of the multiplication is given out in the form of the amount of the analyte.

Поскольку калибровка детектора •.хроматографа по контрольной смеси 25 (эталону) производится в весовых концентрациях вещества в единицах массы элюента, а измерение расхода элюента через колонку также производится в единицах массы элюента, то и окон30 чательный результат после всех расчетов сразу выдается в единицах массы искомого вещества.Since the calibration of the detector with a control mixture 25 (standard) is carried out in weight concentrations of the substance in units of mass of the eluent, and the measurement of the flow rate of the eluent through the column is also carried out in units of mass of the eluent, the final result after all calculations is immediately displayed in units of the mass of the sought substances.

Как правило, весовые концентрации ‘ искомых веществ в потоке элюента на 35 много порядков меньше единицы, потому изменением массы элюента, входящего в колонку и выходящего из нее, пренебрегают и вместо прямого взвешивания искомого вещества проводят 40 прямое взвешивание элюента, поступившего в колонку (отобранного из сосуда) .As a rule, the weight concentrations of the desired substances in the eluent stream are many orders of magnitude less than unity, therefore, the change in the mass of the eluent entering and leaving the column is neglected, and instead of directly weighing the sought substance, 40 direct weighing of the eluent entering the column (selected from vessel).

Измерение больших масс элюента · производить на электронных весах 4$ можно с более высокой точностью, что и позволяет получить в конечном счете более высокую точность вычисление искомой массы.Measurement of large masses of the eluent can be performed on electronic scales of $ 4 with higher accuracy, which allows ultimately to obtain higher accuracy in the calculation of the desired mass.

В частном случае исполнения, можSQ но производить непрерывное измерение скорости потока элюента и перемножение этой скорости на текущее значение сигнала детектора. В результате можно получать на выходе хромато55 графа непрерывное показание количества искомого вещества, а непрерывное интегрирование этого измерения дает количество вещества, уже собранного в пробирку.In the particular case of execution, it is possible to continuously measure the flow rate of the eluent and multiply this speed by the current value of the detector signal. As a result, it is possible to obtain a continuous indication of the amount of the sought substance at the output of the chromatograph55 graph, and continuous integration of this measurement gives the amount of the substance already collected in the test tube.

Claims

A LIQUID CHROMATOGRAPH containing a vessel connected in series with an eluent, a pump, a chromatographic column, a detector, an individual fraction mass meter and a fraction collector, as well as a weight meter on which an eluent vessel is mounted, a peak area integrator, a detector signal level discriminator and a fraction collector control unit, characterized in that, in order to improve the accuracy of determining the amount of emitted substance in a separate fraction, it is additionally equipped with a multiplication unit, which is connected to the outputs A separate mass fraction discriminator and an integrator peak areas.

SU _t , 1263045 A1 ϊ