SU1204639A1

SU1204639A1 - Способ определени концентрации ингибиторов биологической активности

Info

Publication number: SU1204639A1
Application number: SU833652917A
Authority: SU
Inventors: Валентина Александровна Кратасюк; Раиса Ивановна Кручинина; Александр Михайлович Кузнецов; Абрам Михайлович Фиш; Вячеслав Дмитриевич Макаренко
Original assignee: Институт Биофизики Со Ан Ссср; Красноярский государственный медицинский институт
Priority date: 1983-10-11
Filing date: 1983-10-11
Publication date: 1986-01-15

Description

Изобретение относитс к исследованию материалов химическими способами , в частности с помощью ферментных реакций, и может быть использовано дл определени концентрации ингибиторов, в частности металлов платиновой группы, вл ющихс компонентами сточных вод и воздушной среды промышленных предпри тий, оседающих на одежду и кожу работающих.

Цель изобретени - повышение точности и.чувствительности определени концентраций соединений металлов платиновой группы. .

Пример. Дл определени концентрации платиноидов в растворе стро т калибровочную.кривую. Дл этого используют частично очищенные прпараты люциферазы, содержащие активность НАДН:ФМН-:оксидоредуктазы.

Приготавливают раствор, содержащий 100 мкл препарата люциферазы и НАДК:ФМН-оксидоредуктазы (3,75 мкг белка в 1 мл препарата), 50 мкл 0,0005%-ного раствора тетрадеканал 50 мкл 5,4-10 ® М раствора НАДН. Измер ют величину интенсивности сиече- ни ,достигнутую через 20 с без вещества (Ijo) и при внесении в реакционную смесь разных концентраций хлористоплатиноводородной кислоты.

Результаты представлены в табл. 1

5,240

,-6

5,2-10

г5

5, 0,001- 0,0021 0,0052

,-4

По этим данным стро т калибровочную кривую. При добавлении в реакционную смесь неизвестного количества хлористоплатиноводородной кислоты получают сравнивают измеренные величины с калибровочной кривой и определ ют, что концентраци хлористоплатиноводородной кислоты в растворе равна 7,.

Чувствительность анализа - 5,210 %-ного раствора хлористоплатиноводородной кислоты, что соответствует 0, или 2, б г, точность определени ,5%.

Примеры реализации способа дл граничных значений времени, равных 10 и 30 с, приведены в табл. 1 и 3.

Примеры реализации способа определени концентрации хлористоплатиноводородной кислоты при разном содержании ШН в реакционной смеси приведены в табл. 2 и 4.

При увеличении содержани ФМН в реакционной смеси до 5, М и 5,410 М чувствительность анализа хлористоводородной кислоты меньще -0,0001% и 0,002% соответственно.

При уменьшении содержани ФМН в реакционной смеси становитс невозможным определение концентрации ингибиторов, так как интенсивность свечени становитс малой.

Т а б л и ц а 1

24

18

14

8

7

3

0,25-10

.-8

0,5- 10

г 8

0,5500 0,5,40

л 8

«-6

,0,5 ,101035 10 13 15 16

,.

0,25-10

,-Э

0,510

г8

0,5-10 М 0,5 10 М О/З-Ю М 0,

,5%

0,55-10

,-8

0, 0,6 10 М 0,6 10 М 0,

+7,2%

40 1625323738

40 1224303637

461122273236

72614182123

Таблица 4

0,3-10 М 0,3 10 М 0,3-10 %1

+5%

1 -10 М

+2,5%

+2,М 0,6 10 М 0,

+2,5+

+2,5%

,5%

1 ,2-10 М

+2,5%

Claims

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ ИНГИБИТОРОВ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ, включающий обработку анализируемой пробы реакционной смесью, содержащей альдегид и НАДН в насыщающих концентрациях, люциферазу, НАНД: ФМН-оксидоредуктазу и ФМН, отличающийся тем, что, с целью повышения точности и чувствительности определения концентраций соединений металлов платиновой группы, реакционная смесь содержит ФМН в количестве (0,5-0,55) .·10~⁸Μ, а концентрацию определяют по вели.чине интенсивности свечения, достигаемой через 10-30 с.

S £ о □>. оо ςρ