SU1167198A1

SU1167198A1 - Nutrient medium for growing bifidobacteria of bacterium bifidum no.1 strain

Info

Publication number: SU1167198A1
Application number: SU833600085A
Authority: SU
Inventors: Нина Павловна Ефимова; Алла Михайловна Ивакина; Галина Дмитриевна Борискина; Любовь Алексеевна Пределина; Валерий Александрович Несчисляев
Original assignee: Пермский Ордена Трудового Красного Знамени Научно-Исследовательский Институт Вакцин И Сывороток
Priority date: 1983-06-03
Filing date: 1983-06-03
Publication date: 1985-07-15

Abstract

ПИТАТЕЛЬНАЯ СРЕДА ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ БИФИДОБАКТЕРИЙ ШТАММА BACTERIUM BIFIDUM № 1, содержаща источник азотистых соединений, соевый экстракт , сернокислое железо, хлористый натрий, лактозуS агар-агар, отлича.нгща с тем, что, с целью повышени выживаемости бифидобактерий в качестве источника азотистых соединений используют ферментативный гидролизат лошадиного сывороточного альбумина с содержанием амннного азота 160-700 мг) при следующем содержании компонентов , мас.%: Сернокислое железо 0,0002-0,001 0,4-0,6 Хлористый натрий . соевый 3,0-7,0 экстракт 0,8-t,2 Лактоза W 0,075тО,1 Агар-агар с Ферментативный гидролизат лошадиного сьюороточного Остальное альбумина О) со 00Culture medium for culturing strains of bifidobacteria BACTERIUM BIFIDUM № 1, comprising a source of nitrogenous compounds, soy extract, iron sulfate, sodium chloride, laktozuS agar-agar, otlicha.ngscha in that, in order to increase the survival of bifidobacteria as the source of nitrogen compounds using enzymatic hydrolyzed horse serum albumin with the content of amnna nitrogen 160-700 mg) with the following content of components, wt.%: Iron sulphate 0.0002-0.001 0.4-0.6 Sodium chloride. soy 3,0-7,0 extract 0,8-t, 2 Lactose W 0,075tO, 1 Agar-agar with Enzymatic hydrolyzate of horse short serum Albumin O balance with 00

Description

Изобретение относитс к микробиологической промышленности и может быть использовано дл производства препарата - бифкдумбактерина.The invention relates to the microbiological industry and can be used for the manufacture of the drug - bifcumbumin.

Цель изобретени - повьшение выживаёмости би|)идобактерий.The purpose of the invention is to increase the survival of bi |) bacteria.

Сущность изобретени заключаетс в следук цем.The essence of the invention is to follow.

Питательна среда включает сернокислое железо, хлористый натрий, лактозу, соевый экстракт и агарагар и содержит в качестве источника азотистых соединений гидролизат сьтороточного альбумина при следующем содержании компонентов на 1 ft среды, вес.%:The nutrient medium includes ferrous sulphate, sodium chloride, lactose, soybean extract and agaragar and contains as a source of nitrogenous compounds a tertiary albumin hydrolyzate with the following content of components per 1 ft medium, wt.%:

Железо сернокислое 0,0002-0,001Iron sulfate 0.0002-0.001

Натрий хлористый 0,4-0,6Sodium chloride 0.4-0.6

10%-ный соевый10% soy

экстракт3,0-7,0extract 3.0-7.0

Лактоза0,8-1,2Lactose 0.8-1.2

Агар-агар0,075-0,1Agar Agar0.075-0.1

Альбуминовый гидролизатAlbumin hydrolyzate

с содержанием аминногоwith amine content

азота 160-200 мг% Остальное Nitrogen 160-200 mg% Else

Известно, что сывороточный альбумин содержит значительное количество цистеина, что позвол ет отказатьс от введени данного компонента в состав альбуминовой среды и использовать в качестве активатора ферментативной активности бифидобактерий более дешевый компонент - сернокисло железо. Соевый экстракт, получаемый из кормового соевого шрота, содержит витамины группы В и используетс в качестве витаминной добавки.It is known that serum albumin contains a significant amount of cysteine, which allows refusing the introduction of this component into the composition of the albumin medium and using the cheaper component, ferrous sulfate, as an activator of the enzymatic activity of bifidobacteria. Soy extract, derived from fodder soybean meal, contains B vitamins and is used as a vitamin supplement.

Приготовление альбуминового гидролиз ата.Preparation of albumin hydrolysis of ata.

На 1 л альбуминовой фракции белков лошадиной сыворотки, получаемой после высаливани глобулинов, добавл ют 220 г сернокислого аммони и тщательно перемешивают до полного рарастворени соли. Полученный раствор фильтруют через фильтровальные кассеты в меппсах из технического волокн Осадок альбуминов в мешках помещают под механический пресс дл более полного удалени из него смачивающей жидкости. Степень отпрессовки альбуминов вл етс достаточной, когда осадок белка приобретает желтовато-оранжевый цвет и становитс ломким. Отпрессованный альбумин . счищают с мешков и хран т при 4 С не более 30 дней. Сухой альбумин закладывают в вискозные гильзы по ВО 100 г в каждую, помещают в диализационные ванны с проточной водопроводной водой (температура воды +5-10 С) Диализ длитс 20-24 ч до достижени 0,3%-ной концентрации сульфата аммони в растворе.220 grams of ammonium sulphate is added to 1 liter of albumin fraction of horse serum proteins, obtained after salting out globulins, and thoroughly mixed until the salt is dissolved. The resulting solution is filtered through filter cassettes in technical fiber mepps. The precipitates of albumin in bags are placed under a mechanical press to more completely remove the wetting liquid from it. The amount of compression of albumin is sufficient when the protein precipitate acquires a yellowish-orange color and becomes brittle. Pressed albumin. cleaned from bags and stored at 4 ° C for no more than 30 days. Dry albumin is placed in viscose sleeves of 100 g BO each, placed in dialysis baths with running tap water (water temperature + 5-10 ° C) Dialysis lasts 20-24 hours until a 0.3% concentration of ammonium sulfate in solution is reached.

Содержание белка в диализате составл ет 13-16%. Диализат развод т дистиллированной водой до З содержани альбумина.,Добавл ют панкреати 10 г на 1 л, хлороформ 20-30 мл на 1 л.The dialysate protein content is 13-16%. Dialysate is diluted with distilled water to 3% albumin., Pancreatic 10 g per 1 l is added, chloroform 20-30 ml per 1 l.

Гидролиз ведут в течение 40-48 ч при с периодическим перемешиванием до прекращени нарастани аминного азота. В процессе гидролиза рН поддерживают на уровне 8,0-8,5, добавл 20%-ный раствор NaOH. При прекращении нарастани аминного азота (420-600 мг%) гидролизат декантируют , устанавливают с помощью трихлоруксусной; кислоты рН 4,7, кип т т 10 мин, фильтруют через , миткаль. В готовом гидролизате устанавливают рН 7,0 с помощью 20%-ного раствора NaOH и стерилизуют при 30 мин.The hydrolysis is carried out for 40-48 hours with occasional stirring until the growth of amine nitrogen is stopped. In the process of hydrolysis, the pH is maintained at 8.0-8.5 by adding 20% NaOH solution. When termination of the growth of amine nitrogen (420-600 mg%), the hydrolyzate is decanted, set with trichloroacetic acid; acids pH 4.7, boiled for 10 minutes, filtered over, calico. The finished hydrolyzate is adjusted to pH 7.0 with a 20% NaOH solution and sterilized at 30 minutes.

Пример 1, Альбуминовый гидролизат развод т до содержани аминного азота 160 мг% дистиллированной водой. С помощью 20%-ного раствора NaOH устанавливают рН 7,6.К 800 мл гидролизата дьбавл ют 0,002 г сернокислого железа, 4 г хлористого натри , 0,75 г агар-агара.Example 1 Albumin hydrolyzate was diluted to an amino nitrogen content of 160 mg% distilled water. With a 20% NaOH solution, the pH is adjusted to 7.6. 0.002 g of ferrous sulphate, 4 g of sodium chloride, 0.75 g of agar-agar are added to 800 ml of hydrolyzate.

Кип т т 10 мин и добавл ют 8 г и 30 г 10%-ного соевого экстракта. Объем среды до вод т до 1.л добавлением альбуминового -гидролизата с таким же содержанием аминного азота (160 мг%). Среду стерилизуют при 110°С в течение 30 мин.Boil for 10 minutes and add 8 g and 30 g of 10% soybean extract. The volume of the medium is adjusted to 1.l by the addition of an albumin -hydrolyzate with the same content of amino nitrogen (160 mg%). The medium is sterilized at 110 ° C for 30 minutes.

( . . . (.

Приме р 2. Альбуминовый гидролизат развод т до содержани аминного азота 180 мг% дистиллированной водой. Устанавливают рН 7,8 с помощью 20%-ного раствора NaOH К 800 мл .гидролизата добавл ют 0,005 г сернокислого железа, 5 г хло ристого натри 0,8 г агар-агара.Example 2. The albumin hydrolyzate is diluted to an amino nitrogen content of 180 mg% distilled water. The pH is adjusted to 7.8 with 20% NaOH solution. To 800 ml of hydrolyzate, 0.005 g of ferrous sulphate, 5 g of sodium chloride, 0.8 g of agar-agar are added.

Кип т т 15 мин и добавл ют 10 г лактозы и 50 г 10%-ного соевого экстракта. Объем среды довод т до 1 л добавлением альбуминового гидролиэата с содержанием аминного азота 280 мг%. Среду стерилизуют при в течение 30 мин.The mixture is boiled for 15 minutes and 10 g of lactose and 50 g of 10% soybean extract are added. The volume of the medium is brought to 1 liter by the addition of albumin hydrolyte with an amino nitrogen content of 280 mg%. The medium is sterilized at 30 minutes.

3131

Пример 3. Альбуминовый гидролизат развод т до содержани аминного азота 200 мг% дистиллированной водой С помощью 20%-нрго раствора NaOH устанавливают. рН 7,8. К 800 мл гвдролизата добавл ют 0,01 г сернокислого железа, 6 г хлористого натри , 1,0 г агар-агара.Example 3. An albumin hydrolyzate is diluted to an amino nitrogen content of 200 mg% with distilled water. Using a 20% solution of NaOH, it is set. pH 7.8. 0.01 g of ferrous sulphate, 6 g of sodium chloride, 1.0 g of agar-agar are added to 800 ml of gvdrolizat.

Кип т т 10 мин и добавл ют 12 г лактозы и 70 г 10%-ного соевогоBoil for 10 minutes and add 12 g of lactose and 70 g of 10% soy

16719841671984

экстракта. Объем среды довод т до 1 л добавлением альбуминового гидролизата (аминный азат 200 мг%)I Среду стерилизуют при в течение 30 мин.extract. The volume of medium is made up to 1 l by adding albumin hydrolyzate (amine azat 200 mg%). I The medium is sterilized for 30 minutes.

Количество выросших колоний бифидобактерий до и после лиофильной сушки в зависимости от примен емой 10 среды представлено в таблице.The number of grown colonies of bifidobacteria before and after freeze drying, depending on the medium used, is presented in the table.

Альбуминова . 18+2 5±1 Блаурокка (контроль) 15+1 5+1 1+1 18+2 5+1 1+1 1+1 14+2 5+1 1+1Albuminova. 18 + 2 5 ± 1 Blaurock (control) 15 + 1 5 + 1 1 + 1 18 + 2 5 + 1 1 + 1 1 + 1 14 + 2 5 + 1 1 + 1

Claims

NUTRITIONAL MEDIUM FOR CULTIVATION OF BACTERIUM BIFIDUM ¢ 1 STRAIN BIFIDOBACTERIA, containing a source of nitrogenous compounds? <, 10% soybean extract, ferrous sulfate, sodium chloride, lactose, agar-agar, characterized in that it is more beneficial for As a source of nitrogen compounds, an enzymatic hydrolyzate of equine serum albumin with an amine nitrogen content of 160-700 mg% is used with the following components, wt.%:

Iron sulfate. Sodium chloride. 10% Soya Lactose Agar Agar Soybean Extract Albuminous Serum Albumin Hydrolyzate

0,0002-0.0

0.4-0.6

3.0-7.0

0.8-1.2 0.075-0.1

Rest