SU1153279A1

SU1153279A1 - Device for making electrophoresis in vertical gel plates

Info

Publication number: SU1153279A1
Application number: SU833684268A
Authority: SU
Inventors: Галина Евгеньевна Цимаркина; Лев Николаевич Волконский; Рувин Иохонанович Рафалович; Владимир Леонтьевич Тюрин; Елена Израилевна Панкратьева
Original assignee: Специальное Конструкторское Бюро Биофизической Аппаратуры
Priority date: 1983-12-28
Filing date: 1983-12-28
Publication date: 1985-04-30

Abstract

УСТРОЙСТВО ДЛЯ ЭЛЕКТРОФОРЕЗА В ВЕРТИКАЛЬНЬ1Х ПЛАСТИНАХ ГЕЛЯ, содержащее нижнее электродное отделение и размещенное в нем верхнее электродное отделение, кас :еты дл пластин гел и теплообменники , герметично установленные в пазах верхнего электродного отделени , крьш1ку дл герметизации гелевых кассет снизу, о т л и ч а- ю щ е е с тем, что, с целью расширени функциональных возможностей устройства путем обеспечени работы в различных гел х и со;кращсни времени подготовки устройства к работе, верхнее электродное отделение снабжено имеющим прилив у нижнего открытого конца пр моугольным углублением, в котором с помощью эластичной манжеты, установленной по периметру верхнего конца углублени , размещен компактный блок из чередующихс плоских теплообменников и кассет дл пластин гел , при этом крьппка дл гер (Л метизации гелевых кассет снизу снабжена выступом, вход щим в паз нижнего открытого конца углублени , и имеет конусообразное углубление со штуцером.DEVICE FOR ELECTROPHORESIS IN VERTICAL GEL PLATES, containing the lower electrode compartment and the upper electrode compartment located in it, contacts: gel plates and heat exchangers, sealed in the grooves of the upper electrode compartment; - that with the aim of expanding the functional capabilities of the device by providing work in various gels and with; the time of the preparation of the device for operation is increased, the upper electrode compartment is equipped having a tide at the lower open end of a rectangular recess, in which, using an elastic cuff installed along the perimeter of the upper end of the recess, a compact block of alternate flat heat exchangers and cassettes for gel plates is placed, with a hook for the ger (L label gel cassettes are provided with a bottom in the groove of the lower open end of the recess, and has a conical recess with a choke.

Description

1 Изобретение относитс к лабораторной технике, в частности к устройствам , примен емым дл разделени высокомолекул рных соединений на отдельные компоненты в соответствии с их размерами и электрофоретической подвижностью, и может быть использовано в области медицины , биологии, химии и т.д. Известны устройства дл электрофореза в вертикальных блоках гел , содержащие одну или несколько кассет, образованных двум пластинами , скрепленными вместе на опреде ленном рассто нии, между которымиобразуетс открытое сверху и снизу пространство дл гел , и двух электродных отделений верхнего и нижнеГго по отношению к гелю и . Непременным условием конструкции этих устройств вл етс герметичное соединение гелевой кассеты с верхней электродной камерой дл исключени перетекани раствора в ниж нюю камеру, особенно при работе с разными по составу электродными буферами . Кроме того, Б устройствах необхо димо уплотн ть гелевые кассеты с боковых сторон. Это требует наличи механически сложных пружинных или м таллических зажимов. Наиболее близким техническим решением к изобретению вл етс устро ство дл электрофореза в вертикальных ппастинах гел , состо щее, из нижнего электродного отделени и размешенного в нем верхнего электро ного отделени с электродами, кассе дл пластин геп , соединенных своей верхней частью при помощи герметизи рующего элемента с пазами верхнего электродного отделени , многосек ционное охлаждающее устройство, сос то щее из р да вертикальных стекл нных трубок, соединенных поперечными трубками, подключенными к термостатирующему устройству,а также крьпику дл герметизации гелевых кас сет снизу . Однако известное устройство име ет сложную конструкцию уплотнений, котора удорожает его стоимость и увеличивает врем подготовки к рабо те. При этом невозможна одновременна зачивка- нескольких гелевых кассет градиентами по пористости и по рН гелеобразующими растворами чтобы получить в них идентичность 92 условий делени , а также невозможно варьировать толщину гелевых блоков, что ограничивает его функциональные возможности. Цель изобретени - расширение функциональных возможностей устройства путем обеспечени работы в различных гел х и сокращение времени подготовки устройства к работе. Цель достигаетс тем, что в устройстве дл электрофореза в вертикальных пластинах гел , содержащем нижнее электродное отделение и размещенное в нем верхнее электродное отделение, кассеты дл пластин гел и теплообменники, герметично установленные в пазах в.ерхнего электродного отделени , крышку дл герметизации гелевых кассет снизу, снабжено имеющим прилив у нижнего открытого конца пр моугольным углублением , в котором с помощью эластичной манжеты, установленной по периметру верхнего конца углублени , размещен компактный блок из чередующихс плоских теплообменников и кассет дл пластин гел , при этом крьпнка дл герметизации гелевых кассет снизу снабжена выступом, вход Щим в паз нижнего открытого конца углублени , и имеет конусообразное углубление со штуцером. На фиг. 1 изображено устройство дл электрофореза в пластинах гел , поперечный разрез; на фиг.2то же, продольный разрез (электрод верхнего отделени показан условно|; на фиг. 3 - верхнее отделение с устройством дл заливки гелеобразующего раствора в кассеты. Устройство состоит из нижнего по отношению к гелю электродного отделени 1, в которое вставлено верхнее электродное отделение 2, кассет 3 дл пластин гел , собранных в чередующемс пор дке с теплообменниками 4 с помощыо эластичной манжеты 5. Верхнее электродное отделение 2 выполнено в виде пр моугольной емкости со скошенным к центру дном 6. В средней части дна 6 по всей ширине верхнего отделени 2 выполнено пр моугольное углубление 7. С нижней стороны углублени 7 выполнен паз 8, ширина которого соответствует ширине пластины гел , а длина - рассто нию между крайними гелевыми кассетами 3. Параллельно углубле3г1 The invention relates to laboratory technology, in particular to devices used to separate high-molecular compounds into individual components in accordance with their size and electrophoretic mobility, and can be used in the field of medicine, biology, chemistry, etc. Electrophoresis devices in vertical gel blocks are known, containing one or several cassettes formed by two plates fastened together at a certain distance, between which a space open at the top and bottom for the gel and two electrode compartments of the upper and lower gels relative to the gel and are formed. An indispensable condition for the design of these devices is the tight connection of the gel cassette with the upper electrode chamber to prevent the solution from flowing into the lower chamber, especially when working with different in composition electrode buffers. In addition, B devices need to compact gel cassettes from the sides. This requires mechanically complicated spring or metal clips. The closest technical solution to the invention is an arrangement for electrophoresis of gel in vertical pastes, consisting of the lower electrode compartment and the upper electrical compartment placed in it with the electrodes, the cash register for the hepat plates, connected by its upper part with the help of a sealing element grooves of the upper electrode compartment, a multisection cooling device, consisting of a series of vertical glass tubes connected by transverse tubes connected to a thermostatic device roystvu and krpiku for sealing gel k'as set below. However, the known device has a complex seal design, which increases its cost and increases the preparation time for operation. At the same time, it is not possible to simultaneously inject several gel cassettes with gradients of porosity and pH with gel-forming solutions in order to obtain 92 division conditions in them, and it is also impossible to vary the thickness of the gel blocks, which limits its functionality. The purpose of the invention is to expand the functionality of the device by providing work in various gels and reducing the time it takes to prepare the device for operation. The goal is achieved by the fact that in the device for electrophoresis in vertical gel plates containing the lower electrode compartment and the upper electrode compartment placed in it, gel plate cassettes and heat exchangers hermetically installed in the grooves of the upper electrode compartment, a cover for sealing the gel cassettes from below, equipped with a tide at the lower open end of a rectangular recess, in which with a elastic cuff installed along the perimeter of the upper end of the recess, a compact block of ereduyuschihs plane exchangers cassettes and plates for the gel, the gel to seal krpnka cassette bottom provided with a projection, the incoming into the groove of the lower open end of the recess, and has a conical recess with a nipple. FIG. 1 shows a device for electrophoresis in gel plates, a cross section; in Fig. 2 the same is a longitudinal section (the electrode of the upper compartment is shown conventionally;; in Fig. 3, the upper compartment with a device for pouring a gel-forming solution into cassettes. The device consists of a lower electrode compartment 1 relative to the gel, into which the upper electrode compartment is inserted 2, cassettes 3 for gel plates assembled in alternate order with heat exchangers 4 by means of an elastic cuff 5. The top electrode compartment 2 is made in the form of a rectangular tank with the bottom beveled towards the center 6. In the middle part of the bottom 6 all over ine upper compartment 2 formed a rectangular recess 7. On the bottom side of the recess 7 a groove 8 whose width corresponds to the width of the gel plate and the length - the distance between the extreme gel cassette 3. Simultaneously ugluble3g

ию 7 вблизи одной из стенок верхнего электродного отделени 2 смонирован электрод 9. Другой электрод 10 закреплен с наружной стороны электродного отделени 2 на таком е рассто нии от концов кассет 3, как и верхний электрод 9.An electrode 9 is molded near one of the walls of the upper electrode compartment 2. The other electrode 10 is fixed on the outside of the electrode compartment 2 at the same distance from the ends of the cassettes 3 as the upper electrode 9.

Верхнее электродное отделение 2 установлено на дне нижнего элекродного отделени 1 на сгьециальные приливы 11, обеспечива возможность прохождени электрического тока к нижним концам гелевых блоков.The upper electrode compartment 2 is installed at the bottom of the lower electrode compartment 1 on the surge tides 11, allowing the passage of electrical current to the lower ends of the gel blocks.

Теплообменники 4 плотно прижаты к стекл нным пластинам гелевых кассет 3 с помощью эластичной манжеты 5, обеспечивающей, кроме этого , герметичность верхнего отделени 2.The heat exchangers 4 are tightly pressed to the glass plates of the gel cassettes 3 by means of an elastic cuff 5, which also ensures the tightness of the upper compartment 2.

Выходные штуцера 12 от теплообменников 4, соединенных последовательно между собой, вьшедены в прорезь 13 обоих электродных отделений . Нижнее электродное отделение 1 закрыто крышкой 14, на которую выведены штеккера 15 от электродов 9 и 10. Кассета 3 (фиг. 2) состоит из стекл нных пластин 16 и боковых прокладок 17, определ ющих толщину гелевой пластины. Дл заполнени гелевых кассет 3 (фиг. 3) гелеобразующим раствором в аппарате предусмотрено специальное устройство, состо щее из крьштки 18, прикрепленной к нижней части верхнего электродного отделени 2 с помощью специальных пружинных зажимов 19.The output of the nozzle 12 from the heat exchangers 4, connected in series with each other, entered into the slot 13 of both electrode compartments. The lower electrode compartment 1 is closed by a lid 14, to which plugs 15 are led away from electrodes 9 and 10. Cartridge 3 (Fig. 2) consists of glass plates 16 and side spacers 17, which determine the thickness of the gel plate. To fill the gel cassettes 3 (Fig. 3) with the gel-forming solution, a special device is provided in the apparatus, consisting of a cap 18 attached to the lower part of the upper electrode compartment 2 with the help of special spring clips 19.

Крьшака 18 представл ет собой пр моугольную пластину с выступом 20, имеющим размеры паза 8 верхнего электродного отделени 2. Внутри выступа 20 выполнено конусообразное углубление с центральным отверстием 21, штуцер 22 которого предназначен дл соединени с насосом формировател градиента (не показан, если заполнение кассет необходимо проводить раствором с градиентом концентрации акриламида или рН.Krshaka 18 is a rectangular plate with a protrusion 20 having dimensions of 8 groove of the upper electrode compartment 2. Inside the protrusion 20 there is a cone-shaped recess with a central hole 21, the fitting 22 of which is intended to be connected to the gradient former pump pump (not shown if cassette filling is necessary carry out the solution with a gradient of acrylamide concentration or pH.

При необходимости заполнени кассет 3 однородным гелеобразующим раствором в конусообразное углубление крышки 18 может быть установлен вкладьш 23 с пробкой 24, вьшолненной из эластичного материала. По пери .метруфланца 25 крышки 18 закреплена резинова прокла,цка 26. Дл образовани в гелевых пластинах стар532794If it is necessary to fill the cassettes 3 with a homogeneous gel-forming solution into the cone-shaped groove of the cover 18, an insert 23 can be installed with a stopper 24 made of elastic material. Along the perimeter of the flange 25 of the lid 18 is fixed a rubber proclave, tsk 26. For the formation in old gel plates 532794

товьгх канавок в верхнюю часть кассеты 3 вставлены гребенки 27.Combo grooves in the upper part of the cassette 3 inserted combs 27.

Устройство работает следующим образом .The device works as follows.

5 В верхнее электродное отделение 2 на дно имеющегос в нем углублени 7 помещают в чередующемс пор дке теплообменники 4 и кассеты 3 дл пластин гел . Сверху на них одевают5 In the upper electrode compartment 2, to the bottom of the cavity 7 therein, heat exchangers 4 and gel plates 3 are placed in alternate order. On top of them dress

0 эластичную манжету 5 уплотн ею зазоры между блоком кассет 3 и стенками углублени 7. Снизу закрепл ют крышку 18 с помощью зажимов 19. В слу. случае необходимости заполнени кассет 3 однородным гелем в углубление крьщ1ки 18 помещают вкладьш 23 с пробкой 24, герметизиру тем самым отверстие 21. При этом гелеобразуюций раствор заливают пипеткой в0 an elastic cuff 5 seals the gaps between the cassette unit 3 and the walls of the recess 7. The bottom cover 18 is secured with clips 19. In the case. If it is necessary to fill the cassettes 3 with a uniform gel, a cavity 23 with a stopper 24 is placed in the recess of the cavity 18, thereby sealing the hole 21. At the same time, the solution is filled with a pipette into the gel-forming

Q одну из кассет 3, откуда он по щели между вкладьшем 23 и дном блока кассет 3 перетекает в другие кассеты 3, обеспечива тем самым одинаковый уровень раствора в каждойQ one of the cassettes 3, from where it flows along the gap between the insert 23 and the bottom of the cassette unit 3 into the other cassettes 3, thereby ensuring the same level of solution in each

5 кассете.5 cassette.

При необходимости заполнени кассет 3 градиентным по концентрации акриламида гелем штуцер 22 соедин ют с формирователем градиента (не показан и снизу ведут заполнение кассет 3 необходимым раствором. При этом вкладьпп 23-из крышки 18 должен быть предварительно удален. Во всех случа х гелеобразующий раствор заполн ет не только кассеты, но иIf it is necessary to fill the cassettes 3 with a gel of acrylamide concentration gel, the fitting 22 is connected to the gradient former (not shown and the cassettes 3 are filled with the necessary solution from the bottom. In this case, the input 23 from the cover 18 must be removed beforehand. In all cases, the gel-forming solution fills not only cassettes, but also

щели между ними, стенками углублени и теплообменниками 4. После полимеризации гел крьшгку 18 отсоедин ют от верхнего электродного отделени 2, удал из нее остатки гел . Полимеризованный гель надежно уплотн ет все щели до манжеты. Верхнее электродное отделение 2 помещают в нижнее электродное отделение 1. Заливают электролит до метки в the gaps between them, the walls of the recess and the heat exchangers 4. After the polymerization of the gel, the cap 18 is disconnected from the upper electrode compartment 2, removing the remaining gel from it. The polymerized gel reliably seals all the slits to the cuff. The upper electrode compartment 2 is placed in the lower electrode compartment 1. Fill the electrolyte to the mark in

оба электродных отделени , в гелевые пластины 16, в канавки, образованные после удалени гребенок 27, внос т анализируемые пробы под слой электролита. Закрывают устройствоBoth electrode compartments, in the gel plates 16, in the grooves formed after the combs 27 have been removed, the analyzed samples are placed under the electrolyte layer. Close the device

0 крышкой 14 и соедин ют электродные щтеккера 15 с источниками питани (не показан). При этом в гелевой пластине 16 создаетс электрическое поле, под действием которого0 by a lid 14 and connect the electrode plugs 15 to power supplies (not shown). In this case, an electric field is created in the gel plate 16, under the action of which

5 фракции анализируемой пробы перемещаютс в геле со скорост ми, завис щими от их размеров и подвижности в злектрическом поле. По окон5, the fractions of the sample being analyzed are moved in the gel with speeds depending on their size and mobility in an electric field. By windows

Claims

DEVICE FOR ELECTROPHORESIS IN VERTICAL GEL PLATES, containing the lower electrode compartment and the upper electrode compartment located therein, cassettes for 1'el plates and heat exchangers hermetically installed in the grooves of the upper electrode compartment, a cover for sealing gel cassettes from below, from the bottom and a) the fact is that, in order to 'expand the functional capabilities of the device by • providing work in various gels and co _; the time taken to prepare the device for operation, the upper electrode compartment is provided with a rectangular recess having a tide at the lower open end, in which, using an elastic cuff mounted around the perimeter of the upper end of the recess, a compact block of alternating flat ~ heat exchangers and cassettes for plastic gel is placed the lid for sealing gel cassettes at the bottom is provided with a protrusion in the groove of the lower open end of the recess and has a cone-shaped recess with a fitting.

SU ,,, 1153279>

1 153279