SU1151230A1 - Способ определени физиологической совместимости подво и приво - Google Patents

Abstract

СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ СОВМЕСТИМОСТИ ПОДВОЯ И ПРИВОЯ по изменению их белкового спектра, отличающийс  тем, что, с целью повышени  достоверности , белковый спектр определ ют в корн х подво  дважды - до прививки и после прививки, когда глазок приво  тронетс  в рост и будет удалена надземна  часть подво . сл

Description

1 1

РГэобретение относитс  к сельскому хоз йству и может быть использовано дл  определени  совместимости прививаемых компонентов - подво  и приво .

Известны различные способы определени  совместимости прививаемых компонентов, например, по степени активности каталазы, согласно которым дл  хорошей совместимости приво  и подво  необходимо подбирать прививаемые компоненты с одинаковой степенью активности катапазы i .

Наиболее близким к предлагаемому  вл етс  способ, в котором соответствие прививаемых компонентов определ ют по белковому спектру коры. Из коры прививаемых компонентов приготавливают белковый экстракт, который потом подвергают электрофорезу , в результате чего белки распредел ютс  по зонам, кажда  из которых характеризуетс  своим значением относительной электрофоретической подвижности (ОЭП). При этом считаетс , что чем больше будет у прививаемых компонентов тождественных белков, тем более совместимыми будут эти растени  2.

Недостатком известного способа Явл етс  то, что о физиологической совместимости суд т до прививки компонентов . С биологической точки зрени  нельз  считать, что после прививки сохран етс  та же активность процессов у привоев и подвоев, так как образуетс  совершенно новый организм со свойственным только ему обменом веществ, определ ющийс  работой корневой системы одного организма (подво ) и листовым аппаратом другого организма (приво ),. Растени , считающиес  физиологически совместимыми по данному способу попада  в экстремальные услови  (засуха , температурные воздействи ), Испытывают угнетение из-за нарушени  синхронности физиологических процессов у подво  и приво  (дыхани , водный обмен, белковый обмен ) т.е,.оказьгеаютс  физиологически плохо совместимыми.

Кроме того, совместимость определ ют по белковому составу в провод щих ткан х, например в коре, а не в органах, ответственных за синтез , за преобразование метаболитов.

1230J

Таким образом, такие способы определени  физиологической совместимоети нельз  считать надежными.

Целью изобретени   вл етс  повы5 шение достоверности определени  физиологической совместимости прививаемых компонентов.

Поставленна  цель достигаетс  тем, что согласно способу определе0 ни  физиологической совместимости приво  и подво  белковый спектр определ ют .в корн х подво  дважды до прививки и после прививки, когда глазок приво  тронетс  в рост и будет удалена надземна  часть подво .

Выбор корней подво  дл  определени  белкового спектра обусловлен тем, что после прививки образуетс  единый организм с взаимосв занными и зависимыми процессами, а корни  вл ютс  ответственными за метаболизм целого р да веществ, поступающих из листьев и в листь .

Изменение белкового спектра 25 корней свидетельствует о лабильности подво , т.е. в корн х происход т перестройки под вли нием метаболитов приво , что указывает на лучшую физиологическую совместимость под30 войно-привойной комбинации.

Хорошо совместимыми можно считать те комбинации, у которых белковый спектр измен етс  больше чем наполовину .

Пример . Предлагаемьй способ

провер ли на  блоне и груше. Изучали эталонные сорто-подвойные комбинации , выделенные по продуктивности и хорошему состо нию деревьев в саду за много лет наблюдений. Дл  груши помимо подвоев Кавказской и Иволистной изучали грушу Березолистную и разные формы айвы. Из сортов были вз ты районированные (Виль ме, КюР наход щийс  в испытании сорт Васса. По  блоне были вз ты дл  исследовани  подвои селекции института 1-48-46 и 1-48-47 се нцы культурных сортов и М-7. На них прививали

сорта Кальвиль снежный, а на М-7

Старкримзон и сорт местной селекции Кубань.

Дл  получени  исходного материала в первом поле питомника при окулировке подвоев часть их оставл ют непривитыми и в последующей работе используют дл  сравнени  с привитыми растени ми. После того, как приживетс  глазок и растени  тронутс  в рос можно брать пробы дл  проверки соответстви  сорто-подвойных комбинаций , В естестпенных услови х, т.е. в питомнике, эти анализы провод т весной. Однако эти сроки могут быть значительно сокращены, если операци прививки провести в климатической камере в декабре -  нваре. Анализир вать растени  можно уже через 1,5ме после прививки, Дл  анализа берут растени  подво ев и привитые, с них удал ют корни. Берут 1 г навески, заливают трисглицинатным буфером рН - 8,3 с защитными добавками и тритоном Х-100 в 1%-ной концентрации дл  суммарного извлечени  белков в отношении 1:5, Пробу растирают, помещают на 1 ч в холодильник и затем- центрифугируют . Центрифугат очищают на сефа дексе Г-25 и полученный экстракт на нос т на щелочной гель 5%-ной концентрации (О, 1 мл) на трубочку дл  разделени  методом диск-электрофоре за. Разделение провод т на приборе Реанал в течение 1 ч 40 мин в три глицинатном буфере рН-8,3 при токе 2Ма на трубочку при концентрировании белков в верхнем геле и 5 мА при разделении. Способ приготовлени  растворов общеприн тый, но концентра11;ию раздел ющего гел  подбира ют специально дл  плодовых и виногр да. Наилучшее разделение получают в 5%-ном геле. После разделени  извлеченные гели фиксируют в 15%-ной трихлоруксус ной кислоте (ТХУ) в течение 15 мин затем откй 1вают в воде и на 30 мин помещают в окрашивающий раствор амидо-черного 10 В, Отмывку гелей провод т в 7%-ной уксусной кислоте. После обесцвечивани  гел  на столе с подсветом и матовым стеклом замер ют относительную электрофоретическую подвижность (ОЭП) и по количеству общих зон рассчитывают коэффициент родственных белков между нескулированным подвоем и после при вивки на него того или иного сорта. По этому показателю -суд т о приобретении корн ми подво  в результате прививки новых свойств по сравнению 1 4 с непривитым подвоем, т.е. под действием приво  в подвое по вл ютс  новые или исчезают старые белковые зоны, что в процессе дальнейшего роста и развити  позволит привитым растени м успешно переносить стрессовые ситуации и сорту полностью реализовать имеющиес  потенциальные генетически заложенные уровни продуктивности . В таблице приведены значени  относительной электрофоретической подвижности (ОЭП) белков, извлекаемых из корней до прививки и после прививки сорта Виль ма: на разные подвои . Степень физиологической совместимости можно характеризовать коэффициентом родственности, который представл ет собой отношение числа одинаковых зон белкового спектра до 1фйвивки и после прививки к числу зон после прививки. Так из таблицы видно, что в опытах, проведенных в июне 1980 г, с подвоем груши сорта Кавказска , число одинаковых зон, т,е, зон с одинаковым значением ОЗП, равн лось 7, число зон после прививки - 10, Следовательно, коэффициент родственности равен 0,7/7:10 0,7), Эти коэффициенты дл  других опытов приведены в таблице. Хорошо совместимыми можно считать комбинации, у которых, коэффициент родственности равен 0,3-0,4, среднесовместимыми - с коэффициентом 0,5-0,6 и плохо совместимыми с коэффициентом 0,7-1,0. I Предлагаемьгй способ определени  физиологической совместимости приво  и подво  отражает реакцию нового привитого растени  на уровне целого организма. Использование способа позволит ускорить подбор соответствующих прививочных компонентов по времени первого определени  в соответственных услови х (1 поле питомника ) или приводить подбор компонентов в контролируемых услови х (теплица, климатическа  камера), а кроме того, получить саженцы более жизнеспособные , устойчивые к стрессовым ситуаци м и, следовательно, более, продуктивные .

Claims (1)

1. СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЙ СОВМЕСТИМОСТИ ПОДВОЯ И ПРИВОЯ по изменению их белкового спектра, отличающийся тем, что, с целью повышения достоверности, белковый спектр определяют в корнях подвоя дважды - до прививки и после прививки, когда глазок привоя тронется в рост и будет удалена надземная часть подвоя.