SU1045104A1

SU1045104A1 - Способ определени концентрации органических веществ

Info

Publication number: SU1045104A1
Application number: SU823405433A
Authority: SU
Inventors: Юозас Юозович Кулис; Регина Антановна Виджюнайте
Original assignee: Институт биохимии АН ЛитССР
Priority date: 1982-03-11
Filing date: 1982-03-11
Publication date: 1983-09-30

Description

« Изобретение относитс к исследов нию материалов с помощью электричес ких средств путем определени электрохимических параметров, а именно путем измерени тока при электролиз во врем ферментных реакций, и може быть использовано в обработке промышленных сточных вод. Известен способ, где канцерогенные и мутагенные вещества, производ ные поли дерных ароматических ве-.ществ , определ ютс спектрометричес кими методами путем обработки иссле дуемых растворов ННОд Dl Способ обладает недостатком, св заннь1м с предварительной обработкой образцов, вл етс длительным и требует дорогосто щей аппаратуры и реагентов, неприменим в многокомпонентны/ч средах, какими вл ютс , например, сточные воды парфюмерной промышленности. Наиболее близким к предлагаемому гзл етс способ определени концентрации органических веществ, заклю эющийс в электролизе исследуемого раствора с аведенными в него ферментом и окислител.ем, растворенными в фосфатном буфере, и определении концентрации анализируемого вещества по Ееличине тока в потенциостатическом режиме пол ризации. Так, наприме дл определени глюкозы в крови провод т процесс ее электролиза в присутствии глюкозооксидозы в фосфатном буферном растворе, содержащем бензохинон. При этом изменениетока при фиксированном потенциале О,, 7 В . позвол ет определить концентрацию анализируемых веществ L2l . Однако по известному способу из-за специфичности фермента можно определить только концентрацию глюкозы . Поли дерные ароматические амины не трансформируютс индивидуальными ферментами или простыми полиферментными системами, поэтому способ не может быть использован дл оп ределени этих веществ. Цель изобретени - расширение класса исследуемых веществ. Поставленна цель достигаетс тем, что,- согласно способу определени концетрации органических веществ , заклю-1ающемс в электролизе исследуемого раствора с введенными в него ферментом и окислителем,, раст воренными в фосфатном буфере, и опOi ре елении концентрации анализируемого вещества по величине тока в потенциостатическом режиме пол ризации , в качестве фремента используют обработанную глутаровым альдегидом пероксидазу 0,1-1 мМ феррицианид кали , в качестве окислител - 0,050 ,1 мМ перекись водорода в 0,090 ,П М фосфатном буфере при рН 7,07 ,2, а пол ризацию провод т при потенциале электрода. Предлагаемый способ объ сн етс активацией, низкими концентраци ми производных поли дерных ароматических аминов пероксидазной реакции окислени феррицианида кали перекисью водорода. Способ определени концентрации органических веществ включает следующие операции: электролиз, измерение тока и определение концентрации органических веществ по изменению тока. Дл осуществлени способа примен етс электрод, анод которого изготовл ют из стеклоуглерода (диаметр k мм), катод из серебра, покрытого A(D1 . На анод нанос т раствор пероксидазы (0,5-1,0 мг/мл) в буферном растворе и обрабатывают 1-5°о-ным глутаровым альдегидом 12 ч при 20-25С. Анод с пероксидазой отмывают буферным раствором. П р и м е р 1 . Электролиз провод т в п-рисутствии пероксидазы, концентраци которой 0,5 мг/мл, обработанной 1, глутаровым альдегидом , 0,15 мМ ферроцианида кали 0,05 мМ Н, 0,1 М фосфатном буфере . Процесс провод т при 25°С рН . Определ ют зависимость стационарного тока от концентрации 0-дианизидина при ОВ табл. 1 Т а б л и ц а 1 Ток электрода, мкА Концентраци вещества ,. мкМ

3.10А510Д

Продолжение табл. 1

ТаблицаЗ

Злектрод действует более 15 дней. Как видно из табл. 1 - , с повышением концентрации анализируемых веществ наблюдаетс увеличение тока, что обусловлено ускорением переноса электронов в перокЪидазной реакции и зависит от природы анализируемого вещества, а также и от условий, при которых провод тс измерени .

П р и м е р 5 . Электролиз провод т в присутствии пероксидазы, концентраци которой 1 мг/мл, обрабо-танной глутаровым альдегидом До.объема 20 мл добавл ют 0,15 мМ ферроцианида кали и 0,07 мМ 2Внос т 0,1 мл исследуемого раствора диаминобензосульфокислоты. Определ ют ток электрода при ОВ рН 7,2 и на основе калибровочного графика рассчитывают концентрацию канцерогенного вещества (табл. 5).

Таблица5

0,053

5.0 0,050 5,0

5,0

0,052

0,

5,0

0,

5.0

0,019 0,020 0,020

0,021 0,019 Ошибка измерени не превышеет 5. 8 сравнении с известными способа определени концентрации органических веществ расшир ютс технологические возможности предлагаемого способа, так как он обеспечивает определение концентрации, кроме

0,212

0,100 Других органических веществ, также и канцерогенных; упрощаетс определение способа веществ. Кроме того, предлагаемый способ не требует сложной и дорогосто щей аппаратуры, большого количества вещества и позвол ет ускорить определение концентрации- веществ.

Claims

1571 СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИИ ОРГАНИЧЕСКИХ ВЕЩЕСТВ, заключающийся в электролизе исследуемого раствора с введенными в него ферментом и окислителем, 'растворенными в фосфатном буфере, и определения концентрации анализируемого вещества по величине тока в потенцио.статическом режиме поляризации, отличающийся тем, что, с целью'расширения класса исследуемых веществ, в качестве фермента используют об- работанную глутаровым альдегидом пероксидазу и 0,1-1 мМ феррицианид калия, в качестве окислителя 0,05 - 0,1 мМ перекись водорода в 0,09-0,11 М фосфатном буфере при pH 7,0-7,2, а поляризацию проводят при потенциале Ad/AgC! электрода.